專利名稱：：蛇床子素復配物在制備防治水稻稻曲病農(nóng)藥中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及蛇床子素單劑及其復配組合物，特別是其與井岡霉素復配后在制備防治水稻稻曲病農(nóng)藥中的應用。
背景技術：
：水稻稻曲病又稱偽黑穗病、綠黑穗病、谷花病、青粉病，俗稱"豐產(chǎn)果"，是由C/幼7flg!'"o!Weaviw"s(Cooke)Tak引起的水稻后期發(fā)生的一種真菌性病害。1874年Cooke在印度首次發(fā)現(xiàn)稻曲病，該病害是世界主要稻作區(qū)普遍發(fā)生的一種病害。有報道其分布范圍包括中國、日本、菲律賓、印度、印尼、美國、巴西、澳大利亞、埃及、孟加拉國、英國等5大洲40多個國家。自20世紀70年代末以來，該病在我國自南向北相繼大面積發(fā)生，并有加重趨勢，已成為影響我國水稻生產(chǎn)的重要病害之一。一般發(fā)病田塊減產(chǎn)5%~10%，嚴重發(fā)病田塊減產(chǎn)50%~70%。此外稻曲病菌還可產(chǎn)生有害毒素，影響稻米品質，對人、畜、家禽等造成危害。目前水稻稻曲病主要以有機銅、有機錫類藥劑防治，雖然它們有良好的防效，但是重金屬類藥劑在水稻穗期使用對水稻有藥害作用。長期使用該類藥劑不僅造成嚴重的農(nóng)田生態(tài)環(huán)境和水質污染，而且增加了稻米有毒化學物質的殘留，對人類健康帶來嚴重危害。因此，研究新型生物殺菌劑對于控制稻曲病的發(fā)生發(fā)展，提高稻米品質意義重大。香豆素類化合物蛇床子素(Osthol)化學名稱為S-(3-甲基-2-丁烯基)甲醚饊形酮，是傘形花科植物蛇床子中主要成分，也是歐前胡、圓當歸、毛當歸、栓翅芹的根和根莖，以及蕓香科植物八角、黃皮的根皮，單葉蕓香等的地上部分的活性成分。該化合物的殺蟲抑菌活性已經(jīng)報道。如專利ZL01127083.7"蛇床子素在農(nóng)業(yè)上的應用"公開了蛇床子素在殺蟲抑菌、果蔬保鮮和農(nóng)畜產(chǎn)品防腐等方面的應用。專利ZL200410069127.5"蛇床子素及其復配組合物防治作物白粉病"公開了蛇床子素及其復配組合物防治作物白粉病的使用技術和效果。關于蛇床子素、蛇床子素與腈菌唑、井岡霉素復配物防治水稻稻曲病的應用研究未見報道。
發(fā)明內容發(fā)明目的本發(fā)明的目的是針對有機銅、有機錫類藥劑在防治稻曲病方面存在的不足，提供一種高效、低毒的植物源農(nóng)藥的復配組合物，以減少重金屬類藥劑的使用量，安全有效地控制稻曲病的發(fā)生發(fā)展。技術方案本發(fā)明提供了蛇床子素(a)和井岡霉素(b)以重量比為a:b=i:ii:20，更優(yōu)選為i:i-io組成的復配組合物在制備防治水稻稻曲病農(nóng)藥中的應用。蛇床子素與其他殺菌劑復配室內配方篩選。供試病菌及作物以水稻稻曲病菌t/勸7ag/"o/tfeflv^ra(Cooke)Tak為供試菌(江蘇省農(nóng)科院食品質量安全與檢測研究所提供)，供試水稻品種為"連粳3號"。供試藥劑94.7%蛇床子素溶解于95%乙醇，制成IOOOOpg/ml母液備用；95%腈菌唑(江蘇省江陰市福達農(nóng)化有限公司生產(chǎn))、86%井岡霉素(上海市農(nóng)藥研究所生產(chǎn))，分別溶解于水和丙酮，制成10000pg/ml母液備用。表1蛇床子素和其他殺菌劑復配比例<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>注表中所列比例均按藥劑有效成分計算。菌種培養(yǎng)在IOOmlPS培養(yǎng)基中接種已在PSA培養(yǎng)基上培養(yǎng)了7d的菌絲塊(直徑4mm)3i央，25'C恒溫水浴搖培7d的孢子菌絲懸浮液，以單層滅菌醫(yī)用沙布過濾去菌絲，孢子懸浮液供測試用。復配組合物制備通過預備試驗和所測定的單劑毒力曲線進行配比設計，按照表l的復配比例進行復配，各復配劑均溶于丙酮，制成10000pg/ml母液備用。毒力測定方法將上述各單劑及復配母液按表2用PS培養(yǎng)基稀釋成系列濃度。每50ml的三角瓶中裝稀釋液30ml，設空白對照和溶劑對照，每濃度3瓶。稀釋時嚴格無菌操作。然后，每瓶加已培養(yǎng)備用的菌種2.5ml，28。C恒溫搖培7d(轉速120r/min)。收集菌絲，冷凍真空干燥，稱取菌絲干重，計算菌絲干重抑制率。表2各藥劑系列稀釋濃度<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>計算方法-EC5。(理論值"(a+b)/(a/EC50(a)+b/EC50(b));SI^EC5Q(理論值)/ECso(實際值)。通過菌絲干重抑制率的機率值和系列藥劑濃度的對數(shù)值之間的線性回歸分析，求出各藥劑的毒力曲線Y-a+bx和EC50。根據(jù)Wadley方法評價混配劑的相互作用，a、b是各組分在混劑中含量比例。以SR值分析混配的效果。其中，SR=0.51.5，則兩種藥劑混配有加和作用，SRS0.5，則兩種藥劑混配有拮抗作用，SR^L5，貝U2種藥劑混配有增效作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>結果與分析:蛇床子素和其他殺菌劑復配制劑田間藥效試驗。試驗設計具體試驗設計見表4:表4田間藥效試驗設計<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>試驗藥劑1。/。蛇床子素EW250X("X"表示稀釋倍數(shù)下同)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為g/ml。12.5%腈菌唑WP1500X，張家港市七洲農(nóng)藥化工有限公司生產(chǎn)，有效濃度為83.3嗎/ml。20。/。井岡霉素WG3000X，浙江省金豐農(nóng)化有限公司生產(chǎn)，有效濃度為66.7pg/ml。2%蛇床子素腈菌唑SE400X(有效成分1%蛇床子素+1%腈菌唑)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為25嗎/ml蛇床子素+25(ag/ml腈菌唑。3%蛇床子素腈菌唑SE500X(有效成分1%蛇床子素+2%腈菌唑)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為20ng/ml蛇床子素+40ng/ml腈菌唑。4%蛇床子素腈菌唑SE600X(有效成分1%蛇床子素+3%腈菌唑)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為16.7pg/ml蛇床子素+51ng/ml腈菌唑。11%蛇床子素，腈菌唑SE800X(有效成分1%蛇床子素+10%腈菌唑)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為12.5ng/ml蛇床子素+125嗎/ml腈菌唑。4%蛇床子素.井岡霉素SE600X(有效成分1%蛇床子素+3%井岡霉素)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為16.7ng/ml蛇床子素+50嗎/ml井岡霉素。6。/o蛇床子素.井岡霉素SE750X(有效成分1%蛇床子素+5%井岡霉素)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為13.3ng/ml蛇床子素+66.7pg/ml井岡霉素。8%蛇床子素井岡霉素SE900X(有效成分1%蛇床子素+7%井岡霉素)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為11.1ng/ml蛇床子素+77.8pg/ml井岡霉素。11%蛇床子素井岡霉素SEIOOOX(有效成分1%蛇床子素+10%井岡霉素)，江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，有效濃度為1(^g/ml蛇床子素+100pg/ml井岡霉素。對照藥劑20。/。瘟曲克星WP，100g/667m2，浙江禾本農(nóng)化有限公司。空白對照清水。其中，EW表示水乳劑，WP表示可濕性粉劑，WG表示水溶性粒劑，SE表示水懸乳劑。小區(qū)設置及試驗方法根據(jù)預備試驗的結果設置系列濃度進行小區(qū)試驗，設空白對照，每小區(qū)20m2，每處理4次重復。于水稻破口前、破口期和齊穗期各施一次藥，用工農(nóng)-16型噴霧器噴霧，用藥液量50kg/畝。調査方法最后一次施藥后10d觀察安全性，病情穩(wěn)定期調查防治效果。釆用對角線5點取樣，每處理調査5點，共100叢，調査各處理的病穗數(shù)、病粒數(shù)，計算病穗率、病粒率、病穗防效和病粒防效。并用DPS2000數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行分析和差異顯著性檢驗(Duncan，S新復極差法)。藥效計算方法病穗率(％)=病穗數(shù)/調査總數(shù)乂100。病穗防治效果(％)=(對照病穗率一處理病穗率)/對照病穗率X100。病粒率(^)-病粒數(shù)/調査總數(shù)X100。病粒防治效果(％)=(對照病粒率一處理病粒率)/對照病粒率X100。對作物安全性根據(jù)觀察，各藥劑對水稻生長安全，無藥害。試驗結果各藥劑對水稻稻曲病的田間防治效果見表5，1%蛇床子素EW250X、12.5%腈菌唑WP1500X、2%蛇床子素腈菌唑SE400X、3%蛇床子素腈菌唑SE500X、4%蛇床子素'腈菌唑SE600X、1P/。蛇床子素，腈菌唑SE800X等藥劑的病穗防效分別為72.3%、78.1%、84.0%、86.7%、88.4%、86.5%，病粒防效分別為75.2%、81.6%、87.7%、90.1%、89.6%、87.6%，對照藥劑20%瘟曲克星WP100g/667m2的病穗防效和病粒防效分別為87.3%和82.3%。方差分析結果表明，處理藥劑2。/。蛇床子素，腈菌唑SE400X、3%蛇床子素腈菌唑SE500X、4%蛇床子素腈菌唑SE600X、11%蛇床子素腈菌唑SE800X與對照藥劑20%瘟曲克星WP100g/667m2的防效之間無顯著差異，而與兩單劑1%蛇床子素EW250X、12.5%腈菌唑WP1500X的防效之間差異達極顯著水平。1。/o蛇床子素EW250X、20。/。井岡霉素WG、4%蛇床子素井岡霉素SE600X、6%蛇床子素井岡霉素SE750X、8%蛇床子素井岡霉素SE900X、11%蛇床子素井岡霉素SEIOOOX等藥劑對水稻稻曲病的病穗防效分別為72.3%、65.6%、80.3%、82.9%、88.7%、85.6%,病粒防效分別為75.2%、67.8%、81.5%、84.1%、86.7%、88.3%，對照藥劑20%瘟曲克星WP100g/667m2的病穗防效和病粒防效分別為87.3%和82.3%。方差分析結果表明，處理藥劑4%蛇床子素井岡霉素SE600X、6%蛇床子素井岡霉素SE750X、8%蛇床子素井岡霉素SE900X、11%蛇床子素井岡霉素SEIOOOX與對照藥劑20%瘟曲克星WP100g/667m2的防效之間無顯著差異，而與兩單劑1%蛇床子素EW250X、20%井閃霉素WG的防效之間差異達極顯著水平。藥效評價各復配劑對水稻稻曲病均有較好的防治效果，防效可達80%左右，高于各單劑的防效，田間能有效防治水稻稻曲病。表5蛇床子素及其復配制劑防治水稻稻曲病田間藥效試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注不同小寫字母表示差異達0.05顯著水平，不同大寫字母表示差異達0.01顯著水平。*為4次重復的平均值。安全性試驗在上述與蛇床子素復配比例的其它殺菌劑中，其用量均為單劑常規(guī)用量一半或一半以下，因此其對人畜的毒性與對作物的安全性是符合要求的，而在上述配方中，蛇床子素的含量最高1%，經(jīng)認定機構毒性試驗結果表明1%蛇床子素水乳劑屬于微毒類農(nóng)藥大鼠急性經(jīng)口毒性LD5(K>5000mg/Kg，$>5000mg/Kg;大鼠急性經(jīng)皮毒性LD5(K>5000mg/Kg，$>5000mg/Kg;兔眼刺激積分為O(lh)，48h后為0(1:100)稀釋，對眼無刺激性；兔眼刺激積分為0(4h)，對皮膚無刺激性。有益效果本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，其顯著優(yōu)點是提供了一種高效、低毒的植物源農(nóng)藥及其復配組合物農(nóng)藥，以減少重金屬類藥劑的使用量，能安全有效地控制稻曲病的發(fā)生發(fā)展。具體實施方式實施例l:P/。蛇床子素EW250x(有效濃度為40ng/ml)防治水稻稻曲病在水稻破口前、破口前期各施l次藥，每畝用藥100ml，每畝藥液量3040千克，噴霧。實施例2:3%蛇床子素*腈菌唑SE500x(有效成分1%蛇床子素+1%腈菌唑，有效濃度為20pg/ml蛇床子素+4(Hig/ml腈菌唑)防治水稻稻曲病在水稻破口前、破口前期各施1次藥，每畝用藥100ml，每畝藥液量3040千克，噴霧。實施例3:6。/。蛇床子素'井岡霉素SE750X(有效成分1%蛇床子素+5%井岡霉素，有效濃度為13.3嗎/ml蛇床子素+66.7嗎/ml井岡霉素)防治水稻稻曲病在在水稻破口前、破口期各施l次藥，每畝用藥100ml，每畝藥液量3040千克，噴霧。權利要求1、蛇床子素和井岡霉素組成的復配組合物在制備防治水稻稻曲病農(nóng)藥中的應用。2、根據(jù)權利要求1所述的蛇床子素和井岡霉素復配組合物在制備防治水稻稻曲病農(nóng)藥中的應用，其特征是蛇床子素與井岡霉素的重量比為1:1~10。全文摘要本發(fā)明公開了蛇床子素和腈菌唑組成的復配組合物在制備防治水稻稻曲病農(nóng)藥中的應用，其中蛇床子素與腈菌唑的重量比為1∶1～10。本發(fā)明的優(yōu)點是提供了一種高效、低毒的植物源農(nóng)藥及其復配組合物農(nóng)藥，以減少重金屬類藥劑的使用量，能安全有效地控制稻曲病的發(fā)生發(fā)展。文檔編號A01N43/653GK101331876SQ200810003288公開日2008年12月31日申請日期2006年12月11日優(yōu)先權日2006年12月11日發(fā)明者王春梅,石志琦,范永堅,浩陳申請人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學院