本發(fā)明涉及農(nóng)用殺菌劑應(yīng)用領(lǐng)域,具體涉及含茉莉酸甲酯的組合物在柑橘潰瘍病的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

近年來,隨著廣西種植的柑橘品種的增多,潰瘍病的發(fā)生也越來越普遍,柑橘潰瘍病防治措施有很多，化學(xué)防治是重要措施?，F(xiàn)化學(xué)防治的藥劑中銅制劑防治效果較好，但容易誘發(fā)螨害和易產(chǎn)生藥害，影響果品質(zhì)量。因此，尋求高效、低毒、安全的柑橘潰瘍病防治藥劑顯得尤為重要。

中生菌素，英文名稱為：zhongshengmycin，為n-糖甙類抗生素殺菌劑，其抗菌譜廣，能夠抗革蘭氏陽性，陰性病菌，分枝桿菌，酵母菌及絲狀真菌。特別對(duì)農(nóng)作物致病菌和白菜軟腐病菌、黃瓜角斑病菌、水稻白葉枯病菌、水稻細(xì)菌性條斑病、柑橘潰瘍病等均具有明顯的抗菌活性。

茉莉酸甲酯(methyljasmonate，ja_me)，是一類脂肪酸的衍生物，存在于高等植物體內(nèi)的內(nèi)源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，是一種植物誘導(dǎo)抗病研究領(lǐng)域應(yīng)用較廣的高活性激發(fā)子，在誘導(dǎo)植物抗病性方面的作用已備受人們關(guān)注。大量試驗(yàn)證實(shí)，茉莉酸類(jasmonates，jas)作為植物抗病反應(yīng)的重要信號(hào)分子，能激活與植物抗病反應(yīng)相關(guān)的防御保護(hù)機(jī)制，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生對(duì)多種病害的系統(tǒng)獲得抗性。

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，通過不同作用機(jī)理的有效成分進(jìn)行復(fù)配，是延緩病害產(chǎn)生抗性常用的方法，中生菌素與茉莉酸甲酯作用機(jī)理不同，在一定比例范圍內(nèi)混配具有很好的增效作用，目前關(guān)于中生菌素與茉莉酸甲酯的混配用于柑橘潰瘍病在國內(nèi)外尚未見相關(guān)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供含茉莉酸甲酯的組合物在柑橘潰瘍病的應(yīng)用，能顯著提高藥效，能有效的控制病害的發(fā)展，并且有利于緩解病菌抗藥性。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：含茉莉酸甲酯的組合物在柑橘潰瘍病的應(yīng)用。

所述組合物的有效成分由中生菌素和茉莉酸甲酯組成，中生菌素和茉莉酸甲酯的重量比為3-20:1,優(yōu)選的，中生菌素和茉莉酸甲酯的重量比為4:1和8:1。

所述的中生菌素在組合物中的重量百分比為2-10％，茉莉酸甲酯在組合物中的重量百分比為0.5-5％。

所述的組合物加入適當(dāng)?shù)妮o助劑可加工成農(nóng)業(yè)上可接受的任意劑型，優(yōu)選為可濕性粉劑。

所述的組合物制備成可濕性粉劑需要的輔助劑包括填料、粘結(jié)劑、分散劑、潤濕劑、崩解劑或其它有益于有效成分在制劑中穩(wěn)定和藥效發(fā)揮的物質(zhì)，都是農(nóng)藥制劑領(lǐng)域中常用或允許使用的各種成份。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)和顯著的技術(shù)效果:

(1)活性成分中生菌素和茉莉酸甲酯的作用機(jī)理不同,相互混配病菌不易產(chǎn)生抗性；室內(nèi)生測(cè)結(jié)果表明，中生菌素和茉莉酸甲酯合理混配對(duì)柑橘潰瘍病病菌增效明顯，有利于減少農(nóng)藥施用量和降低農(nóng)藥成本，延長(zhǎng)中生菌素的生命周期。

(2)茉莉酸甲酯作為植物體內(nèi)的內(nèi)源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)能提高植物體對(duì)病蟲害、干旱、高溫、低溫等條件下的抗逆反應(yīng)，有助于提高植物免疫力，有利于減輕病害的發(fā)展。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案和有益效果作進(jìn)一步說明，本發(fā)明所述的百分比均為重量百分比。

一、制備實(shí)施例

實(shí)施例1：5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑

配方：按量稱取中生菌素4.0％，茉莉酸甲酯1.0％、烷基萘磺酸鹽5.0％、十二烷基硫酸鈉3.5％，白炭黑10％,硅藻土補(bǔ)足至100％。

實(shí)施例2：4.5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑

配方：按量稱取中生菌素4％、茉莉酸甲酯0.5％、烷基苯磺酸鈣鹽2.5％、十二烷基硫酸鈉4.5％,膨潤土補(bǔ)足至100％。

實(shí)施例3：12.5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑

配方：按量稱取中生菌素10％、茉莉酸甲酯2.5％、烷基苯磺酸鈣鹽4.5％、十二烷基硫酸鈉5％,高嶺土補(bǔ)足至100％。

實(shí)施例4：10.5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑

配方：按量稱取中生菌素10％，茉莉酸甲酯0.5％、木質(zhì)素磺酸鹽6％、無患子粉4％、白炭黑10％，高嶺土補(bǔ)足至100％。

實(shí)施例5：8.5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑

配方：按量稱取中生菌素8.0％，茉莉酸甲酯0.5％、木質(zhì)素磺酸鹽2.5％、十二烷基苯磺酸鈉2.5％,高嶺土補(bǔ)足至100％。

實(shí)施例6：15％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑

配方：按量稱取中生菌素10.0％，茉莉酸甲酯5.0％、烷基萘磺酸鹽8％、十二烷基硫酸鈉3.5％，白炭黑10％,硅藻土補(bǔ)足至100％。

上述實(shí)施例1-6的制備方法為，按配方比例稱量好各成分,在混合缸中混合均勻，經(jīng)氣流粉碎機(jī)粉碎后再混合均勻，即可制得中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑產(chǎn)品。

二、生物活性實(shí)施例

本發(fā)明的生物活性試驗(yàn)采用室內(nèi)生測(cè)毒力測(cè)定和大田藥效試驗(yàn)相結(jié)合的方法。

實(shí)施例1：中生菌素、茉莉酸甲酯及復(fù)配劑對(duì)柑橘潰瘍病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

試驗(yàn)對(duì)象：柑橘潰瘍病菌(xanthomonascitri(hahse))(采自田間，并經(jīng)分離純化)

試驗(yàn)方法：試驗(yàn)參考《農(nóng)藥生物測(cè)定技術(shù)》(陳年春主編，北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社出版)，以及中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)ny/t1156.16-2008《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第16部分：抑制細(xì)菌生長(zhǎng)量試驗(yàn)渾濁度法》，采用渾濁度法測(cè)定中生菌素、茉莉酸甲酯及混配對(duì)柑橘潰瘍病菌的室內(nèi)毒力。

a、靶標(biāo)細(xì)菌的培養(yǎng)：選用na培養(yǎng)基(nutrientagar)培養(yǎng)基(1lna培養(yǎng)基含聚蛋白胨5g，酵母粉1g，牛肉浸膏3g，蔗糖15g，瓊脂17g，用10mol/l的naoh調(diào)至ph7.0)于30℃細(xì)菌培養(yǎng)箱中鈍化培養(yǎng)柑橘潰瘍病菌48h，挑取單菌落于30mlna液體培養(yǎng)基中，置于28℃-30℃條件下震蕩培養(yǎng)(120r/min)18-30h至靶標(biāo)菌生長(zhǎng)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。

b、藥劑中生菌素和茉莉酸甲酯處理與培養(yǎng)：中生菌素母藥直接用蒸餾水溶解為20μg/ml母液，設(shè)置5個(gè)系列質(zhì)量濃度梯度，茉莉酸甲酯0.1％的吐溫-80水溶液稀釋為80μg/ml母液，設(shè)置5個(gè)系列質(zhì)量濃度梯度，按設(shè)計(jì)的濃度定量加入藥劑于30mlna液體培養(yǎng)基中，每處理設(shè)置4個(gè)重復(fù)，并設(shè)不含有效成分的處理作空白對(duì)照(ck)。向各處理培養(yǎng)基中分別接種對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的靶標(biāo)細(xì)菌100ul菌液，置于28℃-30℃條件下震蕩培養(yǎng)(120r/min)16-20h至未加藥劑的對(duì)照菌生長(zhǎng)達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)，測(cè)定并記載各處理的渾濁度。

渾濁度的測(cè)定：測(cè)定藥劑處理前和處理后的菌在600nm的光吸收值。

計(jì)算方法：

用dps數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各藥劑的ec50，將防治效果換算成幾率值(y)，藥液濃度(ug/ml)轉(zhuǎn)換成對(duì)數(shù)值(x)，以最小二乘法計(jì)算毒力方程和抑制中濃度ec50，然后按孫云沛法計(jì)算藥劑的毒力指數(shù)及共毒系數(shù)(ctc)。

實(shí)測(cè)毒力指數(shù)(ati)＝(標(biāo)準(zhǔn)藥劑ec50/供試藥劑ec50)×100

理論毒力指數(shù)(tti)＝a藥劑毒力指數(shù)×混劑中a的百分含量+b藥劑毒力指數(shù)×混劑中b的百分含量

共毒系數(shù)(ctc)＝[混劑實(shí)測(cè)毒力指數(shù)(ati)/混劑理論毒力指數(shù)(tti)]×100

當(dāng)ctc≤80，組合物表現(xiàn)為拮抗作用，當(dāng)80<ctc<120，組合物表現(xiàn)為相加作用，當(dāng)ctc≥120，組合物表現(xiàn)為增效作用。

測(cè)定結(jié)果見表1。

表1：中生菌素、茉莉酸甲酯及復(fù)配劑對(duì)柑橘潰瘍病的室內(nèi)毒力測(cè)定表

測(cè)定結(jié)果表明，當(dāng)中生菌素和茉莉酸甲酯的配比為3-20:1時(shí),共毒系數(shù)(ctc)大于120，當(dāng)中生菌素和茉莉酸甲酯的重量比為4:1、8:1時(shí)，共毒系數(shù)為170.7、175.0，混配劑對(duì)柑橘潰瘍病的增效明顯，兩者混配有利于減少各單劑的用量，在田間試驗(yàn)中有很好的指導(dǎo)價(jià)值。

實(shí)施例2：制備實(shí)施例1所得的制劑防治砂糖橘潰瘍病的田間試驗(yàn)

試驗(yàn)位于廣西南寧市郊，2015年9-10月高溫多雨潰瘍病盛發(fā)期。將5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑兌水稀釋1500倍，在砂糖橘潰瘍病發(fā)病初期，對(duì)植株進(jìn)行均勻噴霧，以葉片充分濕潤為標(biāo)準(zhǔn)，第一次藥后7d再噴施1次，共施藥2次，末次藥后15天的防治果為89.6％。對(duì)照藥劑5％中生菌素可濕性粉劑兌水稀釋1000倍、5％茉莉酸甲酯可濕性粉劑兌水稀釋300倍，采用相同施藥方法，末次藥后15天的防效分別為73.5％和68.2％。

這說明中生菌素和茉莉酸甲酯復(fù)配后對(duì)砂糖橘潰瘍病的防效明顯好于對(duì)照單劑，中生菌素和茉莉酸甲酯合理混配有利于提高藥效，降低農(nóng)藥成本。

實(shí)施例3：制備實(shí)施例2所得的制劑防治馬水桔潰瘍病的田間試驗(yàn)

試驗(yàn)位于廣西桂林市荔浦縣，2016年8-19月高溫多雨季節(jié)處于潰瘍病盛發(fā)期。將4.5％中生菌素·茉莉酸甲酯可濕性粉劑兌水稀釋1500倍，在馬水桔潰瘍病發(fā)病初期，對(duì)馬水桔植株進(jìn)行均勻噴霧，以葉片充分濕潤為標(biāo)準(zhǔn)，第1次藥后7d再噴施1次，共施藥2次，末次藥后15天的防治效果為87.5％。對(duì)照藥劑5％中生菌素可濕性粉劑兌水稀釋1000倍、5％茉莉酸甲酯可濕性粉劑兌水稀釋300倍，采用相同施藥方法，末次藥后15天的防治效果分別為72.6％、和64.82％。

這說明中生菌素和茉莉酸甲酯復(fù)配后對(duì)馬水桔橘潰瘍病的防效明顯好于對(duì)照單劑，中生菌素和茉莉酸甲酯合理混配有利于提高藥效，降低農(nóng)藥成本，有利于緩解病菌對(duì)抗生素類農(nóng)藥中生菌素的抗性，延長(zhǎng)其生命周期。

試驗(yàn)中，試驗(yàn)藥劑對(duì)柑橘類果樹安全，生長(zhǎng)無不良影響，因此值得在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。