1.一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于包含以下步驟:
步驟(1),取樣:稱取兩份過40目篩質(zhì)量相同的飼料樣品,精確至0.0001g;
步驟(2),稱取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品,用100mL容量瓶加水定容,得到標(biāo)準(zhǔn)溶液;
步驟(3),樣品處理:分別將兩份步驟(1)中的樣品置于加入50mL無水乙酸鈉-乙酸緩沖液的150mL錐形瓶中,取其中一份樣品于水浴鍋中沸水浴加熱40min±4min,然后用自來水沖淋冷卻,即為全糊化樣品,另外一份為不完全糊化樣品;分別向兩個(gè)錐形瓶中加入2mL糖化酶溶液,于40℃水浴鍋中加熱40min±4min,然后分別加入2mL硫酸溶液,搖勻后依次加入2mL鎢酸鈉溶液,再次搖勻;將兩個(gè)錐形瓶中的液體分別轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中加水定容后用濾紙過濾,收集濾液,得到兩份待測溶液;
步驟(4),將標(biāo)準(zhǔn)溶液和兩份待測溶液利用液相色譜進(jìn)行檢測,得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品及待測溶液中各組分的保留時(shí)間及峰面積;飼料樣品的淀粉糊化度即為:(不完全糊化樣品葡萄糖峰面積/完全糊化樣品葡萄糖峰面積)×100%。
2.如權(quán)利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于步驟(1)中飼料樣品稱樣量控制在0.4000-1.000g之間。
3.如權(quán)利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于步驟(2)中葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品稱樣量為0.05-0.1g,精確至0.0001g。
4.如權(quán)利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于步驟(3)中無水乙酸鈉-乙酸緩沖液配制方法如下:取4.1g無水乙酸鈉溶于200mL水中,加3.7mL乙酸,用水定容至1000mL,溶液pH在4.4-4.7之間即可。
5.如權(quán)利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于步驟(3)中硫酸溶液和鎢酸鈉溶液為蛋白沉淀劑,硫酸溶液配制方法:將10mL濃硫酸用水稀釋至100mL;鎢酸鈉溶液配制方法:取12.0g鎢酸鈉溶于100mL水中。
6.如權(quán)利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于步驟(3)中所使用的糖化酶酶活為12000U/g;酶溶液配制方法如下:取1g復(fù)合淀粉酶溶于10mL步驟(3)中無水乙酸鈉-乙酸緩沖液,反復(fù)震蕩后,過濾,取濾液,現(xiàn)用現(xiàn)配。
7.如權(quán)利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法,其特征在于步驟(4)所述的液相色譜以水為流動(dòng)相,所述液相色譜采用等度洗脫方式。