本發(fā)明屬于分析科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種定量分析方法。特別是涉及精確測定待測物含量的定量方法。

背景技術(shù)：

在各種分析儀器定量分析中，目前已有的定量方法包括外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法和標(biāo)準(zhǔn)加入法。其中外標(biāo)法最簡單實用，使用制作好的外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品一次測定即可獲得分析結(jié)果，且一個外標(biāo)曲線可以測定多個樣品。但當(dāng)測定中儀器某些條件發(fā)生變化、儀器的穩(wěn)定性不好使分析信號結(jié)果漂移時，則容易造成外標(biāo)校正曲線相關(guān)性和或率不好，分析結(jié)果產(chǎn)生大的誤差，在這種情況下往往使用內(nèi)標(biāo)法。內(nèi)標(biāo)法是以待分析物信號與內(nèi)標(biāo)物信號的比值做縱坐標(biāo)，即使當(dāng)分析條件有波動時，比值也會保持不變，因此內(nèi)標(biāo)法對改善分析條件變化引起的測定結(jié)果變化具有獨特的作用。而當(dāng)待測樣品基體比較復(fù)雜造成的基體效應(yīng)比較大、或樣品中有干擾組分時，外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法所用的標(biāo)準(zhǔn)物基體無法與待測樣品基體完全保持一致。此時，則往往使用標(biāo)準(zhǔn)加入法。標(biāo)準(zhǔn)加入法是將同一個待測樣品分成若干等份，然后保留其中的一份不變，而向余下的幾個等份中加入不同量的待分析物的標(biāo)準(zhǔn)物。在儀器上直接測定這若干份樣品中待分析物的信號，求出獲得的曲線與橫坐標(biāo)軸的交點X0，即獲得待測組分的濃度。標(biāo)準(zhǔn)加入法能克服基體的干擾，但不能克服儀器的漂移，當(dāng)儀器的分析條件變化比較大時，往往獲得的曲線相關(guān)性也不好，對測定造成比較大的誤差。此外，標(biāo)準(zhǔn)加入法比較麻煩，為了測定一個樣品待測組分的濃度，需要制備多個樣品進(jìn)行測定，分析效率比較低。

本發(fā)明人在授權(quán)發(fā)明專利（201510095780 .7）中首次提出了使用兩點或三點的內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)加入法，該方法只需做2或3點內(nèi)標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)添加，然后使用內(nèi)標(biāo)-標(biāo)準(zhǔn)加入法做校正曲線對復(fù)雜基體樣品進(jìn)行測定。該方法不僅能節(jié)省操作時間，并顯著的改善了結(jié)果的準(zhǔn)確性。但該方法還存在不足：（1）該法依然需要人為的外加內(nèi)標(biāo)物，這就增加了分析成本；另外對有些非常復(fù)雜的樣品（如混合稀土礦）在難以選擇內(nèi)標(biāo)物的情況下，該方法顯得無能為力；最后該方法在只測定兩點或三點的情況下，由于操作時移液器的誤差和測定譜線的誤差，仍然可能會帶來系統(tǒng)誤差，使結(jié)果準(zhǔn)確度有時會下降。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對以上的問題，本發(fā)明人通過實驗進(jìn)一步進(jìn)行改善，提出了使用樣品本身含有的一個或幾個非待測組分做內(nèi)標(biāo)物的內(nèi)標(biāo)—標(biāo)準(zhǔn)加入定量方法，由此完成了本發(fā)明。本發(fā)明的方法不用外加內(nèi)標(biāo)物，不僅節(jié)省了分析時間和分析成本，同時由于可以選擇多個樣品本身含有的非待測組分做內(nèi)標(biāo)，經(jīng)過優(yōu)選及統(tǒng)計學(xué)檢驗，使分析結(jié)果更加準(zhǔn)確。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了一種精確測定待測物含量的方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行：

（1）首先測定樣品中待測組分和樣品中本身或測定體系本身含有的其它組分（內(nèi)標(biāo)組分）的信號比；

（2）在另外一份或兩份同樣的樣品中加入已知量的待測組分，重復(fù)測定上面的比值；

（3）以加入的待測組分濃度為橫坐標(biāo)，比值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)加入法回歸，獲得待測組分的標(biāo)準(zhǔn)加入法的含量；

（4）進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗，舍棄不合格數(shù)據(jù)，將合格數(shù)據(jù)平均即得到非常準(zhǔn)確的待測物的含量。

本發(fā)明所述精確測定待測物含量的方法，其中作為測定比值時的內(nèi)標(biāo)物是樣品本身或測定體系本身含有的1個或1個以上的組分。本發(fā)明所說的測定體系本身含有的組分是指除待分析的樣品以外的能夠在儀器上顯示信號的組分，比如在色譜分析中的空氣峰信號，色譜分析中溶劑中的雜質(zhì)產(chǎn)生的信號，ICP光譜或質(zhì)譜中氬氣產(chǎn)生的信號等等。

作為測定比值時的內(nèi)標(biāo)組分是樣品中含有的3個或3個以上的組分；4個或4個以上的組分。特別是當(dāng)內(nèi)標(biāo)物是三個以上時，對標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗，舍去不合格結(jié)果數(shù)據(jù)，將合格數(shù)據(jù)平均后獲得準(zhǔn)確的待測物的含量。

本發(fā)明更加詳細(xì)的描述如下：

一種新的準(zhǔn)確定量方法，該方法只需兩次或三次樣品測定操作，即可獲得非常準(zhǔn)確的待測物含量：（1）首先測定樣品中待測組分和樣品中本身含有的其它組分或測定體系本身含有的其它組分（內(nèi)標(biāo)組分）的信號比；（2）在另外一份或兩份同樣等量的樣品中加入已知量的待測組分，重復(fù)測定上面的比值；（3）以加入的待測組分濃度為橫坐標(biāo)，比值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)加入法回歸，獲得待測組分的標(biāo)準(zhǔn)加入法的含量；（4）進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗，舍棄不合格數(shù)據(jù)，將合格數(shù)據(jù)平均即得到非常準(zhǔn)確的待測物的含量。

本發(fā)明中作為測定比值時的內(nèi)標(biāo)物是樣品本身含有的，或測定體系本身含有的其它組分，最好選用樣品中含有的3個或3個以上的組分做內(nèi)標(biāo)。優(yōu)選樣品中含有的4個或4個以上的組分做內(nèi)標(biāo)。當(dāng)內(nèi)標(biāo)物是三個以上時，對標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗，舍去不合格結(jié)果數(shù)據(jù)，將合格數(shù)據(jù)平均后獲得準(zhǔn)確的待測物的含量。這里所說的統(tǒng)計學(xué)檢驗是可疑數(shù)據(jù)的取舍統(tǒng)計學(xué)檢驗，典型的檢驗方法包括狄克遜(Dixon)檢驗和格魯勃斯(Grubbs)檢驗法，這能在相關(guān)統(tǒng)計學(xué)專著中查到。

本發(fā)明適合的分析方法包括原子光譜儀器（原子熒光光譜儀、有同時測定功能的原子吸收光譜儀、原子發(fā)射光譜儀、無機質(zhì)譜儀和X射線熒光光譜儀），色譜或色譜質(zhì)譜聯(lián)用等所有能同時測定的儀器。

本發(fā)明公開的精確測定待測物含量的方法與現(xiàn)有技術(shù)相比所具有的優(yōu)點如下：

（1）使用樣品本身含有的組分做內(nèi)標(biāo)物，不用外加內(nèi)標(biāo)物，并只進(jìn)行2到3次樣品測定，節(jié)省了復(fù)雜基體樣品分析成本和時間。

（2）使用多個樣品本身含有的組分做內(nèi)標(biāo)物同時做標(biāo)準(zhǔn)加入回歸，并做統(tǒng)計學(xué)可疑值取舍，使復(fù)雜樣品分析結(jié)果更準(zhǔn)確。

（3）方法使用范圍廣，適合所有能同時測定的分析技術(shù)。不僅適用于發(fā)射光譜分析，也適用于色譜及質(zhì)譜。

本發(fā)明更進(jìn)一步公開了采用本發(fā)明所述的測定待測物含量方法在提高復(fù)雜樣品準(zhǔn)確性方面的應(yīng)用。其中的復(fù)雜樣品指的是復(fù)雜難溶解的合金、復(fù)合材料、礦石等金屬樣品中的元素，動物源性食品、高葉綠素植物和復(fù)合化工（日化）樣品等中的有機組分。實驗結(jié)果證明本方法對這些高難分析的樣品具有非常好的準(zhǔn)確性，并能節(jié)省分析成本和時間。

附圖說明

圖1為本方法內(nèi)標(biāo)-標(biāo)準(zhǔn)加入校正曲線圖：選樣品中五個組分同時做內(nèi)標(biāo)，其中最下面的回歸線的橫截距為舍去的可疑值，最終分析結(jié)果為其它4條回歸線在X軸上的截距的平均值）。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例說明本發(fā)明，這里所述實施例的方案，不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域的專業(yè)人員按照本發(fā)明的精神可以對其進(jìn)行改進(jìn)和變化，所述的這些改進(jìn)和變化都應(yīng)視為在本發(fā)明的范圍內(nèi)，本發(fā)明的范圍和實質(zhì)由權(quán)利要求來限定，本發(fā)明所用到的樣品均為常見分析樣品。

實施例1

一種精確測定待測物含量的方法：

（1）首先測定樣品中待測組分和樣品中本身含有的其它組分或測定體系本身含有的其它組分（內(nèi)標(biāo)組分）的信號比；

（2）在另外一份或兩份同樣的樣品中加入已知量的待測組分，重復(fù)測定上面的比值；

（3）以加入的待測組分濃度為橫坐標(biāo)，比值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)加入法回歸，獲得待測組分的標(biāo)準(zhǔn)加入法的含量；

（4）進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗，舍棄不合格數(shù)據(jù)，將合格數(shù)據(jù)平均即得到非常準(zhǔn)確的待測物的含量。

實施例2

在使用液相色譜測定某食品中的非法添加色素蘇丹紅時，由于樣品提取液有大量的干擾組分存在，使正常的外標(biāo)法的測定結(jié)果分析不準(zhǔn)確?，F(xiàn)改為本發(fā)明的定量方法如下：取樣品提取液2份（均為20微升）于兩個10毫升容量瓶中，編號為S0和S1，然后向S1的容量瓶中加入100ng標(biāo)準(zhǔn)蘇丹紅，將兩個容量瓶用蒸餾水定容并搖勻獲得S0和S1的最終測定溶液。然后在液相色譜儀上分別測定S0和 S1的蘇丹紅的峰面積A0和A1。同時測定S0和 S1與蘇丹紅相鄰的4個其它未知物的峰面積，分別標(biāo)記為K10，K20，K30，K40和K11，K12，K13，K14。計算比值：A0/K10 、A0/K20、A0/K30、A0/K40和比值 A1/K11 、A1/K12、A1/K13、A1/K14 。按說明書中描述繪制內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)加入法校正曲線圖（參見說明書附圖1）；將獲得的四條校正曲線延長交至橫軸求得每個直線在x軸的截距，經(jīng)過狄克遜(Dixon)檢驗法檢驗這四個截距確定沒有要舍去的數(shù)據(jù)。然后將獲得保留的數(shù)據(jù)進(jìn)行平均，獲得準(zhǔn)確的蘇丹紅測定結(jié)果為0.16ppm。而用GC-MS分析的結(jié)果為0.15ppm?？梢娫摲椒ň哂泻芎玫臏?zhǔn)確性。

實施例3

使用一臺電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜，測定某高溫鎳基合金標(biāo)物中的鈷。樣品使用磷酸和硫酸混合分解。該合金組成復(fù)雜，不能進(jìn)行樣品基體匹配，因此采用本方法進(jìn)行測定。準(zhǔn)確稱量2個0.3克的合金樣品，混合酸分解后定容100毫升。第一份樣品溶液不加鈷標(biāo)準(zhǔn)，第二份樣品溶液加10ppm鈷標(biāo)準(zhǔn)。選取樣品本身含有的鉬、鈮、鉻和鎢的靈敏線為自身內(nèi)標(biāo)測定。按本發(fā)明的描述進(jìn)行實驗。獲得的四條直線得截距經(jīng)過數(shù)理統(tǒng)計分析，沒有數(shù)據(jù)舍去。因此將此四個X軸截距平均，獲得準(zhǔn)確的樣品中鈷的含量。其鈷含量為0.74.與標(biāo)準(zhǔn)值0.732有很好的吻合。

實施例4

使用一臺四通道無色散原子熒光光度計，測定環(huán)境水樣中的鎘。分取兩個等分的樣品溶液。第一份樣品溶液不加鎘標(biāo)準(zhǔn)，第二份樣品溶液加2ppb鎘標(biāo)準(zhǔn)，然后按通常的氫化物發(fā)生進(jìn)行鎘的測定。選取樣品本身含有的鋅、砷、汞為自身內(nèi)標(biāo)測定。按本發(fā)明的描述進(jìn)行實驗。獲得的三條直線得截距經(jīng)過數(shù)理統(tǒng)計分析，沒有數(shù)據(jù)舍去。因此將3個X軸截距平均，獲得準(zhǔn)確的樣品中鎘的含量為3.5ppb。而使用直接外標(biāo)法測定的結(jié)果為1.5ppb，使用ICP-MS測定的結(jié)果為3.47ppb?？梢姳痉椒ū韧鈽?biāo)法有更好的準(zhǔn)確度，其結(jié)果與ICP-MS標(biāo)準(zhǔn)方法有高度的吻合。