專利名稱：包含芽孢桿菌的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
農(nóng)業(yè)活動(dòng)的增強(qiáng)引起了生態(tài)失衡，這使得有必要使用不影響害蟲與其捕食者、擬寄生物和病原體之間平衡的選擇性產(chǎn)品，害蟲與其捕食者、擬寄生物和病原體之間平衡負(fù)責(zé)著很多天然生物控制，因?yàn)樗鼈兙S持害蟲種群在可接受水平(DENT，D.，Insect pestmanagement. Cambridge Cabi Bioscience2000)。為了逆轉(zhuǎn)這種情況，推薦開發(fā)用于綜合害蟲控制的項(xiàng)目，其被定義為在基于考慮了對(duì)農(nóng)場(chǎng)主、社會(huì)和環(huán)境的利益和/或影響的成本/收益的管理策略中單一或者協(xié)調(diào)組合使用控制戰(zhàn)術(shù)的決策系統(tǒng)。在可用于這些管理系統(tǒng)的控制措施中有昆蟲病原線蟲和擬寄生昆蟲，其涵蓋了害蟲生物控制的不同領(lǐng)域。在關(guān)心保護(hù)環(huán)境的當(dāng)前現(xiàn)代生態(tài)社會(huì)背景下，生物控制被認(rèn)為是常規(guī)控制方法的有吸引力的替代方法和/或補(bǔ)充方法。生物控制是使用一種生物(捕食者、寄生蟲或病原體)來攻擊引起農(nóng)作物經(jīng)濟(jì)損害的另一種生物。這是農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中以及依賴于綜合害蟲控制(IPM)的常規(guī)農(nóng)業(yè)中極其普通的策略。雖然生物控制在減 少或者取消農(nóng)藥使用中和改善農(nóng)場(chǎng)主收入中帶來積極效果，但是對(duì)全世界一組實(shí)驗(yàn)的分析顯示，結(jié)果仍然集中于僅少數(shù)農(nóng)作物上。仍然需要在害蟲和疾病控制領(lǐng)域大力開發(fā)。已經(jīng)高度重視對(duì)使用稱作根際細(xì)菌的寄居在植物根的細(xì)菌的生物控制研究。對(duì)于促進(jìn)生長(zhǎng)和/或在植物病原細(xì)菌生物控制中有作用的有益細(xì)菌被稱作植物生長(zhǎng)促進(jìn)性根際細(xì)菌或者PGPR。PGPR增加植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的利用率并且可以產(chǎn)生促進(jìn)生長(zhǎng)的物質(zhì)的組合物和濃縮物。然而，這些根際細(xì)菌的主要作用是抑制對(duì)這些植物生長(zhǎng)有害的植物病原體。對(duì)這些有害細(xì)菌的抑制是通過產(chǎn)生鐵載體或者產(chǎn)生抗生素實(shí)現(xiàn)的，鐵載體是在低磷可用性條件下通過進(jìn)一步減少磷對(duì)其它根際微生物的可用性而起作用的物質(zhì)。
背景技術(shù)：
用環(huán)境可接受產(chǎn)品或者生態(tài)技術(shù)代替殺線蟲藥的社會(huì)壓力鼓勵(lì)研究控制線蟲的替代方法。在該背景下，生物控制已經(jīng)被考慮作為尋求確保農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的綜合方法中的一種替代方法。天敵的使用已經(jīng)變成了一個(gè)研究領(lǐng)域，其會(huì)起作用減少線蟲種群使其低于經(jīng)濟(jì)損害閾值水平。使用合成農(nóng)藥呈現(xiàn)出的對(duì)人和環(huán)境的危險(xiǎn)加強(qiáng)了在優(yōu)化可持續(xù)農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中對(duì)例如生物控制的手段的需要。歐洲專利申請(qǐng)EP0705807A1涉及用于土壤調(diào)節(jié)的細(xì)菌制劑，其包括屬于芽孢桿菌屬的細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌。制劑可以防止線蟲引起的對(duì)農(nóng)作物根的損傷。巴西專利申請(qǐng)BR PI0604602-9A涉及枯草芽孢桿菌與地衣芽孢桿菌組合用于控制植物線蟲的用途。Siddiqui和Mahmood (1999)描述了細(xì)菌在治理植物寄生性線蟲中的作用，顯示枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌在抗植物線蟲，例如根結(jié)線蟲屬(Meloidogyne spp.)、異皮線蟲屬(Heterodera spp.)和腎狀線蟲屬(Rotylenchulus)中是有用的。本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)進(jìn)行了廣泛篩選和研究，基于對(duì)兩種特別能夠減少由線蟲引起的農(nóng)作物根損害的兩種野生型的枯草芽孢桿菌菌株和地衣芽孢桿菌菌株的鑒定解決了提供控制線蟲的生物學(xué)方法的目標(biāo)。


圖1 -混合制造過程的操作條件流程。圖2 -生物制品作用后幼蟲的移動(dòng)抑制百分?jǐn)?shù)。A :南方根結(jié)線蟲(Meloidogyneincognita) ；B :爪睡根結(jié)線蟲(M. javanica) ;C :咖啡根結(jié)線蟲(M. paranaensis)。圖3 -生物制品作用后孵化抑制百分?jǐn)?shù)。A :南方根結(jié)線蟲；B :爪哇根結(jié)線蟲；C 咖啡根結(jié)線蟲。

圖4 -接種后三周,在番爺“Santa Cruz Kada Gigante”根中侵入的短小根結(jié)線蟲(Meloidogyne exigua) 二齡幼蟲平均數(shù),侵入百分?jǐn)?shù)和侵入抑制百分?jǐn)?shù)。
具體實(shí)施例方式根際細(xì)菌土壤是復(fù)雜生物群體的家園，其中微生物、原核生物和真核生物在數(shù)量和多樣性上均形成主體。一些原核生物具有植物根際和/或跟面生態(tài)位，在其中它們繁殖、存活和保護(hù)自身不受土壤微生物區(qū)系的其余拮抗作用。這些生物在種屬上已經(jīng)稱作根際細(xì)菌。與植物相關(guān)，根際細(xì)菌會(huì)具有有害作用、無作用或者有益作用。具有有益作用，即促進(jìn)生長(zhǎng)和疾病生物控制的那些根際細(xì)菌被稱作PGPR(植物生長(zhǎng)促進(jìn)性根際細(xì)菌)。據(jù)估計(jì)僅O. 6%的根際細(xì)菌對(duì)與它們相關(guān)的植物而言具有一些有益作用。作為牛物控制劑的PGPRPGPR已經(jīng)用于植物疾病的生物控制并且因此提高了農(nóng)作物產(chǎn)量。這種生物控制是如何起效和為何有效仍是一個(gè)需要補(bǔ)充研究的課題。在一些情況中，有可能通過PGPR施加的對(duì)病原體的直接拮抗而產(chǎn)生生物控制，其中涉及已知的抗生作用機(jī)制抗菌物質(zhì)產(chǎn)生、直接寄生、對(duì)營(yíng)養(yǎng)物和生態(tài)位的競(jìng)爭(zhēng)。研究已經(jīng)證明某些PGPR似乎作為ISR(誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性)激發(fā)子起作用，在這種意義上，植物變得全身抵抗一種以上的病原體，與典型的生物控制不同，其目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)更加明確的控制。當(dāng)PGPR寄居在根系統(tǒng)時(shí)，細(xì)菌細(xì)胞的或者由細(xì)菌細(xì)胞合成的構(gòu)成分子作為生物化學(xué)信號(hào)的激發(fā)子起作用。該信號(hào)被轉(zhuǎn)導(dǎo)至距其來源遠(yuǎn)距離的部位。編碼用于動(dòng)態(tài)抗性成分合成的基因失效，在誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性中被表達(dá)。一些根際細(xì)菌產(chǎn)生體外影響線蟲移動(dòng)的毒性代謝物，而另一些根際細(xì)菌抑制幼蟲孵化和幼蟲侵入根的過程。根際細(xì)菌對(duì)植物寄生線蟲的影響根際細(xì)菌對(duì)線蟲施加的控制可以不同方式實(shí)施并且會(huì)影響線蟲生命周期的不同階段-卵根際中細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素和毒素?cái)U(kuò)散進(jìn)入到土壤中并且可以被線蟲卵吸收，從而殺死細(xì)胞并防止它們進(jìn)行胚胎發(fā)育。-孵化根際細(xì)菌降解作為許多種類線蟲孵化因子起作用的根系分泌物，并且因此有可能由線蟲卵吸收的化合物失活或者在發(fā)育過程中引起阻止孵化的變形。

-靶向和移動(dòng)性根際細(xì)菌對(duì)代謝副產(chǎn)物中根系分泌物的轉(zhuǎn)化會(huì)導(dǎo)致線蟲簡(jiǎn)直不能識(shí)別向化性刺激，因此線蟲持續(xù)地隨機(jī)移動(dòng)，并且最終耗竭其能量?jī)?chǔ)備并在未進(jìn)入到根中的情況下死亡。如果線蟲識(shí)別根系分泌物并向根移動(dòng)，則一些細(xì)菌產(chǎn)物會(huì)呈現(xiàn)抑制線蟲的特性(nematostatic characteristic)并減少線蟲移動(dòng)以妨礙線蟲到達(dá)根。-宿主識(shí)別由根際細(xì)菌產(chǎn)生的物質(zhì)被根吸收并且會(huì)改變它們的化學(xué)組成，導(dǎo)致線蟲不能識(shí)別它們的宿主。據(jù)信根際細(xì)菌還與根表面上的、線蟲與其植物宿主之間結(jié)合位點(diǎn)特征性的凝集素結(jié)合，由此妨礙識(shí)別。-侵入根由根際細(xì)菌在根面區(qū)域或者根上皮細(xì)胞內(nèi)容物內(nèi)所產(chǎn)生的高濃度毒素或驅(qū)避劑，會(huì)阻礙線蟲侵入到宿主植物內(nèi)。-食物根際細(xì)菌或者它們的代謝產(chǎn)物會(huì)被植物吸收，并且植物會(huì)感知線蟲的存在，觸發(fā)巨細(xì)胞過敏反應(yīng)，這是宿主抗根結(jié)線蟲屬(Meloidogyne)線蟲的主要機(jī)制。這種抗性被稱作系統(tǒng)抗性，它不是植物原有的，即由PGPR的存在誘導(dǎo)的植物內(nèi)的反應(yīng)。-生殖一些根際細(xì)菌對(duì)減少卵的效應(yīng)比減少癭瘤數(shù)量的效應(yīng)大，這可能是一種運(yùn)行機(jī)制。根際環(huán)塏向根環(huán)境引入根際細(xì)菌的一種最方便的方法是在播種之前的種子上施用。種子發(fā)芽過程以種子滲出物形式釋放豐富的糖和氨基酸。因此，隨種子一起引入到土壤中的這些生物利用分泌物作為營(yíng)養(yǎng)源并且出現(xiàn)根時(shí)寄居在根處。具有更強(qiáng)的利用種子根系分泌物能力的根際細(xì)菌分離株在根寄居中會(huì)具有選擇性優(yōu)勢(shì)。已經(jīng)將芽孢桿菌屬(Bacillus)根際細(xì)菌與線蟲控制關(guān)聯(lián)。Sikora,R.A. (Interrelationship between plant health promoting rhizobacteria, plantparasitic nematodes and soil microorganisms (促進(jìn)植物健康的根際細(xì)菌、植物寄生線蟲和土壤微生物之間的相互關(guān)系)· Medicine Faculty Landbouww RijksunivGent, Landbouww,第53卷，第2b期，第867-878頁，1988)觀察到用芽孢桿菌屬菌株處理不同農(nóng)作物的種子使花生根結(jié)線蟲(Meloidogyne arenaria)、南方根結(jié)線蟲和腎形腎狀線蟲(Rotylenchulus reniformis)的感染降低大約 60-65%。根際細(xì)菌用于商業(yè)應(yīng)用的優(yōu)勢(shì)根際細(xì)菌與殺線蟲劑相比或者甚至與其它生物控制劑相比具有許多優(yōu)點(diǎn)，它們?nèi)菀状罅可a(chǎn)、儲(chǔ)存，它們對(duì)制劑技術(shù)的適應(yīng)性強(qiáng)并且不需要遺傳操作。
通過處理基質(zhì)，將幼苗根系浸入到細(xì)菌懸液中，將細(xì)菌懸液澆在植物上，通過將種子浸入到根際細(xì)菌懸液中或者通過向海藻酸鹽造粒化種子施用PGPR，來施用根際細(xì)菌。牙抱桿囷屬細(xì)囷芽孢桿菌屬物種是革蘭氏陽性細(xì)菌，特征在于具有厚的細(xì)胞壁和缺乏外膜，這與革蘭氏陰性細(xì)菌不同。很多革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁由肽聚糖組成。革蘭氏陽性物種根據(jù)它們的形態(tài)特征和生物化學(xué)特征分為數(shù)組。芽孢桿菌屬屬于生孢子細(xì)菌組。具有抵抗環(huán)境改變的孢子形成結(jié)構(gòu)的物種可耐受干熱和某些化學(xué)消毒劑達(dá)中等時(shí)間階段。它們?cè)诟陕返厣蠄?jiān)持?jǐn)?shù)年。芽孢桿菌在線蟲控制中的用途線蟲造成農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的嚴(yán)重?fù)p失。據(jù)估計(jì)，全世界重要經(jīng)濟(jì)作物每年損失大約1000億美兀。使用抗線蟲的栽培種并不一定可行，因?yàn)橛糜诜敝车目剐栽慈狈?，栽培種缺乏抗某些區(qū)域和種植季節(jié)的適應(yīng)性，或者在田野條件下抗性被破壞。通常不推薦化學(xué)控制線蟲，因?yàn)樗皇欠浅Ｓ行?；它是昂貴的，因?yàn)樗谑澄镏辛粝聫U物并且它造成環(huán)境污染。因?yàn)檫@些缺點(diǎn)，來自社會(huì)的限制使用化學(xué)藥品的壓力增加導(dǎo)致農(nóng)場(chǎng)主需要同時(shí)對(duì)人和動(dòng)物無毒、廉價(jià)且控制線蟲極其有效的產(chǎn)品。已知許多土壤微生物是線蟲的寄生蟲或者捕食者。這些微生物的作用源于干擾病原體生命周期步驟的直接作用或者間接作用?？莶菅挎邨U菌 當(dāng)接近種子或者土壤施用時(shí)，枯草芽孢桿菌的有益效果不僅僅是因?yàn)獒槍?duì)病原體提供的拮抗作用。也由于產(chǎn)生通過磷的增溶作用而促進(jìn)生長(zhǎng)和改善植物營(yíng)養(yǎng)的物質(zhì)，細(xì)菌對(duì)發(fā)芽、生長(zhǎng)和農(nóng)作物產(chǎn)量具有積極影響。根結(jié)線蟲屬根結(jié)線蟲屬線蟲(根-結(jié)線蟲)表現(xiàn)出對(duì)植物宿主的極大多樣性并且在全球不同區(qū)域出現(xiàn)，造成不同種植物損失。主要癥狀是在植物根上出現(xiàn)癭瘤。這些癭瘤是根系統(tǒng)畸形或者增厚部分。受影響的植物表現(xiàn)出衰弱、低產(chǎn)量、早落葉和過早凋謝，并且偶爾會(huì)出現(xiàn)植物死亡，這是在營(yíng)養(yǎng)脅迫和干旱條件下可能的癥狀。最初，根結(jié)線蟲屬二齡幼蟲(J2)穿透根并且在根的中柱區(qū)域內(nèi)建立攝取部位。通過線蟲的發(fā)育，J2分化成成年雄體或雌體。成年雄體離開根系，并且雌體流在根內(nèi)。在雌體根結(jié)線蟲屬發(fā)育過程中，產(chǎn)下大約500枚卵。它們存留在根外凝膠狀基質(zhì)中，在其中J2孵化，并因此再次感染根系。根-結(jié)線蟲的生命周期大約4周并且在較不利的溫度條件下會(huì)延長(zhǎng)。低于20°C或者高于35°C的溫度和土壤干旱或者水浸條件降低線蟲的發(fā)育和存活。取決于所涉及的種植物，可以使用包含某些活性成分例如蟲螨威、丙線磷(etoprophos)、涕滅威、硫威鈉或者苯線磷等化學(xué)藥品控制南方根結(jié)線蟲和爪睡根結(jié)線蟲。開展農(nóng)作物輪作在控制中也是重要的，這歸因于非宿主農(nóng)作物例如花生、菠蘿、水稻的部署，或者使用例如燕麥的也是非宿主的植物物種作為地被物。短小根結(jié)線蟲極具攻擊性并且在種植中傳播極廣。在短小根結(jié)線蟲感染區(qū)的不同化學(xué)控制方法包括使用包含許多活性成分特丁磷或者蟲螨威的化學(xué)藥品，這取決于種植的種類。在非宿主農(nóng)作物當(dāng)中，突出的是棉花、花生、水稻和燕麥。
與短小根結(jié)線蟲一樣，咖啡根結(jié)線蟲在咖啡種植中廣泛傳播，但是在其它種植物中不是大問題。對(duì)于它的控制，通過真菌淡紫擬青霉(Paecilomyces Iilacinus)已經(jīng)得到積極結(jié)果，并且這降低了溫室內(nèi)番茄“Santa Clara”根內(nèi)的線蟲種群。已經(jīng)已知與生物控制有關(guān)的根際細(xì)菌用途。然而，申請(qǐng)人目前開發(fā)了在植物種植中具有針對(duì)植物線蟲的殺線蟲效果的包含兩種枯草桿菌屬物種，即枯草芽孢桿菌DSM17231 (也稱作DSM5750)或其突變體和地衣芽孢桿菌DSM17236 (也稱作DSM5749)或其突變體的組合物。因此，本發(fā)明的第一方面涉及本文所述的新菌株或其突變體。技術(shù)人員明白，通過使用保藏的菌株作為起始材料，技術(shù)人員可通過常規(guī)誘變或者常規(guī)的再分離技術(shù)可得到保留本文所述有關(guān)特征和優(yōu)勢(shì)的更多的其突變體或者衍生物。因此，第一方面中的術(shù)語“其突變體”涉及通過使用保藏的菌株作為起始材料得到的突變菌株。植物線蟲是廣義上的對(duì)商用農(nóng)作物具有負(fù)面影響的任何線蟲。使用本發(fā)明的組合物可以抗擊的線蟲包括根結(jié)線蟲屬、短體線蟲屬(Pratylenchus)、異皮線蟲屬(Heterodera)、球胞囊屬(Globodera)、莖線蟲屬(Ditylenchus)、半穿刺線蟲屬(Tylenchulus)、劍線蟲屬(Xiphinema)、穿孔線蟲屬(Radopholus)、腎狀線蟲屬(Rotylenchulus)、螺旋屬(Helicotylenchus)和刺線蟲屬(Belonolaimus)的線蟲。認(rèn)為根結(jié)線蟲屬物種特別相關(guān)，因?yàn)樗鼈冋嫁r(nóng)作物全部感染的大約95%，導(dǎo)致全球大約5%總農(nóng)作物損失。本發(fā)明的組合物除了包含活性成分之外，還包含農(nóng)業(yè)化學(xué)可接受的輔料和/或賦形劑。本發(fā)明的組合物還包含農(nóng)業(yè)化學(xué)可接受的載體、賦形劑和/或佐劑。本發(fā)明的組合物特別用作抗擊農(nóng)作物植物中的線蟲。主要農(nóng)作物植物有 甘蔗、咖啡、大豆、棉花、玉米、馬鈴薯、番茄、煙草、香蕉、水稻、小麥、鱷梨、菠蘿、南瓜、可可樹、椰子、燕麥、洋蔥、萵苣、甜菜、胡蘿卜、木薯、豆類、向日葵、胡椒、蕪菁、蘋果、草莓、秋葵、蘿卜和洋蔥。至于果樹種植特別相關(guān)的是柑橘、葡萄、番石榴、番木瓜、無花果、桃、李子和枇杷(nespeira),并且至于園藝種植特別相關(guān)的是爺子和十字花科。至于花丼栽培特別相關(guān)的是玫瑰、菊花、洋桔梗(Iisianthus)、大丁草、孤挺花、秋海棠和青葙。本發(fā)明涉及包含枯草芽孢桿菌DSM17231，或其突變體，和地衣芽孢桿菌DSM17236，或其突變體的組合物，并且涉及包含通過制備組合物的方法制備的組合物以及說明書和適宜容器的試劑盒。還提供了制備包含枯草芽孢桿菌DSM17231，或其突變體，和地衣芽孢桿菌DSM17236，或其突變體，以及農(nóng)業(yè)化學(xué)可接受載體、賦形劑和/或佐劑的組合物的方法，以及所述組合物用于控制、抗擊植物線蟲和/或賦予對(duì)植物線蟲特異性抗性的用途。此外，本發(fā)明涉及有效量的枯草芽孢桿菌DSMl7231，或其突變體，和地衣芽孢桿菌DSM17236，或其突變體，在制造具有針對(duì)植物種植物中植物線蟲的殺線蟲效果的農(nóng)業(yè)化學(xué)組合物中的用途，以及用于控制、抗擊植物線蟲和/或賦予對(duì)植物線蟲特異抗性的方法。下面給出的示例性實(shí)施例用于更好地描述本發(fā)明。然而，所述的制劑僅僅涉及本發(fā)明一些實(shí)施方案的一些手段并且不應(yīng)該限制其范圍。
實(shí)施例本發(fā)明的組合物枯草芽孢桿菌(DSM17231)1. 6xl010ufc/g地衣芽孢桿菌(DSM17236)1. 6xl010ufc/g
權(quán)利要求
1.組合物，包含作為活性成分的、具有以保藏號(hào)DSM17231保藏于德國(guó)微生物菌種保藏中心的菌株特征的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtil is)或其突變體,和具有以保藏號(hào)DSM 17236保藏于德國(guó)微生物菌種保藏中心的菌株特征的地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)或其突變體,及其農(nóng)業(yè)化學(xué)可接受輔料和/或載體，其中所述枯草芽孢桿菌的突變體通過使用保藏菌株DSM 17231作為起始材料得到，并且其中所述枯草芽孢桿菌的突變體保留了或者進(jìn)一步改善了 DSM 17231的殺線蟲特性，其中所述地衣芽孢桿菌的突變體通過使用保藏菌株DSM 17236作為起始材料得到，并且其中所述地衣芽孢桿菌的突變體保留了或者進(jìn)一步改善了 DSM 17236的殺線蟲特性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，包含處在麥芽糊精和二氧化硅的混合物中的所述枯草芽孢桿菌和所述地衣芽孢桿菌，其中所述枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、麥芽糊精和二氧化硅存在的最低比率分別為2. 4(%) ,2.4(%) ,94.2(%)和1. 0(%)并且最高比率分別為3. O (%)、3. O (%)、93· O (%)和1. O (%)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2任一項(xiàng)的組合物，其為可濕粉劑形式。
4.制備如權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所定義組合物的方法，包括以希望的比例、有效量的用于施用的所述枯草芽孢桿菌和所述地衣芽孢桿菌與農(nóng)業(yè)化學(xué)可接受的載體、賦形劑和/或佐劑一起混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的組合物或者根據(jù)權(quán)利要求4中所定義的方法可得到的組合物的用途，用于控制、抗擊植物線蟲和/或賦予對(duì)植物線蟲特異性抗性。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其中植物線蟲選自由根結(jié)線蟲屬(Meloidogyne)、短體線蟲屬(Pratylenchus)、異皮線蟲屬(Heterodera)、球胞囊屬(Globodera)、莖線蟲屬(Ditylenchus)、半穿刺線蟲屬(Tylenchulus)、劍線蟲屬(Xiphinema)、穿孔線蟲屬(Radopholus)、腎狀線蟲屬(Rotylenchulus)、螺旋屬(Helicotylenchus)和刺線蟲屬(Belonolaimus)組成的組。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其中植物線蟲選自由南方根結(jié)線蟲(Meloidogyneincognita)、爪睡根結(jié)線蟲(Meloidogyne javanica)、短小根結(jié)線蟲(Meloidogyneexigua)、咖啡根結(jié)線蟲(Meloidogyne paranaensis)、大豆胞囊線蟲(Heterorderaglycines)和玉米短體線蟲(Pratylenchus zeae)組成的組。
8.根據(jù)權(quán)利要求5至7任一項(xiàng)的用途，其中植物栽培物選自由甘蔗、大豆、馬鈴薯、胡蘿卜、咖啡和香蕉組成的組。
9.用于控制和/或抗擊植物上和/或其種植地上植物線蟲的方法，其中使如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所定義的組合物作用在植物線蟲和/或其種植地上。
10.用于賦予對(duì)植物線蟲特異性抗性的方法，包括將有效量的權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所定義的組合物施用于植物和/或其種植地上。
11.試劑盒，包含如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所定義的的組合物或者根據(jù)權(quán)利要求4所定義方法可得到的組合物、說明書和適宜容器。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有針對(duì)植物上和/或其種植地上植物線蟲的殺線蟲效果的、包含枯草芽孢桿菌(DSM17231)和地衣芽孢桿菌(DSM17236)的組合物，涉及其用途和制備方法，枯草芽孢桿菌(DSM17231)和地衣芽孢桿菌(DSM17236)的用途，用于控制、抗擊植物線蟲和賦予針對(duì)植物線蟲的特異性抗性的方法，和試劑盒。
文檔編號(hào)C12R1/125GK103068247SQ201180039403
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2011年8月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月10日
發(fā)明者阿比利奧·阿萊桑德里, 英吉·奈普, 露西安娜·賽吉托戴弗雷塔斯扎姆貝利 申請(qǐng)人:科.漢森有限公司