本發(fā)明屬重酒石酸去甲腎上腺素分析檢測領(lǐng)域，具體涉及一種采用B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)測定重酒石酸去甲腎上腺素含量的方法。

背景技術(shù)：

重酒石酸去甲腎上腺素(Noradrenaline bitartrate monohydrate)是一種直接的α-腎上腺素能受體激動劑，具有很強的血管收縮作用。臨床上主要用作急救時血壓的回升，以保證對腦等重要器官的血液供應(yīng)。其結(jié)構(gòu)式為：

化學(xué)振蕩反應(yīng)是指在化學(xué)反應(yīng)過程中有可能使反應(yīng)體系中某些化學(xué)組份的濃度隨時間或空間發(fā)生周期性的變化。這種周期性變化是發(fā)生在非平衡態(tài)時的現(xiàn)象，廣泛存在于化學(xué)、物理學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域中。化學(xué)振蕩反應(yīng)一直是分析領(lǐng)域的研究熱點。隨著對化學(xué)振蕩反應(yīng)的深入研究，其應(yīng)用領(lǐng)域愈來愈廣。廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析、食品分析、藥物分析和工業(yè)分析等重要領(lǐng)域。其中研究和應(yīng)用最廣泛的化學(xué)振蕩反應(yīng)是化學(xué)家B.P.Belousov等發(fā)現(xiàn)的B-Z(Belousv-Zhabotinsky)化學(xué)振蕩反應(yīng)。

目前檢測重酒石酸去甲腎上腺素的方法主要是熒光法、毛細管電泳法、電致化學(xué)發(fā)光法、高效液相色譜法以及極譜示波滴定法等，這些方法因設(shè)備昂貴、試驗繁瑣、周期長、檢測準(zhǔn)確度、靈敏度低、實驗重現(xiàn)性差等原因，不利于在實驗室或快速分析測試中推廣。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及一種采用B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)測定重酒石酸去甲腎上腺素含量的方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)中檢測操作繁瑣、成本高的問題。

一種采用B-Z化學(xué)振蕩法測定重酒石酸去甲腎上腺素含量的方法，包括如下步驟：在H₂SO₄介質(zhì)中以金屬鈰離子(Ce⁴⁺/Ce³⁺)為催化劑的條件下HOOCCH₂COOH被氧化的B-Z化學(xué)振蕩體系；在B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)進行的過程中向體系中加入重酒石酸去甲腎上腺素，振蕩圖形立刻被擾動，振蕩周期和振幅發(fā)生變化，選擇振蕩周期的改變量ΔT作為分析檢測信號，定義為ΔT＝T-T₀；當(dāng)重酒石酸去甲腎上腺素濃度在一定范圍內(nèi)，ΔT與重酒石酸去甲腎上腺素濃度的負對數(shù)呈良好的線性關(guān)系，由此來測定重酒石酸去甲腎上腺素的含量。

所述B-Z化學(xué)震蕩體系是由HOOCCH₂COOH-(NH₄)₂Ce(SO₄)₃-H₂SO₄-KBrO₃組成。

所述B-Z化學(xué)振蕩體系最佳實驗條件為：HOOCCH₂COOH：0.25mol/L，(NH₄)₂Ce(SO₄)₃：0.003mol/L，H₂SO₄：1.5mol/L，KBrO₃：0.25mol/L，檢測溫度：308K。

所述B-Z化學(xué)振蕩體系內(nèi)加入重酒石酸去甲腎上腺素，隨著重酒石酸去甲腎上腺素濃度的增大，振蕩周期的變化值ΔT增大，在3.92×10^-5～3.33×10^-3mol/L范圍內(nèi)，重酒石酸去甲腎上腺素濃度的負對數(shù)與振蕩周期的改變量呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔT＝-59.709(-lgC)+253.67(R²＝0.9823，n＝6)，檢出限為4.76×10^-10mol/L。

本發(fā)明的優(yōu)點效果如下：

本發(fā)明原理是重酒石酸去甲腎上腺素對B-Z化學(xué)振蕩體系擾動的大小與重酒石酸去甲腎上腺素濃度成一定比例關(guān)系。利用這一原理首次運用B-Z化學(xué)振蕩法測定了重酒石酸去甲腎上腺素含量。結(jié)果表明，加入的重酒石酸去甲腎上腺素濃度越大，振蕩周期的變化值ΔT越大，在3.92×10^-5～3.33×10^-3mol/L范圍內(nèi)，重酒石酸去甲腎上腺素濃度的負對數(shù)與振蕩周期的改變量ΔT呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔT＝-59.709(-lgC)+253.67(R²＝0.9823，n＝6)其檢出限為4.76×10^-10mol/L。并用供試血清樣制成的樣品溶液進行樣品含量和加標(biāo)回收率的測定，平均回收率為分別為98.04％、97.56％和97.87％，相應(yīng)的RSD分別為1.69％、2.10％和1.54％(n＝6)。本發(fā)明方法操作簡便，實驗成本較低，且能夠保證一定的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性，可用于重酒石酸去甲腎上腺素的日常例行分析檢測。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實施例1的重酒石酸去甲腎上腺素對最佳實驗條件下B-Z化學(xué)振蕩周期的影響；

圖2為本發(fā)明實施例2的震蕩周期變化量與重酒石酸去甲腎上腺素濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；

表1為本發(fā)明實施例3的低、中、高三個水平重酒石酸去甲腎上腺素的加標(biāo)回收率。

具體實施方式

以下結(jié)合附圖和具體實施方式對本發(fā)明做進一步的闡述。

實施例1B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)測定重酒石酸去甲腎上腺素含量的實驗裝置及實驗條件優(yōu)化

在帶有恒溫夾套和磁力攪拌的玻璃反應(yīng)器(體積約為20mL)中進行，依次向反應(yīng)器中加入一定濃度的HOOCCH₂COOH溶液、KBrO₃溶液、H₂SO₄溶液各5mL，同時將5mL(NH₄)₂Ce(SO₄)₃放入恒溫槽中進行恒溫，10min后，點擊計算機界面上的“開始通訊”按鈕，設(shè)置好通訊溫度，點擊“確定”按鈕后，計算機界面上開始出現(xiàn)基線，待基線平穩(wěn)后，立即加入已經(jīng)恒溫好的硫酸鈰銨溶液，使反應(yīng)底液總體積保持為20mL。維持體系溫度，在中速攪拌下以鉑電極為工作電極，217型甘汞電極為參比電極，用ZD-BZ振蕩實驗裝置連接計算機檢測體系電位的變化。

通過單因素分析，分別考查了HOOCCH₂COOH、(NH₄)₂Ce(SO₄)₃、H₂SO₄和KBrO₃濃度及檢測溫度的影響。B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)測定重酒石酸去甲腎上腺素的最佳實驗條件為HOOCCH₂COOH：0.25mol/L，(NH₄)₂Ce(SO₄)₃：0.003mol/L，H₂SO₄：1.5mol/L，KBrO₃：0.25mol/L，檢測溫度：308K。最佳實驗條件下重酒石酸去甲腎上腺素對B-Z化學(xué)振蕩周期的影響如圖1所示。

實施例2振蕩周期變化量與重酒石酸去甲腎上腺素濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線

在最佳實驗條件下，以重酒石酸去甲腎上腺素濃度的負對數(shù)為橫坐標(biāo)，振蕩周期的改變量ΔT為縱坐標(biāo)考查線性關(guān)系，具體結(jié)果見圖2。

由圖2可知，重酒石酸去甲腎上腺素濃度在3.92×10^-5～3.33×10^-3mol/L范圍內(nèi)與振蕩周期的改變量ΔT在呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔT＝-59.709(-lgC)+253.67(R²＝0.9823，n＝6)其檢出限為4.76×10^-10mol/L。

實施例3B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)測定血清樣品中重酒石酸去甲腎上腺素含量及回收率實驗

供試血清樣品由聊城某醫(yī)院無償提供，高速離心除去蛋白質(zhì)等大分子后(14000r/min)，精確量取一定體積的上層清液于50mL容量瓶中，加pH＝7的PBS緩沖溶液稀釋至刻度，定容即得樣品溶液。

分別向樣品溶液中加入低、中、高三個水平的標(biāo)準(zhǔn)重酒石酸去甲腎上腺素，利用B-Z化學(xué)振蕩反應(yīng)體系中重酒石酸去甲腎上腺素濃度的負對數(shù)與振蕩周期的改變量之間的線性關(guān)系進行樣品含量和加標(biāo)回收率的測定，結(jié)果見表1。平均回收率為分別為98.04％、97.56％和97.87％，相應(yīng)的RSD分別為1.69％、2.10％和1.54％(n＝6)。

表1樣品測定及回收率實驗