一種2-氨基丁醇手性純度的hplc分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種2-氨基丁醇手性純度的HPLC分析方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] (R)-2-氨基丁醇是合成右蘭索拉唑的重要中間體。美國FDA于2009年1月30日批準(zhǔn) 日本武田制藥公司研發(fā)的食管炎治療新藥右蘭索拉唑（通用名為Dexlansoprazole)上市。 該藥是質(zhì)子栗抑制劑蘭索拉唑的對(duì)映體，又被稱為右旋蘭索拉唑，用于治療與非糜爛性胃 食管反流病相關(guān)的胃灼熱及不同程度的糜爛性食道炎，臨床表明該藥物毒副作用較低且患 者耐受性好。
[0003] 右蘭索拉唑有一個(gè)手性中心，該手性中心是由（R)-2_氨基丁醇引入的，如果(R)-2_氨基丁醇的光學(xué)純度較低，則會(huì)存在另一個(gè)異構(gòu)體，這樣就會(huì)降低右蘭索拉唑的手性純 度，所以(R)-2_氨基丁醇的光學(xué)純度直接影響著右蘭索拉唑的光學(xué)純度也就影響著右蘭索 拉唑治療食道炎的療效。盡管這種新藥上市時(shí)間不是很長(zhǎng)，但由于其高效的治療食管炎作 用以及低毒性引發(fā)了對(duì)這種新藥的大量需求，從而導(dǎo)致對(duì)右蘭索拉唑手性源(R)-2_氨基丁 醇的大量需求。因此制備高標(biāo)準(zhǔn)、高光學(xué)純度的(R)-2_氨基丁醇，對(duì)于合成新藥右蘭索拉唑 具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
[0004] 馮桂春等(CN101024617 A)，葉菲等(CN101863779 A)，臧力等(廣州化工)通過測(cè) 定比旋光度值進(jìn)行手性純度的分析。通過比旋光度值來測(cè)定手性純度，對(duì)于高純度(R)-2-氨基丁醇的測(cè)定誤差較大。與帶紫外吸收的手性試劑進(jìn)行快速雙衍生化，可以得到既有紫 外吸收又形成三個(gè)手性基團(tuán)的衍生物，既能在紫外檢測(cè)器下檢測(cè)，又能直接通過反相高效 液相進(jìn)行異構(gòu)體的分離檢測(cè)。
[0005] 2-氨基丁醇分子結(jié)構(gòu)中含一個(gè)伯胺和一個(gè)羥基，沒有紫外吸收的官能團(tuán)，導(dǎo)致建 立方便、快捷、可靠的光學(xué)純度分析方法難度非常的大。HPLC檢測(cè)法具有分離效率高，選擇 性好，檢測(cè)靈敏度高，操作自動(dòng)化，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，是目前分析化學(xué)中常用的分析方法。 但由于2-氨基丁醇及其手性異構(gòu)體幾乎沒有紫外吸收，使用常規(guī)的紫外檢測(cè)存在末端吸收 干擾等問題，所以通常采用衍生化方法使之紫外吸收增強(qiáng)從而提高檢測(cè)靈敏度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種2-氨基丁醇手性純度的HPLC分 析方法，可以快捷準(zhǔn)確的實(shí)現(xiàn)定性、定量和對(duì)映體過量率分析。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下： 一種2-氨基丁醇手性純度的HPLC分析方法，具體包含如下步驟： 步驟一、衍生化 將2-氨基丁醇溶于有機(jī)溶劑中，在一定的溫度條件下，以（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯為 衍生化試劑，控制2-氨基丁醇和（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯的摩爾比，進(jìn)行衍生化反應(yīng)，得到 衍生化化后的2-氨基丁醇，反應(yīng)式見式I; 式I
步驟二、分離檢測(cè) 采用反相高效液相色譜-紫外檢測(cè)器對(duì)衍生化后的2-氨基丁醇進(jìn)行定性、定量和對(duì)映 體過量率測(cè)定。
[0008] 所述的有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、1，2_二氯乙烷、甲苯、二甲苯、石油醚、四氫呋喃、 氯仿和四氯化碳中的一種或兩種以上的組合。
[0009] 所述的有機(jī)溶劑與2-氨基丁醇的體積比為0.5~300:1，優(yōu)選的為2~20:1。
[0010] 所述的一定溫度是指從0°C到回流溫度，優(yōu)選為20~35°C。
[0011] 本發(fā)明的回流溫度具體數(shù)值與有機(jī)溶劑的選擇有關(guān)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)溶 劑的選擇清楚的確定回流溫度的范圍。
[0012] 所述的2-氨基丁醇和(R)-a-甲基-2-萘乙酰氯的摩爾比為1:4~20。
[0013] 所述的紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)為200~300 nm，優(yōu)選230~260nm。
[0014] 所述的反相高效液相色譜使用的色譜柱是普通反相柱。優(yōu)選的，色譜柱為反相C18 柱，最優(yōu)選的為迪馬反相C18柱(250X4.6mm，5ym，pH范圍2.0~8.0)。
[0015] 所述的反相高效液相色譜的流動(dòng)相由酸的水溶液和有機(jī)溶劑組成，有機(jī)溶劑選自 甲醇、乙醇、異丙醇和乙腈中的一種或兩種；有機(jī)溶劑占流動(dòng)相的體積比例范圍為30%~ 90%，優(yōu)選范圍為60%~80%。
[0016] 所述的流動(dòng)相的酸可以為有機(jī)酸或無機(jī)酸，優(yōu)選為無機(jī)酸，如醋酸、硫酸、硝酸、鹽 酸，更優(yōu)選為鹽酸，最優(yōu)選為〇. 2~lmol/L的鹽酸溶液。
[0017] 所述的緩沖鹽水溶液的PH值為2.0~6.0，優(yōu)選pH值為3.0~5.0。
[0018] 所述的流動(dòng)相流速在0.1~3.0mL/min，最佳流速為1 .OmL/min。
[0019] 本發(fā)明中，反相高效液相色譜分析條件優(yōu)選為：迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為80%甲 醇-2 0 %鹽酸溶液，所述鹽酸溶液的摩爾濃度為0.2 m ο 1 / L，p Η值為4.5。紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為 254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30°C，進(jìn)樣體積20yL。
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所取得的有益效果如下： 本發(fā)明給出了2-氨基丁醇的衍生化方法，通過控制反應(yīng)條件，快速生成（1〇-<!-甲基-2-萘乙酰氯和2-氨基丁醇的衍生物，并建立了對(duì)（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯衍生化后的2-氨 基丁醇的定性、定量和對(duì)映異構(gòu)體測(cè)定的高效液相色譜分析方法。該方法操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性 好、靈敏度高、準(zhǔn)確性強(qiáng)，便于標(biāo)準(zhǔn)化操作。通過對(duì)（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯衍生化后的2-氨基丁醇進(jìn)行定性、定量和手性純度分析，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)2-氨基丁醇的定性、定量和手性純度 分析。
【附圖說明】
[0021] 圖1: (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生化后色譜圖； 在附圖中：1為（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(R)-2-氨基丁醇的衍生物;2為（（R)-a-甲 基-2-萘乙酰氯-和(S) -2-氨基丁醇的衍生物。
【具體實(shí)施方式】
[0022]以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)的敘述。
[0023]實(shí)施例1: (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇的衍生物的液相色譜分析 取(RS)-2-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于50mL二氯甲烷中，30°C下攪拌，緩慢加入 (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯19.67g (0.09111〇1)?？?：監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后蒸干得（R)-a-甲 基-2-萘乙酰氯與(RS )-2-氨基丁醇衍生物。
[0024] 將（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高效 液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為80%甲醇-20%鹽酸溶液， 所述鹽酸溶液的摩爾濃度為〇.2111〇1/1，？!1值為4.5。紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為25411111，流速為1.〇1]117 min，柱溫為30°C，進(jìn)樣體積20yL，保留時(shí)間和手性純度分析見表1，其圖譜見圖1。
[0025] 表1 (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯衍生化后的2-氨基丁醇保留時(shí)間和手性e .e.%值
實(shí)施例基」脬和甲基-2-奈乙既鼠的衍生化條仵考祭試驗(yàn) 2-1:取(RS)-2-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于30mL 1，2-二氯乙烷中，60°C下攪拌，緩 慢加入（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯218.68(0.1111 〇1)。孔(：監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后蒸干得（R)-a_甲基-2-萘乙酰氯與(RS )-2_氨基丁醇衍生物。
[0026] 將（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高效 液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為80%甲醇-20%鹽酸溶液， 所述鹽酸溶液的摩爾濃度為〇.2111〇1/1，？!1值為4.5。紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為25411111，流速為1.〇1]117 min，柱溫為30°C，進(jìn)樣體積20yL，保留時(shí)間和手性e. e. %值同實(shí)施例1。
[0027] : (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 取(RS)-2-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于40mL氯仿中，在40°C下攪拌，緩慢加入（R)_ a-甲基-2-萘乙酰氯26.23g(0.12mol) aTLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后蒸干得（R)-a-甲基-2-萘 乙酰氯與(RS) -2-氨基丁醇衍生物。
[0028] 將（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物用流動(dòng)相溶解后采用高效 液相色譜進(jìn)行檢測(cè)分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動(dòng)相為80%甲醇-20%鹽酸溶液， 所述鹽酸溶液的摩爾濃度為〇.2111〇1/1，？!1值為4.5。紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為25411111，流速為1.〇1]117 min，柱溫為30°C，進(jìn)樣體積20yL，保留時(shí)間和手性e. e. %值同實(shí)施例1。
[0029]:稱取(RS)-2-氨基丁醇3.09g(0.03mol)，溶于40mL四氯化碳中，在30°C下攪拌，緩 慢滴加（R)-a-甲基-2-萘乙酰氯32.79g (O.lSmolhTLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后蒸干得 (R)-a-甲基-2-萘乙酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物。
[0030]將（R)