/l醋酸(96.1:3:0.9)，在280nm波長下，用C 18柱進(jìn)行分析;而且此方法做了方法學(xué)驗 證，各個項目指標(biāo)都很理想，具體結(jié)果如下：專屬性良好;線性方程為Y = 4E+07X+18429，R為 1;重復(fù)性RSD為0.57%;方法檢出限為16.88 ng;加標(biāo)回收率為103.0%;溶液穩(wěn)定性和耐用性 都很好;證明該方法的專屬性、線性、重現(xiàn)性、分離度、回收率等良好。
[0019] 實施例一、1 Day Vision FX(MS01)(江蘇艾蘭得營養(yǎng)品有限公司生產(chǎn)）多維軟膠 囊樣品中VE含量的測定： 本發(fā)明所用試劑及配制：二甲亞砜:色譜純；異丙醇：色譜純;冰醋酸：分析純；甲醇:色 譜純； (1) 標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液:分別精密稱取適量維生素 E對照品于棕色容量瓶中，立即用異丙醇 溶解并稀釋成1 〇mg/ml的溶液； 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:精密吸取1.0ml上述標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于一個100ml棕色容量瓶中，立即用 異丙醇溶解并稀釋至刻度； (2) 樣品處理： 精密稱取5mg維生素 E的樣品于50ml棕色容量瓶中，加15ml二甲亞砜，于超聲水浴機中 60°C超聲20分鐘，加入異丙醇定容，強烈振搖后，在離心機上5000rmp離心30分鐘，取上清 液，注入液相色譜儀； (3) 色譜條件：色譜柱:Ci8柱，250 X 4 · 6mm，5μηι;流動相：甲醇：異丙醇：0 · 5mol/l醋酸 (96上3:0.9);流速：1.〇1111/1^11 ;檢測波長:28〇11111;進(jìn)樣量：1(^1;柱溫 ：30°(3; (4) 計算：
式中:A#、A標(biāo):為樣品、對照品的峰面積， C標(biāo):對照品的濃度，mg/ml; W樣:樣品的重量，g; (5) 樣品檢測結(jié)果:見附圖1(VE對照品圖譜)和附圖2(樣品MS01中VE圖譜）。
[0020] 實施例二、Spectrovite 50+ W/Lutein&Lycopene TB(MT4X)(江蘇艾蘭得營養(yǎng)品 有限公司生產(chǎn))多維片劑樣品中VE含量的測定： 本發(fā)明所用試劑及配制：二甲亞砜:色譜純；異丙醇：色譜純;冰醋酸：分析純；甲醇:色 譜純， (1)標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液:分別精密稱取適量維生素 E對照品于棕色容量瓶中，立即用異丙醇 溶解并稀釋成1 Omg/ml的溶液； 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:精密吸取1 .Oml上述標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于一個100ml棕色容量瓶中，立即用 異丙醇溶解并稀釋至刻度； (2) 樣品處理： 精密稱取5mg維生素 E的樣品于50ml棕色容量瓶中，加15ml二甲亞砜，于超聲水浴機中 60°C超聲25分鐘，加入異丙醇定容，強烈振搖后，在離心機上5000rmp離心30分鐘，取上清 液，注入液相色譜儀； (3) 色譜條件:色譜柱：&8柱，250\4.6111111，5以111;流動相 ：甲醇:異丙醇:0.51]1〇1/1醋酸 (96.1:3:0.9);流速檢測波長:280nm;進(jìn)樣量：10μ1;柱溫:30°C; (4) 計算：
式中：A#、A標(biāo):為樣品、對照品的峰面積， C標(biāo):對照品的濃度，mg/ml; W樣:樣品的重量，g; (5) 檢測結(jié)果:見附圖3(VE對照品圖譜)和附圖4(樣品MT4X中VE圖譜）。
[0021]顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非對實施方式的 限定。對于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式 的變化或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引申出的顯而易見 的變化或變動仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之中。
【主權(quán)項】
1. HPLC測定維生素E含量的色譜方法，其特征在于:包括以下步驟： (1) 對照品溶液的配制，包括標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液配制和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制，其中 標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液配制:分別精密稱取適量維生素E對照品于棕色容量瓶中，立即用異丙醇 溶解并稀釋成1 〇mg/ml的溶液； 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制：精密吸取1.0ml上述標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于一個100ml棕色容量瓶中，立 即用異丙醇溶解并稀釋至刻度； (2) 樣品處理:精密稱取5mg維生素E的樣品置于50ml棕色容量瓶中，加二甲亞砜，在超 聲水浴機中超聲，加入異丙醇定容，強烈振搖后，在離心機上進(jìn)行離心處理，取上清液，注入 液相色譜儀； (3) 液相色譜條件：色譜柱：C18柱；流動相：甲醇：異丙醇：0.5mol/l醋酸；流速:0.8-1.2ml/min;檢測波長：280nm;進(jìn)樣量：10-20μ1;柱溫：25-35°C。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測定維生素E含量的色譜方法，其特征在于:所述步驟(2) 樣品處理過程中，加入15ml二甲亞砜，最后加異丙醇的定容，兩者之間的體積比為1:3,即加 大二甲亞砜和異丙醇的量，調(diào)整兩者之間的體積比。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測定維生素E含量的色譜方法，其特征在于:所述步驟(2) 樣品處理過程中，樣品溶液在超聲水浴機中超聲的溫度為55-65°C，超聲的時間為20-30分 鐘。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測定維生素E含量的色譜方法，其特征在于:所述步驟(2) 樣品處理過程中，在離心機上進(jìn)行離心處理的參數(shù)為:4000-5000rmp離心20-30分鐘。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測定維生素E含量的色譜方法，其特征在于:所述步驟(3) 液相色譜條件中，流動相試劑甲醇:異丙醇:0.5mol/l醋酸的體積比為96.1:3:0.9。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測定維生素E含量的色譜方法，其特征在于： 所述步驟(3)液相色譜條件中，流速、波長、進(jìn)樣量以及柱溫的選擇：（1)色譜柱:C18柱； (2)流速:0 · 8-1 · 2ml/min，（3)檢測波長:280nm; (4)進(jìn)樣量：10-20μ1; (5)柱溫：25-35°C。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高效液相色譜法HPLC測定維生素E含量的色譜方法，能替代傳統(tǒng)氣相色譜法（GC）測定維生素E含量的色譜方法，通過對樣品處理過程以及色譜條件的巧妙選擇，最終達(dá)到簡便而準(zhǔn)確地對單一組分以及復(fù)雜組分樣品中維生素E含量的測定，本發(fā)明包括以下步驟:（1）對照品溶液的制備；（2）樣品處理；（3）液相色譜條件：色譜柱：C18柱；流速：0.8-1.2ml/min；流動相：甲醇:異丙醇:0.5mol/l醋酸；檢測波長：280nm；進(jìn)樣量：10-20μl。本發(fā)明能夠代替?zhèn)鹘y(tǒng)的GC來測定VE含量，而且簡便、快速、準(zhǔn)確。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105467031
【申請?zhí)枴緾N201510825923
【發(fā)明人】包亞君, 徐小明, 夏旭東, 張沛霞, 張興
【申請人】江蘇艾蘭得營養(yǎng)品有限公司
【公開日】2016年4月6日
【申請日】2015年11月25日