一種轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的測定方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，具體而言，涉及一種轉化糖電解質注射液中轉化糖含 量的測定方法。
【背景技術】
[0002] 轉化糖電解質注射液是等量的葡萄糖和果糖（轉化糖）、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、 磷酸二氫鈉與乳酸鈉的滅菌水溶液，可為患者提供水、電解質及能量，并產生利尿作用和代 謝性堿化作用，其所含乳酸根在肝臟代謝生成糖原，在H+參與下，最終生成C02和水。臨 床上適用于需要非口服途徑補充水分或能源及電解質的患者的補液治療，在國內外使用廣 泛，因其效果良好、安全性高而收載入美國藥典。
[0003] 經檢索美國藥典和國家藥品標準中收載轉化糖電解質注射液中轉化糖含量檢測 方法均為化學法，操作繁瑣，而且檢測結果反映的是葡萄糖和果糖總量，不能檢測出果糖和 葡萄糖各自的含量。本發(fā)明采用高效液相色譜法對轉化糖注射液中果糖和葡萄糖進行檢 測，該法專屬性強，可以準確地反映出果糖和葡萄糖的含量，進而可知轉化糖的含量。

【發(fā)明內容】

[0004] 鑒于現有技術的不足，本發(fā)明人通過實驗摸索建立了轉化糖注射液中轉化糖的含 量測定方法，經過嚴格的方法學驗證，保證方法的科學性嚴謹性，滿足了研發(fā)和生產的需 求。本發(fā)明的目的旨在提供一種測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法。
[0005] 本發(fā)明的技術方案是這樣實現的：
[0006] 采用反向高效液相色譜法，測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量，其流動相為 乙腈-水-濃氨溶液，比例為50~90 :50~10 :0~0. 3。
[0007] 所述流動相優(yōu)選為乙腈-水-25%濃氨溶液比例為50~90 :50~10 :0. 1~0. 3。
[0008] 上述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，更優(yōu)選流動相為乙 腈-水-25%濃氨溶液比例為75~90:25~10:0. 1~0.3。
[0009] 上述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，色譜柱為丙基酰胺親水色譜 柱￥611118；[1111110，4.6*250111111，5111]1或此七6『8父131'1(^6八1111(16,4.6111111*15〇111111，3.5111]1或效 能相當的色譜柱。
[0010]流速為〇. 5~1. 5mL/min;柱溫為35~45°C，檢測器為示差檢測器，示差檢測器溫 度設定為40°C或蒸發(fā)光檢測器。
[0011] 轉化糖電解質注射液在臨床上對于需要能量和電解質補給的危重病人有著重要 的作用，但是樣品中檢測轉化糖的方法仍沿襲著以前的化學法，操作繁瑣，準確度差，針對 該品種中轉化糖測定的高效液相色譜法還未見報道。本發(fā)明涉及采用高效液相色譜方法 測定轉化糖電解質注射液中轉化糖的含量。方法省時省力，精密度高，含量測定結果準確可 靠，重復性和回收率良好，可用于轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的常規(guī)分析和質量控 制。另外，經過嚴格的方法驗證，可以滿足研發(fā)和生產的需求，為轉化糖電解質注射液的質 量控制提供了技術保障。
【附圖說明】
[0012] 圖1為實施例1中轉化糖電解質注射液中轉化糖含量測定的系統(tǒng)適用性圖譜；
[0013]圖2為實施例2中轉化糖電解質注射液中轉化糖含量測定的系統(tǒng)適用性圖譜。
【具體實施方式】
[0014] 以下通過實施例形式，對本發(fā)明涉及的轉化糖電解質注射液中轉化糖的含量測定 方法作進一步的詳細說明，但不應將此理解為本發(fā)明上述主體的范圍僅限于以下的實例， 凡基于本發(fā)明上述內容所實現的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
[0015]實施例1
[0016] 轉化糖電解質注射液中轉化糖含量高效液相色譜法測定
[0017] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用WatersXbridgeAmide, 4. 6mm*150mm，3. 5um為色 譜柱，以乙腈-水-濃氨溶液（75 :25 :0. 1)為流動相，流速1.OmL/min，示差折光檢測器，檢 測器溫度和柱溫均為40°C。取果糖與無水葡萄糖各適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每 lml中含果糖5mg和無水葡萄糖5mg的溶液，量取20ill，注入液相色譜儀，果糖峰與無水葡 萄糖峰的分離度應符合要求。測定法精密量取本品適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每 lml含果糖5mg和無水葡萄糖5mg的溶液，精密量取20ill，注入液相色譜儀，記錄色譜圖； 另取果糖和無水葡萄糖對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。
[0018] 對本實施例含量測定方法進行了以下項目的驗證：
[0019] 1、系統(tǒng)適應性
[0020] 采用轉化糖電解質注射液樣品來分析此色譜條件是否符合要求。由圖1可見此條 件輔料及果糖和葡萄糖及果糖之間分離度符合要求。
[0021] 2、標準曲線
[0022] 配制各濃度的供試液，分別精密量取20iU，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度 (mg/ml)為橫坐標，峰面積（A)為縱坐標，繪制回歸曲線，計算回歸系數。由結果可見，本品 的含量測定于果糖和葡萄糖濃度在l_9mg/ml的濃度范圍內有良好線性。
[0023] 表1果糖含量測定標準曲線
[0024]
[0025] 表2葡萄糖含量測定標準曲線
[0026]
[0027] 3、重復性：取樣重復配制六份樣品，分別照高效液相色譜法測定，計算含量。結果 表明本品采用高效液相色譜法測定含量重復性良好。
[0028] 表3葡萄糖和果糖重復性測定結果
[0029]
[0030] 4、回收率制備含有果糖10mg/ml和葡萄糖10mg/ml的混合母液，分別移取該母液 4ml、5ml、6ml置10ml量瓶中，每個濃度溶液平行移取三份，再在每個容量瓶中加入輔料溶 液，加入75%乙腈溶液定容至刻度，搖勻。照高效液相色譜法測定，計算回收率。由結果表 明本方法測定果糖和葡萄糖回收率良好，符合測定要求。
[0031] 表4葡萄糖和果糖含量測定回收率測定結果
[0032]
[0033] 5、溶液穩(wěn)定性，取樣品分別于0、2、4、6、8小時測定，考察本品含量測定的溶液穩(wěn) 定性，有結果可見，本品含量測定溶液在8小時內穩(wěn)定。
[0034] 表5葡萄糖和果糖含量測定溶液穩(wěn)定性測定結果
[0035]
[0036]
[0037] 實施例2
[0038] 轉化糖電解質注射液中轉化糖含量高效液相色譜法測定
[0039] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用丙基酰胺親水色譜柱VenusilHILIC，4. 6*250mm， 5iim，以乙腈-水（80 :20)為流動相，流速為1. 5mL/min，蒸發(fā)光檢測器。取果糖與無水葡 萄糖各適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每lml中含果糖lmg和無水葡萄糖lmg的溶液， 量取10iil，注入液相色譜儀，果糖峰與無水葡萄糖峰的分離度應符合要求。
[0040] 測定法精密量取本品適量，用乙腈溶液（75 - 100)制成每1ml含果糖lmg和無水 葡萄糖lmg的溶液，精密量取10iil，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取果糖和無水葡萄糖 對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。
[0041] 對本實施例含量測定方法進行了以下項目的驗證：
[0042] 1、系統(tǒng)適應性
[0043] 采用轉化糖電解質注射液樣品來分析此色譜條件是否符合要求。由圖2可見此條 件輔料及果糖和葡萄糖及果糖之間分離度符合要求。
[0044] 2、標準曲線
[0045] 配制各濃度的供試液，分別精密量取10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度 (mg/ml)為橫坐標，峰面積（A)為縱坐標，繪制回歸曲線，計算回歸系數。由結果可見，本品 的含量測定于果糖和葡萄糖濃度在l_9mg/ml的濃度范圍內有良好線性。
[0046] 表6果糖含量測定標準曲線
[0047]
[0050] 3、重復性：取樣重復配制六份樣品，分別照高效液相色譜法測定，計算含量。結果 表明本品采用高效液相色譜法測定含量重復性良好。
[0051] 表8甸甸糖和果糖重復性測走結果 [0052：
[0053] 4、回收率制備含有果糖2mg/ml和葡萄糖2mg/ml的混合母液，分別移取該母液 4. 0ml、5. 0ml、6. 0ml置10ml量瓶中，每個濃度溶液平行移取三份，再在每個容量瓶中加入 輔料溶液，加入75%乙腈溶液定容至刻度，搖勻。照高效液相色譜法測定，計算回收率。由 結果表明本方法測定果糖和葡萄糖回收率良好，符合測定要求。
[0054] 表9葡萄糖和果糖含量測定回收率測定結果
[0055]
[0056]
[0057] 5、溶液穩(wěn)定性，取樣品分別于0、2、4、6、8小時測定，考察本品含量測定的溶液穩(wěn) 定性，有結果可見，本品含量測定溶液在8小時內穩(wěn)定。
[0058] 表10葡萄糖和果糖含量測定溶液穩(wěn)定性測定結果
[0059]
【主權項】
1. 一種測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特征在于：采用反向高效液 相色譜法，其中色譜柱以丙基酰胺鍵合硅膠色譜柱或酰胺基三鍵合亞乙基橋雜化顆粒為填 充劑；流動相為乙腈-水-濃氨溶液，比例為50~90 :50~10 :0~0. 3。2. 根據權利要求1所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特征在于： 流動相為乙腈-水-濃氨溶液，比例為50~90 :50~10 :0. 1~0. 3。3. 根據權利要求2所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特征在于： 流動相為乙腈-水-濃氨溶液比例為75~90:10~25:0. 1~0. 3。4. 根據權利要求1-3任一項所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其 特征在于：色譜柱為：丙基酰胺親水色譜柱Venusil HILIC，4. 6*250mm，5 ii m或Waters Xbridge Amide, 4. 6mm*150mm, 3. 5 u m 或效能相當的色譜柱。5. 根據權利要求1-3任一項所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特 征在于：流速為0. 5-1. 5mL/min。6. 根據權利要求1-3任一項所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特 征在于：柱溫為35-45 °C。7. 根據權利要求1-3任一項所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特 征在于：檢測器為示差檢測器，示差檢測器溫度設定為40°C。8. 根據權利要求1-3任一項所述測定轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的方法，其特 征在于：檢測器為蒸發(fā)光檢測器。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測轉化糖電解質注射液中轉化糖含量的高效液相色譜檢測方法。其中色譜柱以丙基酰胺鍵合硅膠色譜柱或酰胺基三鍵合亞乙基橋雜化顆粒為填充劑；流動相為乙腈-水，比例為50～90∶50～10。該方法與傳統(tǒng)的化學法相比較，操作簡便，快速、可準確得出果糖和葡萄糖的含量，經方法學考察，該方法專屬性良好、線性、回收率、重復性、溶液穩(wěn)定性良好，可用于本品在研發(fā)和生產中對轉化糖的質量控制。
【IPC分類】G01N30/89
【公開號】CN105021760
【申請?zhí)枴緾N201410179391
【發(fā)明人】寧洪鑫, 楊穎 , 王偉, 孟令闊
【申請人】天津藥物研究院
【公開日】2015年11月4日
【申請日】2014年4月30日