一種新的三萜化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從野馬追的干燥地上部分中分離得到的一種 三萜化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 野馬追是菊科植物輪葉澤蘭EupatoriumlindleyanumDC.的干燥地上部分，又名 白鼓釘（《江蘇南部種子植物手冊》）、化食草（《杭州藥用植物志》）、毛澤蘭（《內(nèi)蒙古植物 志》），產(chǎn)于江蘇、甘肅、山東、湖南等地。其味苦，性平，歸肝、脾經(jīng)，具有化痰止咳、清熱解毒、 利尿消腫、降壓的功能，用于治療感冒、咳嗽多痰、頭疼、扁桃體炎、細(xì)菌性痢疾、高血壓、慢 性氣管炎、支氣管炎等。其枝葉入藥有解表祛濕、和中化濕之效，用于勞傷咳嗽、吐血咳血以 及淋濁白帶、無名腫痛等證的治療。
[0003] 迄今為止，從野馬追植物中發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分類型主要包括倍半萜類、黃酮類、三萜 類、揮發(fā)油類、有機(jī)酸類及其他類成分，其中以倍半萜類化合物的研究最多。迄今為止，已得 到的倍半萜類化合物主要為愈創(chuàng)木烷型和吉馬烷型，此外還有少量的杜松烷型和桉烷型倍 半砲類。
[0004] 藥理作用研究表明，野馬追提取物具有抗炎、抗菌、降血脂以及保護(hù)急性肺損傷、 止咳、平喘等作用。野馬追廣泛應(yīng)用于臨床，主要包括片劑、顆粒劑、糖漿劑等制劑品種，還 有以野馬追為君藥的復(fù)方野馬追顆粒、膠囊等產(chǎn)品，主要用于治療慢性氣管炎、支氣管炎、 高血壓等癥。通過對(duì)臨床應(yīng)用的觀察發(fā)現(xiàn)，野馬追注射液治療鉤端螺旋體病具有退熱顯著、 緩解癥狀快、治愈時(shí)間短的特點(diǎn)。同時(shí)，野馬追糖漿用于治療小兒咳喘性疾病也安全、有效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從野馬追的干燥地上部分中分離得到的一種三萜化合 物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I):
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將野馬追的干燥地上部分 粉碎，用70~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫8 個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫 濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為50:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫 得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1、5:1和2:1 的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相 硅膠分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個(gè)柱體積洗脫液，洗 脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟(a)中，用75 %乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載 體。
[0013]所述的化合物(I)在制備神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0014]所述的藥物組合物在制備神經(jīng)保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0015]本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對(duì) 人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物⑴計(jì)算ECD和實(shí)驗(yàn)ECD圖；
[0020] 圖3為化合物(I)對(duì)培養(yǎng)不同時(shí)間海馬神經(jīng)元細(xì)胞活力的影響；
[0021 ]圖4為化合物(I)對(duì)Αβ25_35誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元細(xì)胞活力的影響；
[0022] 圖5為化合物（I)對(duì)Αβ25_35誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0024] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0025]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0026]實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0027] (a)將野馬追的干燥地上部分(8kg)粉碎，用75%乙醇熱回流提取(30LX3次），合 并提取液，濃縮至無醇味(6L)，依次用石油醚(6LX3次）、乙酸乙酯(6LX3次)和水飽和的正 丁醇(6LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(375g)和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，再用70%乙 醇洗脫8個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物（129g);(c)步驟(b) 中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為50:1 (8個(gè)柱體積）、30:1 (8個(gè)柱體 積）、15:1(8個(gè)柱體積)和5:1(10個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步 驟(c)中組分4(27g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1(8個(gè)柱體積）、5:1(10個(gè)柱 體積）和2:1(8個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分2 (15g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗 脫，收集8~12個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)(138mg)。
[0028]結(jié)構(gòu)確證：白色無定形粉末，冊43頂3顯示[1+似]+為111/2 625.3424，結(jié)合核磁特 征可得分子式為C34H5QO9，不飽和度為10。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρηι，DMS0_d6，500MHz):H-1 (4.74，d，J = 7.5)，H-2(2.92，dd，J=15.5,7.5)，H-2(3.34，d，J=15.5)，H-5(2.38，dd，J = 12.5，1.5)，H-6(1.99，m)，H-6(1.86，m)，H-7(5.04，br，s)，H-9(2.49，dd，J=11.5，1.5)，H-ll(1.37，m)，H-ll(1.49，m)，H-12(1.65，m)，H-12(1.36，m)，H-15(5.18，d，J=2.5)，H-16 (1.89，m)，H-16(2.09，m)，H-17(1.28，m)，H-18(1.01，s)，H-19(1.17，s)，H-20(2.14，m)，H-21(3.71，dd，J=11.0,5.0)，H-21(3.47，t，J=11.0)，H-22(1.58,2H，m)，H-23(3.79，t，J = 3.0)，H-26(1.23，s)，H-27(1.13，s)，H-28(1.18，s)，H-29(1.46，s)，H-30(1.12，s)，l-0Ac (1.99, s)，7-0Ac(l. 92, s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)&(ppm，DMS〇-d6,125MHz ):72.3(CH，1-C)， 35.6(CH2,2-C)，173.1(C，3-C)，87.4(C，4-C)，45.2(CH，5-C)，27.0(CH2,6-C)，75.9(CH，7-C)，42.7(C，8-C)，36.8(CH，9-C)，45.1(C，10-C)，17.5(CH2，n-C)，35.2(CH2，12-C)，47.4(C， 13-C)，160.3(C，14-C)，119.7(CH，15-C)，34