專利名稱：結(jié)晶肽環(huán)氧酮免疫蛋白酶體抑制劑的制作方法
結(jié)晶肽環(huán)氧酮免疫蛋白酶體抑制劑
背景技術(shù)：
在真核生物中，蛋白質(zhì)降解主要通過泛素途徑來介導(dǎo)，其中被靶向破壞的蛋白質(zhì)被連接到76氨基酸多肽泛素上。一旦被靶向，泛素化的蛋白質(zhì)則充當(dāng)26S蛋白酶體(一種多催化蛋白酶)的底物，26S蛋白酶體通過其三種主要的蛋白質(zhì)水解活性的作用將蛋白質(zhì)裂解成短肽。在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)中具有一般功能的同時，蛋白酶體介導(dǎo)的降解還在許多過程諸如I類主要組織相容性復(fù)合體(MHC)呈遞、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞活力、抗原加工、NF-κ B活化及促炎信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用。20S蛋白酶體是由分類為α型和β型的28個亞基組成的700kDa的圓柱形多催化蛋白酶復(fù)合物，所述亞基排列成4個堆積的七元環(huán)。在酵母和其它真核生物中，7個不同的α亞基形成外環(huán)且7個不同的β亞基組成內(nèi)環(huán)。α亞基充當(dāng)19S(PA700)和11S(PA28)調(diào)節(jié)復(fù)合物的結(jié)合位點(diǎn)以及由兩個β亞基環(huán)形成的內(nèi)部蛋白水解腔的物理屏障。因此，在體內(nèi)，認(rèn)為蛋白酶體作為26S顆粒(“26S蛋白酶體”)存在。體內(nèi)試驗(yàn)表明，蛋白酶體的·20S形式的抑制可以容易地與26S蛋白酶體的抑制相關(guān)聯(lián)。顆粒形成過程中，β亞基的氨基末端前序列的裂解暴露了氨基末端蘇氨酸殘基，其充當(dāng)催化親核物質(zhì)。因此，在蛋白酶體中負(fù)責(zé)催化活性的亞基具有氨基末端親核殘基，且這些亞基屬于N-末端親核試劑(Ntn)水解酶(其中，親核的N-末端殘基為例如Cys、Ser、Thr和其它親核部分)的家族。這個家族包括例如青霉素G?；D(zhuǎn)移酶(PGA)、青霉素V?；D(zhuǎn)移酶(PVA)、谷氨酰胺PRPP酰胺基轉(zhuǎn)移酶(GAT)和細(xì)菌性糖基天冬酰胺酶。除了廣泛表達(dá)的β亞基外，較高級的脊椎動物還具有三個干擾素-Y-可誘導(dǎo)的β亞基(LMP7、LMP2和MECL1)，其分別代替它們的正常副本β 5、β I和β 2。當(dāng)所有的三個IFN- Y -可誘導(dǎo)的亞基都存在時，蛋白酶體被稱為“免疫蛋白酶體”。因此，真核細(xì)胞可以具有不同的比例的蛋白酶體的兩種形式。通過不同肽底物的使用，已經(jīng)定義了真核細(xì)胞20S蛋白酶體的三種主要的蛋白質(zhì)水解活性在大的疏水殘基后裂解的類胰凝乳蛋白酶活性(CT-L);在堿性殘基后裂解的類胰蛋白酶活性(T-L);及在酸性殘基后裂解的肽谷氨?；乃饣钚?PGPH)。兩種額外的特征不明顯(Iesscharacterized)的活性也已經(jīng)被歸因于蛋白酶體在支鏈氨基酸后裂解的BrAAP活性；及在小的中性氨基酸后裂解的SNAAP活性。盡管蛋白酶體的兩種形式具有所有的5種酶活性，但是已經(jīng)基于特定的底物描述了兩種形式之間的活性程度的差別。對于兩種形式的蛋白酶體，主要的蛋白酶體蛋白質(zhì)水解活性似乎由20S核心之內(nèi)的不同催化位點(diǎn)促成。存在用于抑制蛋白酶體活性的小分子的幾個實(shí)例；然而，這些化合物通常缺乏區(qū)分蛋白酶體的兩種形式的特異性。所需要的是改進(jìn)的組合物和用于制備和配制蛋白酶體抑制劑的方法。發(fā)明概沭本發(fā)明的一個方面涉及具有式(I)的結(jié)構(gòu)的結(jié)晶化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，
權(quán)利要求
1.一種用于制備式(II)的結(jié)晶化合物的方法，
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑選自乙腈、丙酮、乙醚、異丙醚、乙酸乙酯、庚烷、乙酸異丙酯、甲醇、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、甲苯或其任意組合。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑選自甲苯、甲基叔丁基醚、庚烷或其組口 ο
4.如權(quán)利要求I所述的方法，其中使所述溶液過飽和包括添加反溶劑、使所述溶液冷卻、減少所述溶液的體積或其任意組合。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中使所述溶液過飽和包括使所述溶液冷卻至環(huán)境溫度且減少所述溶液的體積。
6.如權(quán)利要求I所述的方法，還包括洗滌所述晶體。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述洗滌包括用選自反溶劑、乙腈、丙酮、乙醚、異丙醚、乙醇、乙酸乙酯、庚烷、乙酸異丙酯、甲醇、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、甲苯或其任意組合或其組合的液體來洗漆。
8.如權(quán)利要求8所述的方法，其中洗滌包括用甲苯和甲基叔丁基醚的組合來洗滌。
9.如權(quán)利要求7所述的方法，其中洗滌包括用甲苯來洗滌。
10.如權(quán)利要求I所述的方法，其中分離所述晶體包括過濾所述晶體。
11.如權(quán)利要求I所述的方法，還包括在減壓下干燥所述晶體。
12.如權(quán)利要求I所述的方法，其中所述式(II)的結(jié)晶化合物是溶劑化物。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述式(II)的結(jié)晶化合物是甲苯溶劑化物。
14.一種具有式(II)的結(jié)構(gòu)的結(jié)晶化合物
15.如權(quán)利要求14所述的結(jié)晶化合物，具有大體上如圖I所示的DSC差示熱分析圖。
16.如權(quán)利要求14所述的結(jié)晶化合物，具有大體上如圖2所示的XRPD圖。
17.如權(quán)利要求14所述的結(jié)晶化合物，具有以下2Θ值3. 62±0. 20 ;6. 52±0. 20 ;7. 20 ±O. 20 ；8. 66 + 0. 20 ；10. 04 ±O. 20 ；10. 82 + 0. 20 ；12. 98 + 0. 20 ；14. 42 + 0. 20 ；16. 46±0· 20 ；17. 32±0· 20 ；17. 98±0· 20 ；18. 02 + 0. 20 ；18. 88±0· 20 ；19. 06±0· 20 ；19. 56±0· 20 ；19. 88±0· 20 ；20. 40±0· 20 ；21. 36±0· 20 ；22. 16±0· 20 ；23. 20±0· 20 ；25. 40±0· 20 ；28. 82±0· 20。
18.如權(quán)利要求14所述的結(jié)晶化合物，所述結(jié)晶化合物是溶劑化物。
19.如權(quán)利要求18所述的結(jié)晶化合物，所述結(jié)晶化合物是甲苯溶劑化物。
20.一種用于治療選自免疫相關(guān)疾病、癌癥、炎癥、感染、增殖性疾病或神經(jīng)變性疾病的疾病或病癥的方法，所述方法包括施用權(quán)利要求14所述的結(jié)晶化合物。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述疾病或病癥為免疫相關(guān)疾病。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，其中所述免疫相關(guān)疾病選自自身免疫疾病、克羅恩氏病、糖尿病、狼瘡、多發(fā)性硬化、肌炎、銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和潰瘍性結(jié)腸炎。
23.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述疾病或病癥為癌癥。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中所述癌癥選自白血病、淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤。
25.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述疾病或病癥為炎癥。
26.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述疾病或病癥為感染。
27.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述疾病或病癥為增殖性疾病。
28.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述疾病或病癥為神經(jīng)變性疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及結(jié)晶肽酮環(huán)氧化合物，其制備方法及相關(guān)的藥物組合物。
文檔編號A01N43/20GK102946729SQ201180022014
公開日2013年2月27日 申請日期2011年4月6日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月7日
發(fā)明者P·菲婭西豐薩 申請人:歐尼斯治療公司