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與特發(fā)性男性不育相關(guān)的精漿代謝小分子標志物及其檢測方法和應用與流程

文檔序號:12268164閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.與特發(fā)性男性不育相關(guān)的精漿代謝小分子標志物,其特征在于該標志物為精漿代謝小分子乙酰肉堿和/或色氨酸。

2.權(quán)利要求1所述的精漿代謝小分子標志物在制備特發(fā)性男性不育診斷或監(jiān)測試劑盒中的應用。

3.一種診斷或監(jiān)測特發(fā)性男性不育的試劑盒,其特征在于該試劑盒含有檢測精漿代謝小分子乙酰肉堿和/或色氨酸的試劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒,其特征在于該試劑盒含有采用UPLC-Q exactiveMS方法檢測精漿代謝小分子乙酰肉堿和/或色氨酸的試劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于該試劑盒含有下列試劑:

乙酰肉堿和/或色氨酸標準品;

內(nèi)標A:肌酐、纈氨酸、煙酸、胸腺嘧啶、戊二酸、L-苯基丙胺酸、N-乙酰對氨基酚、馬尿酸中一種或多種物質(zhì)的同位素內(nèi)標;

內(nèi)標B:十五烷酸的同位素內(nèi)標;

內(nèi)標C:二十四烷酸的同位素內(nèi)標。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒,其特征在于該試劑盒還含有:

Hypersil GOLD C18色譜柱;

試劑A:沉淀蛋白用,含100%甲醇;

試劑B:流動相用,含0.1%的甲酸的水;

試劑C:流動相用,含0.1%的甲酸的乙腈;

試劑D:復溶用,超純水。

7.一種檢測如權(quán)利要求1所述的與特發(fā)性男性不育相關(guān)的精漿代謝小分子標志物的方法,其特征在于該方法采用UPLC-Q exactive MS方法,檢測精漿中代謝小分子乙酰肉堿和/或色氨酸的含量。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于該方法中:

一、液相條件:

液相色譜柱為Hypersil GOLD C18色譜柱,柱溫為40℃;

流動相A為含0.1%甲酸的水,流動相B為含0.1%甲酸的乙腈,流速為400μL/min;

儀器梯度為:0-3min 1%B,3-10min 1%到99%B,10-13min 99%B,13-13.1min 99%到1%B,13.1-17min 1%B;

進樣方式:體積10μl;

二、質(zhì)譜條件

采用加熱電噴霧電離方式(HESI)進行分析,正離子模式噴霧電壓:3.5kV;負離子模式噴霧電壓:2.5kV;兩種模式下毛細管溫度:250℃,加熱器溫度:425℃,鞘氣氣流:50AU,輔助氣氣流:13AU,反吹氣氣流:0AU;透鏡電壓:60V;采用全掃模式,掃描范圍:70到1050m/z;分辨率:70000。

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