[014引實(shí)施例3,非對映異構(gòu)體2
[0149] 39mg的非對映異構(gòu)體2作為第二洗脫非對映異構(gòu)體獲得。
[0150] 1h NMR(500MHz，DMS0-d6)Sppm 1.32(d，3H)，1.95(s，3H)，3.01-3.18(m，2H)，5.00 (td,lH),6.53(q,lH),7.13-7.24(m,3H),7.29(d,4H),7.65(t,lH),8.17(d,lH),8.49(d, IH)。擴(kuò)大了譜中的信號且未看到DMSO-信號分裂。
[0151] 1化醒R(126MHz，DMS0-d6)Sl9.6,20.7,44.4,54.9,88.6，121.6，123.7，126.4， 126.9，128.3，136.2，143.0，149.0，153.1，158.0，168.5.]?5化5+)111八 329(]\1+扣 +。
[0152] 光學(xué)純度98%。
[0153] 實(shí)施例4
[0154] 異下酸1-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基氨基甲酯基氧基）乙醋
[0155] 由于在用*表示的碳原子處有兩種可能的構(gòu)型，實(shí)施例4存在兩種不同的非對映異 構(gòu)體。其稱為實(shí)施例4非對映異構(gòu)體1和實(shí)施例4非對映異構(gòu)體2。并未確定其絕對構(gòu)型。
[0156]
[0157] 步驟 A:
[0158] 異下酸1-((4-(甲基橫酷基)苯氧基)幾基氧基）乙醋
[0159]
[0160] (1)將4-(甲基琉基)苯酪(4.91旨，35.0〇111111〇1)吸收于0〔1(1〇〇1^)并冷卻至0°(：。添 加氯甲酸1-氯乙醋（1.888血，17.50mmol)。在0°C歷時10分鐘逐滴添加4-甲基嗎嘟(4.81血， 43.74mmol)在DCM(20mL)中的溶液并在該溫度攬拌獲得的混合物5分鐘。在d攬拌反應(yīng)混合 物180分鐘，隨后用DCM稀釋，用水洗涂(2x)，經(jīng)Na2S〇4干燥，過濾并蒸發(fā)得到碳酸1-氯乙醋· 4-(甲基硫基)苯醋(6.94g)，將其用于下一步而無需進(jìn)一步純化。
[0161] (ii)將碳酸1-氯乙醋.4-(甲基硫基)苯醋（2.3邑，9.32111111〇1)、氧化銀（1)(2.160邑， 9.32mmol)和異下酸(9.51ml，102.55mmol)的混合物在氣氣氣氛下加熱至95°C，持續(xù)2小時。 將反應(yīng)混合物冷卻至d并用MTBE稀釋，通過娃藻±過濾，用更多的MTBE洗涂。用水 (4x25mL)、sat. aq.碳酸氨鋼他25mL)洗涂合并的濾液，干燥(Na2S〇4)并蒸發(fā)得到1.16g的產(chǎn) 物，將其用于下一步而無需進(jìn)一步純化。
[0162] (iii)將異下酸1-((4-(甲基硫基)苯氧基)幾基氧基）乙醋（1.16g，3.89mmol)吸收 于丙酬（12mL)和水（3.00mL)的混合物。歷時5分鐘逐份添加過硫酸氨鐘制劑（4.78g, 7.78mmol)，隨后在的攬拌過夜。過濾反應(yīng)混合物并用MTBE(2巧OmL)洗涂濾液，通過蒸饋出 丙酬將體積減少至約50mL，隨后在MT肥和水間分離。用MTBE萃取水層并經(jīng)Na2S〇4干燥合并的 有機(jī)物，過濾并蒸發(fā)得到531mg的標(biāo)題化合物，將其用于下一步而無需進(jìn)一步純化。
[0163] 步驟 B
[0164] 異下酸1-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基氨基甲酯基氧基）乙醋
[01 化]
[0166] 將異下酸1-((4-(甲基橫酷基)苯氧基)幾基氧基）乙醋(0.500g，1.51mmol)在乙臘 (2mL)中的溶液添加至（S)-1-苯基-2-"比晚-2-基）乙胺（0.300邑，1.51111111〇1)和碳酸氨鋼 (0.254g，3.03mmo 1)在乙臘(6mL)中的經(jīng)攬拌的混合物中，并將反應(yīng)混合物攬拌過夜。在 化OAc和sat aq化肥化間分離混合物，用sat aq化肥化、鹽水洗涂有機(jī)層，經(jīng)Na2S化干燥并 蒸發(fā)得到0.70g.，通過柱色譜純化(使用庚燒中的化OAc梯度(0-50%))得到作為兩種非對 映異構(gòu)體的混合物的標(biāo)題化合物(0.309g，57.2% )。
[0167] 非對映異構(gòu)體的分析和分離分別W3mL/min的流速在Phenomenex LuxC4,4.6* 250mm; 5μπι上使用 15 %MeOH+DEA/85 %C〇2，W及 W50mL/min的流速在曲enomenex LuxC4， 20*250mm; 5μπι 上使用 15 %Me0H+DEA/85 % C〇2 完成。
[016引實(shí)施例4,非對映異構(gòu)體1
[0169] 25mg的非對映異構(gòu)體1通過手性分離作為第一洗脫非對映異構(gòu)體W99%光學(xué)純度 獲得。旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體混合物：
[0170] 1h NMR(500MHz，DMS0-d6)Sppm 0.86-1.05(m)，l.19(d),1.32(d),2.31-2.44(m), 2.98-3.20(m)，4.94-5.07(m)，6.48(d)，6.52(q),7.15-7.25(m),7.25-7.34(m),7.60-7.70 (m)，7.77(d) ,8.06-8.18(m) ,8.44-8.55(m)。譜中完全無質(zhì)子：24。主要 / 次要的比率：1: 0.07。
[0171] MS(ES+APCI+)m/z 357(Μ+ΗΓ。
[0172] UV 純度= 100 %。
[0173] 實(shí)施例4,非對映異構(gòu)體2
[0174] 25mg的非對映異構(gòu)體2作為第二洗脫異構(gòu)體獲得。旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體混合物：
[0175] 1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)d ppm 0.82-0.94(m),0.94-1.04(m),1.25(d),1.32 (d),2.24-2.32(m),2.34-2.44(m),3.00-3.17(m),5.02(td),6.48(d),6.52(q),7.15-7.25 (m) ,7.25-7.38(m) ,7.55-7.77(m), 8.16(d) ,8.44-8.57(m).譜中完全無質(zhì)子:24。主要 / 次 要的比率:1:0.08。
[0176] MS(ES+APCI+)m/z 357(Μ+ΗΓ.
[0177] UV 純度= 100%.
[017引光學(xué)純度= 99%.
[0179] 實(shí)施例5-12使用通用的中間體，現(xiàn)對其制備進(jìn)行說明。
[0180] 用于實(shí)施例5-12的通用中間體的制備
[0181] 2-((S)-2-苯基-2-((S)-化咯燒-2-鐵甲酯氨基）乙基川比晚鐵二氯化物(其也可稱 為：（S)-N-((S)-1 -苯基-2-(化晚-2-基）乙基川比咯燒-2-甲酯胺二鹽酸鹽）
[0182]
[0183] 步驟 A
[0184] (S)-2-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基氨基甲酯基川比咯燒-1-簇酸叔下醋
[0185]
[0186] 在〇°C將T3P(DMF中50%wt.，0.861^，1.47111111〇1)逐滴添加至（18)-1-苯基-2-(化 晚-2-基）乙-1-胺（200mg，0.737mmol)、BocA-脯氨酸（159mg，0.737mmol)和DI陽A(0.64mL 3.69mmol)在C出Cb(7.4mL)中的溶液。對反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂羋同時攬拌過夜。用5% aq.化肥化洗涂有機(jī)層兩次，用鹽水洗涂一次，經(jīng)化2S化干燥，過濾并濃縮。使用50g Snap柱 純化產(chǎn)物（用MeOH和CH2CI2的梯度洗脫(0%Me0H/100 %CH2CI2一 10%Me0H/90 %CH2CI2))，得 到標(biāo)題化合物305mg(〉100% ).
[0187] 1h 醒R(300MHz，CDCl3):卵m 1.35(s，9H)，1.70-1.90(m，2H)，2.05-2.19(m，2H), 3.13(dd,lH),3.29-3.39(m,lH),3.46-3.62(m,2H),4.20-4.29(m,2H),5.39(q,lH),6.91 (d，lH)，7.09-7.14(m，lH)，7.16-7.23(m，5H)，7.49(td，lH)，8.45-8.59(m，lH).
[018引可替換的方法：
[0189] 將Boc-^Pr〇-OH( 2 . Og，9.29mmol)溶于無水DMF( 15mL)。添加 HATU( 3.7g， 9.76mmol)和許尼希堿(5.3mL，30.66mmol)并在d攬拌混合物30分鐘。隨后，將2-[ (2S) -2- 氨鐵基-2-苯基乙基]化晚-1-鐵二氯化物(2.5g，9.29mmol)添加至溶液并在的攬拌混合物3 小時30分鐘。添加水且用化OAc 3x萃取混合物。用鹽水洗涂有機(jī)相，經(jīng)化2S〇4干燥，過濾并減 壓濃縮。在Si〇2柱上純化產(chǎn)物（用梯度（0%Me0H/50%Et0Ac/50%庚燒一0%Me0H/100% 化OAc/0%庚燒一 10%Me0H/90%化OAc/0%庚燒)洗脫）且隨后在C-18柱上純化（用MeOH和 水的梯度(0-100 % MeOH)洗脫），得到2.9g (78 % )的標(biāo)題化合物。
[0190] 1h 醒R(300MHz，CDCl3):卵m 1.35(s，9H)，1.70-1.90(m，2H)，2.05-2.19(m，2H), 3.13(dd，J=13.8,7.1Hz，lH)，3.29-3.39(m，lH)，3.46-3.62(m，2H)，4.20-4.29(m，lH), 5.39(q，J = 6.細(xì)z，lH), 6.91 (d，J = 7.3Hz，1H) ,7.09-7.14(m，lH) ,7.16-7.23(m，5H) ,7.49 (td，J = 7.63，1.8Hz，lH)，8.45-8.59(m，lH).
[0191] 步驟 B
[0192] (s)-N-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基川比咯燒-2-甲酯胺二鹽酸鹽
[0193]
[0194] 在0°C，將(S)-2-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基氨基甲酯基川比咯燒-1-簇酸叔 下醋（305mg，0.77Immo 1)溶于4M肥1在1，4-二嗯燒中的溶液（7.7mL，30.8mmo 1)。將反應(yīng)混 合物逐漸溫?zé)嶂恋耐瑫r攬拌過夜。在真空下去除揮發(fā)物并在MT肥中研磨產(chǎn)物。在布氏漏斗 上通過過濾回收固體，用MT肥洗涂并在真空下干燥，獲得為二鹽酸鹽的263mg(93%)標(biāo)題化 合物。
[0195] 1h 醒R(300MHz，DMS0-d6):卵m 1.61-1.84(m，3H)，2.30-2.36(m，lH)，3.05-3.11 (m,2H),3.39-3.47(m,2H),4.05-4.20(m,2H),5.34(q,lH),7.17-7.41(m,5H),8.20-8.42 (m,lH),8.67-8.75(m,lH),9.45-9.62(m,2H).
[0196] 可替換的方法：
[0197] 將(2S)-2-{[(lS)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基]氨基甲酯基}化咯燒-1-簇酸叔下 醋（2.9邑，7.33臟〇1)溶于4]\1肥1在1，4-二嗯燒中的溶液(731^，293.31111111〇1)中。在的攬拌反 應(yīng)混合物3小時。在真空下去除揮發(fā)物并在MTBE中研磨產(chǎn)物。在布氏漏斗上通過過濾回收固 體，用MT肥洗涂并在真空下干燥，獲得2.7g(100%)的（2S)-2-{[(lS)-1-苯基-2-(化晚-1- 鐵-2-基）乙基]氨基甲酯基}化咯燒-1 -鐵。
[019引 1h 匪R(300MHz，D20):郵m 1.66-1.83(m，3H)，2.20-2.26(m，lH)，3.14(t，J = 6.9Hz，2H)，3.34(dd，J=14.1，8.2Hz，lH)，3.51(dd，J=14.4,7.3Hz，lH)，4.18(dd，J = 8.5， 6.2Hz，lH)，5.11(t，J=7.9Hz，lH)，7.06-7.10(m，2H)，7.15-7.21(m，3H)，7.61-7.70(m, 2H)，8.23(dt，J = 7.9，l.甜z，lH)，8.37(d，J = 5.細(xì)z，lH).
[0199] 實(shí)施例5
[0200] (s)-1-((S)-2-氨基-3-甲基下酷基)-N-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基川比咯 燒-2-甲酯胺
[0201]
[0202] 制備標(biāo)題化合物，其為（S)-1-( (S)-2-氨基-3-甲基下酷基)-N-( (S)-1-苯基-2- 川比晚-2-基）乙基川比咯燒-2-甲酯胺的二鹽酸鹽。
[0203] 步驟 A
[0204] (S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-((S)-1-苯基-2-川比晚-2-基）乙基氨基甲酯基川比 咯燒-1 -基)下-2-基氨基甲酸叔下醋
[0205]
[0206] 在〇°C將T3P(DMF中50%wt.，0.83mL，1.42mmol)逐滴添加至（S)-N-((S)-1-苯基- 2-"比晚-2-基）乙基）化咯燒-2-甲酯胺二鹽酸鹽（263mg，0.714mmol)、Boc-レ鄉(xiāng)氨酸 (155mg，0.714mmo 1)和DI陽A(0.62mL，3.57mmo 1)在DCM(7mL)中的溶液中。在攬拌下逐漸溫 熱反應(yīng)混合物至的過夜。用5 % aq.化肥〇3洗涂有機(jī)層兩次，用鹽水洗涂一次，經(jīng)化2S化干燥， 過濾并濃縮。使用50g Snap柱純化產(chǎn)物（用MeOH和C此C12梯度（5%Me0H/95%C此C12一 10% MeOH/90 % C出Cl2)洗脫），得到標(biāo)題化合物258mg(73 % )。
[0207] ^ NMR(300MHz,CDCb):ppm 0.91(d,3H),1.00(d,3H),1.43(s,9H),1.85-1.99(m, 2H),2.00-2.16(m,lH),2.17-2.21(m,lH),3.12-3.27(m,2H),3.47-3.62(m,lH),3.63-3.78 (m，lH)，4.32(dd，lH)，4.58(d，lH)，5.23-5.35(m，2H)，6.97(d，lH)，7.10(dd，lH)，7.14- 7.30(m，5H)，7.50(td，lH)，7.84(d，lH)，8.48(dd，lH).
[020引步驟B
[0209] (s)-1-((S)-2-氨基-3-甲基下酷基)-N-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基川比咯 燒-2-甲酯胺二鹽酸鹽
[0210]
[0211] 將(S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-2-((S)-1-苯基-2-川比晚-2-基）乙基氨基甲酯基） 化咯燒-1-基)下-2-基氨基甲酸叔下醋（258mg，0.522mmol)溶于4M肥1在1,4-二嗯燒中的 溶液(5.2mL，30.8mmo 1)中。攬拌反應(yīng)混合物過夜。在真空下去除揮發(fā)物并在化OAc中研磨產(chǎn) 物。在布氏漏斗上通過過濾回收固體，隨后在化2〇中研磨。在布氏漏斗上過濾后，在真空下 干燥固體，獲得200mg(82%)的標(biāo)題化合物，其為二鹽酸鹽。隨后將作為二鹽酸鹽的標(biāo)題化 合物通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的技術(shù)轉(zhuǎn)化為游離堿。可替換地，標(biāo)題化合物可作為富馬 酸鹽通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的方法制備。
[0^2] 1h