治療涎腺腺樣囊性癌的三萜化合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從燈臺(tái)樹的干燥葉中分離得到的一種具有治 療涎腺腺樣囊性癌作用的三萜類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 燈臺(tái)樹Alstonia scholaris(L. )R.Br.為夾竹桃科雞骨常山屬喬木。其性味甘、 淡、平，具有清熱解毒、消腫止痛、平喘止咳、截瘧、發(fā)汗、健胃等作用。燈臺(tái)樹根、莖、皮、葉均 可入藥，以皮和葉為主。該植物主要分布在我國(guó)的廣西南部、西部和云南南部，在尼泊爾、印 度、斯里蘭卡、緬甸、泰國(guó)、越南、柬埔寨、馬來西亞、印度尼西亞、菲律賓和澳大利亞熱帶地 區(qū)也有分布。燈臺(tái)樹具有悠久的民間用藥歷史，我國(guó)民間用燈臺(tái)樹皮治療頭痛、傷風(fēng)、痧氣、 肺炎、百日咳、慢性支氣管炎，外用可治外傷止血、接骨、消腫、瘡癤及配制殺蟲劑等。
[0003] 國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)燈臺(tái)樹的化學(xué)成分進(jìn)行了一系列研究，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分主要包 括生物堿類、黃酮類和三萜類，其次還有揮發(fā)油、留體類、維生素等成分。目前，燈臺(tái)樹的生 物堿、黃酮和三萜類成分研究較為深入，其中以燈臺(tái)樹葉的研究較多，已經(jīng)從中分離得到了 50多個(gè)生物堿成分，主要為單萜吲哚生物堿。
[0004] 近年來，隨著對(duì)其化學(xué)成分和藥理活性等方面研究的逐步展開，發(fā)現(xiàn)其活性成分 豐富，在抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗糖尿病和調(diào)血脂等方面顯示出潛在的藥用價(jià)值。研究表明， 燈臺(tái)樹中含有的三萜類成分羽扇豆醇對(duì)不同組織來源的細(xì)胞均具有增殖抑制活性，如黑色 素瘤451LU細(xì)胞、WM35細(xì)胞和B162F2細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞株AsPC-I，人表皮癌A431細(xì)胞，肝癌 3麗07721細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞^^ &?、011?221?丫1和?(：-3。羽扇豆醇可選擇性地抑制無胸腺裸 鼠451LU和CWR22R γ 1細(xì)胞的增殖，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖標(biāo)記物、細(xì)胞凋亡標(biāo)記物和細(xì)胞周期 調(diào)控分子在腫瘤異種移植中的表達(dá)而發(fā)揮作用。燈臺(tái)樹除了具有以上藥理作用外，還具有 退熱、縮宮、降壓、抗瘧疾等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從燈臺(tái)樹的干燥葉中分離得到的一種具有治療涎腺腺 樣囊性癌作用的三萜類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將燈臺(tái)樹的干燥葉粉碎，用 75~85 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和 的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中乙 酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用75%乙醇洗脫10個(gè)柱體 積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸 膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1、45 :1、20:1、12:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脫得到5個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、12:1和 5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反 相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~12個(gè)柱體積洗脫液， 洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。
[0010]進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0011] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為80%。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載 體。
[0013] 所述的化合物(I)在制備治療涎腺腺樣囊性癌的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療涎腺腺樣囊性癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對(duì) 人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018]圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0019 ]圖2為化合物（I)理論ECD值與實(shí)驗(yàn)ECD值比較。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021 ]實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購(gòu)自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購(gòu)自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023]制備方法：（a)將燈臺(tái)樹的干燥葉（IOkg)粉碎，用80 %乙醇熱回流提?。?5L X 3 次），合并提取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水飽 和的正丁醇(3LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(431g)和正丁醇萃取 物；（b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積， 再用75%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏 (157g); (c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1(8個(gè)柱體 積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、20:1 (8個(gè)柱體積）、12 :1 (8個(gè)柱體積）和1:1 (5個(gè)柱體積）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4(49g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用 體積比為20:1(8個(gè)柱體積）、12:1(10個(gè)柱體積)和5:1(8個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2(25g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百 分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純 的化合物（I)(35mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：白色無定形粉末，HR-ESMS顯示[M+Na]+為m/z 623 · 3226，結(jié)合核磁特 征可得分子式為C34H48O9，不飽和度為11。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)3h(ppm，DMS0_d6，500MHz): H-I (4.74，d，J = 7.5)，H-2(2.92，dd，J=15.5,7.5)，H-2(3.34，d，J=15.5)，H-5(2.38，dd，J = 12.5，1.5)，H-6(1.99，m)，H-6(1.86，m)，H-7(5.04，br，s)，H-9(2.49，dd，J=11.5，1.5)，H-ll(1.37，m)，H-ll(1.49，m)，H-12(1.65，m)，H-12(1.36，m)，H-15(5.18，d，J=2.5)，H-16 (1.89，m)，H-16(2.09，m)，H-17(1.28，m)，H-18(1.01，s)，H-19(1.17，s)，H-20(2.14，m)，H-21(3.71，dd，J=11.0,5.0)，H-21(3.47，t，J=11.0)，H-22(2.58，m)，H-22(2.26，m)，H-26 (1.23，s)，H-27(1.13，s)，H-28(1.18，s)，H-29(1.46，s)，H-30(1.12，s)3-0Ac(1.99，s)，7-OAc (I · 92，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)δ。(ppm，DMSO-Cl6，125MHz): 72 · 3 (CH，I-C)，35 · 6 (CH2，2-C)， 173.1(C，3-C)，87.4(C，4-C)，45.2(CH，5-C)，27.0(CH2,6-C)，75.9(CH，7-C)，42.7(C，8-C)， 36.8(CH，9-C)，45.1(C，10-C)，17.5(CH2，11-C)，35.2(CH2，12-C)，47.4(C，13-C)，160.3(C， 14-C)，119.7(CH，15-C)，34.6(CH2，16-C)，58.1(CH，17-C)，19.5(CH 3，18-C)，15.3(CH3，19-C)，30.8(CH，20-C)，66.0(CH2,21-C)，35.9(CH 2,22-C)，201.1(C，23-C)，120.7(C，24-C)， 56·7(C，25-C)