本發(fā)明涉及食品技術(shù)加工領(lǐng)域，具體涉及一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

當(dāng)今社會(huì)激烈的競(jìng)爭(zhēng)，快節(jié)奏的生活，導(dǎo)致人們作息時(shí)間不規(guī)律，飲食不均衡，進(jìn)而造成人們免疫功能日益低下，免疫力的降低直接影響人體健康，引發(fā)各種疾病，越來(lái)越多的人已經(jīng)開(kāi)始意識(shí)到提高免疫力的重要性，因此開(kāi)發(fā)一種能夠提高人體免疫力的健康食品不僅滿足市場(chǎng)的需求，同時(shí)也將帶來(lái)良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

南極磷蝦多肽酶解液是通過(guò)酶工程技術(shù)對(duì)南極磷蝦蛋白質(zhì)進(jìn)行酶解，通過(guò)酶解的方式作用其富含的高蛋白得到人體易吸收的活性肽，對(duì)人體具有非常重要且不可替代的調(diào)節(jié)作用，還具有提高免疫力，降血壓等功效。目前市場(chǎng)上的南極磷蝦產(chǎn)品多為海洋飼料，利用率低，通過(guò)酶解的方式作用其富含的高蛋白得到人體易吸收的活性肽，使其更廣泛的應(yīng)用到食品、醫(yī)藥等方面，為南極磷蝦的高附加值利用提供了一種新的途徑。

枸杞子藥食同源植物，味甘，性平，歸肝、腎、肺經(jīng)，養(yǎng)肝，滋腎，潤(rùn)肺。枸杞多糖為枸杞子主要活性成分，具有提高人體對(duì)免疫力的功效。

黃芪多年生草本植物，味甘，性微溫，歸肺、脾、肝、腎經(jīng)。其黃芪多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。

白術(shù)屬于菊科、蒼術(shù)屬多年生草本植物。味苦，甘，性溫。歸脾、胃經(jīng)?！夺t(yī)學(xué)啟源》記載：“除濕益燥，和中益氣，溫中，去脾胃中濕，除胃熱，強(qiáng)脾胃，進(jìn)飲食，安胎。其所含揮發(fā)油具有抗腫瘤提高免疫力的作用。

當(dāng)歸為傘形科多年生草本植物當(dāng)歸的根?！侗静菔觥罚何犊?，溫，無(wú)毒；《湯液本草》：入手少陰、足太陰、厥陰經(jīng)。具有補(bǔ)血，活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)燥滑腸的功效。當(dāng)歸揮發(fā)油為當(dāng)歸主要活性成分，具有抗癌、抗衰老、提高免疫力的作用。

扇貝多肽酶解液經(jīng)酶工程技術(shù)多次分離純化得到的小分子，水溶性多肽。多肽易被人體吸收，還具有抗氧化、提高免疫力等作用。

基于上述論述，本發(fā)明以南極磷蝦多肽酶解液為主料，枸杞多糖、黃芪多糖、白術(shù)揮發(fā)油、當(dāng)歸揮發(fā)油，大棗濃縮液及扇貝多肽酶解液為輔料，通過(guò)科學(xué)安全的配伍，使各具特性的活性成分通過(guò)多種途徑，互促發(fā)揮綜合效能，開(kāi)發(fā)出一種能夠提高人體免疫力的食品制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑及其制備方法。

為實(shí)現(xiàn)以上發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑，按重量百分比計(jì)配比如下：枸杞子提取物5～8％、黃芪提取物3～9％、白術(shù)提取物6～10％、當(dāng)歸提取物2～8％、大棗濃縮液3～9％，扇貝多肽酶解液5～15％，其余為南極磷蝦多肽酶解液。

上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑，所含枸杞子提取物是由枸杞子的烘干粉提取的多糖提取物；所含黃芪提取物由黃芪的根提取的皂苷提取物；所含白術(shù)提取物由白術(shù)的根莖提取的揮發(fā)油提取物；所含當(dāng)歸提取物由當(dāng)歸的干燥根提取的揮發(fā)油提取物；所含大棗濃縮液由大棗的干燥品提取的大棗濃縮液；

上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)制備南極磷蝦多肽酶解液：取鮮凍南極磷蝦粉，加入比重1:30～150的去離子水，膠體磨磨漿至均勻，用100～500目濾網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾，加熱50～100℃，20～50min，冷卻至30～70℃，添加500～2000u/g酶解鮮凍南極磷蝦粉的蛋白酶，保溫30～70℃，2～7h，加熱至80～100℃，10～40min，冷卻至20～50℃，離心5000～8000r/min，15～30min，過(guò)濾，取上清液，即得南極磷蝦多肽酶解液；

(2)制備扇貝酶解液：取干扇貝肉，將其研磨成100～300目的細(xì)粉，加入重量比1:50～200的蒸餾水，混勻，制成扇貝溶液，加熱至40～60℃，調(diào)節(jié)ph值為7～9，加入扇貝溶液重量的3％～12％的細(xì)菌蛋白酶或胰蛋白酶，酶解3～8h，酶解完畢后加熱至80～100℃，保持10～30min，迅速冷卻至3～10℃，加入hcl或nacl調(diào)節(jié)ph值為7，并于4～8℃溫度下，3000～7000r/min離心10～30min，取上清液進(jìn)行冷凍干燥即得扇貝酶解液；

(3)按配比將枸杞提取物、黃芪提取物、白術(shù)提取物、當(dāng)歸提取物、大棗濃縮液和步驟(2)中得到的扇貝多肽酶解液添加在步驟(1)中得到的南極磷蝦多肽酶解液中，30～60℃下混勻，經(jīng)高壓勻質(zhì)，殺菌后冷卻至20～50℃，即得到一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑。

上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑的制備方法，步驟(1)中的蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶、糜蛋白酶、無(wú)花果酶、無(wú)花果酶、或凝血蛋白酶。

上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑的制備方法，步驟(3)中高壓勻質(zhì)的條件為55～70℃，10～30mpa，殺菌條件為80～100℃，殺菌10～30min。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：

1.本發(fā)明以南極磷蝦多肽酶解液為主料，以枸杞多糖、黃芪皂苷、白術(shù)揮發(fā)油、當(dāng)歸揮發(fā)油，大棗濃縮液及扇貝多肽酶解液為輔料，通過(guò)科學(xué)安全的配伍，將海洋多肽與傳統(tǒng)中藥提取物完美結(jié)合，具有增強(qiáng)免疫力的功能。

2.本發(fā)明制備工藝簡(jiǎn)單，通過(guò)功效實(shí)驗(yàn)可知，本發(fā)明的南極磷蝦多肽制劑具有顯著的提高免疫力的功能，且安全無(wú)毒。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。

本發(fā)明中所采用的原料均可通過(guò)市售的方式獲得，其中枸杞子提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：枸杞多糖>50％；黃芪提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：黃芪甲苷>50％，黃芪多糖>50％；白術(shù)提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：揮發(fā)油>50％；當(dāng)歸提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：藁本內(nèi)酯>50％；紅棗濃縮液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：紅棗多糖>50％。以下具體實(shí)施方式中，所有中藥提取物組分均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版中相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)要求。

實(shí)施例1：

一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑，以重量百分比計(jì)配比如下：枸杞子提取物8％、黃芪提取物7％、白術(shù)提取物7％、當(dāng)歸提取物5％、大棗濃縮液7％，扇貝多肽酶解液12％，其余為南極磷蝦多肽酶解液。

上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)制備南極磷蝦多肽酶解液：取鮮凍南極磷蝦粉，加入比重1:120的去離子水，膠體磨磨漿至均勻，用400目濾網(wǎng)過(guò)濾3次，加熱至70℃保溫30min，冷卻至45℃，添加1000u/g酶解鮮凍南極磷蝦粉的枯草桿菌蛋白酶，于55℃保溫3h，加熱至95℃，20min，冷卻至35℃，6000r/min離心20min，過(guò)濾，取上清液，即得南極磷蝦多肽酶解液；

(2)制備扇貝酶解液：取干扇貝肉，將其研磨成細(xì)粉，過(guò)200目篩，重復(fù)5次，加入重量比1:100的蒸餾水，混勻，制成扇貝溶液，加熱至45℃，調(diào)節(jié)ph值為7，加入扇貝溶液重量的7％的細(xì)菌蛋白酶，酶解4h，酶解完畢后加熱至90℃，保持30min，迅速冷卻至7℃，加入hcl或nacl調(diào)節(jié)ph值為7，并于7℃溫度下，4000r/min離心20min，取上清液即得扇貝酶解液；

(3)按配比將枸杞提取物、黃芪提取物、白術(shù)提取物、當(dāng)歸提取物、大棗濃縮液，扇貝酶解液和南極磷蝦多肽酶解液在45℃下混合均勻，在55℃，10mpa下勻質(zhì)后加熱至95℃殺菌20min，冷卻至25℃進(jìn)行真空包裝，即得到一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑。

功效實(shí)驗(yàn)：

將上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑，按350mg·kg^-1的量給spf級(jí)昆明種小鼠每天1次灌胃，對(duì)照組給予同等量的蒸餾水溶液，每組小鼠30只，連續(xù)灌胃21天后1h，摘眼球取血。將采集的全血于37℃恒溫30min，然后于4℃冰箱1.5h，3000rpm離心3min，分離血清。將抗小鼠igg單抗溶液包被于酶標(biāo)板上，每孔中加入100μl待測(cè)血清，37℃孵育2h。pbs洗板3次后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親合素與生物素結(jié)合，加入酶底物(0.4mg/ml鄰苯二胺和0.1m的檸檬酸-磷酸緩沖液中的0.01％h2o2，ph5.0)，反應(yīng)10min后，每孔加入50μl0.2m的h2o2終止反應(yīng)，在492nm處測(cè)定吸光度值。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出對(duì)應(yīng)的igg值，結(jié)果見(jiàn)表1。igg值起著激活補(bǔ)體，中和多種毒素的作用，同時(shí)它也是反映機(jī)體免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)。

表1一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑對(duì)小鼠血清中igg含量的影響

由表1結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，灌胃上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑組小鼠血清中igg含量差異顯著，高出對(duì)照組近3倍。因此，實(shí)施例1的一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑對(duì)正常小鼠體液免疫功能具有明顯的促進(jìn)作用。

實(shí)施例2

一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑，以重量百分比計(jì)配比如下：枸杞提取物5％、黃芪提取物9％、白術(shù)提取物8％、當(dāng)歸提取物8％、大棗濃縮液5％，扇貝多肽酶解液15％，其余為南極磷蝦多肽酶解液。

上述一種能夠提高人體免疫力的南極磷蝦多肽制劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)制備南極磷蝦多肽酶解液：取鮮凍南極磷蝦粉，加入比重1:150的去離子水，膠體磨磨漿至均勻，用300目濾網(wǎng)過(guò)濾5次，加熱至65℃保溫35min，冷卻至50℃，添加1500u/g酶解鮮凍南極磷蝦粉的無(wú)花果酶，50℃保溫4h，加熱至95℃，15min，冷卻至30℃，離心7000r/min，20min，過(guò)濾，取上清液，即得南極磷蝦多肽酶解液；

(2)制備扇貝酶解液：取干扇貝肉，將其研磨成細(xì)粉，過(guò)200目篩，重復(fù)3次，加入重量比1:150的蒸餾水，混勻，制成扇貝溶液，加熱至50℃，調(diào)節(jié)ph值為8，加入扇貝溶液重量的8％細(xì)菌蛋白酶，酶解6h，酶解完畢后加熱至95℃，保持20min，迅速冷卻至8℃，加入hcl或nacl調(diào)節(jié)ph值為7，并于8℃溫度下，5000r/min離心20min，取上清液，即得扇貝酶解液；

(3)按配比將枸杞提取物、黃芪提取物、白術(shù)提取物、當(dāng)歸提取物、大棗濃縮液，扇貝酶解液和南極磷蝦多肽酶解液在40℃下混合均勻，在60℃，25mpa下勻質(zhì)后經(jīng)過(guò)95℃殺菌20min，冷卻至20℃進(jìn)行真空包裝，即得到一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑。

功效實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)方法同實(shí)施例1，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑對(duì)小鼠血清中igg含量的影響

由表2結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，灌胃上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑組小鼠血清中igg含量差異顯著，高出對(duì)照組近3倍。因此，實(shí)施例2的一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑對(duì)正常小鼠體液免疫功能具有明顯的促進(jìn)作用。

實(shí)施例3

一種能夠提高人體免疫力的南極磷蝦多肽制劑，以重量百分比計(jì)配比如下：枸杞提取物7％、黃芪提取物8％、白術(shù)提取物10％、當(dāng)歸提取物7％、大棗濃縮液4％，扇貝多肽酶解液13％，其余為南極磷蝦多肽酶解液。

上述一種能夠提高人體免疫力的南極磷蝦多肽制劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)制備南極磷蝦多肽酶解液：取鮮凍南極磷蝦粉，加入比重1:120的去離子水，膠體磨磨漿至均勻，用500目濾網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾5次：加熱65℃，35min，冷卻至50℃，添加2000u/g酶解鮮凍南極磷蝦粉的枯草桿菌蛋白酶，保溫55℃，3h，加熱至90℃，30min，冷卻至35℃，離心6000r/min，25min，過(guò)濾，取上清液，即得南極磷蝦多肽酶解液；

(2)制備扇貝酶解液：取干扇貝肉，將其研磨成細(xì)粉，過(guò)200目篩，重復(fù)5次，加入重量比1:100的蒸餾水，混勻，制成扇貝溶液，加熱至50℃，調(diào)節(jié)ph值為9，加入扇貝溶液重量的8％胰蛋白酶，酶解5h，酶解完畢后加熱至95℃，保持30min，迅速冷卻至8℃，加入hcl或nacl調(diào)節(jié)ph值為7，并于5℃溫度下，7000r/min離心20min，取上清液，即得扇貝酶解液；

(3)按配比將枸杞提取物、黃芪提取物、白術(shù)提取物、當(dāng)歸提取物、大棗濃縮液，扇貝酶解液和南極磷蝦多肽酶解液在35℃下混合均勻，在60℃，20mpa下勻質(zhì)后經(jīng)過(guò)95℃殺菌30min，冷卻至25℃進(jìn)行真空包裝，即得到一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑。

功效實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)方法同實(shí)施例1，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑對(duì)小鼠血清中igg含量的影響

由表3結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，灌胃上述一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑組小鼠血清中igg含量差異顯著，高出對(duì)照組近3倍。因此，實(shí)施例3的一種能夠提高免疫力的南極磷蝦多肽制劑對(duì)正常小鼠體液免疫功能具有明顯的促進(jìn)作用。