專利名稱：血液分析用試劑(1)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是有關(guān)在臨床檢查方面，用于測定白血球數(shù)和血紅蛋白濃度的試劑。
測定血液試樣中的白血球數(shù)和血紅蛋白濃度，對于臨床診斷白血病和貧血等，是非常重要的。
過去化驗白血球數(shù)是通過顯微鏡進(jìn)行目測計數(shù)，是在經(jīng)過血液的涂抹、固定、染色等操作之后進(jìn)行觀測的。
關(guān)于血紅蛋白濃度是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方法、將血紅蛋白轉(zhuǎn)化為氰化高鐵血紅蛋白之后，用分光光度計，通過測定540nm附近的吸光度而求出的。
另外的測定方法是研制了基于電阻方式的血球計數(shù)裝置、用緣皂角苷或季銨鹽這樣的溶劑將紅血球溶解而保留白血球原封不動、使血紅蛋白與氰化物反應(yīng)轉(zhuǎn)化為氰化高鐵血紅蛋白之后、用血球計數(shù)裝置同時測定白血球數(shù)和血紅蛋白濃度的方法。
上述基于顯微鏡的檢查和基于分光光度計的測定存在有操作復(fù)雜而且花費(fèi)時間的問題。
另外，在用皂角苷溶解紅血球的方法中，由于皂角苷是天然存在的物質(zhì)、它的溶血力不穩(wěn)定、而且到可以對白血球進(jìn)行計數(shù)所需的時間比較長。在隨著用季銨鹽對紅血球的溶解、用氰化物將血紅蛋白轉(zhuǎn)化為氰化高鐵血紅蛋白的方法中，到對白血球可以計數(shù)的時間雖然縮短了、但由于表面活性劑的影響、使氰化高鐵血紅蛋白的吸收曲線，比用國際標(biāo)準(zhǔn)方法得到的吸收曲線向長波長的方向發(fā)生位移，因而在540nm附近的吸光度減少、比本來的血紅蛋白濃度值要低、不能夠求出正確的濃度值。
因此，本發(fā)明的目的是提供既能簡便地對白血球進(jìn)行計數(shù)同時又能正確地求得血紅蛋白濃度的試劑。
為了解決上述課題，本發(fā)明的血液分析用試劑由以下各組分構(gòu)成十四烷基三甲基銨溴化物27.3-50.0g/l、十六烷基二甲基乙基銨溴化物27.3-50.0g/l、聚氧乙烯壬基苯醚40-60g/l、硝基氫氰酸鈉0.8-1.4g/l、氰化物5.0-7.6g/l。
用稀釋液將血液稀釋后、通過加入本發(fā)明的血液分析用試劑、使白血球保持原封不動、而使紅血球很快地溶血。適宜的表面活性劑濃度是十四烷基三甲基銨溴化物27.3-50.0g/l、十六烷基二甲基乙基銨溴化物27.3-50.0g/l、聚氧乙烯壬基苯醚40-60g/l，如果不在上述濃度范圍之內(nèi)、則會由于溶血不良或是溶血亢進(jìn)，使得與血球空殼不容易辨別，從而不能夠?qū)Π籽驍?shù)進(jìn)行測定。另外，通過季銨鹽和氰化物使血紅蛋白轉(zhuǎn)化為氰化高鐵血紅蛋白。這時，血紅蛋白的吸收峰與用國際標(biāo)準(zhǔn)方法得到的吸收峰相比較，雖然向長波長方向位移、但是通過使用硝基氫氰酸鈉、與用國際標(biāo)準(zhǔn)方法得到的氰化高鐵血紅蛋白的吸收曲線是相同的。必要的氰化物濃度是5.0-7.6g/l、硝基氫氰酸鈉濃度是0.8-1.4g/l。如果在該濃度范圍之外，則不能得到與國際標(biāo)準(zhǔn)方法同樣的氰化高鐵血紅蛋白吸收曲線。通過測定這種白血球懸浮液的吸光度可以求出血紅蛋白濃度。進(jìn)而，將白血球浮游液引入血球計數(shù)裝置的測量部分、通過檢測由測量部分發(fā)出的電信號、可以求出白血球數(shù)目。
本發(fā)明的實施例如下
實施例(溶血劑組成)十四烷基三甲基銨溴化物 37.6g十六烷基二甲基乙基銨溴化物 30.7g聚氧乙烯壬基苯醚 55.0g硝基氫氰酸鈉 1.2g氰化鉀 5.7g提純水 11將20μl血液稀釋成10ml、添加上述組成的溶血劑100μl、經(jīng)30秒之后，用血球計數(shù)裝置進(jìn)行測定，可求出白血球數(shù)和血紅蛋白濃度。
按照本發(fā)明，由于表面活性劑的作用，紅血球通過電阻方式的測定可在無阻礙地迅速被破壞，從而可以進(jìn)行白血球的計數(shù)，同時血紅蛋白通過季銨鹽、氰化物、硝基氫氰酸鈉的作用轉(zhuǎn)化為氰化高鐵血紅蛋白，可以正確的測定血紅蛋白濃度。
權(quán)利要求
1.一種測定血液中白血球數(shù)和血紅蛋白濃度的試劑，該血液分析用試劑含有十四烷基三甲基銨溴化物27.3-50.0g/l、十六烷基二甲基乙基銨溴化物27.3-50.0g/l、聚氧乙烯壬基苯醚40-60g/l、硝基氫氰酸鈉0.8-1.4g/l、氰化物5.0-7.6g/l。
全文摘要
本發(fā)明是一種測定血液中白血球數(shù)和血紅蛋白濃度的試劑，該試劑由十四烷基三甲基銨溴化物、十六烷基二甲基乙基銨溴化物、聚氧乙烯壬基苯醚硝基氫氰酸鈉和氰化物組成。
文檔編號G01N33/50GK1101979SQ9312038
公開日1995年4月26日 申請日期1993年10月20日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月20日
發(fā)明者浜口行雄 申請人:東亞醫(yī)用電子株式會社