一種骨科敷藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種用于治療骨折及骨傷疾病的中藥制劑骨科敷藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]骨折及跌打損傷等骨傷疾病為外科的一種常見病、多發(fā)病，在不同年齡段的人群中均有較高的發(fā)生率。其中西醫(yī)治療骨折的常規(guī)方法是復(fù)位、固定、功能鍛煉，最終使患者受傷的肢體最大限度的恢復(fù)功能。但這些方法相對來說治愈周期很長(少則3-6個月，多則1-2年)、費(fèi)用高，而且使患者長期承受較大的痛苦。西醫(yī)對于跌打損傷的治療則采用口服消炎藥、外用抗菌藥進(jìn)行治療，而西藥的副作用是人所共知的。
[0003]我國傳統(tǒng)中醫(yī)中藥的發(fā)展有著悠久的歷史，歷代中醫(yī)根據(jù)患者病情的不同需要，往往會在臨床治療時，靈活運(yùn)用湯、膏、丸、散等不同劑型內(nèi)、外兼治，有“藥食同源”的理論作基礎(chǔ)，來源于天然產(chǎn)物，毒副作用較小，可以長期使用，因此尤其適合于骨折及跌打損傷患者的治療。如采用具有活血化瘀、舒筋止痛、生肌健骨等功效的中藥，通過合理組方、內(nèi)服外敷的方法加速骨折、骨傷的愈合。另外，在眾多的骨折及跌打損傷患者當(dāng)中，少年兒童占有很大一部分比例，少年兒童因其骨骼及各組織器官尚處于生長發(fā)育階段，如采用西醫(yī)療法服用西藥，對其生長發(fā)育必將產(chǎn)生更多的不良影響，因此，對少年兒童骨傷患者，更需要采用治療效果好且無毒副作用的中藥制劑進(jìn)行治療。
[0004]現(xiàn)有的中藥制劑種類眾多，亦各有所長。但多數(shù)的中藥骨傷制劑缺乏科學(xué)合理的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，無法保證制劑質(zhì)量的穩(wěn)定，進(jìn)而存在一定的安全隱患。
[0005]本發(fā)明中的骨科敷藥由蛤殼、白及、穿山甲、白芷、紅花、續(xù)斷、大黃、地龍、骨碎補(bǔ)等9味中藥組成，具有行氣散瘀、消腫止痛之功效，臨床用于跌打損傷后局部紅、腫、熱、痛等癥，也可用于損傷后期軟組織僵硬或粘連等，具有療效確切，治療效果好的特點(diǎn)。但目前該制劑尚缺乏質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，無法有效的對該制劑進(jìn)行科學(xué)合理的質(zhì)量監(jiān)控，因而也無法保證藥品的療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]基于此，本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于治療骨傷疾病的中藥制劑-骨科敷藥的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢測方法。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案:對制劑中的白及、紅花、地龍進(jìn)行薄層鑒別，對白芷中的歐前胡素(C16H1404>進(jìn)行含量測定。
[0008]本骨科敷藥的質(zhì)量控制方法包括如下鑒別和/或含量測定:
鑒別包括如下方法中的一種或幾種:
A、白及薄層鑒別:取骨科敷藥0.5-5g，加5-50mL的60-80%的甲醇或乙醇水溶液，超聲或回流處理20-60min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10mL使溶解，用石油醚、乙醚或乙酸乙酯振搖提取2-4次，每次10-20mL，合并提取液，揮至lmL，作為供試品溶液；另取白及對照藥材0.5-3g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，分別吸取上述供試品溶液及對照藥材溶液各2-10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲醇(6:2.5:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105°C條件下加熱數(shù)分鐘，放置30-60min。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；置紫外光燈(365nm)下檢視，在相同位置上顯相同的棕紅色熒光斑點(diǎn)。
[0009]B、紅花薄層鑒別:取骨科敷藥0.5-5g，加5-15mL的70-90%丙酮溶液，密塞，振搖10-20min，靜置，過濾，濾液濃縮至5mL，作為供試品溶液。另取紅花對照藥材0.2~2g,同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，分別吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各2-10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠Η薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7:2:3:0.4)作為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0010]C、地龍薄層鑒別:取骨科敷藥l-5g，加10-50mL的蒸餾水，加熱至沸，放冷，離心，取上清液濃縮至10mL，作為供試品溶液；另取賴氨酸對照品、亮氨酸對照品、纈氨酸對照品，分別加水制成每lmL含0.l-2mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，分別吸取上述4種溶液1-10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以印三酮試液，于105°C條件下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0011]取骨科敷藥0.5-5g，加三氯甲烷5-50mL，超聲或回流處理10_30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加lmL三氯甲烷使溶解，作為供試品溶液；另取地龍對照藥材0.5-2g，同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，分別吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各3-10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮(9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
[0012]白芷的含量測定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈-水(40-80:30-70);柱溫為25°C ;檢測波長為254 nm ;理論板數(shù)按歐前胡素峰計應(yīng)不低于3000 ；
對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥24小時的歐前胡素對照品適量，精密稱定后置于100mL容量瓶中，加甲醇、乙醇或氯仿溶解，定容，制成每lmL含1-20μ8的溶液，搖勻，過0.22 μ m濾膜，續(xù)濾液即為標(biāo)準(zhǔn)品溶液；
供試品溶液的制備取骨科敷藥l-10g，精密稱定，置50mL量瓶中，加甲醇、乙醇或氯仿45mL，超聲處理0.5-1.5h，加甲醇、乙醇或氯仿定容；或置于圓底燒瓶中，精密加入甲醇、乙醇或氯仿50mL，稱重，回流提取0.5-1.5h，放冷，加甲醇、乙醇或氯仿補(bǔ)足重量，搖勻，過
0.22 μ m濾膜，續(xù)濾液即為供試品溶液；
測定方法于高效液相色譜儀中分別自動進(jìn)樣對照品溶液與供試品溶液各ΙΟμ?，測定，即得；骨科敷藥每lg含白芷以歐前胡素(C16H1404)計，不得少于0.05mg。
[0013]本發(fā)明骨科敷藥的質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別和/或含量測定方法:
鑒別優(yōu)選如下方法中的一種或幾種: A、白及薄層鑒別:取骨科敷藥2g，加20mL的70%甲醇，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10mL使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次15mL，合并乙醚提取液，揮至lmL，作為供試品溶液；另取白及對照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法，分別吸取上述供試品溶液、對照藥材溶液各8 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲醇(6:2.5:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105°C條件下加熱數(shù)分鐘，放置30-60min。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；置紫外光燈(365nm)下檢視，在同一位置上顯相同的棕紅色熒光斑點(diǎn)。
[0014]B、紅花薄層鑒別:取骨科敷藥0.5g，加8mL的80%丙酮溶液，密塞，振搖15min，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取紅花對照藥材0.5g，同供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，分別吸取上述供試品溶液10 μ 1和對照藥材溶液各5 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠Η薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7:2:3:0.4)作為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0015]C、地龍薄層鑒別:取骨科敷藥lg，加10mL的蒸餾水，加熱至沸，放冷，離心，取上清液作為供試品溶液；另取賴氨酸對照品、亮氨酸對照品、纈氨酸對照品，加水制成每lmL各含1.0mg、1.0mg、0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，分別吸取上述供試品溶液10 μ 1、3種對照品溶液各5 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以印三酮試液，于105°C條件下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0016]取骨科敷藥lg，加三氯甲燒20mL，超聲處理20min，濾過，濾液蒸干，殘渣加lmL三氯甲烷使溶解，作為供試品溶液；另取地龍對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，分別吸取上述供試品溶液和對照藥材溶液各10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮(9:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
[0017]白芷的含量測定
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈-水(62:38);柱溫為25°C ;檢測波長為254 nm ;理論板數(shù)按歐前胡素峰計應(yīng)不低于于3000 ;
對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥24小時的歐前胡素對照品適量，精密稱定后置于100mL容