一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒及其使用方法，適用于尿液中葡萄糖含量的快速檢測。尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒包括如下成分：緩沖劑、葡萄糖氧化酶、脫氫酶、鄰聯(lián)甲苯胺、抗干擾劑和稀釋溶劑。本發(fā)明通過硫酸亞鐵來抑制尿液中VC等物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，通過顯色更加明顯的藍(lán)色來顯示尿液中葡萄糖是否超標(biāo)。本發(fā)明提供的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，簡單易操作，速度快，檢測效果更加準(zhǔn)確、檢出率高，為家庭式檢測提供了一種更好的選擇。
【專利說明】一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒及其使用方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測試劑，更具體是涉及一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒及其 使用方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或 其生物作用受損，或兩者兼有引起。糖尿病時長期存在的高血糖，導(dǎo)致各種組織，特別是眼、 腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙。糖尿病是由遺傳因素和環(huán)境因素造成的。遺傳 因素：1型或2型糖尿病均存在明顯的遺傳異質(zhì)性。糖尿病存在家族發(fā)病傾向，1/4?1/2 患者有糖尿病家族史。臨床上至少有60種以上的遺傳綜合征可伴有糖尿病。1型糖尿病有 多個DNA位點(diǎn)參與發(fā)病，其中以HLA抗原基因中DQ位點(diǎn)多態(tài)性關(guān)系最為密切。在2型糖尿 病已發(fā)現(xiàn)多種明確的基因突變，如胰島素基因、胰島素受體基因、葡萄糖激酶基因、線粒體 基因等。環(huán)境因素：進(jìn)食過多，體力活動減少導(dǎo)致的肥胖是2型糖尿病最主要的環(huán)境因素， 使具有2型糖尿病遺傳易感性的個體容易發(fā)病。1型糖尿病患者存在免疫系統(tǒng)異常，在某些 病毒如柯薩奇病毒，風(fēng)疹病毒，腮腺病毒等感染后導(dǎo)致自身免疫反應(yīng)，破壞胰島素3細(xì)胞。
[0003]糖尿病的檢測通常包括九種方法。1.血糖：是診斷糖尿病的惟一標(biāo)準(zhǔn)。有明顯 "三多一少"癥狀者，只要一次異常血糖值即可診斷。無癥狀者診斷糖尿病需要兩次異常血 糖值。可疑者需做75g葡萄糖耐量試驗(yàn)。2.尿糖：常為陽性。血糖濃度超過腎糖閾（160? 180毫克/分升）時尿糖陽性。腎糖閾增高時即使血糖達(dá)到糖尿病診斷可呈陰性。因此，尿 糖測定不作為診斷標(biāo)準(zhǔn)。3.尿酮：體酮癥或酮癥酸中毒時尿酮體陽性。4.糖基化血紅蛋 白（HbAlc):是葡萄糖與血紅蛋白非酶促反應(yīng)結(jié)合的產(chǎn)物，反應(yīng)不可逆，HbAlc水平穩(wěn)定，可 反映取血前2個月的平均血糖水平。是判斷血糖控制狀態(tài)最有價值的指標(biāo)。5.糖化血清 蛋白：是血糖與血清白蛋白非酶促反應(yīng)結(jié)合的產(chǎn)物，反映取血前1?3周的平均血糖水平。 6.血清胰島素和C肽水平：反映胰島0細(xì)胞的儲備功能。2型糖尿病早期或肥胖型血清 胰島素正?；蛟龈撸S著病情的發(fā)展，胰島功能逐漸減退，胰島素分泌能力下降。7.血脂： 糖尿病患者常見血脂異常，在血糖控制不良時尤為明顯。表現(xiàn)為甘油三酯、總膽固醇、低密 度脂蛋白膽固醇水平升高。高密度脂蛋白膽固醇水平降低。8.免疫指標(biāo)：胰島細(xì)胞抗體 (ICA)，胰島素自身抗體（IAA)和谷氨酸脫羧酶（GAD)抗體是1型糖尿病體液免疫異常的三 項(xiàng)重要指標(biāo)，其中以GAD抗體陽性率高，持續(xù)時間長，對1型糖尿病的診斷價值大。在1型 糖尿病的一級親屬中也有一定的陽性率，有預(yù)測1型糖尿病的意義。9.尿白蛋白排泄量， 放免或酶聯(lián)方法：可靈敏地檢出尿白蛋白排出量，早期糖尿病腎病尿白蛋白輕度升高。其中 尿糖檢測法是最為方便的體質(zhì)，成本低廉的。但由于各人體質(zhì)的不同和尿液中一些物質(zhì)的 影響，導(dǎo)致了尿糖檢測法的不準(zhǔn)確性而不得大范圍推廣。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于為了克服以上現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種減少干擾因素，檢測 效果準(zhǔn)確的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒及其使用方法。
[0005] 技術(shù)方案：本發(fā)明公開了一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：緩 沖劑、葡萄糖氧化酶、脫氫酶、鄰聯(lián)甲苯胺、抗干擾劑和稀釋溶劑。
[0006] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，緩沖劑為ll(Tl80mm〇l/L的檸檬酸鈉 溶液。
[0007] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，葡萄糖氧化酶的濃度為600(T7500U/ L〇
[0008] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，脫氫酶的濃度為15(T200U/L。
[0009] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，鄰聯(lián)甲苯胺的濃度為4. 5飛.Ommol/L。
[0010] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，抗干擾劑為〇. 05~0. 2mol/L的硫酸亞 鐵溶液。
[0011] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，稀釋溶劑為0.159TO. 5%的氫氧化鈉 溶液。
[0012] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入3-7mL稀釋溶劑，攪拌2-3分鐘后加入2-3滴抗干擾劑攪拌 至抗干擾劑的綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入1-2滴緩沖劑后加入3-5滴葡萄糖氧化酶，攪拌 2-3分鐘后加入2-3滴脫氫酶，攪拌1-2分鐘后加入3-5滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，若步驟三中所述的反應(yīng)液顯藍(lán)色則尿液中葡萄糖含量超標(biāo)；若步驟三中所述 的反應(yīng)液仍顯黃色則尿液中葡萄糖含量未超標(biāo)。
[0013] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，步驟三中所述的觀察顏色 為反應(yīng)5分鐘內(nèi)的顏色。
[0014] 有益效果：本發(fā)明通過硫酸亞鐵來抑制尿液中VC等物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，通過 顯色更加明顯的藍(lán)色來顯示尿液中葡萄糖是否超標(biāo)。本發(fā)明提供的尿液中葡萄糖含量檢測 試劑盒，簡單易操作，速度快，檢測效果更加準(zhǔn)確、檢出率高，為家庭式檢測提供了一種更好 的選擇。

【具體實(shí)施方式】
[0015] 實(shí)施例1 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：110mm〇l/L的檸檬酸鈉溶液、 7500U/L的葡萄糖氧化酶、150U/L的脫氫酶、6.Ommol/L的鄰聯(lián)甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亞 鐵溶液和〇. 15%的氫氧化鈉溶液。
[0016] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入3mL氫氧化鈉溶液，攪拌2分鐘后加入3滴硫酸亞鐵溶液攪 拌至綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入1滴檸檬酸鈉溶液后加入5滴葡萄糖氧化酶，攪 拌3分鐘后加入3滴脫氫酶，攪拌1分鐘后加入3滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，步驟三中所述的反應(yīng)液顯淺藍(lán)色則尿液中葡萄糖含量微量超標(biāo)。
[0017] 實(shí)施例2 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：180mmol/L的檸檬酸鈉溶液、 6000U/L的葡萄糖氧化酶、200U/L的脫氫酶、4. 5mmol/L的鄰聯(lián)甲苯胺、0. 2mol/L的硫酸亞 鐵溶液和〇. 5%的氫氧化鈉溶液。
[0018] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入7mL氫氧化鈉溶液，攪拌3分鐘后加入2滴硫酸亞鐵溶液攪 拌至綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入2滴檸檬酸鈉溶液后加入3滴葡萄糖氧化酶，攪 拌2分鐘后加入2滴脫氫酶，攪拌2分鐘后加入5滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，步驟三中所述的反應(yīng)液顯深藍(lán)色則尿液中葡萄糖含量嚴(yán)重超標(biāo)。
[0019] 實(shí)施例3 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：110mm〇l/L的檸檬酸鈉溶液、 6500U/L的葡萄糖氧化酶、180U/L的脫氫酶、6.Ommol/L的鄰聯(lián)甲苯胺、0. 15mol/L的硫酸亞 鐵溶液和〇. 2%的氫氧化鈉溶液。
[0020] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入4mL稀氫氧化鈉溶液，攪拌2分鐘后加入3滴硫酸亞鐵溶液 攪拌至綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入1滴檸檬酸鈉溶液后加入5滴葡萄糖氧化酶，攪 拌3分鐘后加入3滴脫氫酶，攪拌1分鐘后加入3滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，步驟三中所述的反應(yīng)液顯藍(lán)色則尿液中葡萄糖含量超標(biāo)。
[0021] 實(shí)施例4 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：150mmol/L的檸檬酸鈉溶液、 6800U/L的葡萄糖氧化酶、190U/L的脫氫酶、5.Ommol/L的鄰聯(lián)甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亞 鐵溶液和〇. 35%的氫氧化鈉溶液。
[0022] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入5mL稀氫氧化鈉溶液，攪拌3分鐘后加入3滴硫酸亞鐵溶液 攪拌至綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入2滴檸檬酸鈉溶液后加入4滴葡萄糖氧化酶，攪 拌3分鐘后加入2滴脫氫酶，攪拌1分鐘后加入3滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，步驟三中所述的反應(yīng)液仍顯黃色則尿液中葡萄糖含量未超標(biāo)。
[0023] 實(shí)施例5 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：110mm〇l/L的檸檬酸鈉溶液、 7500U/L的葡萄糖氧化酶、150U/L的脫氫酶、6.Ommol/L的鄰聯(lián)甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亞 鐵溶液和〇. 15%的氫氧化鈉溶液。
[0024] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入6mL稀氫氧化鈉溶液，攪拌2分鐘后加入2滴硫酸亞鐵溶液 攪拌至綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入1滴檸檬酸鈉溶液后加入4滴葡萄糖氧化酶，攪 拌2分鐘后加入3滴脫氫酶，攪拌1分鐘后加入4滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，步驟三中所述的反應(yīng)液仍顯黃色則尿液中葡萄糖含量未超標(biāo)。
[0025] 實(shí)施例6 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，包括如下成分：110mm〇l/L的檸檬酸鈉溶液、 7500U/L的葡萄糖氧化酶、150U/L的脫氫酶、6.Ommol/L的鄰聯(lián)甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亞 鐵溶液和〇. 15%的氫氧化鈉溶液。
[0026] 以上所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入4mL稀氫氧化鈉溶液，攪拌3分鐘后加入3滴硫酸亞鐵溶液 攪拌至綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入2滴檸檬酸鈉溶液后加入3滴葡萄糖氧化酶，攪 拌3分鐘后加入3滴脫氫酶，攪拌2分鐘后加入3滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，步驟三中所述的反應(yīng)液仍顯黃色則尿液中葡萄糖含量未超標(biāo)。
[0027] 以上實(shí)施例1-6所檢測的為來自不同檢測者的檢測樣品，其中實(shí)施例1-3中所 使用的樣品來自患有糖尿病的患者，實(shí)施例4-6中所使用的樣品來自未患有糖尿病的患 者。將實(shí)施例1-6的樣品的檢測結(jié)果與正規(guī)醫(yī)院尿檢檢測結(jié)果對比見表1 : 表1實(shí)施例1-6的檢測結(jié)果與現(xiàn)有檢測試劑盒比較

【權(quán)利要求】
1. 一種尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，包括如下成分：緩沖劑、葡萄糖氧 化酶、脫氫酶、鄰聯(lián)甲苯胺、抗干擾劑和稀釋溶劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，緩沖劑為 ll(Tl80mm〇l/L的檸檬酸鈉溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，葡萄糖氧化酶 的濃度為 600(T7500U/L。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，脫氫酶的濃度 為 150?200U/L。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，鄰聯(lián)甲苯胺的 濃度為 4. 5?6. Ommol/L〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，抗干擾劑為 0. 05?0. 2mol/L的硫酸亞鐵溶液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒，其特征在于，稀釋溶劑為 0. 15%~0. 5%的氫氧化鈉溶液。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，包括 如下步驟： 步驟一，取lmL尿液，加入3-7mL稀釋溶劑，攪拌2-3分鐘后加入2-3滴抗干擾劑攪拌 至抗干擾劑的綠色消失； 步驟二，向步驟一中所述的樣品中加入1-2滴緩沖劑后加入3-5滴葡萄糖氧化酶，攪拌 2-3分鐘后加入2-3滴脫氫酶，攪拌1-2分鐘后加入3-5滴鄰聯(lián)苯甲胺； 步驟三，快速攪拌上述所述的反應(yīng)液觀察顏色變化； 步驟四，若步驟三中所述的反應(yīng)液顯藍(lán)色則尿液中葡萄糖含量超標(biāo)；若步驟三中所述 的反應(yīng)液仍顯黃色則尿液中葡萄糖含量未超標(biāo)。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的尿液中葡萄糖含量檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，步 驟三中所述的觀察顏色為反應(yīng)5分鐘內(nèi)的顏色。
【文檔編號】G01N21/78GK104458727SQ201410742682
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月9日
【發(fā)明者】熊開勝, 張海防, 謝建庭 申請人:蘇州東辰林達(dá)檢測技術(shù)有限公司