，氯化鈣0.5 g/ U 碳酸鈣 5g/L，pH7.2; 各培養(yǎng)基滅菌的條件為:. 10-0.15MPa，121°C滅菌30分鐘； 二、 將萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液60份;填料:高嶺土 28份;紫外保護(hù)劑:海藻糖1.8份，羧甲基 纖維素0.8份;干燥保護(hù)劑:蔗糖4份，谷氨酸鈉0.8份;混勻后噴霧干燥，得到萎縮芽孢桿菌 粉劑； 三、 將潤(rùn)濕劑:十二烷基苯磺酸鈉3份;分散劑:Morwet D-425 1份;芽孢萌發(fā)劑:果糖 〇. 8份，蘇氨酸0.4份，2，6-吡啶二羧酸鈣0.5份;混勻得到萎縮芽孢桿菌的助劑； 四、 將步驟二與步驟三所得到的萎縮芽孢桿菌粉劑與助劑混勻并過(guò)通過(guò)氣流粉碎機(jī)粉 碎過(guò)400目篩，檢測(cè)其芽孢含量為124億cfu/g，懸浮率為91%，潤(rùn)濕時(shí)間為62s，水分含量為 3.55%，真空包裝，即為萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑。
[0025] 實(shí)施例2 含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑在黃瓜上的應(yīng)用效果。
[0026] 1.試驗(yàn)地點(diǎn):湖南省隆回縣桃洪鎮(zhèn)某農(nóng)戶(hù)蔬菜大田。
[0027] 2.試驗(yàn)方法:分9區(qū)，每區(qū)67平米，做三個(gè)重復(fù) 試驗(yàn)組:移植時(shí)將幼苗用200倍實(shí)施例1制備的含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉 劑稀釋液沾根20分種，在定植后10天后，用含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑1000 倍稀釋液灌根1次，在黃瓜生長(zhǎng)期間，葉面噴施1:500倍可濕性粉劑，20天1次，連噴3次； 對(duì)照組一:移植時(shí)將幼苗用200倍未含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑稀釋液 沾根20分種，在定植后10天后，用未含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑1000倍稀釋 液灌根1次，在黃瓜生長(zhǎng)期間，葉面噴施1:500倍未含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉 劑，20天1次，連噴3次； 對(duì)照組二:用清水噴施與沾根。
[0028] 3 .試驗(yàn)結(jié)果:移植后，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組與對(duì)照組一沾根了萎縮芽孢桿菌的植株葉片比 較新鮮，而且生長(zhǎng)勢(shì)好，沒(méi)有打蔫的了，噴過(guò)含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑的植 株(試驗(yàn)組）比清水組(對(duì)照組二)提前6天現(xiàn)花;噴過(guò)未含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕 性粉劑的植株(對(duì)照組一）比清水組(對(duì)照組二)提前3天現(xiàn)花;在大部分的都開(kāi)過(guò)花后觀(guān)察 發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑的花開(kāi)的比噴清水的鮮艷的多，而且花的質(zhì)量很好，色 艷，花大，花看上去就比較"壯"，而且從整個(gè)植株的生長(zhǎng)來(lái)看，生長(zhǎng)勢(shì)明顯好于沒(méi)噴過(guò)芽孢 桿菌的，期間用過(guò)的黃瓜表現(xiàn)為葉色翠綠、植株整齊且土壤表現(xiàn)為疏松，從口感上黃瓜要清 脆、香甜。而對(duì)照組二(清水組)則葉色黃綠、植株參差不齊。實(shí)際測(cè)產(chǎn)時(shí)，從表1可看出加芽 孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑(試驗(yàn)組）比清水(對(duì)照組二）的增產(chǎn)35.8%，未加芽孢 萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑(對(duì)照組一）比清水(對(duì)照組二）的增產(chǎn)約14.6%，從枯萎 病的防治情況看，加芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑（試驗(yàn)組）的防治效果達(dá)到 86.01%，未加芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑(對(duì)照組一)的防治效果也達(dá)到了 60%， 但較加了芽孢萌發(fā)劑的防治效果還是差了 26%左右。
[0029]表1含芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑在黃瓜上的應(yīng)用效果
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑，其特征在于，所述萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑由下列 重量份組成:萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液40-70份;填料:高嶺土20-30份;潤(rùn)濕劑:十二烷基苯磺酸 鈉1-4份;分散劑 :MorWet D-425 0.2-1份;芽孢萌發(fā)劑:果糖0.1-1份，蘇氨酸0.1-1份，2， 6_吡啶二羧酸鈣0.1-0.5份;紫外保護(hù)劑:海藻糖1-2份，羧甲基纖維素0.2-1份;干燥保護(hù) 劑:鹿糖1-5份，谷氨酸鈉0.2-1份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑的制備方法，其特征在于，由以 下幾步驟組成： 一、 萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液的制備 取出菌種保藏管，用營(yíng)養(yǎng)肉湯固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30°C培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下 挑取單個(gè)菌落接種至50毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30°C震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，種子采 用5%的接種量，接種至5L大三角瓶中的萎縮芽孢桿菌液體培養(yǎng)基，裝液量為2L，30°C震蕩培 養(yǎng)16-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌液含量超過(guò)30億/毫升，即可作為萎縮芽孢桿菌種子液； 將萎縮芽孢桿菌種子液接種至1000L的發(fā)酵罐中，裝液量為600L的發(fā)酵培養(yǎng)基，通氣量為前 16小時(shí)為每分鐘液氣比為1:0.8，其后通氣量為1:1;培養(yǎng)溫度前24小時(shí)為30°C，開(kāi)攪拌，轉(zhuǎn) 速為160r/min，其后，每2小時(shí)將溫度提高1°C，培養(yǎng)26-32小時(shí)，檢測(cè)其芽孢含量超過(guò)100億 CFU/ml，即可結(jié)束發(fā)酵，作為萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液； 其中，所述營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基:蛋白胨l〇g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，水1000mL，pH7.2，固體培 養(yǎng)基中加入瓊脂2%;其中，所述萎縮芽孢桿菌液體培養(yǎng)基:葡萄糖15g/L，牛肉膏10 g/L，蛋 白胨5 g/L，魚(yú)粉5 g/L，硫酸鎂0.5 g/L，硫酸錳0.5 g/L，磷酸二氫鉀0.5 g/L，磷酸氫二鉀 0.5 g/L，氯化鈣0.5 g/L，pH7.2; 其中，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基:葡萄糖15g/L玉米粉10 g/L，玉米漿30 g/L，蛋白胨10 g/L， 硫酸鎂0.5 g/L，硫酸錳0.5 g/L，磷酸二氫鉀0.5 g/L，磷酸氫二鉀0.5 g/L，氯化鈣0.5 g/ L，碳酸鈣 5g/L，pH7.2; 各培養(yǎng)基滅菌的條件為:. 10-0.15MPa，121°C滅菌30分鐘； 二、 將萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液40-70份;填料:高嶺土20-30份;紫外保護(hù)劑:海藻糖1-2份， 羧甲基纖維素0.2-1份;干燥保護(hù)劑:鹿糖1-5份，谷氨酸鈉0.2-1份;混勻后噴霧干燥，得到 萎縮芽孢桿菌粉劑； 三、 將潤(rùn)濕劑：十二烷基苯磺酸鈉1-4份；分散劑:MorWet D-425 0.2-1份；芽孢萌發(fā) 劑:果糖〇. 1-1份，蘇氨酸〇. 1-1份，2，6-吡啶二羧酸鈣0.1-0.5份;混勻得到萎縮芽孢桿菌的 助劑； 四、 將步驟二與步驟三所得到的萎縮芽孢桿菌粉劑與助劑混勻并過(guò)通過(guò)氣流粉碎機(jī)粉 碎過(guò)400目篩，檢測(cè)其芽孢含量不低于100億cfu/g，懸浮率不低于82%，潤(rùn)濕時(shí)間不高于75s， 水分含量低于5%，真空包裝，即為萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑，其特征，在于所述萎縮芽孢桿 菌可濕性粉劑由下列重量份組成:萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液60份;填料:高嶺土 28份;潤(rùn)濕劑:十 二烷基苯磺酸鈉3份;分散劑:M〇rWet D-425 1份;芽孢萌發(fā)劑:果糖0.8份，蘇氨酸0.4份， 2,6_吡啶二羧酸鈣0.5份;紫外保護(hù)劑:海藻糖1.8份，羧甲基纖維素0.8份;干燥保護(hù)劑:蔗 糖4份，谷氨酸鈉0.8份。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及生物農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體公開(kāi)的是一種含有芽孢萌發(fā)劑的萎縮芽孢桿菌的可濕性粉劑及其制備方法，該可濕性粉劑的原料由下列重量組份組成：萎縮芽孢桿菌發(fā)酵液40-70份；填料：高嶺土20-30份；潤(rùn)濕劑：十二烷基苯磺酸鈉？1-4份；分散劑：Morwet？D-425？0.2-1份；芽孢萌發(fā)劑：果糖0.1-1份，蘇氨酸0.1-1份，2，6-吡啶二羧酸鈣0.1-0.5份；紫外保護(hù)劑：海藻糖1-2份，羧甲基纖維素0.2-1份；干燥保護(hù)劑：蔗糖1-5份，谷氨酸鈉0.2-1份。本發(fā)明制備的萎縮芽孢桿菌可濕性粉劑施入大田后芽孢萌發(fā)速度快，萌發(fā)率高，可明顯提高其防治效果，可減少芽孢用量，降低生產(chǎn)成本。
【IPC分類(lèi)】C05G3/00, A01P3/00, A01N63/02, A01N25/14
【公開(kāi)號(hào)】CN105638651
【申請(qǐng)?zhí)枴?br>【發(fā)明人】胡艷暉
【申請(qǐng)人】佛山市艷暉生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2016年6月8日
【申請(qǐng)日】2015年12月19日