本發(fā)明提供一種同時(shí)檢測(cè)圓齒野鴉椿藥材中isbiflorin和biflorin的含量測(cè)定方法，屬于對(duì)中藥材進(jìn)行定量檢測(cè)的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
野鴉椿藥材來源于省沽油科植物野鴉椿euscaphisjaponica和圓齒野鴉椿euscaphiskonishii，其根、枝條、果皮、種子均可入藥。本課題組一直致力于圓齒野鴉椿藥用植物資源的開發(fā)和利用。前期，已突破圓齒野鴉椿種苗生產(chǎn)瓶頸，并在國家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金資金項(xiàng)目的資助下，先后在福建的南平、三明、福州等地建立2000多畝的人工林，目前均已成林，植物資源豐富。
現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，圓齒野鴉椿具有顯著的抗炎活性。已有專利以五種鞣花酸類成分為指標(biāo)性成分，采用高效液相色譜法梯度洗脫進(jìn)行含量測(cè)定，提供一種控制野鴉椿藥材質(zhì)量。該方法操作繁瑣，色譜條件復(fù)雜；測(cè)定的五種成分抗炎活性不明確，總含量以索氏提取最高，為0.5937mg/g，在藥材中的含量不足萬分之六。
本課題組從圓齒野鴉椿果皮中分離得到的色原酮碳苷類成分，也是該屬植物中首次分離得到該類成分。isbiflorin，中文名為5,7-二羥基-2-甲基-色原酮-8-c-β-d-葡萄糖苷；biflorin，中文名為5,7-二羥基-2-甲基-色原酮-6-c-β-d-葡萄糖苷；這兩個(gè)化合物在植物中含量高，抗炎活性顯著的代表性色原酮碳苷類成分。
藥典、地方標(biāo)準(zhǔn)、已有文獻(xiàn)等均未記載植物中同時(shí)測(cè)定isbiflorin和biflorin的方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在提供一種同時(shí)檢測(cè)圓齒野鴉椿藥材中isbiflorin和biflorin的方法，所測(cè)定的成分在藥材中的含量高，在藥材各部位的范圍0.57-0.90mg/g，且色譜洗脫方法簡(jiǎn)單，只需等度洗脫無需復(fù)雜梯度，用時(shí)短，工作效率高，提取時(shí)間僅需超聲30min，無須濃縮；測(cè)定時(shí)間僅需15min，優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種同時(shí)檢測(cè)圓齒野鴉椿藥材中isbiflorin和biflorin的方法，其特征包括以下步驟：
a、將圓齒野鴉椿植物體粉碎成粗粉，過3號(hào)篩；
b、稱取藥材粗粉1.0g，置具塞錐形瓶中，加入70%乙醇30ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min；
c、藥材超聲處理后，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，得續(xù)濾液；
d、將續(xù)濾液采用液相色譜法分析檢測(cè)，線性回歸方程計(jì)算，測(cè)得圓齒野鴉椿果皮中isbiflorin和biflorin的含量；
設(shè)備及參數(shù)如下：
儀器：四元泵高效液相色譜儀；
色譜柱：c18；色譜柱，250×4.6nm，5μm；
柱溫：30℃；流速：1.0ml；流動(dòng)相：
甲醇：水為20：80；
檢測(cè)波長(zhǎng):234nm；進(jìn)樣量：5μl。
上述的一種同時(shí)檢測(cè)圓齒野鴉椿藥材中isbiflorin和biflorin的方法，超聲處理的條件為功率140w，頻率42khz。
上述的一種同時(shí)檢測(cè)圓齒野鴉椿藥材中isbiflorin和biflorin的方法，其特征是所使用的的高效液相色譜儀為watersw2690/5-w2998高效液相色譜儀，使用的c18色譜柱為dikmadiamonsilc18色譜柱。
本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：本發(fā)明提供兩種具有顯著抗炎活性的色原酮碳苷類化合物作為指標(biāo)性成分，并且提供了一種操作簡(jiǎn)單、分離度好、精確度高、用時(shí)短的同時(shí)檢測(cè)這兩個(gè)成分的方法。
具體實(shí)施實(shí)例
下面結(jié)合具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制。
實(shí)例1將圓齒野鴉椿果皮干燥藥材粉碎成粗粉，過3號(hào)篩；稱取果皮粗粉1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇30ml，密塞，稱定重量，超聲（功率140w，頻率42khz）處理30min；藥材超聲處理后，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。取5μl續(xù)濾液注入watersw2690/5-w2998高效液相色譜儀；色譜條件：dikmadiamonsilc18色譜柱，250×4.6nm，5μm，柱溫30℃，流速1.0ml，流動(dòng)相體積比甲醇：水為20：80，檢測(cè)波長(zhǎng)234nm。經(jīng)液相分析，線性回歸方程計(jì)算，測(cè)得圓齒野鴉椿果皮中isbiflorin和biflorin的含量分別為0.51mg/g和0.39mg/g。
實(shí)例2稱取圓齒野鴉椿干燥根的粗粉1.0g，按照實(shí)例1的方式操作，測(cè)得圓齒野鴉椿根中isbiflorin和biflorin的含量分別為0.35mg/g和0.41mg/g。
實(shí)例3稱取圓齒野鴉椿干燥葉片的粗粉1.0g，按照實(shí)例1的方式操作，測(cè)得圓齒野鴉椿根中isbiflorin和biflorin的含量分別為0.27mg/g和0.36mg/g。
稱取圓齒野鴉椿干燥種子的粗粉1.0g，按照實(shí)例1的方式操作，測(cè)得圓齒野鴉椿根中isbiflorin和biflorin的含量分別為0.44mg/g和0.13mg/g。
稱取圓齒野鴉椿干燥枝條的粗粉1.0g，按照實(shí)例1的方式操作，測(cè)得圓齒野鴉椿根中isbiflorin和biflorin的含量分別為0.27mg/g和0.33mg/g。