本發(fā)明屬于薄層色譜分析及制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種制備薄層點(diǎn)樣的方法。

背景技術(shù)：

薄層色譜設(shè)備簡單，操作方便，適應(yīng)性廣，可以快速給出可靠、準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，是一種可供選擇的經(jīng)濟(jì)、可靠、快速的分析方法。常用的薄層色譜載樣量少，多用于定性分析，無法大量制備樣品，而制備色譜是對常用薄層色譜應(yīng)用的擴(kuò)展，克服了常用薄層色譜載樣量少的缺點(diǎn)，既保留了快速高效的分離效果又可對混合物達(dá)到制備的作用，具有操作方便、設(shè)備簡單、分析制備速度快的優(yōu)點(diǎn)。雖然柱色譜為純化樣品常用方法，但對于少量待分離或難分離樣品，柱色譜中的固定相可能會浪費(fèi)一些樣品且成本大，而且由于不能實時檢測，分離效果差，不易得到純品。因此對于少量樣品的制備，制備色譜是一種低成本、設(shè)備簡單，分離速度快的有效方法。

常規(guī)的制備方法，在制備板上點(diǎn)樣時，常用點(diǎn)狀點(diǎn)樣，在薄層板上呈現(xiàn)波浪狀條帶，這樣對于分離效果差的樣品，多個化合物的條帶可能出現(xiàn)交叉，難以分析和樣品分離制備。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于薄層色譜分析的薄層點(diǎn)樣的制備方法，本發(fā)明的方法具有設(shè)備簡單、易操作、步驟少、快捷、方便，并且成本低，點(diǎn)樣準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，使少量樣品通過本發(fā)明的方法有效的得到分離制備。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種用于制備薄層色譜分析的薄層點(diǎn)樣方法，包括以下步驟：

1)薄層板的制備：取硅膠和羧甲基纖維素鈉水溶液混合均勻，攪拌至硅膠完全潤濕，超聲處理4-5min，充分排出溶液中的氣泡，然后將調(diào)制好的硅膠于玻璃板上涂勻，室溫下干燥后，置于烘箱中，于100-110℃下烘干20-40min，得薄層板；

2)點(diǎn)樣裝置的制備：取玻璃膠頭滴管和脫脂棉，將脫脂棉揉搓成1cm長細(xì)條狀后從膠頭滴管下端塞入膠頭滴管，下端出口端外留出0.4-0.6cm的脫脂棉，呈毛筆狀；

3)點(diǎn)樣：將標(biāo)尺放于距薄層板下端1-5cm處，與薄層板下緣平行，使用鉛筆沿標(biāo)尺輕輕畫一條點(diǎn)樣線，將點(diǎn)樣裝置脫脂棉一端浸沒樣品，吸取適量樣品，然后勻速沿點(diǎn)樣線點(diǎn)板；

4)樣品展開：配制流動相，將點(diǎn)樣后的薄層板在層析缸中展開，取出，晾干，置紫外燈下檢視；

5)樣品富集：沿展開帶邊界用刮刀將展開帶刮下，用有機(jī)溶劑將展開帶上的樣品組分溶解，過濾，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮，得粉末樣品。

上述的一種用于制備薄層色譜的薄層點(diǎn)樣方法，其特征在于，所述的玻璃膠頭滴管的出口端直徑為2-5mm。

本發(fā)明具有以下有益效果：

1.本發(fā)明，通過對點(diǎn)樣裝置和點(diǎn)樣方式的創(chuàng)新，使得少量樣品的分析和制備，操作更加方便，而且點(diǎn)樣效果更好。

2.本發(fā)明，通過對點(diǎn)樣裝置和點(diǎn)樣方式的創(chuàng)新，使得點(diǎn)樣時，克服了傳統(tǒng)的波浪狀線條的缺陷，本發(fā)明的點(diǎn)樣方式使樣品呈現(xiàn)平行的色譜帶，使得樣品分離效果更好，多個化合物的條帶不會出現(xiàn)交叉，便于展開和樣品制備。

3.本發(fā)明，用于樣品的定性分析和分離制備，使得分析過程更加高效，快速，分析結(jié)果更加準(zhǔn)確。

4.本發(fā)明，對設(shè)備和費(fèi)用要求較低，且操作簡便，步驟少，靈活性大。

5.本發(fā)明便于推廣，可以不需要特殊設(shè)備即能開展工作，對于少量或難分離樣品的分析兼分離制備來說是一種很好的方法。

6.本發(fā)明，所制備的點(diǎn)樣裝置末端是材質(zhì)柔軟的脫脂棉，點(diǎn)樣時能防止劃破薄層板從而能更好的在薄層板上劃線，利于樣品展開。

附圖說明

圖1為本發(fā)明點(diǎn)樣裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2為本發(fā)明點(diǎn)樣裝置的局部放大圖。

圖3為常規(guī)點(diǎn)樣的效果圖。

圖4為采用本發(fā)明點(diǎn)樣裝置點(diǎn)樣效果示意圖。

具體實施方式

本專利以白芍提取液為例，進(jìn)行薄層色譜分析時，通過制備薄層的點(diǎn)樣對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。

實施例1

白芍提取液采用現(xiàn)有技術(shù)的方法獲得。

1)薄層板的制備

稱取粘合劑羧甲基纖維素鈉(cmc-na)5g于燒杯中，加入蒸餾水1l，在電爐上加熱攪拌約30min至完全溶解，冷卻，配成0.5％cmc水溶液，備用。稱取40g硅膠與70ml的0.5％cmc水溶液，混合均勻，不斷攪拌，靜置，再攪拌直至所有硅膠完全潤濕，最后用超聲波處理約4-5min，充分排出溶液中的氣泡。使用牛角匙把調(diào)制好的硅膠倒在一片20cm×20cm的正方形玻板上，用牛角匙涂勻，在桌面輕震至表面平坦光滑。室溫干燥后，置于烘箱中，105℃加熱30min后，制得薄層板5，放入干燥器中，保存。

2)點(diǎn)樣裝置的制備

取實驗室常用的干燥潔凈的100mm長玻璃膠頭滴管1，所述的玻璃膠頭滴管的出口端直徑為約3mm，戴一次性手套取脫脂棉2少許，將脫脂棉揉搓成1cm長細(xì)條狀后，從膠頭滴管下端塞入膠頭滴管，下端出口端外留出0.4cm的脫脂棉，呈毛筆狀，制得點(diǎn)樣裝置。

3)點(diǎn)樣

取干燥潔凈的標(biāo)尺放于距薄層板下端1.5cm處，與薄層板下緣平行，使用鉛筆沿標(biāo)尺輕輕畫一條點(diǎn)樣線。將點(diǎn)樣裝置脫脂棉一端浸沒樣品，緩慢松開膠頭同時使脫脂棉一端始終在樣品液面下端，吸取適量樣品，然后使用點(diǎn)樣裝置勻速沿點(diǎn)樣線連續(xù)點(diǎn)板。

4)樣品展開

以二氯甲烷和甲醇配制展開劑，按體積比，二氯甲烷:甲醇＝5:1，將點(diǎn)樣后的薄層板放在層析缸中展開，取出，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視。

結(jié)果如圖3所示，按照常規(guī)方法使用毛細(xì)管點(diǎn)樣3后，經(jīng)展開劑展開后，在紫外燈檢視到兩個呈波浪狀的條帶4。如圖4所示，使用本發(fā)明所制備的點(diǎn)樣裝置點(diǎn)樣6，經(jīng)展開劑展開后，能夠在紫外燈檢視到兩個幾乎平行的條帶7。由圖3和圖4顯而易見，對于難分離的樣品，使用常規(guī)毛細(xì)管點(diǎn)樣后觀察到的多個化合物的條帶出現(xiàn)交叉，難以達(dá)到樣品完全分離以及分析制備的目的，另外使用毛細(xì)管點(diǎn)樣時很容易劃破薄層板，從而影響分離效果。而采用本發(fā)明制備的點(diǎn)樣裝置末端是材質(zhì)柔軟的脫脂棉，點(diǎn)樣時能防止劃破薄層板，并能使樣品達(dá)到最大限度的分離并可后續(xù)用于樣品的分析和制備。

5)樣品富集

用鉛筆輕輕沿兩個展開帶邊界劃出展開帶的輪廓，并用刮刀將兩個展開帶分別刮下，置于兩個100ml燒杯中。在燒杯中加入適量甲醇超聲，充分溶解刮下的展開帶上的組分樣品，再分別將兩個燒杯中的溶液在裝有濾紙的漏斗中過濾，取濾液置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮蒸干，得到粉末樣品。

技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種用于制備薄層色譜的薄層點(diǎn)樣方法。屬于薄層色譜分析及制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明方法主要包括以下步驟：薄層板的制備、點(diǎn)樣裝置的制備、點(diǎn)樣、樣品展開和樣品富集。本發(fā)明方法具有設(shè)備簡單、易操作、快捷、方便、成本低、樣品展開后分離效果好的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：劉玉峰;孫珊珊;朱麗君;胡延喜;徐亮;桑育黎;盧曉丹
受保護(hù)的技術(shù)使用者：遼寧大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：2017.05.12
技術(shù)公布日：2017.08.22