3)，類圓形zeta電位為- 20.3mv。將其通過化學(xué)鍵合法載在人工晶狀體上。
[0067] 3金雀異黃素納米緩釋-人工晶體載藥系統(tǒng)(GEN-NLC-IOL)體外釋放的檢測鍵合法 和浸泡吸附法：
[0068] 對(duì)照組:浸泡吸附法載藥:將人工晶體去掉包裝后用ImL pH 7.4PBS清洗S次，然 后通風(fēng)干燥。將制備的陰離子金雀異黃素納米脂質(zhì)載體滴加到人工晶體兩側(cè)光學(xué)區(qū)表面， 室溫通風(fēng)干燥至干，待用。
[0069] 實(shí)驗(yàn)組:化學(xué)鍵合法載藥:將人工晶體去掉包裝后用ImL pH 7.4PBS清洗S次，然 后用0.1 moL/L的pH 5.0乙酸鋼緩沖液清洗3次。將適量邸C溶解于0.1iik)L/L的抑5.0乙酸鋼 緩沖液中，配置成終濃度為2mg/血的溶液。然后將人工晶體在該邸C溶液中浸泡15min，隨即 拿出。將人工晶體浸泡在制備的陰離子金雀異黃素納米脂質(zhì)載體中，37°C溫度下解育化。然 后取出人工晶體，并用抑7.4PBS清洗S遍，室溫通風(fēng)干燥至干，待用。
[0070] 注:對(duì)照組為相同方法制備陰離子金雀異黃素納米脂質(zhì)載體，將相同品牌的人工 晶狀體直接浸泡到其中，相同溫度時(shí)間解育。
[0071 ]表1浸泡吸附法和化學(xué)鍵合法載藥量的比較
[0073] 浸泡吸附法通過靜電力吸附將藥物與人工晶體結(jié)合，浸泡法載藥量的多少取決于 I化材質(zhì)、分子間相互吸引力及靜電吸引力，其載藥量?。绘I合法載藥的原理是通過使Gen-化C帶負(fù)電荷，加入的脫氧膽酸鋼的親水端提供的簇基利用邸C醋化反應(yīng)與親水性丙締酸醋 I化表面的徑基鍵合，所W鍵合法載藥量大，藥物有效濃度高。
[0074] 4金雀異黃素納米緩釋-人工晶體載藥系統(tǒng)(GEN-NLC-IOL)體內(nèi)房水中藥物濃度的 比較
[0075] 新西蘭白兔一只眼實(shí)施白內(nèi)障超聲乳化手術(shù)，并將載藥人工晶狀體系統(tǒng)植入兔眼 中，術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)分別取不同組的前房水，高效液相色譜法檢測房水中藥物釋放情況。分 兩組觀察對(duì)比：
[0076] 前房注藥組:手術(shù)中植入普通人工晶狀體，并且在前房注射相同濃度的藥物Gen-化C-IOL組:植入載藥人工晶狀體系統(tǒng)
[0077] 表2,不同組隨時(shí)間改變前房水藥物濃度的變化(mg/L)
[0079]兩組的藥物濃度均在手術(shù)后6小時(shí)內(nèi)達(dá)到峰值，隨時(shí)間延長濃度逐漸下降；Gen-化C-IOL的藥物濃度在任何時(shí)間點(diǎn)均顯著高于前房注藥組，兩組數(shù)據(jù)在化、1化、24h、4化和 7化時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。
[0080] 5金雀異黃素納米緩釋-人工晶體載藥系統(tǒng)(GEN-NLC-IOL)有效性的評(píng)價(jià)
[0081 ]術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)Gen-NLC-WL對(duì)后囊膜混濁的影響
[0082] 術(shù)后連續(xù)觀察12周，并比較3組不同時(shí)間點(diǎn)后囊膜混濁的程度。術(shù)后1周內(nèi)眼內(nèi)前 房炎癥反應(yīng)比較明顯，2周后開始明顯好轉(zhuǎn)，所W記錄后囊膜的變化從術(shù)后2周開始。結(jié)果提 示術(shù)后2周時(shí)，對(duì)照組可見后囊膜周邊區(qū)輕度混濁，而前房注藥組和實(shí)驗(yàn)組后囊膜均保持透 明；在術(shù)后4周時(shí)，對(duì)照組后囊膜混濁加重，可見上皮細(xì)胞增殖、移行，皮質(zhì)增生，前房注藥組 可見后囊膜輕度混濁，囊膜皺縮，而實(shí)驗(yàn)組后囊膜保持透明；在12周時(shí)，對(duì)照組后囊膜周邊 區(qū)和中央?yún)^(qū)全部混濁，前房注藥組可見周邊囊膜片狀致密纖維化混濁，并累及后囊膜中央 區(qū)，而實(shí)驗(yàn)組可見周邊后囊膜輕度混濁，中央?yún)^(qū)透明。
[0083] 6金雀異黃素納米緩釋-人工晶體載藥系統(tǒng)(GEN-NLC-IOL)安全性的評(píng)價(jià)
[0084] 光鏡下可見各組角膜內(nèi)皮細(xì)胞連續(xù)平順，未見明顯缺失;視網(wǎng)膜10層結(jié)構(gòu)完整，光 感受器組成的外核層、雙極細(xì)胞、水平細(xì)胞組成的內(nèi)核層W及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層均未見細(xì)胞數(shù) 量減少，睫狀突上皮細(xì)胞連續(xù)，虹膜基質(zhì)層未見變薄，未見明顯的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在于，通過化學(xué)鍵法將藥物納米脂 質(zhì)載體加載到人工晶狀體上。2. 如權(quán)利要求所述的一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在于，所述的藥 物納米脂質(zhì)載體為陰離子納米脂質(zhì)載體，包含藥物、固態(tài)脂質(zhì)材料、液體脂質(zhì)材料、乳化劑， 水；且每10毫升水中，含有藥物：lmg-20mg，固態(tài)脂質(zhì)材料80-150mg，液態(tài)脂質(zhì)材料50-l〇〇mg，乳化劑 200-400mg。3. 如權(quán)利要求1或2所述的一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在于，所述 的人工晶狀體為親水性丙烯酸酯人工晶狀體。4. 如權(quán)利要求2或3所述的一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在于，所述 的固態(tài)脂質(zhì)材料為:單硬酯酸甘油酯，山崳酸甘油酯，三山崳酸甘油酯，三硬脂酸甘油酯，甘 油棕櫚酸硬脂酸酯，三月桂酸甘油酯中的任意一種或者兩種的混合物;所述液態(tài)脂質(zhì)材料 為:橄欖油，花生油，大豆油，鏈長在C8-C18之間的中等鏈長脂肪酸甘油酯，辛酸/癸酸三甘 酯中的任意一種或者兩種的混合物;所述的乳化劑為大豆卵磷脂，蛋黃卵磷脂，聚氧乙烯蓖 麻油，聚乙二醇十二羥基硬脂酸酯，十二烷基硫酸鈉中的一種或幾種與脫氧膽酸鈉的混合。5. 如權(quán)利要求2-4任何一項(xiàng)所述的一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在 于，所述的固態(tài)脂質(zhì)材料山崳酸甘油酯;所述液態(tài)脂質(zhì)材料為:辛酸/癸酸三甘酯;所述乳化 劑為:磷脂、CremophorEL與脫氧膽酸鈉的混合。6. 如權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在 于，所述的藥物為抗炎藥，優(yōu)選金雀異黃素，普拉洛芬，地塞米松，醋酸潑尼松龍，妥布霉素， 氧氟沙星。7. 如權(quán)利要求1所述的藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)，其特征在于，所述的化學(xué) 鍵法為:將陰離子納米脂質(zhì)載體與親水性丙烯酸酯人工晶狀體在酸性緩沖液和1-乙基-碳 二亞胺鹽酸鹽的混合溶液中酯化。8. 如權(quán)利要求2所述的一種藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)的制備方法，其特征在 于，包括如下步驟： 步驟一:將處方量的藥物、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)材料混合，加熱到60-90°C熔融，形 成油相備用； 步驟二:將處方量乳化劑溶于水中，形成濃度為0.5-1%的溶液為水相，備用； 步驟三:將水相加熱至油相相同溫度，在400-600r/min的攪拌速度下，把油相緩慢滴加 至水相中，滴加完畢后，乳化8-12min，得初乳： 步驟四：在保持初乳體系溫度下以200-600W功率使用超聲破碎儀進(jìn)行超聲破碎5-lOmin； 步驟五:將超聲后的初乳轉(zhuǎn)移至冰浴條件下低溫固化，得到粒徑為100-400nm的陰離子 納米脂質(zhì)載體； 步驟六:全新親水性丙烯酸酯人工晶狀體取出后用PBS清洗后干燥，放置預(yù)先配置的酸 性(PH=4.0-6.0)緩沖液和1-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽的混合溶液中（lmg/ml-5mg/ml) 10-15 分鐘； 步驟七:人工晶狀體浸沒于藥物的陰離子納米脂質(zhì)載體溶液中37°放置12-24小時(shí)。9. 如權(quán)利要求7或8所述的制備方法，其特征在于，所述的酸性緩沖液為:KH2P〇4-K2HP〇4 緩沖液。10.權(quán)利要求1-7任何一項(xiàng)所述的藥物納米脂質(zhì)載體-人工晶狀體系統(tǒng)在制備預(yù)防或治 療白內(nèi)障術(shù)后并發(fā)癥的載體中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種新的人工晶狀體載藥系統(tǒng)的構(gòu)建方法：即通過化學(xué)鍵合法將具有緩釋效果的透明的納米脂質(zhì)載藥系統(tǒng)均勻加載到人工晶體光學(xué)區(qū)和襻上，進(jìn)而在白內(nèi)障手術(shù)過程中植入，達(dá)到治療預(yù)防術(shù)后并發(fā)癥的效果。本發(fā)明將藥物制備成帶陰離子納米脂質(zhì)載體，以親水性丙烯酸酯人工晶體為載體，通過化學(xué)鍵結(jié)合，固定于晶狀體囊袋中，無需術(shù)后額外操作給藥；藥物在晶狀體囊袋內(nèi)釋放具有更強(qiáng)的靶向性，優(yōu)于術(shù)后眼藥水制劑-藥物需穿透角膜并彌散于前房；并且納米脂質(zhì)載體可以緩慢可控性釋放，從而長期發(fā)揮藥效，最終達(dá)到預(yù)防治療后發(fā)性白內(nèi)障，術(shù)后眼內(nèi)炎，炎癥反應(yīng)等白內(nèi)障術(shù)后并發(fā)癥的效果。本方法可明顯提高載藥量，操作簡單，經(jīng)濟(jì)，可大量復(fù)制生產(chǎn)。
【IPC分類】A61K31/5383, A61K31/352, A61K31/573, A61K45/06, A61F2/16, A61K9/127, A61K31/702, A61M31/00, A61K47/28, A61P27/12
【公開號(hào)】CN105476730
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610005904
【發(fā)明人】孔珺, 潘衛(wèi)三, 劉金璐, 張文驥, 李雪冬, 楊娜, 于世慧, 陳建亭
【申請(qǐng)人】中國醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院
【公開日】2016年4月13日
【申請(qǐng)日】2016年1月6日