合A_E、A-F、B-D、B-E、B-F、C_D、 C-E和C-F的每一個(gè)被特別地構(gòu)思并應(yīng)考慮為從A、B和C;D、E和F;和實(shí)例組合A-D的公開(kāi)內(nèi)容 公開(kāi)的。同樣地，這些的任何亞群或組合也被特別地構(gòu)思和公開(kāi)。因此，例如，A-E、B-F和C-E 的亞組被特別地構(gòu)思并應(yīng)考慮為從A、B和C; D、E和F;和實(shí)例組合A-D的公開(kāi)內(nèi)容公開(kāi)的。此 外，如上構(gòu)思和公開(kāi)的各種材料、組合物、組分等也可特別地和獨(dú)立地包含在此類材料的任 何組、亞組、列表、集合等中或從此類材料的任何組、亞組、列表、集合等中排除。這些概念應(yīng) 用于本申請(qǐng)的所有方面，包括但不限于制備和使用所公開(kāi)的組合物的方法中的步驟。因此， 如果有各種可進(jìn)行的另外的步驟，則要理解這些另外的步驟的每一個(gè)可用所公開(kāi)方法的任 何特定實(shí)施方案或?qū)嵤┓桨傅慕M合進(jìn)行，且每個(gè)這樣的組合被特別地構(gòu)思并應(yīng)考慮為公開(kāi) 的。
[0033]構(gòu)思了可用作減少HCC腫瘤生長(zhǎng)的食物補(bǔ)劑和治療劑的益生菌制劑，稱為ProHep。 益生菌制劑包含有益益生菌微生物區(qū)系的混合物，其包含(a)熱滅活的嗜酸乳桿菌(Moro) Hansen和Mocqu (ATCC 53103)，（b)活的大腸桿菌Nissle 1917,和（c)熱滅活的VSL#3?。 VSL#3 ?是可市售獲得的以商品名VSL#3 ?交易的產(chǎn)品并包含8個(gè)不同的細(xì)菌菌株:短雙歧 桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、類干酪乳桿菌、保加利亞乳桿 菌和嗜熱鏈球菌。經(jīng)測(cè)定這種益生菌制劑可減少HCC腫瘤生長(zhǎng)。
[0034]目前HCC治療的主要缺點(diǎn)是高的醫(yī)療護(hù)理成本。例如，使用如由NCCN/AASLD/JSH/ ESMO指南推薦的索拉非尼的分子靶向療法是昂貴的，每月的平均費(fèi)用約US$6,000 (Cabrera, R.和 D. Nelson,評(píng)論文章：肝細(xì)胞癌的管理（Review article: the management of hepatocellular carcinoma). Alimentary pharmacology & therapeutics, 2010. 31(4):第461-476)頁(yè)，因此它可只能在擁有廣泛的醫(yī)療保健服務(wù) 的財(cái)政資源的國(guó)家實(shí)施(Benson 3rd，A.，等人，腫瘤學(xué)的NCCN臨床實(shí)踐指南:肝細(xì)胞癌 (NCCN clinical practice guidelines in oncology: hepatobiliary cancers). Journal of the National Comprehensive Cancer Network: JNCCN, 2009. 7(4):第 350頁(yè)；Jelic，S.，肝細(xì)胞癌：診斷、治療和隨訪的ESMO臨床建議（Hepatocellular carcinoma:: ESMO clinical recommendations for diagnosis, treatment and follow-up). Annals of Oncology，2009. 20(增刊4):第iv41_iv45頁(yè)；Izumi，N·，肝 病的日本社會(huì)的診斷和治療法則：一種基于共識(shí)的實(shí)踐指南(Diagnostic and treatment algorithm of the Japanese society of hepatology: a consensus-based practice guideline). Oncology, 2010. 78 (增刊I):第78-86 頁(yè);Bruix, J.和 M. Sherman,肝細(xì) 胞癌的管理：一個(gè)更新（Management of hepatocellular carcinoma: an update). Hepatology, 2011. 53(3):第1020-1022頁(yè)）。美國(guó)HCC的公布成本分析指示，對(duì)于HCC患者 平均5年凈成本是平均每月US$45,000 (Yabroff，K.R.，等人，對(duì)于美國(guó)的老年癌癥患者 的醫(yī)護(hù)成本（Cost of care for elderly cancer patients in the United States). Journal of the National Cancer Institute, 2008. 100(9):第630-641 頁(yè)）。同時(shí)，益 生菌通常在乳制品食品中發(fā)現(xiàn)，而對(duì)于購(gòu)買專利的商業(yè)產(chǎn)品如VSL#3?，成本僅為大約US$ 86.00每月。因此，所公開(kāi)的有效的益生菌提供一種HCC干預(yù)的更廉價(jià)途徑。
[0035]益生菌口服補(bǔ)劑，無(wú)論是活的或是熱滅活的形式，先前并未用來(lái)治療HCC且先前并 不知道可減少HCC生長(zhǎng)。此外，雖然益生菌已顯示某些一般的免疫調(diào)節(jié)作用，但在HCC腫瘤微 環(huán)境中的T輔助細(xì)胞相關(guān)免疫調(diào)節(jié)作用及其與HCC預(yù)防和干預(yù)的關(guān)系在本工作之前并未研 究過(guò)。特別地，先前并不知道LGG、EcN和VSL#3 ?可具有對(duì)HCC的作用。
[0036]所公開(kāi)的組合物和方法也可用來(lái)治療處于發(fā)生HCC的風(fēng)險(xiǎn)中的那些。HCC的致病因 素包括乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)的慢性感染，暴露于食物黃曲霉毒素Bl (AFBl)，和酒精消費(fèi)。其中，HBV占全世界HCC病例的50%-80%，而10%-25%的病例被認(rèn)為是HCV 感染的后果(Venook，A.P.，等人，肝細(xì)胞癌的發(fā)病率和流行病學(xué)：全球和地區(qū)展望(The incidence and epidemiology of hepatocellular carcinoma: a global and regional perspective). Oncologist, 2010. 15 (增刊4):第5-13頁(yè)；Block, T.M·，等人，肝細(xì)胞 癌的分子病毒腫瘤學(xué)(Molecular viral oncology of hepatocellular carcinoma). Oncogene, 2003. 22 (33):第5093-5107頁(yè)；Anthony, P·，肝細(xì)胞癌：綜述 (Hepatocellular carcinoma: an overview). Histopathology, 2001. 39(2):第109-118頁(yè)）。所公開(kāi)的益生菌組合物可通過(guò)在發(fā)生HCC前，口服消費(fèi)益生菌調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)來(lái)減少 發(fā)展HCC的風(fēng)險(xiǎn)。因此，肝炎攜帶者可用所公開(kāi)的益生菌組合物治療，以幫助減少他們發(fā)展 HCC的風(fēng)險(xiǎn)。世界衛(wèi)生組織(WHO)估計(jì)世界上超過(guò)520,000,000人為面臨發(fā)展肝硬化和/或肝 癌風(fēng)險(xiǎn)的慢性肝炎病毒攜帶者(WHO.乙型肝炎全球警報(bào)和響應(yīng)（Hepatitis B Global Alert and Response). 2013 [2013 引用的；可在網(wǎng)頁(yè) who. int/csr/disease/hepatitis / whocdscsrlyo20022/en/index3·html上獲得;WHO.丙型肝炎全球警報(bào)和響應(yīng)(Hepatitis C. Global Alert and Response). 2013;可在網(wǎng)頁(yè) who. int/csr /disease/hepatitis/ whocdscsrlyo2003/en/index4 .html上獲得）。假定每月益生菌消費(fèi)的平均成本是大約US$ 68.30 (Ferring. VSL#3? ordering. 2013;可在網(wǎng)頁(yè)vsl3.co.uk/order_vsl3上獲得； Mutaflor. Buy Mutaflor. 2013;可在網(wǎng)頁(yè)mutaflor ? ca/products-page/上獲得； verkkoapteekki，Gefilus. 2013)，估計(jì)的用所公開(kāi)的益生菌治療45天的市場(chǎng)大小為約US $440億每年。
[0037]所公開(kāi)的組合物和方法允許對(duì)要靶向的宿主的慢性微生物攻擊源，這將有助于在 腫瘤微環(huán)境中調(diào)節(jié)T輔助細(xì)胞相關(guān)免疫應(yīng)答和減緩肝癌進(jìn)展。使用益生菌減緩HCC腫瘤生長(zhǎng) 的方法和使用一種新的益生菌混合物(ProHep)減少腫瘤生長(zhǎng)的方法被公開(kāi)。通過(guò)預(yù)防或治 療與患者的腫瘤生長(zhǎng)有關(guān)的問(wèn)題，隨后的健康問(wèn)題可以得到預(yù)防或減輕，這可導(dǎo)致降低患 者未來(lái)的健康護(hù)理成本。
[0038] 某些所公開(kāi)的益生菌組合物是細(xì)菌的混合物。例如，某些益生菌組合物可以是幾 種可市售獲得的細(xì)菌或公共領(lǐng)域細(xì)菌(public domain bacteria)，即嗜酸乳桿菌(Moro) Hansen和Mocquot菌株GG (ATCC 53103)、大腸桿菌Nissle 1917 (以商品名Mutaflor交易 的可市售獲得的產(chǎn)品）、VSL#3 ? (以商品名VSL#3 ?交易的可市售獲得的產(chǎn)品）的混合物。 細(xì)菌混合物是活的和熱滅活的細(xì)菌的混合物，該混合物可稱為ProHep。益生菌組分也可以 兩種或更多種分開(kāi)的組合物配制。這樣的分開(kāi)的組合物可在相同的時(shí)間或在不同的時(shí)間一 起或分開(kāi)給予。所公開(kāi)的組合物可進(jìn)一步包含組合物的其它組分，或可與組合物的其它組 分一起給予。例如，所公開(kāi)的益生菌組合物可與食物合并或可與食物一起給予。
[0039] 雖然不希望被限制于一個(gè)特定的操作方式，但所公開(kāi)的組合物和方法可通過(guò)影響 腫瘤微環(huán)境中的T輔助細(xì)胞相關(guān)免疫應(yīng)答和血管生成，減少HCC腫瘤生長(zhǎng)(Sung CY，L.N.， El-Nezami Η.，通過(guò)細(xì)菌調(diào)節(jié)T輔助細(xì)胞17:治療肝細(xì)胞癌的途徑（Regulation of T helper 17 by bacteria: an approach for the treatment of hepatocellular carcinoma). International journal of Hepatology, 2012. 2012(論文ID 439024): 第8頁(yè)）。
[0040] 要理解，除非另外指明，所公開(kāi)的方法和組合物并不限于特定的合成方法、特定的 分析技術(shù)或特定的試劑，因此可改變。還要理解，本文所用的術(shù)語(yǔ)僅僅為了描述特定實(shí)施方 案的目的并非意欲進(jìn)行限制。
[0041 ] 益生菌組合物 可用來(lái)治療肝細(xì)胞癌(HCC)的益生菌組合物被公開(kāi)。所公開(kāi)的益生菌組合物是可用作 食物補(bǔ)劑和治療劑以降低HCC風(fēng)險(xiǎn)和/或生長(zhǎng)的益生菌制劑并通常包含有益益生菌微生物 區(qū)系的混合物。已觀察到益生菌細(xì)菌的某些組合可減少HCC的風(fēng)險(xiǎn)和/或作用。某些益生菌 組合物包含熱滅活的嗜酸乳桿菌(Moro) Hansen和Mocqu (ATCC 53103)、活的大腸桿菌 Nissle 1917和熱滅活的VSL#3?。例如，益生菌組合物可包含嗜酸乳桿菌(Moro) Hansen和 Mocquot菌株GG (ATCC 53103)(熱滅活的，2x 1010 cfu/d);市面上稱為VSL#3?的短雙歧 桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、類干酪乳桿菌、保加利亞乳桿 菌和嗜熱鏈球菌（熱滅活的，總劑量1·8χ 1012 cfu/d);和大腸桿菌Nissle 1917 (活的， 5x 1012 cfu/d)。與對(duì)照生長(zhǎng)比較，細(xì)菌的組合可有效減少肝細(xì)胞癌(HCC)生長(zhǎng)。與對(duì)照風(fēng) 險(xiǎn)比較，細(xì)菌的組合可有效減少肝細(xì)胞癌(HCC)風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)菌(a)、（b)和(c)可各自獨(dú)立地以約 20-55%重量的濃度存在于益生菌組合物中。
[0042] 嗜酸乳桿菌(Moro) Hansen和Mocqu (ATCC 53103)是已知在全身和腸疾病模型中 調(diào)節(jié)與Thl/Th2應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞因子的產(chǎn)生、誘導(dǎo)T-細(xì)胞低反應(yīng)性和減少炎癥的細(xì)菌。 [0043]大腸桿菌Nissle 1917是已知可誘導(dǎo)T-細(xì)胞低反應(yīng)性和促進(jìn)抗炎作用的細(xì)菌。 [0044] VSL#3 ? (Sigma-Tau)是取得專利權(quán)的、商業(yè)可獲得的益生菌混合物，其由8種細(xì) 菌組成:短雙