1.一種固相萃取-比色法測定西洋參中總皂甙的方法,其特征在于,步驟如下:
(1)樣品前處理:精密稱取0.5g樣品,置于50mL容量瓶中,按料液比1g:30mL加水溶解,60℃超聲30min,放至室溫,純水定容至50mL,搖勻,放置,作為樣品溶液;
(2)固相萃?。簩滔噍腿≈M(jìn)行活化處理,樣品溶液上活化處理后的固相萃取柱,依次用25mL水、25mL質(zhì)量濃度70%乙醇進(jìn)行洗脫,收集質(zhì)量濃度70%乙醇洗脫液于50mL離心管中,將收集的洗脫液置于蒸發(fā)皿中,60℃下水浴揮干;
(3)比色法測定:在步驟(2)所得已揮干的洗脫液中準(zhǔn)確加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液,使殘渣全部溶解,再加0.8mL高氯酸,充分混勻后精密吸取0.5mL于10mL具塞離心管中,60℃水浴上加熱15min,冰浴冷卻后,準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0mL,搖勻后,以1cm比色皿于560nm波長處測定吸光度;
(4)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算結(jié)果:以人參皂苷Re配置標(biāo)準(zhǔn)溶液,精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液20μL、40μL、60μL、80μL、100μL、200μL,于10mL具塞離心管中,40-50℃熱風(fēng)揮干后,按照步驟(3)的方法在560nm處分別測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),人參皂苷Re質(zhì)量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,將步驟(3)測得的樣品吸光度代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,計算獲得樣品中總皂甙的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中所述活化處理為:控制流速在2.5mL/min,用25mL質(zhì)量濃度70%乙醇沖洗后用25mL純水淋洗。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟(2)中所述洗脫速度控制在0.8mL/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟(2)中所述固相萃取型號為:Agela Technologies,CleanertPS/AL,規(guī)格:填料1g,柱體積6mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟(2)樣品溶液上活化處理后的固相萃取柱的上樣速度控制在1mL/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟(3)中標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法為:精密稱取干燥至恒重的人參皂苷Re 20mg置于10mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,步驟(3)中標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:y=5.0546x-0.0126,其中X為人參皂苷Re質(zhì)量,Y為吸光度。