專利名稱：啤酒有害菌檢測(cè)專用培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到一系列啤酒有害菌檢測(cè)專用培養(yǎng)基，屬于微生物發(fā)酵領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
啤酒有害菌的存在給啤酒工業(yè)造成巨大的損害。啤酒有害菌包括乳酸菌、野生酵母等，其中以乳酸菌最為常見(jiàn)，危害也最大。對(duì)啤酒有害菌的檢測(cè)，普遍采用培養(yǎng)基檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，一般需要5-7天，不能夠及時(shí)反饋微生物的污染狀況。同時(shí)國(guó)內(nèi)啤酒和國(guó)外啤酒相比有自己的特點(diǎn)，趨向于淡爽化，濃度較低，苦味質(zhì)很降，意味著國(guó)內(nèi)啤酒對(duì)啤酒有害菌的抑制能力較差，同時(shí)由于氣候和地理環(huán)境的差異，我國(guó)的啤酒有害菌分布也有自己的特點(diǎn)，很多在國(guó)外沒(méi)有出現(xiàn)的有害菌在中國(guó)也有發(fā)現(xiàn)，很多在國(guó)外經(jīng)常出現(xiàn)的嚴(yán)格厭氧菌在國(guó)內(nèi)很少報(bào)道。因此需要針對(duì)中國(guó)啤酒的特點(diǎn)和微生物檢測(cè)現(xiàn)狀開(kāi)發(fā)出適合自己的檢測(cè)培養(yǎng)基，達(dá)到高效快速的檢出目的。目前啤酒行業(yè)檢測(cè)啤酒有害菌的培養(yǎng)基，如NBB、MRS等都是依靠進(jìn)口，對(duì)于我國(guó)作為世界上連續(xù)8年世界啤酒生產(chǎn)第一的地位不對(duì)稱，由于國(guó)內(nèi)啤酒的特點(diǎn)與國(guó)外啤酒不一樣，如國(guó)外啤酒的苦味值比較高，而苦味值高能夠抑制啤酒有害菌的生長(zhǎng)，同時(shí)又由于國(guó)內(nèi)啤酒趨向于淡爽化方面，且啤酒濃度較低，我國(guó)當(dāng)前啤酒原麥汁濃度主要以7-8度為主，而國(guó)外原麥汁濃度基本在11度以上，啤酒濃度越高，意味著酒精度越高，其對(duì)啤酒有害菌的抑制能力越高，綜上所述，基于國(guó)內(nèi)啤酒的特點(diǎn)所對(duì)應(yīng)生產(chǎn)的啤酒有害菌的種類和數(shù)量與國(guó)外啤酒有害菌可能存在一定程度的差異，因此開(kāi)發(fā)適合國(guó)內(nèi)啤酒特點(diǎn)有害菌培養(yǎng)基是必要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題就是針對(duì)中國(guó)啤酒的有害菌特點(diǎn)，開(kāi)發(fā)出檢出率高，檢測(cè)速度快的培養(yǎng)基系列。該系列培養(yǎng)基有三種配置形式，一種是液體培養(yǎng)基，第二種是在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加瓊脂而成的固體培養(yǎng)基，第三種是在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上濃縮型而成的濃縮培養(yǎng)基，這三種形式的培養(yǎng)基配方和制作方法如下培養(yǎng)基A型(固體型)蛋白胨8_12g，牛肉浸粉6_10g，酵母膏4_6g，葡萄糖15_25g，吐溫80 l-3ml,無(wú)水磷酸氫二鉀l_3g，三水乙酸鈉4-6g，檸檬酸三銨l_3g，MgS047H20 0. 1-0. 4gMnS044H20 :0. 05-0. 06g,麥根浸出物，0. 2_lg，精氨酸0. 5-0. 75g，葉酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):10-20g，瓊脂粉20g，放線菌酮5_10mg。加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L。121度高壓滅菌。冷卻后備用。該型培養(yǎng)基用于傾倒平板使用。培養(yǎng)基B型(液體型)蛋白胨8_12g，牛肉浸粉6_10g，酵母膏4_6g，葡萄糖15_25g，吐溫80 l-3ml,無(wú)水磷酸氫二鉀l_3g，三水乙酸鈉4-6g，檸檬酸三銨l_3g，MgS047H20 0. 1-0. 4gMnS044H20 :0. 05-0. 06g,麥根浸出物，0. 2_lg，精氨酸0. 5-0. 75g，葉酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):10-20g，放線菌酮5-10mg，氯酚紅0. 05-0. 07g。將以上試劑溶解在0.4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L。121度高壓滅菌。冷卻后備用。加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，加入氯酚紅可以提供顏色指示，當(dāng)有害菌生長(zhǎng)時(shí)，培養(yǎng)既可由紅色變成黃色。該培養(yǎng)基應(yīng)用于對(duì)設(shè)備表面的棉簽擦拭等應(yīng)用。培養(yǎng)基C型(濃縮型)蛋白胨:40-60g，牛肉浸粉:30-50g，酵母膏20_30g，葡萄糖75_125g，吐溫80 5-15ml,無(wú)水磷酸氫二鉀:5-15g,三水乙酸鈉:20_30g，檸檬酸三銨5_15g，MgS047H20 0. 5-2g MnS044H20 :0. 25-0. 3g，麥根浸出物l_5g，精氨酸2. 5-37. 5g，葉酸l_2g，天然蜂蜜(不含防腐劑):50-100g，放線菌酮5-10mg。將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5.6。115度高壓滅菌10分鐘。冷卻后備用。加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，該濃縮培養(yǎng)基可用于酵母泥和渾濁發(fā)酵液的檢測(cè)使用。本發(fā)明產(chǎn)品的性狀如下培養(yǎng)基A型(固體型)暗紅色固體培養(yǎng)基，以玻璃瓶形式包裝。培養(yǎng)基B型(液體型)紅色液體，使用后如果有菌生長(zhǎng)，則變黃色。培養(yǎng)基C型(濃縮型)棕紅色液體，使用后如有菌生長(zhǎng)，則變渾濁。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例IA型(固體型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖:20g，吐溫80 :1ml，無(wú)水磷酸氫二鉀2g，三水乙酸鈉5g，檸檬酸三銨:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麥根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，葉酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):15g,瓊脂粉:20g,放線菌酮7mg。加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L。121度高壓滅菌。冷卻后備用。該型培養(yǎng)基用于傾倒平板使用。 實(shí)施例2培養(yǎng)基B型(液體型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖:20g，吐溫80 :1ml，無(wú)水磷酸氫二鉀2g，三水乙酸鈉5g，檸檬酸三銨:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麥根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，葉酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):15g,放線菌酮:7mg,氯酚紅0. 06g。將以上試劑溶解在0.4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L。121度高壓滅菌。冷卻后備用。加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，加入氯酚紅可以提供顏色指示，當(dāng)有害菌生長(zhǎng)時(shí)，培養(yǎng)既可由紅色變成黃色。該培養(yǎng)基應(yīng)用于對(duì)設(shè)備表面的棉簽擦拭等應(yīng)用。實(shí)施例3培養(yǎng)基C型(濃縮型)
蛋白胨50g，牛肉浸粉40g，酵母膏20g，葡萄糖100g，吐溫80 :5ml，無(wú)水磷酸氫二鉀10g，三水乙酸鈉25g，檸檬酸三銨:10g, MgS047H20 :lg，MnS044H20 :0. 25g，麥根浸出物2. 5g，精氨酸:2. 5g，葉酸:2g,天然蜂蜜(不含防腐劑):75g,放線菌酮:35mg。將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5.6。115度高壓滅菌10分鐘。冷卻后備用。加入放線菌酮以抑制酵母可用于酵母泥生長(zhǎng)，該濃縮培養(yǎng)基和渾濁發(fā)酵液的檢測(cè)使用。實(shí)施例4對(duì)比檢測(cè)效果實(shí)驗(yàn)
權(quán)利要求
1.啤酒有害菌檢測(cè)專用系列培養(yǎng)基，其組分配方和相關(guān)配制方法如下(1)培養(yǎng)基A型(固體型)蛋白胨8-12g，牛肉浸粉；6-10g，酵母膏4-6g，葡萄糖:15-25g，吐溫80 :l_;3ml，無(wú)水磷酸氫二鉀:l-3g,三水乙酸鈉:4-6g,檸檬酸三銨:l-3g, MgS047H20 :0. 1-0. 4gMnS044H20 0. 05-0. 06g，麥根浸出物，0. 2-lg，精氨酸:0. 5-0. 75g，葉酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):10-20g，瓊脂粉20g，放線菌酮:5-10mg ；加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用INHCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L。121度高壓滅菌。冷卻后備用。(2)培養(yǎng)基B型(液體型)蛋白胨8-12g，牛肉浸粉6-10g，酵母膏4-6g，葡萄糖:15-25g，吐溫80 :l_;3ml，無(wú)水磷酸氫二鉀:l-3g,三水乙酸鈉:4-6g,檸檬酸三銨:l-3g, MgS047H20 :0. 1-0. 4gMnS044H20 0. 05-0. 06g，麥根浸出物，0. 2-lg，精氨酸:0. 5-0. 75g，葉酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑)10-20g，放線菌酮5-10mg，氯酚紅:0. 05-0. 07g。將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L。121度高壓滅菌，冷卻后備用。(3)培養(yǎng)基C型(濃縮型)蛋白胨40-60g，牛肉浸粉30-50g，酵母膏20-30g，葡萄糖75_125g，吐溫80 5-15ml,無(wú)水磷酸氫二鉀:5-15g,三水乙酸鈉:20_30g，檸檬酸三銨5_15g，MgS047H20 0. 5-2g MnS044H20 :0. 25-0. 3g，麥根浸出物l_5g，精氨酸2. 5-37. 5g，葉酸l_2g，天然蜂蜜(不含防腐劑)50-100g，放線菌酮5-10mg;將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，115度高壓滅菌10分鐘。冷卻后備用。
2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基其中培養(yǎng)基A型(固體型)用于傾倒平板使用，培養(yǎng)基B型(液體型)應(yīng)用于對(duì)設(shè)備表面的棉簽擦拭等應(yīng)用，培養(yǎng)基C型(濃縮型)可用于酵母泥和渾濁發(fā)酵液的檢測(cè)使用。
3.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其中各系列培養(yǎng)基配方優(yōu)選如下(1)A型(固體型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖20g，吐溫80 :1ml,無(wú)水磷酸氫二鉀2g，三水乙酸鈉5g，檸檬酸三銨:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麥根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，葉酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):15g,瓊脂粉:20g,放線菌酮7mg ；加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用INHCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L，121度高壓滅菌。冷卻后備用。該型培養(yǎng)基用于傾倒平板使用。(2)培養(yǎng)基B型(液體型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖20g，吐溫80 :1ml,無(wú)水磷酸氫二鉀2g，三水乙酸鈉5g，檸檬酸三銨:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麥根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，葉酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐劑):15g,放線菌酮:7mg,氯酚紅0. 06g ；將以上試劑溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至.1L。121度高壓滅菌，冷卻后備用。加入放線菌酮以抑制酵母生長(zhǎng)，加入氯酚紅可以提供顏色指示，當(dāng)有害菌生長(zhǎng)時(shí)，培養(yǎng)既可由紅色變成黃色，該培養(yǎng)基應(yīng)用于對(duì)設(shè)備表面的棉簽擦拭等應(yīng)用。(3)培養(yǎng)基C型(濃縮型)蛋白胨50g，牛肉浸粉40g，酵母膏20g，葡萄糖100g，吐溫80 :5ml，無(wú)水磷酸氫二鉀:10g，三水乙酸鈉:25g，檸檬酸三銨:10g, MgS047H20 :lg，MnS044H20 :0. 25g，麥根浸出物.2. 5g，精氨酸2. 5g，葉酸:2g,天然蜂蜜(不含防腐劑):75g,放線菌酮:35mg ；將以上試劑溶解在0. 9L水中，用IN HCL調(diào)整pH至5. 6，再補(bǔ)足水至1L，115度高壓滅菌10分鐘，冷卻后備用，加入放線菌酮以抑制酵母可用于酵母泥生長(zhǎng)，該濃縮培養(yǎng)基和渾濁發(fā)酵液的檢測(cè)使用。
4.如權(quán)利要求1所述啤酒有害菌檢測(cè)專用系列培養(yǎng)基在啤酒有害菌尤其是純生啤酒的檢測(cè)應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及到一系列啤酒有害菌檢測(cè)專用培養(yǎng)基，該系列培養(yǎng)基有三種配置形式，一種是液體培養(yǎng)基，第二種是在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加瓊脂而成的固體培養(yǎng)基，第三種是在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上濃縮型而成的濃縮培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基主要針對(duì)中國(guó)啤酒的有害菌特點(diǎn)，有自己獨(dú)特的配方組分，與其他產(chǎn)品相比，出檢出率高，檢測(cè)速度更快。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK102392067SQ20111038329
公開(kāi)日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月28日
發(fā)明者宋常欣, 宋緒磊, 張五九, 李紅, 駱懷民, 黃彥君 申請(qǐng)人:中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院