使用益生菌治療癌癥的方法和組合物的制作方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】使用益生菌治療癌癥的方法和組合物
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉參照 本申請(qǐng)要求2013年8月16日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)系列號(hào)61/866,784的權(quán)益，其通過(guò)引 用以其全文結(jié)合到本文中。
[0002] 發(fā)明背景 肝細(xì)胞癌(HCC)是世界上第五大最流行的癌癥和所有癌癥相關(guān)的死亡的第二大原因 (Ferlay, J·，等人，2008年全球癌癥負(fù)擔(dān)的估計(jì)（Estimates of worldwide burden of cancer in 2008)：GL0B0CAN 2008. International journal of cancer, 2010. 127 (12):第2893-2917頁(yè)）。據(jù)報(bào)道，每年全球有超過(guò)600,000人死亡。HCC影響所有地區(qū)的世界 人口（El-Serag，H.B.和K.L. Rudolph，肝細(xì)胞癌：流行病學(xué)和分子致癌作用 (Hepatocellular carcinoma: epidemiology and molecular carcinogenesis) ? Gastroenterology, 2007. 132(7):第2557-2576頁(yè)）。大約75% HCC患者集中在亞洲，但 已有報(bào)道，在包括歐洲和美國(guó)的幾個(gè)發(fā)達(dá)國(guó)家，HCC的發(fā)病率最近有上升的趨勢(shì)(Venook， A.P.，等人，肝細(xì)胞癌的發(fā)病率和流行病學(xué)：全球和地區(qū)展望（incidence and epidemiology of Hepatocellular carcinoma: a global and regional perspective) ? Oncologist, 2010. 15 (增刊4):第5-13頁(yè)）。
[0003] 護(hù)理的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)可以分為3大類(lèi)，包括（I)手術(shù)治療；（2)局部消融療法；和（3) 化學(xué)療法。手術(shù)治療包括肝切除術(shù)和肝移植。非手術(shù)治療包括局部消融療法，其中經(jīng)皮乙醇 注射(PEI)和射頻消融(RFA)是最常實(shí)施的；和化學(xué)療法，其或者是經(jīng)動(dòng)脈化療栓塞(TACE) 給藥或者是系統(tǒng)給藥。標(biāo)準(zhǔn)治療涉及高費(fèi)用。例如，使用如由NCCN/AASLD/JSH/ESM0指南推 薦的索拉非尼的分子靶向療法是昂貴的，每月的平均費(fèi)用約US$6,000。
[0004] 口服活的益生菌是已在文獻(xiàn)中報(bào)道的許多可供選擇的實(shí)驗(yàn)性癌癥治療之一。益生 菌被定義為活的微生物，當(dāng)其以適合的量給予時(shí)，對(duì)宿主提供健康益處。益生菌對(duì)癌癥發(fā)展 的功效已由幾條科學(xué)證據(jù)和假設(shè)提出，包括增加免疫細(xì)胞激活，增加抗腫瘤監(jiān)視免疫活性， 促進(jìn)抗炎作用，和抑制細(xì)菌轉(zhuǎn)化前致癌物（de LeBlanc, A.d.M·，C. Matar，和G. Perdig<5 n，益生菌在癌癥中的應(yīng)用（The application of probiotics in cancer). British Journal of Nutrition, 2007. 98(S1):第S105-S110頁(yè)）。大多數(shù)數(shù)據(jù)從結(jié)腸和乳腺癌病 例獲得。在前者中，預(yù)防首先在動(dòng)物模型中實(shí)現(xiàn)并被歸因于益生菌的顯著抗炎作用 (Perdigon, G.，等人，酸奶在預(yù)防結(jié)腸癌中的作用（Role of yoghurt in the prevention of colon cancer). European journal of clinical nutrition, 2002. 56:第S65頁(yè)）。而在乳腺癌的情況下，提示的益生菌的有益作用似乎是通過(guò)增加抗腫瘤監(jiān) 視免疫活性來(lái)介導(dǎo)(de Moreno de LeBlanc, A.，等人，瑞士乳桿菌R389發(fā)酵的乳對(duì)正常 乳腺和乳腺癌模型相關(guān)的免疫細(xì)胞的影響（Effects of milk fermented by Lactobacillus helveticus R389 on immune cells associated to mammary glands in normal and a breast cancer model). Immunobiology, 2005. 210(5):第349-358頁(yè)）。
[0005] 在肝癌的背景下，有關(guān)于益生菌補(bǔ)劑（活的鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus rhamnosus) LC705和費(fèi)氏丙酸桿菌謝爾曼亞種（Propionibacterium freudenreichii subsp. Shennani))作為食物途徑以降低肝癌風(fēng)險(xiǎn)的用途的報(bào)道。提出的機(jī)制與通過(guò)結(jié)合 于黃曲霉毒素(af Iotoxin)阻斷致癌物質(zhì)黃曲霉毒素Bl的腸吸收，并由此減少生物有效劑 量的食物黃曲霉毒素暴露有關(guān)(El-Nezami，H.S.，等人，益生菌補(bǔ)充減少在中國(guó)南方的年 青人中增加的肝癌風(fēng)險(xiǎn)的生物標(biāo)記(Probiotic supplementation reduces a biomarker for increased risk of liver cancer in young men from Southern China). American journal of clinical nutrition， 2006. 83(5):第1199-1203頁(yè)）〇
[0006] 有大量的證據(jù)表明，一些益生菌可通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能(包括調(diào)節(jié)T輔助細(xì)胞應(yīng)答） 提供益處。取決于疾病模型，這些益生菌可誘導(dǎo)T-細(xì)胞低反應(yīng)性(Braat，H.，等人，鼠李糖 乳桿菌在刺激的CD4+ T細(xì)胞中通過(guò)調(diào)節(jié)樹(shù)突狀細(xì)胞功能誘導(dǎo)外周免疫低反應(yīng)性 (Lactobacillus rhamnosus induces peripheral hyporesponsiveness in stimulated CD4+ T cells via modulation of dendritic cell function). American journal of clinical nutrition，2004. 80(6):第 1618-1625頁(yè)），上調(diào)或下調(diào)與Thl/Th2應(yīng)答有關(guān)的 細(xì)胞因子的產(chǎn)生（Valio Ltd，R.D.a. S.，LGG ? Summatim，載于Health effects of LGG2009;Mutaflor.最近的Mutaflor證據(jù)和臨床研究（Most Recent Mutaflor Evidence and Clinical Studies) (2006-2010). 2010;可在網(wǎng)頁(yè)mutaflor.ca/health-care-professionals/mutaf lor-clinical-studies/獲得；Sigma-Tau Pharmaceuticals，I. VSL#3 ? references · 2012;可從網(wǎng)頁(yè)vs 13. com/hcp/references .asp獲得）。大腸桿菌 (Escherichia coli)Nissle 1917 (EcN)已經(jīng)臨床研究用于潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、慢 性便秘、長(zhǎng)期腹瀉、腸易激綜合征和結(jié)腸袋炎(Mutaflor.最近的MutafIor證據(jù)和臨床研究 (Most Recent Mutaflor Evidence and Clinical Studies) (2006-2010). 2010;可在網(wǎng) 頁(yè) mutaf lor · ca/health-care-professionals/mutaf lor-clinical- studies/獲得）。嗜酉愛(ài) 乳桿菌（Lactobacillus acidophilus)(Moro) Hansen和Mocquot GG菌株（ATCC 53103) (LGG)已顯示除了治療上述胃腸道紊亂外，還增強(qiáng)在病毒感染和呼吸道感染期間的抗體形 成（Valio Ltd，R.D.a.S·，LGG ? Summatim，載于Health effects of LGG2009)dVSL#3 ? (Sigma-Tau)也廣泛用于潰瘍性結(jié)腸炎、腸易激綜合征和回腸袋的臨床管理(Sigma-Tau Pharmaceuticals，I. VSL#3? references. 2012;可在網(wǎng)頁(yè) vsl3.com/hcp/ references .asp上獲得）。在動(dòng)物模型中，VSL#3?已顯示在結(jié)腸炎相關(guān)的結(jié)腸直腸中通過(guò) 減弱各種炎癥相關(guān)參數(shù)，在延緩向異型增生轉(zhuǎn)變中的保護(hù)作用(Appleyard，C.B.，等人用 益生菌VSL# 3預(yù)處理在結(jié)腸炎相關(guān)癌癥的大鼠模型中延緩從炎癥向異型增生的轉(zhuǎn)變 (Pretreatment with the probiotic VSL# 3 delays transition from inflammation to dysplasia in a rat model of colitis-associated cancer). American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology， 2011. 301(6):第G1004-G1013頁(yè)）。
[0007] 除了活的益生菌之外，熱滅活的益生菌補(bǔ)充的健康益處也已被研究，雖然疾病模 型不是癌癥D益生菌菌株如嗜酸乳桿菌(L. acidophilus) L-92、短乳桿菌(L. brevis) SBC8803、干酷乳桿菌(L. casei) Shirota、格氏乳桿菌(L. gasseri) 0LL2809、類(lèi)干酷乳 桿菌(L. paracasei) KW3110、戊糖乳桿菌(L. pentosus) S-PT84仍然在敏化和過(guò)敏表現(xiàn) 的動(dòng)物模型中顯示免疫調(diào)節(jié)功能，包括影響IgE產(chǎn)生和影響Thl/Th2細(xì)胞因子產(chǎn)生，甚至在 熱處理之后(Sashihara，T.，N. Sueki，和S. Ikegami，熱殺滅乳酸細(xì)菌在減輕過(guò)敏性疾 病中的效力的分析(An analyis of the effectiveness of heat-killed lactic acid bacteria in alleviating allergic diseases). Journal of dairy science, 2006. 89(8):第2846-2855頁(yè)）。同時(shí)，非益生菌細(xì)菌已經(jīng)熱減毒并用于癌癥疫苗形式的癌癥研 究。這樣的實(shí)例包含Coley氏毒素--一種熱滅活釀膿鏈球菌(S. pyogenes)和粘質(zhì)沙雷氏 菌(S. marcescens)的混合物，其中減毒的細(xì)菌已經(jīng)系統(tǒng)給予以由細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)針對(duì)腫 瘤的嚴(yán)重炎性反應(yīng)和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。雖然它主要用于治療肉瘤、淋巴瘤和黑素瘤（Cann， S.H·，J. Van Netten，和C. Van Netten, Dr William Coley和腫瘤消退：歷史上或?qū)?lái) 的一個(gè)地方（Dr William Coley and tumour regression: a place in history or in the future) · Postgraduate medical journal, 2003. 79(938):第672-680頁(yè)），它在 HCC患者中的用途在一個(gè)作為輔助治療的研究中已有報(bào)道。然而，這種治療可在伴有嚴(yán)重發(fā) 熱和患者死亡的高風(fēng)險(xiǎn)(Richardson，M.A.，等人，Coley毒素免疫療法:一種回顧性評(píng)述 (Coley toxins immunotherapy:a retrospective review). Alternative therapies in health and medicine, 1999. 5(3):第42頁(yè)）。
[0008] 發(fā)明簡(jiǎn)述 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供可通過(guò)例如抑制癌癥生長(zhǎng)來(lái)治療癌癥的益生菌組合物。本發(fā) 明的另一個(gè)目的是提供用益生菌組合物治療癌