本發(fā)明屬于生物檢測領域，涉及一種用于檢測白血病的試劑盒。血管生成素樣蛋白3(angio-poietin-likeprotein3,angptl3)是一種分泌性蛋白因子,具有促進腫瘤新生血管形成的作用。conklin發(fā)現(xiàn)并克隆angptl3基因，在人和小鼠中分別定位于1號和4號染色體，包括7個外顯子和6個內含子。其表達產(chǎn)物angptl3是分子量約為70kda的分泌蛋白，人angptl3特異性的表達于肝臟，在人腎臟也有少量表達。angptl3是一種分泌性蛋白因子即人angptl3是由ip31編碼的460個氨基酸組成的多肽,其蛋白結構由分泌信號膚、n-端螺旋形卷曲結構域和c-端fbn樣區(qū)組成.最先發(fā)現(xiàn)在發(fā)育的肝臟中特異的表達,成人肝臟中也有少量持續(xù)表達.和促血管生成素家族不同,angptl3的fbn區(qū)和他們只有37％-39％的同源區(qū),故不能和tic2受體結合,但其fbn樣區(qū)可以和整合素ανβ3結合.camenisch等研究發(fā)現(xiàn)angptl3通過和內皮細胞表面整合素ανβ3結合,導致內皮細胞黏附、遷移,刺激整合素信號轉導途徑包括akt,mapk,fak磷酸化.已經(jīng)發(fā)現(xiàn)整合素ανβ3不僅可以影響腫瘤細胞的增殖和遷移,也和腫瘤血管的生成相關,國外已有通過抑制其表達來治療腫瘤的臨床實驗研究.此外ανβ3還和肝星形細胞的增殖和凋亡相關,因此也可能影響肝纖維化過程.動物實驗發(fā)現(xiàn)ngptl3和vegf具有相似的促進鼠角膜血管生長活性.可能和vegf一樣,angptl3同樣具有促進腫瘤新生血管形成,從而誘發(fā)侵襲轉移作用.其中angptl3和腫瘤新生血管形成的關系尚未見報道.宋其同等還發(fā)現(xiàn),angptl3mrna表達和腫瘤新生血管生成,癌栓的形成和腫瘤分級相關,而和腫瘤大小,包膜的完整性無明顯相關,因此認為angptl3在hcc的侵襲和轉移中發(fā)揮重要作用,可以促進腫瘤血管形成以及hcc的侵襲和轉移；可以通過angptl3的表達強度判斷hcc的預后,設想通過調控ang-ptl3的表達以控制血糖,并抑制腫瘤血管生成。目前的研究表明，angptl3在人肝癌組織、癌旁肝組織中均表達,但在肝癌組織中表達明顯高于癌旁組織.同時發(fā)現(xiàn)腫瘤血管密度較高的腫瘤組織,其angptl3表達也較高.研究表明angptl3的表達與腫瘤血管生成呈正相關,表明其可能在促進hcc的發(fā)生、發(fā)展及轉移過程中起著重要作用。同時angptl3本身作為活性蛋白質也參與脂質代謝及血管生成過程，通過激活不同靶蛋白協(xié)同其他活性物質完成其生理功能。進一步了解angptl3可能的調控因素、生物學效應及作用通路，對于尋找與其相關疾病新的治療途徑有積極意義。急性髓系白血病(acutemyeloidleukemia，aml)是一種異質性髓細胞腫瘤，也稱急性非淋巴細胞性白血病，常進展迅速，其特點是由造血干細胞惡變而形成的原始細胞克隆取代了正常骨髓造血。由于白血病細胞代替了正常血細胞，它們不具備正常血細胞的功能，由此導致貧血，血小板和粒細胞減少而引發(fā)一系列并發(fā)癥。若不經(jīng)過治療，存活期一般不超過半年。有的病例從診斷到死亡，甚至不過一周，死亡的主要原因是出血和感染。檢測急性髓系白血病目前主要通過測血液組分來實現(xiàn)，但是目前對于angptl3與白血病的關系沒有相關報道。技術實現(xiàn)要素：根據(jù)第一方面，本發(fā)明提供一種檢測急性髓系白血病該方法包括通過檢測angptl3在血液中的表達水平，來鑒定時候患有急性髓系白血病。本發(fā)明的另外一方面，提供一種檢測急性髓系白血病的試劑盒，該試劑盒中包含有特異性結合angptl3的單克隆抗體，以及elasa檢測相關的試劑以及酶標板。所述的試劑盒中還包括：固相載體(如多孔板)；較佳地，單克隆抗體包被于所述的固相載體；較佳的，所述的單克隆抗體還連接有標記物。在另一優(yōu)選例中，所述的標記物選自：辣根過氧化物酶、堿性磷酸酯酶、葡萄糖氧化酶、3-d-半乳糖苷酶、脲酶、過氧化氫酶、熒光素或葡萄糖淀粉酶。在另一優(yōu)選例中，所述的試劑盒中還包括：與標記物相對應的底物；顯色劑；]洗滌液；和/或終止液。在本發(fā)明的另一方面，提供所述的試劑盒的用途，用于特異性檢測急性髓系白血病。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：1所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：3所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：4所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：5所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：6所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：7所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：8所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：9所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：10所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：11所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。在另外一個方面，本發(fā)明提供一種angptl3的單克隆抗體，其重鏈可變區(qū)序列如seqidno：12所示，其輕鏈可變區(qū)如seqidno：2所示。本發(fā)明高的另外一個方面，其中所述單克隆抗體是抗體片段。優(yōu)選的，其中所述抗體片段選自scfv片段、fab片段、f(ab’)2片段和fab’片段。發(fā)明的有益效果本發(fā)明通過大量的實驗和數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)了angptl3與白血病表達密切相關，angptl3可以作為檢測靶標用于白血病的快速檢測中的用途。另外，發(fā)明人通過提供了改進的angptl3單克隆抗體，從而用于構建檢測angptl3的表達量的試劑盒從而為快速檢測白血病打下了堅實的基礎，并且所述試劑盒成本低廉，制備簡單，不需要大型儀器，即可快速實現(xiàn)目的蛋白的定量，從而實現(xiàn)物美價廉的白血病的檢測。具體實施方式發(fā)明人在前期通過蛋白質組學分析大數(shù)據(jù)比對，發(fā)現(xiàn)了angptl3在白血病患者和正常人群中表達有顯著差異，因此，初步判定angptl3可以作為檢測白血病的初步靶標。實施例1白血病患者和正常人群血液中angptl3表達量的區(qū)分取急性髓系白血病患者和正常人群的血液2ml，按總rna抽提試劑盒說明操作提取細胞總rna，用uv法定量分析rna得率和純度，瓊脂糖凝膠電泳分析其完整性。經(jīng)檢測，rna提取成功。cdna合成(10μl反應體系)：取mgcl22μl，10×rt緩沖液1μl，無核酸酶蒸餾水3.75μl，dntp混合液1μl，rna酶抑制劑0.25μl，amv逆轉錄酶0.5μl，隨機引物0.5μl，總rna1μl.。逆轉錄反應條件：30℃10min，42℃30min，99℃5min，5℃5min，所得產(chǎn)物用于pcr擴增.pcr反應：采用primerpremier5.0軟件設計angptl3引物和β-actin引物。angptl3上游引物序列：5′tccagaacacccagaagtaac-3′，下游引物序列:5′-ccagcctcctgaataaccct-3′；β-actin上游引物序列:5′-tcctccctggagaagagcta-3′，下游引物序列：5′-tcaggaggagcaatgatcttg3′.angptl3和β-actin反應同管進行，終體積50μl。pcr反應條件：94℃2min，1個循環(huán)；94℃30s，55℃30s，72℃1min，共35個循環(huán).取8μl反應液進行瓊脂糖凝膠電泳，凝膠成像系統(tǒng)采集圖片，quantityone軟件分析，將angptl3與β-actin面積灰度值的比值作為angptl3的mrna表達量參數(shù)。結果如表1所示：angptl3的mrna表達量倍數(shù)關系患者2.57正常人1從表1可以看出，在患者中angptl3高表達，可以作為特異性的檢測靶標。實施例2改進的單克隆抗體的制備首先按照本領域常規(guī)的試驗方法制備重鏈可變區(qū)序列和輕鏈可變區(qū)序列分別為seqidno：1和2所述的單克隆抗體angptl3-1。另外通過本領域常規(guī)的重疊pcr技術，分別在重鏈可變區(qū)seqidno：1的區(qū)域中進行突變取代，通過300多個取代以及檢測，共發(fā)現(xiàn)了12個取代形式可以導致單克隆抗體的效果顯著提升，其余280多種均沒有提高或者效果遠遠差于原始抗體，在此不一一列舉。按照本領域常規(guī)的抗體活性檢測方式，分別檢測各個單克隆抗體的活性，結果如表2所示：從表2可以看出，經(jīng)過改造后的單克隆抗體具有較好的親和性，比原始抗體具有性能上的改進優(yōu)勢。另外檢測抗體結合能力(elisa法)：以包被緩沖液(50mmna2co3,nahco3ph9.6)稀釋angptl3抗原蛋白至2μg/m1,100μl/well,4℃過夜。甩掉板中液體，pbst(ph7.4,0.05％tween-20,v/v)洗板后，3％bsa-pbs封閉1h。將抗體分別從2000ng/ml開始，進行2倍梯度稀釋，共11個濃度，稀釋液(1％bsa-pbs)作對照，37℃孵育2h。加入羊抗人igg-hrp(goatanti-humanigg-hrpconjugated)，孵育1h。加可溶性單組分tmb底物顯色液，室溫避光顯色5-10min。2nh2so450μl/well，終止顯色反應。置mdspectramaxplus384酶標儀上讀od450nm-650nm值，應用軟件sotfmaxprov5.4進行數(shù)據(jù)處理和作圖分析，結果如下表二所示，抗體的結合抗原ec50常數(shù)。實施例3試劑盒檢測取30例白血病患者血液，10例正常人群的血液各2ml，離心取血清，按照實施例2中(elisa法)用血清代替抗原蛋白進行相應檢測，血清的加入量為20微升；通過elasa檢測結果發(fā)現(xiàn)，在30例白血病患者中均有較強顯色，而10例正常人群中顯色幾乎沒有，通過這次檢測，可以發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的試劑盒能夠較好的實現(xiàn)白血病患者的區(qū)分。實施例4白細胞抑制試驗將人人急性髓系白血病細胞株kgla細胞接種于rpmi-1640培養(yǎng)液中，37'c、5％(1)2飽和濕度培養(yǎng)箱內培養(yǎng)傳代，接種于96孔培養(yǎng)板，加入溶解于乙醇生理鹽水混合液的單克隆抗體(濃度為30ug.ml-1、50ug.ml-1、100ug.ml-1)48h后mtt法測定生長抑制率。試驗數(shù)據(jù)表明，本發(fā)明的單克隆抗體對白血病細胞有明顯的抑制作用，且生長抑制作用與抗體濃度呈正相關，即隨著抗體濃度升高，其對白血病細胞的生長抑制作用越明顯。盡管本發(fā)明的具體實施方式已經(jīng)得到詳細的描述，本領域技術人員將會理解。根據(jù)已經(jīng)公開的所有教導，可以對那些細節(jié)進行各種修改和替換，這些改變均在本發(fā)明的保護范圍之內。本發(fā)明的全部范圍由所附權利要求及其任何等同物給出。序列表〈110〉蘇州立豪生物科技有限公司〈120〉一種用于檢測白血病的試劑盒〈210〉1<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120<210>2<212>prt<213>人工序列<400>輕鏈可變區(qū)aspileglnmetthrglnthrthrserserleuseralaserleugly151015aspargvalthrilesercysargalaserglnaspileserasnphe202530leuasntrptyrglnglnlysproaspglythrvallysleuleuile354045tyrtyrthrserargleuhisserglyvalproserargphesergly505560serglyserglythrasptyrserleuthrileserasnleuglugln65707580gluaspilealathrtyrphecysglnglnglyasnthrleupropro859095thrpheglyglyglythrlysleugluilelysarg100105〈210〉3<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercysseralaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉4<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglyprolystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉5<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleulystrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉6<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrglnasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉7<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthrsertyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉8<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysgly505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉9<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560thrglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrsergluaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉10<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvallysglnlysproglyglnglyleuglutrpile354045glytyrpheasnprotyrasnaspglythrlystyrasnglulysphe505560lysglylysalathrleuthrserasplysserserserthralatyr65707580metgluleuserserleuthrseralaaspseralavaltyrtyrcys859095alaarggluglyasptyrtyrglytyrpheasptyrtrpglyglngly100105110thrthrleuthrvalserserala115120〈210〉11<212>prt<213>人工序列<400>重鏈可變區(qū)gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglyala151015servallysmetsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr202530valmethistrpvally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