本發(fā)明涉及一種食品檢測(cè)領(lǐng)域的檢測(cè)裝置及檢測(cè)方法，更確切地說，本發(fā)明涉及一種PVC膜傳感器及利用其檢測(cè)牛肉味覺的方法。

背景技術(shù)：

牛肉作為一種富含蛋白質(zhì)的肉類，是我國(guó)消費(fèi)量?jī)H次于豬肉的肉類食品。牛肉中脂肪含量低且具有消化吸收率高的特點(diǎn)，因此是人體絕佳的蛋白質(zhì)來源之一。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)社會(huì)的發(fā)展，人們對(duì)牛肉品質(zhì)的要求也越來越高。通常牛肉的品質(zhì)體現(xiàn)在其肉色，嫩度，味覺特性和多汁性等方面。對(duì)于牛肉味覺的評(píng)價(jià)大多通過常規(guī)感官評(píng)定的方法，然而受限于感官評(píng)價(jià)的主觀性強(qiáng)和重現(xiàn)性差的原因，對(duì)牛肉的品質(zhì)評(píng)價(jià)并不能滿足現(xiàn)代快速檢測(cè)的需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服了現(xiàn)有技術(shù)存在主觀性強(qiáng)、重現(xiàn)性差與對(duì)牛肉的品質(zhì)評(píng)價(jià)并不能滿足現(xiàn)代快速檢測(cè)需求的問題，提供了一種PVC膜傳感器及利用其檢測(cè)牛肉味覺的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：所述的PVC膜傳感器包括有工作電極、對(duì)電極與參比電極；

所述的工作電極、對(duì)電極與參比電極一端的銅導(dǎo)線依次和電化學(xué)工作站對(duì)應(yīng)的工作電極夾具、對(duì)電極夾具與參比電極夾具連接，工作電極、對(duì)電極與參比電極通過電極臺(tái)架固定安裝并保持豎直向下狀態(tài)浸泡在樣品溶液中，浸泡在樣品溶液中的深度為10mm～15mm,并保證工作電極、對(duì)電極與參比電極的下表面處在溶液中的同一高度，工作電極、對(duì)電極與參比電極不與杯壁和杯底接觸；工作電極、對(duì)電極與參比電極互不接觸，工作電極、對(duì)電極與參比電極中心間的距離大于10mm，呈等邊三角形放置。

技術(shù)方案中所述的工作電極包括鉑盤裸電極、聚吡咯薄膜層、具有特異性檢測(cè)牛肉味覺特性的PVC薄膜層；所述的鉑盤裸電極由銅導(dǎo)線、電極外套和鉑盤組成；鉑盤的純度為99.99％，鉑盤為直徑2mm的扁圓柱體，一側(cè)暴露在空氣中，另一側(cè)與銅導(dǎo)線的一端固定連接，電極外套包裹在銅導(dǎo)線與鉑盤的周圍，銅導(dǎo)線15mm長(zhǎng)的另一端作為連接端，連接端伸出電極外套即不被電極外套所包裹；通過電化學(xué)氧化聚合方式在暴露于空氣中的鉑盤表面形成具有導(dǎo)電性能的聚吡咯薄膜層，將聚吡咯后的鉑盤裸電極中的鉑盤表面均勻地附著一層具有特異性檢測(cè)牛肉味覺特性的PVC膜。

技術(shù)方案中所述的通過電化學(xué)氧化聚合方式在暴露于空氣中的鉑盤表面形成具有導(dǎo)電性能的聚吡咯薄膜層是指：

當(dāng)聚合電量達(dá)到5×10^-3C時(shí)所得聚吡咯層的厚度大于50nm。

技術(shù)方案中所述的將聚吡咯后的鉑盤裸電極中的鉑盤表面均勻地附著一層具有特異性檢測(cè)牛肉味覺特性的PVC膜是指：

所述的PVC膜均勻的附著在電極一端的鉑盤表面，無缺口和裂縫，并且干燥后結(jié)合牢固不脫落，PVC膜的厚度介于0.05mm與0.3mm之間。

技術(shù)方案中所述的對(duì)電極即采用鉑盤裸電極；參比電極采用型號(hào)為232的飽和甘汞電極，使用前無需活化，對(duì)電極、參比電極與電化學(xué)工作站的連接均為對(duì)電極、參比電極中的銅導(dǎo)線和電化學(xué)工作站的對(duì)電極夾具、參比電極夾具相連接。

所述的采用PVC膜傳感器檢測(cè)牛肉味覺的方法步驟如下：

1)待測(cè)樣品預(yù)處理；

2)PVC膜傳感器預(yù)處理及活化；

3)利用PVC膜傳感器進(jìn)行電位檢測(cè)；

4)電位值與牛肉味覺品質(zhì)評(píng)價(jià)。

技術(shù)方案中所述的待測(cè)樣品預(yù)處理包括步驟如下：

1)取不同牛的眼肌進(jìn)行檢測(cè)，分別記錄樣品編號(hào)，每個(gè)樣品平行準(zhǔn)備三組；

2)除去牛肉的結(jié)締組織及肌外脂肪，均勻切成10×10×10mm的方塊，密封于保鮮袋中并置于80℃水浴加熱，在中心溫度達(dá)到70℃時(shí)開始計(jì)時(shí)，10min后取出冷卻，取出時(shí)保證保鮮袋密封無破損，牛肉汁均為加熱后從樣品中自然流出，冷卻后通過紗布三次過濾，再通過濾紙三次過濾得澄清牛肉汁，定容至30ml，確保牛肉汁澄清無固形物，密封后防塵無菌條件下保存?zhèn)溆茫?/p>

3)將澄清牛肉汁編號(hào)保存，同時(shí)記錄相同牛眼肌的樣品編號(hào)。

技術(shù)方案中所述的PVC膜傳感器預(yù)處理及活化是指：

1)參比電極

參比電極采用型號(hào)為232的飽和甘汞電極，使用前需要在飽和氯化鉀溶液中浸泡24h,確保甘汞電極在樣品檢測(cè)過程中的電位穩(wěn)定，浸泡后用去離子水沖洗10min，然后用氮?dú)獯蹈杀Ｗo(hù)待用，檢測(cè)之前要求保持參比電極表面無塵干燥；

2)對(duì)電極

使用前為保證鉑盤表面的光滑和清潔相應(yīng)的處理方法為：

(1)在25攝氏度條件下，用95％的乙醇和清水先后超聲清洗10min，氮?dú)獯蹈珊笥?000目粗砂紙除去擦痕及刮痕；

(2)再用更細(xì)的4000目砂紙打磨鉑盤表面，打磨完成后需對(duì)電極進(jìn)行拋光，用50nm氧化鋁拋光粉在麂皮上畫圈打磨，氧化鋁拋光粉在打磨前用蒸餾水略微濕潤(rùn)形成漿狀；打磨完成后以鉑盤表面平滑光亮無劃痕；

3)工作電極

工作電極即為PVC膜電極，在檢測(cè)前保證電極表面干燥無塵。

技術(shù)方案中所述的利用PVC膜傳感器進(jìn)行電位檢測(cè)是指：

1)所述的采用PVC膜傳感器檢測(cè)牛肉味覺過程在電化學(xué)工作站進(jìn)行，利用制備的PVC膜電極作為工作電極，鉑金裸電極作為對(duì)電極，飽和甘汞電極作為參比電極，構(gòu)成傳感器，分別和電化學(xué)工作站上的工作電極夾具、對(duì)電極夾具、參比電極夾具相連接；

2)接通電源后將三個(gè)電極浸入裝有牛肉汁的燒杯中，保持三個(gè)電極下表面同時(shí)處于液面下15mm處，三個(gè)電極呈等邊三角形放置，由電極臺(tái)架固定在豎直方向；

3)在檢測(cè)進(jìn)行中，保證傳感器的三個(gè)電極互不接觸，不與杯壁杯底接觸，利用chi660d軟件選用開路-時(shí)間電位法測(cè)定，待信號(hào)穩(wěn)定后用PVC膜傳感器測(cè)得牛肉汁的電位值，在對(duì)不同樣品檢測(cè)的間隔需對(duì)PVC膜傳感器的三個(gè)電極用去離子水清洗2min，并用濾紙擦干。

技術(shù)方案中所述的電位值與牛肉味覺品質(zhì)評(píng)價(jià)是指：

應(yīng)用PVC膜傳感器對(duì)牛肉味覺品質(zhì)檢測(cè)所得數(shù)據(jù)可按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定：

1)應(yīng)用PVC膜傳感器檢測(cè)的牛肉味覺是根據(jù)牛肉的五味，嫩度，柔軟度來進(jìn)行評(píng)價(jià)；

2)在電化學(xué)工作站所得開路電位值大于0.2000V時(shí)認(rèn)為所檢測(cè)的牛肉味覺優(yōu)秀，具有明顯的鮮味、嫩度及柔軟度并符合優(yōu)級(jí)牛肉標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)電位值越高表明牛肉中氨基酸含量越豐富，反應(yīng)出牛肉味覺更加突出；因此，開路電位值大于0.2000V的不同牛肉根據(jù)其開路電位值的高低來判斷其味覺的優(yōu)劣；

3)當(dāng)電化學(xué)工作站的開路電位值低于0.2000V時(shí)認(rèn)為所檢測(cè)的牛肉味覺一般或者較差，不具備或者具備較少牛肉的味覺特征。

與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果是：

1.本發(fā)明所述的利用PVC膜傳感器檢測(cè)牛肉味覺的方法是通過電化學(xué)方法進(jìn)行定量檢測(cè)，該方法相比于感官評(píng)價(jià)法更加客觀準(zhǔn)確。

2.本發(fā)明所述的PVC膜傳感器制備過程簡(jiǎn)單，造價(jià)低廉。

3.本發(fā)明所述的PVC膜傳感器是對(duì)牛肉味覺品質(zhì)檢測(cè)的一種快速檢測(cè)裝置。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明：

圖1-a為本發(fā)明所述的PVC膜傳感器的主視圖；

圖1-b為本發(fā)明所述的PVC膜傳感器的左視圖；

圖1-c為本發(fā)明所述的PVC膜傳感器的右視圖；

圖2為圖1-a中I處PVC膜傳感器鉑盤修飾后放大視圖；

圖3為吡咯聚合時(shí)循環(huán)伏安掃描圖像；

圖4為本發(fā)明所述的PVC膜傳感器未穩(wěn)定時(shí)圖像；

圖5為本發(fā)明所述的PVC膜傳感器穩(wěn)定時(shí)圖像；

圖6為本發(fā)明所述的PVC膜傳感器制作及應(yīng)用過程的流程框圖；

圖7為本發(fā)明所述的利用PVC膜傳感器檢測(cè)牛肉味覺品質(zhì)方法的流程框圖；

圖中：1.銅導(dǎo)線，2.電極外套，3.PVC層，4.聚吡咯層，5.鉑盤。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)的描述：

本發(fā)明通過制備的PVC膜傳感器能夠客觀快速的鑒別牛肉味覺特性的優(yōu)劣，通過對(duì)牛肉中呈鮮味氨基酸的測(cè)定來表征牛肉的味覺特性。本發(fā)明采用了PVC為基底物質(zhì)，選取二茂鐵為味敏物質(zhì)，研究其與牛肉中兩種呈鮮味氨基酸的聯(lián)系，制備了PVC-PPy-Pt(聚氯乙烯-聚吡咯-鉑)形式的工作電極，采用了電化學(xué)工作站的開路電位法對(duì)不同牛肉樣品進(jìn)行檢測(cè)，并通過感官評(píng)定的驗(yàn)證，結(jié)果表明制備的PVC膜傳感器具有良好的準(zhǔn)確性。

本發(fā)明所述的PVC膜傳感器包括工作電極、對(duì)電極與參比電極。

1.工作電極

所述的工作電極包括鉑盤裸電極一支、聚吡咯薄膜層、具有特異性檢測(cè)牛肉味覺特性的PVC薄膜層。

1)鉑盤裸電極

鉑盤裸電極是連接電化學(xué)工作站與樣品間的媒介，同時(shí)鉑盤裸電極也是后續(xù)修飾物質(zhì)的載體。鉑盤裸電極由鉑盤5、銅導(dǎo)線1和電極外套2組成。鉑盤5的純度為99.99％，為直徑2mm的扁圓柱體，一側(cè)暴露在空氣中，另一側(cè)與銅導(dǎo)線1相連，保證了檢測(cè)時(shí)電路的通路；鉑盤5的表面為銀白色有金屬光澤。

電極外套2為耐腐蝕的pvdf(聚偏氟乙烯)材料，不滲液，為乳白色棒狀，是鉑盤裸電極的主要結(jié)構(gòu)件，與銅導(dǎo)線1和鉑盤5聚合密接使其相對(duì)位置固定。同時(shí)鉑盤5與電極外套2之間緊密結(jié)合保證鉑盤裸電極的密封性。相對(duì)于鉑盤5的另一端為一根銅導(dǎo)線1，銅導(dǎo)線1被電極外套2包裹，其中約15mm暴露在空氣中，作為鉑盤裸電極與夾具的連接端。

2)聚吡咯薄膜層

本發(fā)明所用吡咯為充氮保護(hù)條件下75～80攝氏度減壓蒸餾所制。

將打磨后的鉑盤裸電極連接在電化學(xué)工作站上，連接方式為鉑盤裸電極的銅導(dǎo)線1與電化學(xué)工作站的夾具相連，用電極臺(tái)架將鉑盤裸電極固定在豎直方向，浸泡在含有吡咯的鄰苯二甲酸氫鉀溶液中構(gòu)成傳導(dǎo)回路，通過電化學(xué)氧化聚合方式在鉑盤5表面形成導(dǎo)電性聚吡咯薄膜層4，

選用循環(huán)伏安法掃描70周后聚吡咯薄膜層4生成在鉑盤5表面。要求聚吡咯層4能夠完全覆蓋整個(gè)鉑盤5，并且聚吡咯過程后的鉑盤5表面失去原有銀白色金屬光澤轉(zhuǎn)為棕黑色。

在用電化學(xué)工作站進(jìn)行吡咯聚合的過程中，當(dāng)聚合電量達(dá)到5×10^-3C時(shí)可視為聚吡咯薄膜層已達(dá)到后續(xù)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。即鉑盤5表面具有一定的厚度和導(dǎo)電性。

由于聚合電量固定，因此通過電子顯微鏡觀察所得聚吡咯層4的厚度以大于50nm為標(biāo)準(zhǔn)。

其中鄰苯二甲酸氫鉀溶液的配制過程為：25℃下配制0.1mol/L鄰苯二甲酸氫鉀溶液30ml，加入402μl吡咯(0.2mol/L)，并充氮驅(qū)氧。

3)PVC薄膜層

PVC膜溶液用于制作PVC薄膜，其主要成分為THF、PVC粉末、DOP、AEO-3P、二茂鐵與硬脂酸鎂。本發(fā)明所用化學(xué)材料均為分析純，按一定順序配制成溶液。

其中PVC膜溶液的配制過程為：室溫25攝氏度條件下，在5mlTHF溶液中依次加入0.18g聚合度為2500的PVC粉末、14.0mg二茂鐵、0.48mlDOP、294μlAEO-3P與7.2mg硬脂酸鎂，混合均勻。

將聚吡咯后的鉑盤裸電極浸泡在PVC膜溶液中保證電極頭不與容器底部或四周接觸，浸泡10min后從PVC膜溶液中取出。取出在無塵條件下放置24h，電極表面生成薄薄的一層PVC膜。

保證PVC膜能夠均勻的附著在電極一端的鉑盤5表面，無缺口和裂縫，并且以干燥后結(jié)合牢固不脫落為標(biāo)準(zhǔn)。且厚度介于0.05mm與0.3mm之間。

2.對(duì)電極與參比電極

對(duì)電極即為打磨后的鉑盤裸電極，均為用于檢測(cè)時(shí)回路電位值的穩(wěn)定。參比電極為市面購(gòu)得的標(biāo)準(zhǔn)232型飽和甘汞電極，并作為標(biāo)準(zhǔn)件來測(cè)量工作電極的電位。使用前無需活化，對(duì)電極、參比電極與電化學(xué)工作站的連接均為其中的銅絲與夾具之間的連接。

3.電化學(xué)工作站

本發(fā)明采用標(biāo)準(zhǔn)CHI660D型電化學(xué)檢測(cè)的方式獲取數(shù)據(jù)，電化學(xué)工作站的本質(zhì)是用于控制和檢測(cè)電化學(xué)池電流和電位以及其他電化學(xué)參數(shù)變化的儀器裝置。主要可分為單通道工作站和多通道工作站兩種，本發(fā)明所選用的為單通道工作站，主要選用的方法有循環(huán)伏安法和開路電位-時(shí)間法?？赏ㄟ^將電化學(xué)工作站連接至計(jì)算機(jī)，采用CHI660D軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。電化學(xué)工作站上有三個(gè)相應(yīng)的夾具，分別為工作電極夾具，對(duì)電極夾具和參比電極夾具。相應(yīng)的夾具與本發(fā)明所述的PVC膜傳感器相連接可應(yīng)用PVC膜傳感器進(jìn)行檢測(cè)。

4.傳感器工作方式

本發(fā)明將制備的PVC膜電極作為工作電極，鉑金裸電極作為對(duì)電極，標(biāo)準(zhǔn)飽和甘汞電極為參比電極。工作電極、對(duì)電極與參比電極構(gòu)成PVC膜傳感器，通過工作電極，對(duì)電極，參比電極一端的銅絲與電化學(xué)工作站對(duì)應(yīng)的夾具連接，三個(gè)電極先后通過電極臺(tái)架固定，保持豎直向下狀態(tài)浸泡在樣品溶液中構(gòu)成一個(gè)閉合回路。檢測(cè)條件的標(biāo)準(zhǔn)為：浸泡在樣品溶液中的深度為10-15mm,并同時(shí)保證三個(gè)電極下表面處在溶液中的同一高度，不與杯壁和杯底接觸。三個(gè)電極的位置關(guān)系為：互不接觸，且三個(gè)電極中心間的距離大于10mm，呈等邊三角形放置。在上述標(biāo)準(zhǔn)下再通過電化學(xué)工作站中開路電位-時(shí)間法，利用傳感器在樣品溶液中電子轉(zhuǎn)移速率的差異來進(jìn)行不同樣品之間的開路電位值檢測(cè)。

采用本發(fā)明所述的PVC膜傳感器檢測(cè)牛肉味覺的步驟如下：

1.待測(cè)樣品預(yù)處理

1)取不同牛的眼肌進(jìn)行檢測(cè)，分別記錄樣品編號(hào)，每個(gè)樣品平行準(zhǔn)備三組；

2)除去牛肉的結(jié)締組織及肌外脂肪，均勻切成10×10×10mm大小的方塊，密封于保鮮袋中并置于80℃條件下水浴加熱，并在中心溫度達(dá)到70℃時(shí)開始計(jì)時(shí)，10min后取出冷卻，取出時(shí)保證保鮮袋密封無破損，牛肉汁均為加熱后從樣品中自然流出。冷卻后通過紗布三次過濾，再通過濾紙三次過濾得澄清牛肉汁，定容至30ml，確保牛肉汁澄清無固形物，密封后防塵無菌條件下保存?zhèn)溆茫?/p>

3)為使后續(xù)步驟合理簡(jiǎn)潔，將澄清牛肉汁編號(hào)保存，同時(shí)記錄相同牛眼肌的樣品編號(hào)；

2.PVC膜傳感器預(yù)處理及活化

1)參比電極

參比電極為標(biāo)準(zhǔn)232型飽和甘汞電極，使用前需要在飽和氯化鉀溶液中浸泡24h,確保甘汞電極在樣品檢測(cè)過程中的電位穩(wěn)定，浸泡后用去離子水沖洗干凈，取出后用氮?dú)獯蹈杀Ｗo(hù)待用，檢測(cè)之前要求保持參比電極表面無塵干燥；

2)對(duì)電極

對(duì)電極為鉑盤裸電極，長(zhǎng)度為80mm，一端為銅導(dǎo)線1，另一端為鉑盤5，銅導(dǎo)線1與鉑盤5由PVDF材料的電極外套2包裹。使用前為保證鉑盤5表面的光滑和清潔。相應(yīng)的處理方法為：

在25攝氏度條件下，用95％的乙醇和清水先后超聲清洗10min，氮?dú)獯蹈珊笥?000目粗砂紙除去擦痕及刮痕，然后再用更細(xì)的4000目砂紙打磨鉑盤5表面。打磨完成后需對(duì)電極進(jìn)行拋光，用50nm氧化鋁拋光粉在麂皮上畫圈打磨，氧化鋁拋光粉在打磨前用蒸餾水略微濕潤(rùn)形成漿狀。打磨完成后以對(duì)鉑盤5表面平滑光亮無劃痕為標(biāo)準(zhǔn)。

3)工作電極

工作電極為本發(fā)明所述的PVC膜電極，在檢測(cè)前保證電極表面干燥無塵。

4)電化學(xué)工作站

檢測(cè)的過程在標(biāo)準(zhǔn)CHI66D型電化學(xué)工作站上進(jìn)行，選用開路電位-時(shí)間法進(jìn)行，在檢測(cè)時(shí)保證環(huán)境安靜無噪音，所在區(qū)域環(huán)境噪聲低于10分貝。

3.利用PVC膜傳感器進(jìn)行電位檢測(cè)

1)所述的PVC膜傳感器檢測(cè)過程在電化學(xué)工作站進(jìn)行，利用所制備的PVC膜電極作為工作電極，鉑金裸電極作為對(duì)電極，飽和甘汞電極作為參比電極，構(gòu)成傳感器。分別與電化學(xué)工作站上的工作電極、對(duì)電極、參比電極夾具相連接。

2)接通電源后將三個(gè)電極浸入裝有牛肉汁的燒杯中，保持三個(gè)電極下表面同時(shí)處于液面下15mm處，三個(gè)電極呈等邊三角形放置，由電極臺(tái)架固定在豎直方向。

3)在檢測(cè)進(jìn)行中，保證傳感器的三個(gè)電極互不接觸，不與杯壁杯底接觸，利用chi660d軟件選用開路-時(shí)間電位法測(cè)定。待信號(hào)穩(wěn)定后用PVC膜傳感器測(cè)得牛肉汁的電位值。在對(duì)不同樣品檢測(cè)的間隔需對(duì)PVC膜傳感器的三個(gè)電極用去離子水清洗2min，并用濾紙擦干。

4.電位值與牛肉味覺品質(zhì)評(píng)價(jià)

應(yīng)用PVC膜傳感器對(duì)牛肉味覺品質(zhì)檢測(cè)所得數(shù)據(jù)可按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。本傳感器所研究的牛肉味覺根據(jù)牛肉的五味(酸甜苦咸鮮)、嫩度與柔軟度來進(jìn)行評(píng)價(jià)。

在電化學(xué)工作站所得開路電位值大于0.2000V時(shí)可認(rèn)為所檢測(cè)的牛肉味覺優(yōu)秀，具有明顯的鮮味，嫩度及柔軟度符合優(yōu)級(jí)牛肉標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)電位值越高表明牛肉中氨基酸含量越豐富，反應(yīng)出牛肉味覺更加突出。因此大于0.2000V的不同牛肉之間可根據(jù)其電位值的高低來判斷其味覺的優(yōu)劣。

當(dāng)電化學(xué)工作站的開路電位值低于0.2000V時(shí)可認(rèn)為所檢測(cè)的牛肉味覺一般或者較差。不具備或者具備較少牛肉的味覺特征。

實(shí)施例：

以下的實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

1.待測(cè)樣品預(yù)處理

1)牛肉為本發(fā)明所檢驗(yàn)的目標(biāo)樣品，取三頭不同牛的眼肌進(jìn)行檢測(cè)，分別記為A,B,C樣品，每個(gè)樣品平行測(cè)量三組；實(shí)施例用牛為中國(guó)吉林省長(zhǎng)春市皓月清真肉業(yè)股份有限公司提供的健康沃金黑牛，體質(zhì)量為400-550kg，月齡為30-36月，育肥6個(gè)月以上。按《牛肉等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/Y676-2003)要求的操作規(guī)程屠宰，屠宰后冷卻24h，取眼肌部位。

2)除去牛肉的結(jié)締組織及肌外脂肪，均勻切成10×10×10mm大小的方塊，密封于保鮮袋中并置于80℃條件下水浴加熱，并在中心溫度達(dá)到70℃時(shí)開始計(jì)時(shí)，10min后取出冷卻，取出時(shí)保證保鮮袋密封無破損，牛肉汁均為加熱后從樣品中自然流出。冷卻后通過紗布三次過濾，再通過濾紙三次過濾得澄清牛肉汁，定容至30ml，確保牛肉汁澄清無固形物，密封后防塵無菌條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

3)將澄清牛肉汁編號(hào)1-9保存，同時(shí)記錄下相同牛眼肌的樣品編號(hào)。A對(duì)應(yīng)編號(hào)為1,2,8；B對(duì)應(yīng)編號(hào)為3,4,6；C對(duì)應(yīng)編號(hào)為5,7,9。

2.PVC膜傳感器預(yù)處理及活化

按本發(fā)明所述對(duì)PVC膜傳感器的工作電極，對(duì)電極，參比電極進(jìn)行不同條件的活化?；罨筮B接至CHI660D電化學(xué)工作站(上海辰華公司)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3.利用PVC膜傳感器進(jìn)行電位檢測(cè)

所述的PVC膜傳感器檢測(cè)過程在電化學(xué)工作站進(jìn)行，利用本發(fā)明所制備的PVC膜電極作為工作電極，鉑金裸電極作為對(duì)電極，飽和甘汞電極作為參比電極，構(gòu)成傳感器。分別與電化學(xué)工作站上的工作電極，對(duì)電極，參比電極夾具相連接。接通電源后將三個(gè)電極浸入裝有牛肉汁的燒杯中，保持三個(gè)電極下表面同時(shí)處于液面下15mm處，三個(gè)電極呈等邊三角形放置，由電極臺(tái)架固定在豎直方向。在檢測(cè)進(jìn)行中，保證傳感器的三個(gè)電極互不接觸，不與杯壁杯底接觸。

在對(duì)不同樣品進(jìn)行檢測(cè)的過程中，用去離子水清洗并用濾紙擦干保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

所得電位值如表1：

表1 PVC膜電極開路電位值

4.電位值與牛肉味覺品質(zhì)評(píng)價(jià)

根據(jù)表1可知：1-9樣品的電位值均高于0.2000V，因此可以判斷本次選用的牛肉均為牛肉味覺優(yōu)秀的牛肉。具有良好的味覺特性，嫩度和柔軟度。且相同牛眼肌之間電位值接近，表明所制備的PVC膜式傳感器具有良好的穩(wěn)定性。不同牛眼肌之間電位值存在差值，表明PVC膜式傳感器具有良好的準(zhǔn)確性。

5.PVC膜傳感器準(zhǔn)確性的驗(yàn)證方法——感官評(píng)價(jià)

1)感官評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置按照GB/T 13868-2009構(gòu)建，檢驗(yàn)區(qū)設(shè)施顏色為中性色和淺灰色以免影響對(duì)被檢樣品顏色的評(píng)價(jià)，保持無氣味并提供均勻可調(diào)控的照明設(shè)施；

2)檢測(cè)期間應(yīng)控制噪聲，檢驗(yàn)區(qū)的溫度和相對(duì)濕度讓評(píng)價(jià)員感到舒適。

3)對(duì)樣品的評(píng)價(jià)過程參照GB/T 22210-2008進(jìn)行。挑選出12位受過訓(xùn)練的小組成員(7男5女)作為感官評(píng)定成員，經(jīng)體格檢查合格，其視覺、嗅覺、味覺及觸覺符合感官評(píng)定要求，并穿著無異味的工作服。

4)在感官評(píng)價(jià)前1h，每位成員需要先對(duì)感官面板進(jìn)行10次訓(xùn)練，達(dá)到熟悉認(rèn)知感官面板和味覺詞匯的程度后才可進(jìn)行正式評(píng)估。感官面板所評(píng)價(jià)的樣品是標(biāo)準(zhǔn)的味覺溶液。甜味用蔗糖定義，酸味用檸檬酸定義，咸味用氯化鈉定義，鮮味用谷氨酸鈉定義。

5)樣品評(píng)估的過程包括預(yù)估階段，是通過測(cè)試一種相關(guān)的牛肉樣品并達(dá)成口味相同共識(shí)的階段。在預(yù)估計(jì)階段之后進(jìn)行正式的感官評(píng)價(jià)，包括每次15min的品嘗階段，一共進(jìn)行三次，在評(píng)估下一個(gè)樣品之前，小組成員被要求用自來水漱口，并用無鹽餅干清洗味覺。評(píng)定的過程中，品評(píng)人員應(yīng)獨(dú)自打分，禁止相互交換意見。

感官評(píng)價(jià)每項(xiàng)指標(biāo)評(píng)分范圍為0～10分最后求和來確定每個(gè)樣品最后的得分。其中2分,5分,8分分別代表了“輕微”，“適度”，“強(qiáng)烈”的味覺。

所得感官評(píng)價(jià)結(jié)果為：12位感官評(píng)價(jià)員均一致認(rèn)為三種不同牛眼肌均具有優(yōu)秀的味覺品質(zhì)，具有良好的五味，嫩度和柔軟度。同時(shí)對(duì)A,B,C三個(gè)樣品的判定結(jié)果為C優(yōu)于A優(yōu)于B。與PVC膜式傳感器的檢測(cè)結(jié)果相符，即C樣品的電位值高于A樣品的電位值高于B樣品的電位值。

因此得出結(jié)論：本發(fā)明能夠用于牛肉味覺的快速檢測(cè)，且具有準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)，滿足了現(xiàn)代食品快速檢測(cè)的要求。