專利名稱：用化學振蕩對復合氨基酸中l(wèi)-色氨酸的直接定性、定量檢測的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明利用一種B-Z化學振蕩分析技術(shù)對復合氨基酸中L-色氨酸進行了直接定性、定量檢測。
背景技術(shù)：
氨基酸種類繁多、性質(zhì)接近，對復合氨基酸分析一直是色譜分析公認的難題。本發(fā)明利用化學振蕩對復合氨基酸中L-色氨酸的進行直接定性、定量檢測準確高，檢測限低， 操作簡單。

發(fā)明內(nèi)容
用B-Z化學振蕩方法可以檢測氨基酸的機理就是根據(jù)不同的氨基酸對化學振蕩體系有不同的擾動而形成不同的振蕩圖形；不同的氨基酸對化學振蕩體系擾動大小與氨基酸的濃度成一定比例關(guān)系。根據(jù)這一原理首次利用化學振蕩的方法對復合氨基酸中色氨酸的進行直接定性、定量檢測。結(jié)果表明，L-色氨酸可使振蕩體系的振幅和周期均增大，且當 L-色氨酸的濃度在5. 36X10—4 3. 35Xl(Tm0l/L范圍內(nèi)時，振幅、周期的增大值與L-色氨酸濃度的負對數(shù)呈良好的線性關(guān)系，最低檢出限為1. 68 X 10_8mol/L，相關(guān)系數(shù)為0. 9934 (η =9)。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明所提出的技術(shù)方案是實驗裝置采用SY-601型超級恒溫水浴；85-2數(shù)顯恒溫磁力攪拌器；CHI-832型電化學分析儀；213型鉬電極；217型飽和硫酸亞汞電極；302型溴離子選擇電極；帶恒溫夾套全玻璃反應器(50mL)；微量注射器。實驗所用H2SO4、CH2 (COOH) 2、KBrO3和Ce (SO4) 2均為分析純，水為二次去離子水。其中 Ce(SO4)2, CH2(COOH)2, KBrO3 用 0. 7mol/L H2SO4 配制。利用化學振蕩的方法對復合氨基酸中色氨酸的進行直接定性、定量檢測，步驟如下化學振蕩反應在帶有恒溫夾套和磁力攪拌的玻璃反應器中進行，依次向反應器中加入CH2(COOH)2. Ce(SO4)2，H2SO4, KBrO3,使反應底液總體積為20. OmL0實驗溫度為 303士0. 1K，恒定攪速，以213型鉬電極分別為工作電極和對電極，217型飽和硫酸亞汞電極為參比電極，用CHI-832型電化學分析儀連接計算機檢測記錄體系電位。在優(yōu)化實驗條件下，振蕩體系穩(wěn)定后，在穩(wěn)定的B-Z振蕩體系中加入不同濃度的L-色氨酸溶液，體系的振幅和周期不同程度增大(如圖2B所示)。結(jié)果顯示，在當所加入色氨酸的濃度在5. 36 X 10_4 3. 35X10-7mol/L范圍內(nèi)時，L-色氨酸濃度的負對數(shù)IogC與振幅的變化量(ΔΑ)和周期變量(Δ T)呈良好的線性關(guān)系(如圖3所示)，最低檢出限為1. 68 X 10_8mol/L，其線性回歸方程分別為Δ A (mv) = 14. 84-1. 6201og[L-tryptophan] (η = 9, r = 0. 9934)
AT(S) = 18. 08-2. 5061og[L-tryptophan] (η = 9, r = 0. 9954)本發(fā)明的優(yōu)點和產(chǎn)生有益效果是1、采用化學振蕩的方法對復合氨基酸中微量色氨酸直接定性、定量檢測，利用不同氨基酸在化學振蕩體系存在差異，從而實現(xiàn)色氨酸的定性，定量研究。2、該方法簡單，儀器價廉，檢測快捷，重現(xiàn)性好，準確度高。3、該方法所用能快速地滿足日常復合氨基酸中色氨酸檢測的需要，具有良好的經(jīng)濟效益。


圖1.各影響因素對色氨酸測定的影響a、H2SO4濃度的影響如圖IA所示b、催化劑的影響如圖IBc、KBrO3的影響如圖ICd、丙二酸的影響如圖IDe、溫度的影響如圖IE圖2. 20種氨基酸對振蕩圖形的影響(共同條件C(L-tryptophan)= 6. 35Xl(T5mol/L)圖3.復合氨基酸中色氨酸的振蕩圖形及L-色氨酸濃度的負對數(shù)IogC與振幅的變化量(ΔΑ)的線性關(guān)系圖4. 20種氨基酸在振蕩體系中對L-色氨酸擾動的影響((共同條件在振蕩周期的底點進樣；實驗條件與圖1相同)。
權(quán)利要求
1.一種直接定性、定量檢測復合氨基酸中L-色氨酸的方法，其特征是在硫酸介質(zhì)中以金屬鈰離子(Ce47Ce3+)作催化劑的條件下丙二酸被溴酸氧化的B-Z振蕩體系。在B-Z化學振蕩反應進行的過程中向體系中加入L-色氨酸，振蕩圖形立刻被擾動，振蕩周期和振幅發(fā)生變化，當L-色氨酸的濃度在一定范圍內(nèi)時，振幅、周期的增大值與L-色氨酸濃度的負對數(shù)呈良好的線性關(guān)系。
2.如權(quán)利要求1實驗條件是由丙二酸-Ce(SO4)2-H2SO4-KBrO3組成的B-Z化學振蕩體系。
3.如權(quán)利要求1或2B-Z化學振蕩體系組成濃度=KBrO3:0. 065mol/L, Ce (SO4) 2 0. 002mol/L, MA :0. 163mol/L, H2SO4 :0. 7mol/L, T = 303K
4.如權(quán)利要求1或2利用B-Z化學振蕩反應進行氨基酸的定性識別，探討了對復合氨基酸中其他氨基酸的影響范圍。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用B-Z化學振蕩分析技術(shù)對復合氨基酸中L-色氨酸直接定性、定量檢測。L-色氨酸擾動的B-Z振蕩體系的特征圖譜可用于其定性、定量識別。同時，L-色氨酸可使振蕩體系的振幅和周期均增大，當L-色氨酸的濃度在一定范圍內(nèi)時，振幅、周期的增大值與L-色氨酸濃度的負對數(shù)呈良好的線性關(guān)系，最低檢出限分別為1.68×10-8mol/L和1.98×10-7mol/L，相關(guān)系數(shù)分別為0.9934和0.9954(n＝9)。
文檔編號G01N27/26GK102323306SQ20111012814
公開日2012年1月18日 申請日期2011年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月18日
發(fā)明者楊武, 王杰, 王紅兵 申請人:北京興有豐科科技發(fā)展有限公司, 西北師范大學