專(zhuān)利名稱(chēng)：一種抗黃曲霉侵染的大豆乳清提取物抑菌劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明利用經(jīng)堿提、酸沉后的大豆乳清廢液提取物，用于降低花生、玉米、大米 等農(nóng)產(chǎn)品因黃曲霉侵染而導(dǎo)致的黃曲霉毒素污染。在大豆乳清高值化、資源化利用及環(huán)境工 程等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用前景。
背景技術(shù)：
我國(guó)花生、玉米等農(nóng)產(chǎn)品及其制品因品質(zhì)優(yōu)良、價(jià)格低廉而享譽(yù)國(guó)際市場(chǎng)?；ㄉ?作為中國(guó)具有明顯競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的出口創(chuàng)匯產(chǎn)品，年出口量700kt以上，創(chuàng)匯5億多美元，占世
界花生貿(mào)易份額的42%之多。但目前黃曲霉毒素污染問(wèn)題成為我國(guó)花生生產(chǎn)和出口的重要問(wèn) 題和難題之一。近年來(lái)，因黃曲霉毒素污染問(wèn)題，中國(guó)花生出口屢遭各種技術(shù)性貿(mào)易壁壘， 給生產(chǎn)者和企業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)還影響了中國(guó)花生在國(guó)際上的信譽(yù)度。黃曲霉毒 素是由黃曲霉菌等產(chǎn)生的強(qiáng)致癌物質(zhì)，對(duì)人、畜禽存在極其嚴(yán)重的危害。目前，防止花生等
農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉毒素污染的主要措施，是采用抗黃曲霉侵染的品種、減弱地下害蟲(chóng)危害、防止 種子莢果破裂、控制土壤溫度和濕度、調(diào)整種子儲(chǔ)藏期間溫度和濕度等遺傳育種和簡(jiǎn)單的物 理處理手段等，而在花生、玉米及其他農(nóng)產(chǎn)品中添加抑菌劑，以減弱黃曲霉侵染作用的方法 還鮮有報(bào)道。
大豆乳清是工業(yè)上采用堿提、酸沉等工藝，制備大豆分離蛋白過(guò)程中所產(chǎn)生的。每年排 放的大豆乳清廢棄液在300萬(wàn)噸以上。但其中含有豐富的乳清蛋白，如胰蛋白酶抑制劑、大 豆血球凝集素、低聚糖、異黃酮等營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高的功能性物質(zhì)，直接排放會(huì)造成 大量的資源浪費(fèi)和嚴(yán)重的環(huán)境污染。目前，從大豆乳清中提取生物活性物質(zhì)研究較為成熟的 是大豆低聚糖、大豆異黃酮和大豆皂甙的提取，而大豆乳清提取物的抗真菌活性，如抗黃曲 霉活性還未見(jiàn)報(bào)道
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及從大豆乳清中提取乳清蛋白，制備了具有較強(qiáng)抑制黃曲霉侵染作用的 抑菌劑，可用于防治花生、玉米、大米等農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉毒素的污染。
工藝流程如下取大豆乳清液進(jìn)行濾紙過(guò)濾除雜，NaOH溶液調(diào)節(jié)pH，離心去沉淀。取上 清液濃縮、干燥，即為大豆乳清液提取物。將乳清提取物粉末或配置成蒸餾水溶液，均勻拌 在花生、玉米、大米等農(nóng)產(chǎn)品上，接入一定量的產(chǎn)毒黃曲霉孢子，置于恒溫濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 取以上同樣的樣品，處理方法同上，不加乳清提取物粉末或溶液作為對(duì)照，放于同樣的恒溫 濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，七天后觀察結(jié)果。經(jīng)乳清提取物抑菌劑處理的農(nóng)產(chǎn)品，無(wú)任何黃曲霉斑生 長(zhǎng)，而未加抑菌劑的對(duì)照樣品，表面附著大量的黃曲霉菌絲體。
具體實(shí)施方式
取大豆乳清液經(jīng)濾紙過(guò)濾，除去雜質(zhì)，用0.2 1.2mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH 為3. 5 5. 5， 2000 4000g離心15 30min，除去沉淀，上清液經(jīng)減壓蒸餾濃縮，30 60°C 真空干燥，得到大豆乳清提取物。稱(chēng)取提取物0. 6 4. 0g，蒸餾水40 80mL，混合完全溶解， 均勻拌在600 1200g花生、玉米等農(nóng)產(chǎn)品上。待農(nóng)產(chǎn)品將提取物溶液吸收后，接種一定量的 產(chǎn)毒黃曲霉孢子。對(duì)照處理方法同上，只是不加乳清提取物抑菌劑。將以上處理樣品置于恒 溫濕培養(yǎng)箱中，25 3(TC培養(yǎng)，6 10天，觀察黃曲霉生長(zhǎng)情況。經(jīng)抑菌劑處理的農(nóng)產(chǎn)品， 沒(méi)有發(fā)現(xiàn)黃曲霉孢子的萌發(fā)和菌絲體的生長(zhǎng)，而對(duì)照樣品表面則出現(xiàn)大量的黃曲霉斑。
實(shí)例1:取大豆乳清液經(jīng)濾紙過(guò)濾，除去雜質(zhì)，用0. 2mol/L的NaOH溶液，調(diào)節(jié)pH為4. 5， 2500g離心20min，上清液經(jīng)減壓蒸餾濃縮，45'C真空干燥，得到大豆乳清提取物。稱(chēng)取2. 0g 干燥提取物，溶解在50mL的蒸餾水中，均勻拌在1000g的花生米上。稍加攪拌，待溶液被吸 收后，接種少量的產(chǎn)毒黃曲霉孢子。對(duì)照處理不加乳清提取物，同樣于恒溫濕培養(yǎng)箱中，28 'C培養(yǎng)7天，發(fā)現(xiàn)經(jīng)抑菌劑處理的花生，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)黃曲霉孢子的萌發(fā)和菌絲體的生長(zhǎng)，而對(duì) 照樣品表面附著大量的黃曲霉斑。
實(shí)例2:取大豆乳清液經(jīng)濾紙過(guò)濾，除去雜質(zhì)，用0. 8mol/L的Na0H溶液，調(diào)節(jié)pH為4. 0， 2800g離心15min，上清液經(jīng)減壓蒸餾濃縮，50'C真空干燥，得到大豆乳清提取物。稱(chēng)取4. 0g 干燥提取物，溶解在60mL的蒸餾水中，均勻拌在1200g的玉米上。稍加攪拌，待溶液被吸收 后，接種少量的產(chǎn)毒黃曲霉孢子。對(duì)照處理不加乳清提取物，同樣于恒溫濕培養(yǎng)箱中，25°C 培養(yǎng)9天，發(fā)現(xiàn)經(jīng)抑菌劑處理的玉米，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)黃曲霉孢子的萌發(fā)和菌絲體的生長(zhǎng)，而對(duì)照 則出現(xiàn)大量的黃曲霉斑。
實(shí)例3:取大豆乳清液經(jīng)濾紙過(guò)濾，除去雜質(zhì)，用1. 0mol/L的Na0H溶液，調(diào)節(jié)pH為4. 2， 2000g離心25min，上清液經(jīng)減壓蒸餾濃縮，35。C真空干燥，得到大豆乳清提取物。稱(chēng)取1. 0g 干燥提取物，溶解在50mL的蒸餾水中，均勻拌在800g的大米上。稍加攪拌，待溶液被吸收 后，接種少量的產(chǎn)毒黃曲霉孢子。對(duì)照處理不加乳清提取物，同樣于恒溫濕培養(yǎng)箱中，26°C 培養(yǎng)6天，發(fā)現(xiàn)經(jīng)抑菌劑處理的玉米，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)黃曲霉孢子的萌發(fā)和菌絲體的生長(zhǎng)，而對(duì)照 樣品則出現(xiàn)大量的黃曲霉斑。
權(quán)利要求
1、將大豆乳清液以0.2～1.2mol/L的NaOH溶液，調(diào)節(jié)pH為3.5～5.5，2000～4000g離心15～30min，上清液經(jīng)減壓蒸餾濃縮，30～60℃真空干燥，即得大豆乳清提取物。
2、 將制備的大豆乳清提取物作為農(nóng)產(chǎn)品防治黃曲霉侵染的抑菌劑，特征是充分利用生產(chǎn)大豆 蛋白的副產(chǎn)物一乳清液，從而使農(nóng)產(chǎn)品上沾染的黃曲霉菌孢子萌發(fā)和菌絲體的生長(zhǎng)受到抑制。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的防治黃曲霉抑菌劑，可適用于花生、玉米、大米等農(nóng)產(chǎn)品。大豆乳 清提取物可為粉末或配成液體制劑使用，處理花生、玉米、大米等農(nóng)產(chǎn)品的劑量為0.6
4、 0g/kg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于抗黃曲霉侵染的大豆乳清提取物抑菌劑技術(shù)，屬輕工、食品及環(huán)境工程領(lǐng)域。此抑菌劑直接提取于生產(chǎn)大豆蛋白的副產(chǎn)物—乳清液，簡(jiǎn)單易行，對(duì)充分利用廢棄資源，降低花生、玉米、大米等農(nóng)產(chǎn)品因黃曲霉侵染而造成的黃曲霉毒素污染等問(wèn)題有重要作用。此提取物抑菌劑處理花生、玉米、大米等農(nóng)產(chǎn)品的劑量為0.6～4.0g/kg。
文檔編號(hào)A01P3/00GK101361493SQ20081000519
公開(kāi)日2009年2月11日 申請(qǐng)日期2008年1月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月23日
發(fā)明者侯仰鋒, 賓 張, 莉 張, 李海燕, 汪東風(fēng) 申請(qǐng)人:中國(guó)海洋大學(xué)