專(zhuān)利名稱(chēng)：耐高溫乳酸菌株ht1及其在調(diào)制青貯飼料方面的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物應(yīng)用和飼料調(diào)制加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及乳酸菌在改善青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
青貯飼料是在厭氧和酸性環(huán)境下長(zhǎng)期貯存的新鮮牧草、飼料作物等多水分飼料。 近年來(lái)，隨著我國(guó)奶牛業(yè)的快速發(fā)展，青貯飼料的生產(chǎn)量在迅速增長(zhǎng)，2003年全國(guó)青貯飼料的生產(chǎn)量就已經(jīng)超過(guò)了 2億噸(中國(guó)奶業(yè)協(xié)會(huì)，2003)?？梢?jiàn)青貯飼料的生產(chǎn)、利用對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)，特別是高產(chǎn)奶牛來(lái)說(shuō)具有非常重要的意義。它既能保證奶、肉產(chǎn)品的數(shù)量與品質(zhì)， 又可節(jié)約飼用糧食，另外通過(guò)青貯還可使粗糙或帶異味而不易直接飼用的植物材料，以及不易干燥的高水分飲料、食品加工副產(chǎn)物等得到充分利用，提高生物資源的利用、轉(zhuǎn)化效率 (內(nèi)田，1999 ；曹致中，2005)。但青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)受多種因素的影響，其中乳酸菌在調(diào)制青貯飼料中起主要作用。乳酸菌為革蘭氏陽(yáng)性菌，抗過(guò)氧化氫酶，厭氧，無(wú)孢子，無(wú)運(yùn)動(dòng)性。在青貯過(guò)程中， 促進(jìn)乳酸發(fā)酵，可提高青貯發(fā)酵品質(zhì)，減少營(yíng)養(yǎng)損失。當(dāng)青貯窖密封后，厭氧微生物可以快速繁殖，如果條件適宜，乳酸菌將快速酸化環(huán)境，當(dāng)PH下降到一定程度時(shí)，與其競(jìng)爭(zhēng)的有害微生物將不能生存，這樣便得到穩(wěn)定的青貯飼料。反之，不良微生物快速生長(zhǎng)，導(dǎo)致青貯飼料腐敗或品質(zhì)下降。乳酸發(fā)酵的關(guān)鍵是乳酸菌，如果材料本身附著的乳酸菌數(shù)量較少，或乳酸菌數(shù)量雖多，但缺乏耐特殊環(huán)境(如高溫)的乳酸菌，在相應(yīng)條件下就難于獲得優(yōu)質(zhì)青貯飼料。高溫青貯環(huán)境無(wú)論在南方還是北方都存在，如裝窖時(shí)間長(zhǎng)或密封不充分時(shí)，由于植物和微生物的呼吸產(chǎn)熱，青貯窖內(nèi)的溫度很快就會(huì)超過(guò)40°C。在我國(guó)南方，全年溫度較高，特別是夏季，青貯窖內(nèi)更易發(fā)生高溫。在以上條件下很難調(diào)制優(yōu)質(zhì)青貯飼料(張建國(guó)，2000 ； Ashbell G. et al, 1992)。青貯時(shí)添加甲酸等酸類(lèi)化學(xué)物質(zhì)，可以直接降低pH，改善青貯料的發(fā)酵品質(zhì)，但因成本高、腐蝕性強(qiáng)、作業(yè)不安全等因素，在生產(chǎn)中難以利用。改善青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的乳酸菌添加劑在市場(chǎng)上也比較多，但一般沒(méi)有考慮到高溫條件，在高溫環(huán)境下改善效果不明顯。本發(fā)明針對(duì)生產(chǎn)中青貯高溫環(huán)境存在的問(wèn)題，對(duì)耐高溫并能改善青貯發(fā)酵品質(zhì)的乳酸菌進(jìn)行了分離、篩選。結(jié)果發(fā)現(xiàn)1株鼠李糖乳桿菌，它在高溫條件下，可顯著提高飼草青貯的發(fā)酵品質(zhì)，在生產(chǎn)上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)生產(chǎn)中青貯高溫環(huán)境存在的問(wèn)題，提供了一種耐高溫乳酸菌株及利用該菌株調(diào)制優(yōu)質(zhì)青貯飼料的方法。此菌株在高溫條件下可顯著提高飼草青貯的發(fā)酵品質(zhì)， 在生產(chǎn)上具有較大的應(yīng)用價(jià)值。本發(fā)明提供了耐高溫乳酸菌HTl在調(diào)制青貯飼料方面的應(yīng)用。發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明提供一種耐高溫乳酸菌HTl，經(jīng)鑒定為乳桿菌屬鼠李糖乳桿菌a—illus rAaffiwosm)，于2010年12月17日寄存于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心 (CGMCC)，菌種保藏號(hào)為CGMCC 4483，該菌株的16S rDNA的Genbank登錄號(hào)為JF414107 ； 其主要生物學(xué)特性為革蘭氏染色陽(yáng)性桿菌，葡萄糖同型發(fā)酵，耐酸性強(qiáng)(在PH3. 75 9條件下可以正常生長(zhǎng))，生長(zhǎng)速度快(MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)1天pH可降到3. 9以下)，生育溫域?qū)?(10_50°C可正常生長(zhǎng))，耐50°C的高溫。鼠李糖乳桿菌菌株HTl在調(diào)制青貯飼料方面的應(yīng)用。一種利用上述乳酸菌菌株HTl調(diào)制青貯飼料的方法，其特征在包括以下步驟① 將待發(fā)酵飼料切斷混合均勻；②每kg新鮮飼料加入菌株HTl 1.0X IO8個(gè)或以上；③添加菌株HTl后的飼料密封后貯藏。菌株的生長(zhǎng)溫度優(yōu)選為45 °C。步驟①所述的待發(fā)酵飼料切斷至1 cm 2 cm。耐高溫乳酸菌菌株HTl的16S rDNA序列如下所示
權(quán)利要求
1.一個(gè)耐高溫乳酸菌菌株HT1，經(jīng)鑒定為乳桿菌屬鼠李糖乳桿菌，于2010年12月17 日寄存于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，菌種保藏號(hào)為CGMCC 4483，該菌株的16S rDNA的Genbank登錄號(hào)為JF414107 ；其主要生物學(xué)特性為革蘭氏染色陽(yáng)性桿菌，葡萄糖同型發(fā)酵，生長(zhǎng)Ph為Ph3. 75 9，生長(zhǎng)溫度為10 50°C。
2.如權(quán)利要求1所述的耐高溫乳酸菌菌株HTl在調(diào)制青貯飼料方面的應(yīng)用。
3.一種利用如權(quán)利要求1所述乳酸菌菌株HTl調(diào)制青貯飼料的方法，其特征包括以下步驟①將待發(fā)酵飼料切斷混合均勻；②每kg新鮮飼料加入菌株HTl 1.0X108個(gè)或以上； ③添加菌株HTl后的飼料密封后貯藏。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述菌株的生長(zhǎng)溫度為45°C。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟①所述的待發(fā)酵飼料切斷至1cm 2cm0
6.如權(quán)利要求1所述的耐高溫乳酸菌菌株HT1，其特征在于其核苷酸序列如SEQID NOl所示。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一株耐高溫乳酸菌及其調(diào)制青貯飼料的方法，屬于微生物應(yīng)用和飼料調(diào)制加工技術(shù)領(lǐng)域。所用菌株為HT1，經(jīng)鑒定為乳桿菌屬鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosussp.)，菌種保藏號(hào)為CGMCC4483，該菌株的16SrDNA的Genbank登錄號(hào)為JF414107。主要生物學(xué)特性為為革蘭氏染色陽(yáng)性桿菌，葡萄糖同型發(fā)酵，耐酸，生長(zhǎng)速度快，生育溫域?qū)?，尤為耐高溫?br> 文檔編號(hào)A23K3/02GK102286394SQ20111011813
公開(kāi)日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月9日
發(fā)明者劉秦華, 張建國(guó), 陳明霞 申請(qǐng)人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)