降解試驗 后PE樣品的FTIR分析。(A)FTIR光譜，（B)用于各處理的羰基指數(shù)。
[0048]圖29為在與漆酶預溫育7天后實施的，在不同添加劑存在下在30天生物降解試驗 后PE樣品的DSC分析。(A)DSC曲線，（B)由DSC分析的得到的參數(shù)。
[0049]圖30為在與漆酶預溫育及未預溫育下的DSC曲線的比較。（A)DSC曲線，（B)由DSC分 析的得到的參數(shù)。
[0050]圖31為在不同時間內(nèi)與漆酶溫育的PE的FTIR分析。（A)FTIR光譜，（B)用于各處理 的羰基指數(shù)。
[0051 ]圖32為在與漆酶溫育不同的時間后PE樣品的DSC曲線的比較。（A)DSC曲線，（B)由 DSC分析的得到的參數(shù)。
[0052]圖33為PE樣品的SEM圖像。（A)未進行處理的PE樣品，（B)未與酶溫育7天后的PE樣 品，（C)與漆酶溫育7天后的PE樣品。
[0053]圖34為由土壤短芽孢桿菌得到的多銅氧化酶序列。
[0054]圖35為擴增基因的PCR產(chǎn)物的1 %瓊脂糖凝膠。
[0055] 圖36為由菌落PCR得到的PCR產(chǎn)物的1 %瓊脂糖凝膠。
[0056] 圖37為誘導產(chǎn)物的10%SDS PAGE。
[0057] 圖38為在不同溫度下酶的誘導。
[0058]圖39為細菌誘導介質(zhì)中銅濃度對漆酶活性的影響。
[0059] 圖40為洗滌和洗脫緩沖劑中銅濃度對漆酶活性的影響。
[0060] 圖41為純化蛋白質(zhì)樣品的10%SDS PAGE，其中所述的樣品是在具有不同銅濃度的 洗脫緩沖劑中清潔的。
[0061] 圖42為monoQ級份的 10%SDS PAGE。
[0062] 圖43為ABTS濃度對漆酶活性的影響（蛋白質(zhì)原液濃度為0.5mg/mL)。
[0063]圖44為反應溫度對漆酶活性的影響（蛋白質(zhì)濃度為0.5mg/mL)。
[0064]圖45為溫度對漆酶存活的影響。
[0065] 發(fā)明詳述
[0066]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種組合物，其包含:聚乙烯和漆酶。在另一個 實施方案中，漆酶為氧化酶。在另一個實施方案中，漆酶為包含銅的氧化酶。在另一個實施 方案中，漆酶為氧化酶，其作用于酚及類似的分子，實施一個電子的氧化。在另一個實施方 案中，漆酶為細菌漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為植物漆酶。在另一個實施方案中，漆酶 為真菌漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為嗜熱細菌漆 酶。在另一個實施方案中，漆酶為需氧細菌漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為細菌分離的 漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為細菌純化的漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為波茨坦 短芽孢桿菌的漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為土壤短芽孢桿菌的漆酶。在另一個實施方 案中，漆酶為細胞外細菌漆酶。在另一個實施方案中，漆酶為赤紅球菌漆酶。在另一個實施 方案中，漆酶為赤紅球菌C208漆酶。
[0067]在另一個實施方案中，本發(fā)明的組合物保持在50°C至100°C的溫度下。在另一個實 施方案中，本發(fā)明的組合物保持在60 °C至100°C的溫度下。在另一個實施方案中，本發(fā)明的 組合物保持在70°C至90°C的溫度下。在另一個實施方案中，本發(fā)明的組合物保持在75°C至 85°C的溫度下。在另一個實施方案中，本發(fā)明的組合物保持在77°C至83°C的溫度下。
[0068]在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶在50°C至100°C的溫度下具有最佳比活。在另 一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶在60°C至100°C的溫度下具有最佳比活。在另一個實施方案 中，本發(fā)明的漆酶在70°C至90°C的溫度下具有最佳比活。在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆 酶在75°C至85°C的溫度下具有最佳比活。在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶在77°C至83 °C的溫度下具有最佳比活。
[0069] 在另一個實施方案中，本文所述的漆酶包含以下氨基酸序列： mrepfvlegeksilaladwqahfpglvagftvrlggeseepygsfnmglhvgddpahvianrkklaeqvgmpfeawt cadqvhgnrvcqvtaggagkeslgdviaatdglftqqkgvlltsfyadcvplyfldpasgaiglahagwkgtvgria eemvkalqthykakpgdiriaigpsiggccyevderimtqvrtsaenwktavsastegkymldlrqlnteilreagi sranmlvtdwctscrtdlffshrkeagpgkmtgrma syigwketegr(SEQ ID N0:l)〇在另一個實施方 案中，本文所述的漆酶包含SEQ ID NO:3中列出的氨基酸序列。
[0070] 在另一個實施方案中，本文所述的漆酶包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID N0:3的活性片 段。在另一個實施方案中，漆酶的活性片段包含漆酶的活性。在另一個實施方案中，漆酶的 活性片段包含聚乙烯生物降解和/或分解活性。在另一個實施方案中，漆酶的活性片段在60 °C至100°C的溫度或者上文針對漆酶所提及的任何其他的范圍內(nèi)包含最佳聚乙烯生物降解 和/或分解活性。
[0071] 在另一個實施方案中，漆酶為SEQ ID NO: 1所示的漆酶的變體，該變體與SEQ ID NO: 1所示的漆酶具有1-5個保守的氨基酸取代的差異。在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶 與SEQ ID NO: 1所示的漆酶或其肽是至少70%同源的。在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶 的氨基酸序列與SEQ ID NO: 1所示的漆酶是至少75%同源的。在另一個實施方案中，本發(fā)明 的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID NO: 1所示的漆酶是至少80%同源的。在另一個實施方案中， 本發(fā)明的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID NO: 1所示的漆酶是至少85%同源的。在另一個實施 方案中，本發(fā)明的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID N0:1所示的漆酶是至少90%同源的。在另一 個實施方案中，本發(fā)明的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID NO: 1所示的漆酶是至少95%同源的。 [0072] 在另一個實施方案中，漆酶為SEQ ID N0:3所示的漆酶的變體，該變體與SEQ ID N0:3所示的漆酶具有1-5個保守的氨基酸取代的差異。在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶 與SEQ ID N0:3所示的漆酶或其肽是至少70%同源的。在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶 的氨基酸序列與SEQ ID N0:3所示的漆酶是至少75%同源的。在另一個實施方案中，本發(fā)明 的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID N0:3所示的漆酶是至少80%同源的。在另一個實施方案中， 本發(fā)明的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID N0:3所示的漆酶是至少85%同源的。在另一個實施 方案中，本發(fā)明的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID N0:3所示的漆酶是至少90%同源的。在另一 個實施方案中，本發(fā)明的漆酶的氨基酸序列與SEQ ID N0:3所示的漆酶是至少95%同源的。
[0073] 在另一個實施方案中，本發(fā)明的漆酶是由以下DNA序列編碼的： ATGAACAAATCATCGTTACGAAGCACAGCCTTCCCGCTTTTGCTGGGCGGTCTGCTGCTTCTGTCCGCCTGCTCGAC CGAGCAAGCGACGACCGCGGGCCACGCCGGGCACGACATGGGAGCCGACCAAAGCGCGACGCAGCAACCGGCTGCTC CCTCCCAACCGATGACTGCGTCAGGCGACAATGCCATGGAGGTGCTGACGGGCAATACGTTCACCCTCACGGCAAAA GAGAGCATGCTGCACCTCGACGACCAGACGATGAAAACAGCCTGGACCTACAACGGAACCGTCCCTGGACCGCAGCT TCGCGTCAAGCAGGGCGAGACGATTTCCGTCACCTTGAAAAATGAACTGCCGGAGCCGGTGACGATCCACTGGCACG GGCTGCCTGTGCCAAACAACATGGACGGCATCCCCGGTGTCACGCAAAATGCGGTGAAGCCAAACGAAAGCTTCACC TACCGCTTCAAGGTCGACGTGGCGGGAACGTACTGGTACCACTCGCATCAAAACAGCTCCAGGCAGGTCGACAAAGG GCTGTACGGCTCGCTCGTCGTCGAGCCGAAAACGCCGGAGCCAGCAGACAAAGACGTCACGCTCGTCCTCGACGAAT GGATGCAGGACGACAGCATGGCCGAAATGCACGGTGGCGGCGGCTCGATGGCAGGCATGAACCACGGTGCTGACCAC GCCGCTCCCGCCACCTCTGCTGCGAGCGGCCACGACATGGCGAACATGAGCGACGCGAAAATGATGCCGCTCATGTA CACGATCTTTTCCGTCAACGGGAAGACGGGACCTGCCATCGCTCCGCTGCGCGTGAAGGAAGGCGAAAAAGTCCGCA TCCGCCTCATCAATGCCGGGTATTTGTCGCACAAGCTGAACCTGCAAGGACATGCGTTCCAAATCGTTTCCACGGAC GGGCAGCCGCTGCACAATCCGCCGCTCACGAGCGGACAGTTGCTCAACATCGCCCCCGGCGAGCGCTACGATCTCGA ATTTGTAGCGAACAACCCGGGAACATGGCTGCTGGAGGAGCGAAGCGACAACCCTGGCGCCAAATCGCTTGCCGTGC CTATCGTCTACGAAGGCTACGAAGCGGCGCAGGCCAAACCGGAGTCGGGTCAACTCCCGGTCATTGATCTCACCCGA TACGGCGAAGCGGCCCAAAGCAGCTTTTCGCTGGAGCAGCCGTACGATATCACATACCGAATGGACTTGAACACCGA CTCGCGCGACGGGCAGATGGTGTTTACGATCAACGGCCAAACGTTCCCGAACGTCCCTCCGCTGGATGTAAAAAAAG GCGACCGGGTCAAGGTGACCATCGTCAACAACTCGCCGGAGGACGTCCACCCGATGCATTTGCACGGACACTTCTTC CAGGTGCTGAGCAAAAACGGCCAGCCCGTGTCCGGCTCGCCGCTGGTCAAGGACACCTTGAATGTGCTGCCAGGCGA GTCCTACGTCGTCGCCTTTGCGGCTGACAATCCCGGCGAGTGGATGTTCCACTGCCACGACCTGGGGCATGCGGCCA AAGGGATGGTGTCCGAGGTCAAATACACGGGCTTCCAGCGGGACTTCGTCGTCG ATCCGACCGTCGGCAACATGCCGGAGTAA(SEQ ID N0:2)〇
[0074] 在另一個實施方案中，編碼本發(fā)明的漆酶的DNA序列與SEQ ID NO: 2所示的DNA序 列是至少70%-致的。在另一個實施方案中，編碼本發(fā)明的漆酶的DNA序列與SEQ ID NO: 2 所示的DNA序列是至少75%-致的。在另一個實施方案中，編碼本發(fā)明的漆酶的DNA序列與 SEQ ID N0:2所示的DNA序列是至少80%-致的。在另一個實施方案中，編碼本發(fā)明的漆酶 的DNA序列與SEQ ID N0:2所示的DNA序列是至少85%-致的。在另一個實施方案