本公開內(nèi)容涉及用于診斷胰腺癌的組合物和試劑盒，其包含用于測量某一標記物基因的蛋白或mRNA表達水平的試劑，所述試劑可用于確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性，以及涉及使用所述組合物或試劑盒診斷胰腺癌的方法。
背景技術(shù)：
：目前，在人類主要疾病中具有代表性的是癌癥。關(guān)于癌癥的研究正在積極進行，特別是在高發(fā)癌癥(包括肺癌、肝癌、胃癌等)領(lǐng)域，但是對低發(fā)癌癥(包括食管癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌等)進行的研究較少。特別地，胰腺癌在其早期通常不引起可識別的癥狀，并且該疾病通常由于其癥狀輕微(例如疼痛、體重減輕等)，直到疾病從胰腺本身擴散至全身才被診斷出。此外，胰腺癌的存活率通常很低，因此定期診斷非常重要。在大多數(shù)情況下，胰腺癌的臨床癥狀是緩慢暴露的，并且胰腺癌患者最常出現(xiàn)虛弱、厭食和體重減輕。已發(fā)現(xiàn)胰腺癌的五年存活率是1-4％，中位生存期是5個月，其非常致命并且是人類癌癥中預(yù)后最差的。診斷后，發(fā)現(xiàn)80-90％的人不能通過有希望的治愈性切除術(shù)治療。這是通常預(yù)后非常差的主要原因之一。主要使用化學(xué)療法治療胰腺癌。因此，與其他癌癥相比，迫切需要胰腺癌的早期診斷方法。盡管目前已知一些抗癌試劑(包括5-氟尿嘧啶、吉西他濱和特羅凱)可用于治療胰腺癌，但是它們表現(xiàn)出非常低的療效和對癌癥治療的僅15％左右的反應(yīng)率。這些情況表明，迫切需要更有效的胰腺癌的早期診斷和治療，由此可改善預(yù)后。在本文中，用于胰腺癌的前期病變(即胰腺癌的前期)的適合的診斷和治療對治療結(jié)果非常重要。根據(jù)血液學(xué)檢驗(CA19-9)、使用X-射線造影劑的胃腸道造影術(shù)和十二指腸造影術(shù)、經(jīng)皮膚和肝的膽管造影術(shù)，或內(nèi)窺鏡逆行胰膽管造影術(shù)來確定胰腺癌或其前期病變的診斷。可通過這樣的方法檢測許多疾病病變，但是目前最優(yōu)選的是超聲波掃描術(shù)和計算機斷層掃描術(shù)。更謹慎的活檢方法可產(chǎn)生相對更精確的結(jié)果。上述診斷方法由于其通常是精確的而被使用，但是，受試者不愿經(jīng)受檢查，因為這些診斷方法是令人不舒服的或疼痛的。因此，需要方便并快速診斷胰腺癌或其前期病變的方法。目前，利用影像學(xué)診斷技術(shù)(包括腹部超聲(US)、計算機斷層掃描(CT)、磁共振成像(MRI)等)的廣泛醫(yī)學(xué)檢查已能夠經(jīng)常在胰腺或胰腺周圍發(fā)現(xiàn)惡性病變，即使它們傾向于在除胰腺以外的其他器官中檢測病變。通過影像學(xué)診斷測量顯示為囊腫的病變是在臨床上重要的，因為它們在病理學(xué)特性方面可能會涵蓋從良性病變到癌前病變和惡性病變的各種疾病。盡管在影像學(xué)診斷(例如，CT、MRI等)方面有許多進展，但在手術(shù)之前準確地區(qū)分出具有各種病理學(xué)特性(從良性病變到癌前病變和惡性病變)的胰腺的囊腫病變?nèi)匀皇抢щy的。因此，確定胰腺中的囊腫病變是否為易于惡化轉(zhuǎn)變的腫瘤病變，以及如果有可能惡化轉(zhuǎn)變，其是否仍處于癌前還是已是惡性腫瘤，這些在臨床學(xué)上是重要的。韓國專利第10-0819122號和未經(jīng)審查的韓國專利申請公開第2012-0082373號公開了使用多種胰腺癌標記物(包括母系蛋白、甲狀腺素轉(zhuǎn)運蛋白和分層蛋白)的技術(shù)。另外，未經(jīng)審查的韓國專利申請公開第2009-0003308號描述了通過檢測受試者血液樣品中REG4的表達水平來診斷胰腺癌。未經(jīng)審查的韓國專利申請公開第2012-0009781號描述了測量受試者癌癥組織中XISTRNA表達水平的分析方法，由此可提供受試者胰腺癌的發(fā)病的信息。未經(jīng)審查的韓國專利申請公開第2007-0119250號公開了新的LBFL313基因家族，其在正常胰腺組織和胰腺癌組織之間以不同模式表達。美國專利申請第2011/0294136A1號公開了使用生物標記物(包括角蛋白8蛋白)的胰腺癌的診斷方法。但是，不同標記物之間的診斷效率和精確度大大不同。因此，迫切需要非常有效的標記物和使用該標記物的診斷方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：技術(shù)問題本公開內(nèi)容的一個目的是提供胰腺癌的診斷標記物，使用該診斷標記物可在早期方便地診斷出胰腺癌的發(fā)病、發(fā)病的可能性或風(fēng)險性。本公開內(nèi)容的另一個目的是提供胰腺癌的診斷組合物，使用該診斷組合物可在早期方便地診斷出胰腺癌的發(fā)病、發(fā)病的可能性或風(fēng)險性。本公開內(nèi)容的又一個目的是提供用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含所述組合物。本公開內(nèi)容的再一個目的是提供使用診斷組合物或試劑盒診斷胰腺癌或提供關(guān)于胰腺癌的診斷結(jié)果的信息的方法。本公開內(nèi)容的另一個目的是使用診斷組合物或試劑盒確定受試者中胰腺癌的存在或惡性程度的方法。本公開內(nèi)容的另一個目的是提供診斷標記物用于在早期診斷出胰腺癌的發(fā)病、發(fā)病可能性或風(fēng)險性的用途。技術(shù)方案為實現(xiàn)以上目的，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌或其前期病變的組合物，其包含用于測量胰腺癌的某種診斷標記物基因的蛋白或mRNA表達水平的試劑；用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含所述組合物；以及確定胰腺癌患者或疑似患有胰腺癌的受試者中胰腺癌的存在或惡性程度的方法。所述組合物或試劑盒還可包含適用于分析的其他成分、溶液或裝置。在本公開內(nèi)容的一些實施方案中，胰腺癌的診斷是從正常組中選擇性地區(qū)分出胰腺癌，在各種癌癥中選擇性地檢測出胰腺癌，或在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷出胰腺癌。具體而言，用于診斷胰腺癌的組合物或試劑盒可用于從正常組中檢測或區(qū)分出胰腺癌患者組，在1期或2期中診斷出胰腺癌(PDAC)——使用常規(guī)方法進行檢測是困難的，從各種不同的癌癥(例如，乳腺癌、結(jié)直腸癌和/或甲狀腺癌)或除癌癥以外的各種胰腺疾病(例如，胰腺炎和膽囊炎)中選擇性地區(qū)分出胰腺癌，或者甚至在CA19-9水平小于37U/ml的受試者(而正常受試者CA19-9水平小于36U/ml)或具有胰腺病癥(例如，胰腺炎或膽囊炎)的患者中診斷出胰腺癌。所述標記物基因可為三種以上的標記物基因的結(jié)合物。該結(jié)合物可包含：(a)CA19-9(糖類抗原19-9)；(b)LRG1(富含亮氨酸的α-2-糖蛋白1，LRG1)；以及(c)選自TTR(甲狀腺素轉(zhuǎn)運蛋白，ATTR，前白蛋白，TBPA)、C1R(補體C1r亞成分前體)、CLU(叢生蛋白前蛋白原)及KLKB1(血漿激肽釋放酶蛋白)的至少一種。根據(jù)一些實施方案，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含用于診斷胰腺癌的組合物。根據(jù)一些實施方案，本公開內(nèi)容提供了診斷受試者中的胰腺癌或提供關(guān)于胰腺癌的診斷結(jié)果的信息的方法，其包括：從待進行胰腺癌發(fā)病診斷的受試者中獲得樣品；測量包含以下的胰腺癌標記物的各蛋白或mRNA表達水平，所述標記物包括：(a)CA19-9、(b)LRG1以及(c)至少一種選自TTR、C1R、CLU和KLKB1的標記物；將所述胰腺癌標記物的表達水平與相應(yīng)的正常對照的表達水平分別進行比較；以及基于比較結(jié)果，確定受試者中胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性。在確定步驟中，用于確定胰腺癌易于高發(fā)的條件如下：在CA19-9的蛋白表達水平或編碼CA19-9的基因的mRNA表達水平方面，在LRG1的蛋白表達水平或編碼LRG1的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者高于正常對照；并且在TTR的蛋白表達水平或編碼TTR的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者低于正常對照；在C1R的蛋白表達水平或編碼C1R的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者高于正常對照；在CLU的蛋白表達水平或編碼CLU的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者低于正常對照；或在KLKB1的蛋白表達水平或編碼KLKB1的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者低于正常對照。根據(jù)一些實施方案，本公開內(nèi)容提供了用于選擇性地診斷高危IPMN的組合物，其包含用于測量包含LRG1(富含亮氨酸的α-2-糖蛋白1，LRG1)的IPMN標記物的表達水平的試劑。所述IPMN標記物還可包含選自CA19-9(糖類抗原19-9)、TTR、C1R、CLU及KLKB1的至少一種。例如，所述IPMN標記物可為LRG1與選自TTR、C1R、CLU和KLKB1的至少一種的結(jié)合物，或LRG1與選自TTR、C1R、CLU和KLKB1的至少兩種的結(jié)合物。在具體的實施方案中，本公開內(nèi)容提供了用于選擇性診斷高危IPMN的組合物，其包含用于測量IPMN標記物蛋白的表達水平或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達水平的試劑，所述IPMN標記物蛋白包含CLU(叢生蛋白前蛋白原)和選自LRG1(富含亮氨酸α-2-糖蛋白1，LRG1)、CA19-9(糖類抗原19-9)、TTR(甲狀腺素轉(zhuǎn)運蛋白，ATTR，前白蛋白，TBPA)、C1R(補體C1r亞成分前體)及KLKB1(血漿激肽釋放酶蛋白)的至少一種。例如，所述IPMN標記物是CLU與選自LRG1、CA19-9、TTR、C1R和KLKB1的至少一種的結(jié)合物，或LRG1與選自LRG1、CA19-9、TTR、C1R和KLKB1的至少兩種的結(jié)合物。在一些實施方案中，本公開內(nèi)容提供用于診斷高危IPMN的方法，其包括：測量受試者樣品中的IPMN標記物蛋白的表達水平，或編碼所述標記物蛋白的基因的mRNA表達水平，將所測得的受試者樣品和對照樣品的各個標記物的表達水平進行比較；以及基于表達水平的比較結(jié)果，確定受試者中高危IPMN的發(fā)病風(fēng)險。有益效果如上所述，根據(jù)本公開內(nèi)容的胰腺癌的診斷標記物可用于在早期預(yù)測或診斷胰腺癌的發(fā)病、發(fā)病的可能性及嚴重性。所述標記物還可用于胰腺癌腫瘤發(fā)生的研究。此外，本公開內(nèi)容的診斷方法允許以無創(chuàng)性(non-invasive)方式在樣品(例如血液)中方便地檢測胰腺癌。附圖說明圖1是表示對照組和胰腺癌患者組中的CA19-9蛋白的表達水平的圖，如通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)所測得的。圖2是表示對照組和胰腺癌患者組中的LRG1蛋白的表達水平的圖，如通過MRM試驗所測得的。圖3是表示對照組和胰腺癌患者組中的TTR蛋白的表達水平的圖，如通過MRM試驗所測得的。圖4是表示對照組和胰腺癌患者組中的C1R蛋白的表達水平的圖，如通過MRM試驗所測得的。圖5是表示對照組和胰腺癌患者組中的CLU蛋白的表達水平的圖，如通過MRM試驗所測得的。圖6是表示對照組和胰腺癌患者組中的KLKB1蛋白的表達水平的圖，如通過MRM試驗所測得的。圖7是表示對照組和胰腺癌患者組中的LRG1蛋白的表達水平的圖，如通過ELISA所測得的。圖8是表示對照組和胰腺癌患者組中的TTR蛋白的表達水平的圖，如通過ELISA所測得的。圖9是表示對照組和胰腺癌患者組中的CLU蛋白的表達水平的圖，如通過ELISA所測得的。圖10是表示對照組和胰腺癌患者組中的TTR蛋白的表達水平的圖，如通過免疫比濁試驗所測得的。圖11示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫試驗(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。圖12示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。圖13示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。圖14示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。圖15示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。圖16示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。圖17示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。圖18示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。圖19示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。分別通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)、ELISA及免疫比濁測定對CA19-9蛋白、LRG1蛋白及TTR蛋白進行定量分析。圖20示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。分別通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)、ELISA及免疫比濁測定對CA19-9蛋白、LRG1蛋白及TTR蛋白進行定量分析。圖21示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。分別通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)、ELISA及免疫比濁測定對CA19-9蛋白、LRG1蛋白及TTR蛋白進行定量分析。圖22示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。分別通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)、ELISA及免疫比濁測定對CA19-9蛋白、LRG1蛋白及TTR蛋白進行定量分析。圖23示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。圖24示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。圖25示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。圖26示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。圖27示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。圖28示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。圖29示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。圖30示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。圖31示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。圖32示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。圖33示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。圖34示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。圖35示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和KLKB1進行MRM定量分析。圖36示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于診斷早期胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和KLKB1進行MRM定量分析。圖37示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于從其他癌癥中區(qū)分出胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和KLKB1進行MRM定量分析。圖38示出了將三種標記物CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物與單獨的CA19-9及兩種標記物CA19-9和TTR的結(jié)合物用于在CA19-9水平小于37U/ml的受試者中診斷胰腺癌的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。圖39示出了將LRG1與單獨的CA19-9用于診斷高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1進行MRM定量分析。圖40至44示出了將兩種蛋白的結(jié)合物(LRG1+CA19-9)、(LRG1+TTR)、(LRG1+CLU)、(LRG1+C1R)或(LRG1+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，對而LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖45至48示出了將三種蛋白的結(jié)合物(LRG1+CA19-9+TTR)、(LRG1+CA19-9+CLU)、(LRG1+CA19-9+C1R)或(LRG1+CA19-9+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖49至54示出了將三種蛋白的結(jié)合物(LRG1+TTR+CLU)、(LRG1+TTR+C1R)、(LRG1+TTR+KLKB1)、(LRG1+CLU+C1R)、(LRG1+CLU+KLKB1)或(LRG1+C1R+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖55至57示出了將兩種蛋白的結(jié)合物(CLU+CA19-9)、(CLU+TTR)或(CLU+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖58至63示出了將三種蛋白的結(jié)合物(CLU+CA19-9+TTR)、(CLU+CA19-9+C1R)、(CLU+CA19-9+KLKB1)、(CLU+TTR+C1R)、(CLU+TTR+KLKB1)或(CLU+C1R+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖64示出了將LRG1與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1進行MRM定量分析。圖65至69示出了將兩種蛋白的結(jié)合物(LRG1+CA19-9)、(LRG1+TTR)、(LRG1+CLU)、(LRG1+C1R)或(LRG1+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖70至73示出了將三種蛋白的結(jié)合物(CA19-9+LRG1+TTR)、(CA19-9+LRG1+C1R)、(CA19-9+LRG1+CLU)或(CA19-9+LRG1+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖74至79示出了將三種蛋白的結(jié)合物(LRG1+TTR+CLU)、(LRG1+TTR+C1R)、(LRG1+TTR+KLKB1)、(LRG1+CLU+C1R)、(LRG1+CLU+KLKB1)或(LRG1+C1R+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖80至83示出了將兩種蛋白的結(jié)合物(CLU+CA19-9)、(CLU+TTR)、(CLU+C1R)或(CLU+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖84至89示出了將三種蛋白的結(jié)合物(CLU+CA19-9+TTR)、(CLU+CA19-9+C1R)、(CLU+CA19-9+KLKB1)、(CLU+TTR+C1R)、(CLU+TTR+KLKB1)或(CLU+C1R+KLKB1)與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行MRM定量分析。圖90示出了將LRG1與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1進行ELISA。圖91至93示出了將兩種蛋白的結(jié)合物(LRG1+CA19-9)、(LRG1+TTR)或(LRG1+CLU)與單獨的CA19-9用于診斷出與低危IPMN區(qū)分的高危IPMN的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行ELISA。圖94至97示出了將(LRG1+CA19-9+TTR)、(LRG1+CA19-9+CLU)、(LRG1+CA19-9+TTR+CLU)或(LRG1+TTR+CLU)組合標記物與單獨的CA19-9用于診斷出將高危IPMN與低危IPMN區(qū)分的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行ELISA。圖98至100示出了將(CLU+CA19-9)、(CLU+TTR)或(CLU+CA19-9+TTR)組合標記物與單獨的CA19-9用于將高危IPMN與低危IPMN區(qū)分的性能(AUC和檢測靈敏度)進行比較。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1、TTR、CLU、C1R和KLKB1進行ELISA。具體實施方式本文所用的術(shù)語“胰腺癌”意指胰腺中的細胞產(chǎn)生的癌癥(癌)或惡性腫瘤。有多種類型的胰腺腫瘤，從可通過手術(shù)切除而治愈的良性腫瘤到預(yù)后非常差的惡性腫瘤。良性腫瘤、惡性腫瘤以及轉(zhuǎn)變成惡性腫瘤的良性腫瘤均包括在胰腺腫瘤的范圍內(nèi)。至于胰腺的惡性腫瘤，這類腫瘤的90％是胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)。因此，胰腺導(dǎo)管腺癌在狹義上被稱為胰腺癌。胰腺癌的其他實例包括神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤和腺泡細胞瘤。此外，胰腺腫瘤可為囊性腫瘤的形式，如由漿液性囊性腫瘤、黏液性囊性腫瘤、胰腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀黏液腫瘤(IPMN)和固體假乳頭狀瘤代表性地表示。具體地，胰腺癌可以是胰腺導(dǎo)管腺癌或IPMN。胰腺導(dǎo)管腺癌可由于各種原因而產(chǎn)生。例如，胰腺導(dǎo)管腺癌可能衍生自IPMN或可能會與IPMN無關(guān)而產(chǎn)生?；蛘?，胰腺導(dǎo)管腺癌可排除IPMN衍生的胰腺導(dǎo)管腺癌。根據(jù)WHO的腫瘤分類，IPMN被定義為上皮細胞在主胰管或其分支胰管內(nèi)以乳頭狀形式生長而成的腫瘤(瘤狀物)，其特征在于腫瘤細胞產(chǎn)生粘稠液體并從胰管擴散至囊腫。IPMN具有包括以下的形貌特性：主胰管的彌漫型擴張、粘液或腫瘤塊的非典型充盈缺損、分支胰管的囊性擴張、乳頭孔的擴張，以及粘蛋白通過乳頭孔大量滲出。在組織學(xué)上，IPMN的特征是產(chǎn)生粘蛋白的上皮細胞在胰管內(nèi)的乳頭狀增殖，并且表現(xiàn)出從良性腫瘤到惡性腫瘤的廣譜的疾病。根據(jù)腫瘤的部位和病變的范圍，IPMN可分為三種在臨床上不同的亞型：主胰管型、分支胰管型及混合型。確定IPMN預(yù)后的因素包括侵襲性、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管浸潤、組織學(xué)發(fā)現(xiàn)及切除邊緣上的組織學(xué)發(fā)現(xiàn)。尤其，最重要的是侵襲性。IPMN在侵襲性癌癥發(fā)生之前是一種可治愈的疾病，但在出現(xiàn)侵襲后剩余胰腺或額外胰腺組織中的復(fù)發(fā)率高達50-90％。由于IPMN甚至在治愈性切除后還有可能在剩余胰腺中復(fù)發(fā)，因此需要長期跟蹤，并采取間歇性適當治療來增加存活率。因此，IPMN的惡性評估對于確定隨后的預(yù)后和治療方法非常重要。通常，IPMN的惡性程度由手術(shù)后的微觀組織檢查按遞升順序分為低度非典型增生、中度非典型增生、高度非典型增生以及與侵襲性癌相關(guān)的IPMN。浸入鄰近基質(zhì)中的侵襲性癌可為導(dǎo)管腺癌或黏液非囊性癌(膠樣癌)的形式，它們均是胰腺癌中最常見的形式。在本公開內(nèi)容中，提供了方法、組合物以及試劑盒，其用于將IPMN區(qū)分為高度非典型增生和侵襲型(例如，惡性亞型或高危IPMN)，以及低度和中度非典型增生(例如，低危IPMN)。根據(jù)本公開內(nèi)容，與胰腺癌相關(guān)的的標記物可用于區(qū)分高危IPMN與低危IPMN。此外，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含胰腺癌的診斷組合物。具體地，例如，所述試劑盒可為RT-PCR試劑盒、DNA芯片試劑盒、ELISA試劑盒、蛋白質(zhì)芯片試劑盒、快速試劑盒、或MRM(多反應(yīng)監(jiān)測)試劑盒。本文所用的術(shù)語“診斷”旨在涵蓋確定受試者對某種疾病或病癥的易感性、確定受試者是否患有某種疾病或病癥、確定患有某種疾病或病癥的受試者的預(yù)后(例如鑒定癌癥的轉(zhuǎn)移前狀態(tài)或轉(zhuǎn)移狀態(tài)、確定癌癥的階段或癌癥對治療的響應(yīng))或治療度量(therametrics)(例如，監(jiān)測受試者的狀態(tài)以提供關(guān)于治療功效的信息)。具體地，本文所用的診斷意指確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性(風(fēng)險性)。本文所用的術(shù)語“標記物”、“生物標記物”或“診斷標記物”意指允許區(qū)分正常和疾病狀態(tài)、或能夠使治療結(jié)果被預(yù)測或客觀測量的標記。具體地，在與胰腺癌相關(guān)的上下文中，標記物意指在患胰腺癌或有胰腺癌發(fā)病風(fēng)險的受試者中，相比于正常對照(未患胰腺癌的受試者)，其蛋白或基因表達水平顯著升高或降低的有機生物分子，例如多肽或核酸(例如mRNA等)、脂質(zhì)、糖脂、糖蛋白、糖(單糖、二糖、寡糖等)等。本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的組合物，其包含：(1)用于測量CA19-9(糖類抗原19-9)的蛋白或mRNA表達水平的試劑，(2)用于測量LRG1(富含亮氨酸的α-2-糖蛋白1)的蛋白或mRNA表達水平的試劑，以及(3)用于測量至少一種選自以下的標記物的蛋白或mRNA表達水平的試劑：TTR(甲狀腺素轉(zhuǎn)運蛋白，ATTR，前白蛋白，TBPA)、C1R(補體C1r亞成分前體)、CLU(叢生蛋白前蛋白原)以及KLKB1(血漿激肽釋放酶蛋白)。利用至少三種不同標記物基因(例如，(a)CA19-9；(b)LRG1；以及(c)選自TTR、C1R、CLU和KLKB1中的至少一種)的結(jié)合物，本公開內(nèi)容可有效地診斷受試者的胰腺癌發(fā)病或發(fā)病的可能性。本公開內(nèi)容中可用作胰腺癌診斷標記物的CA19-9蛋白通常在確定消化系統(tǒng)癌癥預(yù)后中用作腫瘤標記物。作為適用于本公開內(nèi)容的另一個胰腺癌診斷標記物，LRG1蛋白參與了與子宮內(nèi)膜癌及肺癌的發(fā)病相關(guān)的血管生成。LRG1可為NCBI登錄號#NP_443204.1。可用于本公開內(nèi)容的胰腺癌的其他診斷標記物可為選自以下的至少一種：TTR、C1R、CLU和KLKB1。TTR是一種具有同源四聚體結(jié)構(gòu)(每個亞基由127個氨基酸殘基組成)的血清蛋白，并且作為甲狀腺激素的腦脊液載體發(fā)揮作用。所述蛋白與阿爾茨海默病、乳腺癌、卵巢癌和胃癌的發(fā)病有關(guān)。CIR——是在補體系統(tǒng)的補體中首個發(fā)現(xiàn)的補體——部分地負責機體免疫，并與阿爾茨海默病和腎癌的發(fā)病有關(guān)。CLU用于阻止血液中的蛋白凝聚(coagulation)，并且與阿爾茨海默病和肺癌有關(guān)。KLKB參與血液凝聚，并且與高血壓和肺癌有關(guān)。在本公開內(nèi)容具體的一些實施方案中，TTR可為NCBI登錄號#NP_000362.1，C1R可為NCBI登錄號#NP_001724.3，CLU可為NCBI登錄號#NP_001822.3，以及KLKB1可為NCBI登錄號#NP_000883.2。發(fā)明人以表1中所示的方式，對比健康對照者的血清樣品，分析了患有胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)、胰腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀黏液腫瘤(IPMN)或慢性膽囊炎患者的血清樣品，并最終建立了CA19-9、LRG1與TTR、C1R、CLU及KLKB1中至少一種的結(jié)合物的功效。[表1]在胰腺癌的情況下，本文所用的術(shù)語“測量蛋白表達水平”意指檢測和鑒定生物樣品中胰腺癌的診斷標記物(蛋白)或編碼所述標記物的基因的存在和表達水平。用于測量或比較分析蛋白的方法的實例包括，但不限于，蛋白芯片測定、免疫測定、配體結(jié)合測定、MALDI-TOF(基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜)、SELDI-TOF(表面增強激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜)、放射免疫測定、放射免疫擴散、雙向免疫擴散(Ouchterlonyimmunodiffusion)、火箭免疫電泳、免疫組化染色、補體結(jié)合試驗、2-D電泳、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC-MS/MS)、蛋白質(zhì)印跡法及ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)。在根據(jù)本公開內(nèi)容用于診斷胰腺癌的組合物中，用于測量CA19-9、LRG1、TTR、C1R、CLU或KLKB1的蛋白表達水平的試劑可包含可特異性結(jié)合至蛋白CA19-9、LRG1、TTR、C1R、CLU或KLKB1的抗體、寡肽、配體、PNA(肽核酸)或適體。本文所用的術(shù)語“抗體”是指特異性結(jié)合抗原以引發(fā)抗原-抗體反應(yīng)的物質(zhì)。對于本公開內(nèi)容的目的，術(shù)語“抗體”意指特異性結(jié)合至CA19-9蛋白、LRG1蛋白、TTR蛋白、C1R蛋白、CLU蛋白或KLKB1蛋白的抗體。落入本公開內(nèi)容的抗體范圍的是多克隆抗體、單克隆抗體和重組抗體。這些抗體可使用本領(lǐng)域熟知的技術(shù)容易地制得。例如，如本領(lǐng)域中熟知的，可通過將作為抗原的胰腺癌標記物注入動物中并從所述動物獲得含有抗體的血清而制備多克隆抗體。多克隆抗體可使用任何動物(例如，山羊、兔、綿羊、猴、馬、豬、牛、狗等)而制得。單克隆抗體可通過雜交瘤方法(Kohler和Milstein(1976)EuropeanJournalofImmunology6：511-519)，或噬菌體抗體庫技術(shù)(Clackson等人，Nature，352：624-628，1991；Marks等人，J.Mol.Biol.，222：58，1-597，1991)獲得。所述抗體可使用凝膠電泳、透析、鹽沉淀、離子交換層析、親和層析等來進行分離和純化。此外，適用于本公開內(nèi)容的抗體可以是由兩條全長輕鏈和兩條全長重鏈組成的完整抗體，或是完整抗體分子的功能片段。術(shù)語抗體分子的“功能片段”意指保留抗體結(jié)合功能的片段，例如Fab、F(ab′)、F(ab′)2及Fv。如本文所用的術(shù)語“PNA(肽核酸)”是指與DNA或RNA相似的人工合成的聚合物，1991年由Nielsen、Egholm、Berg和Buchardt(丹麥哥本哈根大學(xué))教授首次引入。DNA具有磷酸-核糖骨架，而PNA的骨架由通過肽鍵連接的重復(fù)的N-(2-氨基乙基)-甘氨酸單元構(gòu)成。由于這種結(jié)構(gòu)，PNA顯著增強DNA或RNA的結(jié)合親合性及穩(wěn)定性，因此有效地用于分子生物學(xué)研究、診斷和反義療法。對于PNA的詳細說明，可參考文獻[NielsenPE，EgholmM，BergRH，BuchardtO(1991年12月).″Sequence-selectiverecognitionofDNAbystranddisplacementwithathymine-substitutedpolyamide″.Science254(5037)：1497-1500]。本文所用的“適體”是結(jié)合至特定靶分子的寡核苷酸或肽分子。對于適體的詳細說明，可參考文獻[BockLC等人，Nature355(6360)：5646(1992)；Hoppe-SeylerF，ButzK″Peptideaptamers：powerfulnewtoolsformolecularmedicine″.JMolMed.78(8)：42630(2000)；CohenBA，ColasP，BrentR.″Anartificialcell-cycleinhibitorisolatedfromacombinatoriallibrary″.ProcNatlAcadSciUSA.95(24)：142727(1998)]。在胰腺癌的情況下，本文所用的術(shù)語“測量mRNA表達水平”意指檢測和鑒定生物樣品中編碼診斷標記物(蛋白)的基因的mRNA的存在和表達水平。在本公開內(nèi)容中，可用于測量mRNA表達水平的分析方法的實例包括反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)、競爭性RT-PCR、實時RT-PCR、核糖核酸酶保護測定(RPA)、RNA印跡法和DNA芯片，但不限于此。在根據(jù)本公開內(nèi)容的用于診斷胰腺癌的組合物中，用于測量編碼CA19-9、LRG1、TTR、C1R、CLU或KLKB1的基因的mRNA表達水平的試劑包含與編碼CA19-9、LRG1、TTR、C1R、CLU或KLKB1的基因的mRNA特異性結(jié)合的引物、探針或反義核苷酸。關(guān)于CA19-9、LRG1、TTR、C1R、CLU或KLKB1蛋白的信息可從UniProt獲得，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可基于該信息設(shè)計與編碼所述蛋白的基因的mRNA特異性結(jié)合的引物、探針或反義核苷酸。如本文所用的術(shù)語“引物”是識別靶基因序列的短核酸序列的鏈，其包括一對正反向引物。具體地，所述”引物”包括一對提供特異性和靈敏度的分析結(jié)果的引物。引物被認為在用于擴增靶基因序列時提供高度特異性，但并不引起與靶基因序列不一致或不互補的非靶序列的擴增。本文所用的術(shù)語“探針”是指特異性結(jié)合至樣品中待檢測的靶標的物質(zhì)。通過所述結(jié)合，探針可確定樣品中靶標的存在。只要它通常用于本領(lǐng)域中，任何探針均可用于本公開內(nèi)容。特別地，所述探針可以是PNA(肽核酸)、LNA(鎖核酸)、肽、多肽、蛋白質(zhì)、RNA或DNA，最優(yōu)選PNA。具體而言，所述探針是可來自生物或可在活體外合成的生物材料或其模擬物。例如，所述探針可以是酶、蛋白、抗體、微生物、動物或植物細胞或器官、神經(jīng)元、DNA或RNA。所述DNA可包括cDNA、基因組DNA和寡核苷酸?；蚪MRNA、mRNA和寡核苷酸也可落入所述RNA的范圍內(nèi)。所述蛋白的實例包括抗體、抗原、酶和肽。本文所用的術(shù)語“反義寡聚體”是指具有核苷酸堿基序列和亞基-亞基骨架的寡聚體，所述骨架允許反義寡聚體通過Watson-Crick堿基配對與RNA中的靶序列雜交，以在所述靶序列中形成RNA：寡聚體異源雙鏈核酸分子。所述寡聚體可具有與所述靶序列精確或接近的序列互補性。此外，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含用于診斷胰腺癌的組合物。例如，所述試劑盒可為RT-PCR試劑盒、DNA芯片試劑盒、ELISA試劑盒、蛋白芯片試劑盒、快速試劑盒或MRM(多反應(yīng)監(jiān)測)試劑盒。當使用包含CA19-9、LRG1和選自TTR、C1R、CLU及KLKB1中的至少一種的胰腺標記物的結(jié)合物時，根據(jù)本公開內(nèi)容用于診斷胰腺癌的組合物或包含該組合物的試劑盒在診斷性能方面遠遠優(yōu)于使用兩種標記物CA19-9和LRG1的組合物或試劑盒。用于診斷胰腺癌的試劑盒還可包含至少一種適用于分析的其他元件組成(elementalcomposition)、溶液或裝置。例如，所述診斷試劑盒還可包含反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)所必需的元件。RT-PCR試劑盒包含一對特異性針對編碼標記物蛋白的基因的引物。各引物是具有特異性針對所述基因的核酸序列的序列的核酸，其長度可為約7至50bp，更特別為約10至30bp。此外，所述試劑盒還可包含特異性針對對照基因的核酸序列的引物。另外，所述RT-PCR試劑盒可包含測試管或合適的器皿、反應(yīng)緩沖液(不同pH值和鎂濃度)、脫氧核苷酸(dNTP)、酶(例如Taq聚合酶和反轉(zhuǎn)錄酶)、脫氧核糖核酸酶抑制劑、核糖核酸酶抑制劑、DEPC-水，和無菌水。此外，本公開內(nèi)容的診斷試劑盒可包含用于操作DNA芯片所必需的元件。所述DNA芯片試劑盒可包含與基因或cDNA或相當于其片段的寡核苷酸結(jié)合的底物，及用于構(gòu)建熒光標記的探針的反應(yīng)物、試劑和酶。此外，所述底物可包含對照基因或cDNA或相當于其片段的寡核苷酸。在一些實施方案中，本公開內(nèi)容的診斷試劑盒可包含用于進行ELISA所必需的元件。所述ELISA試劑盒可包含特異性針對蛋白的抗體。所述抗體具有針對標記物蛋白的高選擇性和親合力，與其他蛋白無交叉反應(yīng)性，并且可以是單克隆抗體、多克隆抗體或重組抗體。此外，所述ELISA試劑盒可包含特異性針對對照蛋白的抗體。另外，所述ELISA試劑盒還可包含能夠檢測被結(jié)合的抗體的試劑，例如，標記的第二抗體、發(fā)色團、酶(例如，與抗體綴合)及其底物或能夠結(jié)合所述抗體的物質(zhì)。在一些實施方案中，用于根據(jù)本公開內(nèi)容診斷胰腺癌的組合物或包含本公開內(nèi)容的組合物的診斷試劑盒可用于區(qū)分正常受試者與患有早期(1期或2期)胰腺癌的患者以及患有嚴重胰腺癌的患者。因此，本公開內(nèi)容體提供了用于診斷1期或2期胰腺癌的組合物，其包含(a)用于測量CA19-9的表達水平的試劑，(b)用于測量LRG1的表達水平的試劑，以及(c)用于測量選自TTR、C1R、CLU和KLKB1中的至少一種的表達水平的試劑。另外，本公開內(nèi)容的用于診斷胰腺癌的組合物或包含本公開內(nèi)容的組合物的診斷試劑盒可用于選擇性地區(qū)分胰腺癌患者與患有不同癌癥的患者以及正常受試者。因此，本公開內(nèi)容提供了用于區(qū)分胰腺癌與其他癌癥的組合物，其包含(a)用于測量CA19-9的表達水平的試劑，(b)用于測量LRG1的表達水平的試劑，以及(c)用于測量選自TTR、C1R、CLU和KLKB1中的至少一種的表達水平的試劑。此外，利用本公開內(nèi)容的胰腺癌診斷組合物或試劑盒，本公開內(nèi)容提供了在受試者中診斷胰腺癌或提供關(guān)于胰腺癌診斷結(jié)果的信息的方法。所述方法包括以下步驟：從待進行胰腺癌發(fā)病診斷的受試者中獲得樣品；測量包含以下的胰腺癌標記物的各自蛋白或mRNA表達水平：(a)CA19-9、(b)LRG1以及(c)選自TTR、C1R、CLU和KLKB1的至少一種；將胰腺癌標記物的表達水平分別與相應(yīng)的正常對照的表達水平進行比較，所述胰腺癌標記物包括：(a)CA19-9、(b)LRG1以及(c)選自TTR、C1R、CLU和KLKB1的至少一種；以及基于比較結(jié)果，確定受試者中胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性。如在用于診斷胰腺癌或提供關(guān)于胰腺癌的診斷信息的方法的上下文中使用的術(shù)語“受試者”是指待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者，其包括胰腺癌患者、疑似患有胰腺癌的受試者以及未患胰腺癌的正常受試者。例如，將進行PDAC醫(yī)學(xué)檢查、無臨床胰腺癌確診史的健康受試者，或盡管切除了腫瘤、由于胰腺癌過往病史而定期檢查的受試者，落入所述受試者的范圍。在一個實施方案中，所述受試者可為哺乳動物，而在另一個實施方案中可為人類。在確定受試者中胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病可能性的步驟中，基于比較結(jié)果，用于確定胰腺癌高度易發(fā)的條件如下：在CA19-9的蛋白表達水平或編碼CA19-9的基因的mRNA表達水平方面，在LRG1的蛋白表達水平或編碼LRG1的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者高于正常對照；并且在TTR的蛋白表達水平或編碼TTR的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者低于正常對照；在C1R的蛋白表達水平或編碼C1R的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者高于正常對照；在CLU的蛋白表達水平或編碼CLU的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者低于正常對照；或在KLKB1的蛋白表達水平或編碼KLKB1的基因的mRNA表達水平方面，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者低于正常對照。如與所述方法結(jié)合使用的術(shù)語“樣品”是指隨著胰腺癌的發(fā)病，蛋白或基因表達水平不同的生物樣品，并且所述樣品的實例包括組織、細胞、血清、血漿、唾液、腦脊液和尿液，優(yōu)選血液、血清或血漿。由于與正常對照相比，胰腺癌患者的CA19-9蛋白和LRG1蛋白的表達水平或編碼該蛋白的基因的mRNA表達水平升高，TTR蛋白、CLU蛋白及KLKB1蛋白的表達水平或編碼該蛋白的基因的mRNA表達水平降低，以及C1R蛋白的表達水平或編碼該蛋白的基因的mRNA表達水平升高，因此胰腺癌發(fā)病的可能性可通過測量胰腺癌標記物的各蛋白表達水平或編碼該蛋白的基因的mRNA表達水平來確定，所述胰腺癌標記物包括：(a)CA19-9、(b)LRG1以及(c)至少一種選自TTR、C1R、CLU和KLKB1的標記物。例如，當被檢測的受試者的CA19-9和LRG1蛋白表達水平或mRNA表達水平比正常對照高，并且TRR蛋白表達水平或mRNA表達水平比正常對照低時，可確定該受試者胰腺癌發(fā)病的可能性高。表述或短語“待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者在CA19-9的蛋白表達水平或編碼CA19-9的基因的mRNA表達水平方面高于正常對照”意指如通過多種方法所測量的，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者的CA19-9蛋白的蛋白表達水平或編碼CA19-9蛋白的基因的mRNA表達水平是正常對照的1.0、1.5、2、3、5或10倍。該含義適用于LRG1或C1R的蛋白水平或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達水平。表述或短語“待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者在TTR的蛋白表達水平或編碼CA19-9的基因的mRNA表達水平方面低于正常對照”意指如通過多種方法所測量的，待進行胰腺癌發(fā)病檢查的受試者的TTR蛋白的蛋白表達水平或編碼TTR蛋白的基因的mRNA表達水平是正常對照的0.1、0.2、0.3、0.5或1倍。該含義適用于CLU或KLKB1的蛋白水平或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達水平。在一些實施方案中，可根據(jù)胰腺癌診斷公式?jīng)Q定“確定胰腺癌高度易發(fā)”，如通過以下公式1所示例的。[公式1]其中，x是胰腺癌診斷標記物的表達水平測量值，αi是SVM中的拉格朗日乘數(shù)，yi是正常組/胰腺癌組的分離系數(shù)，xi是參考測量值，以及b是校正值。此函數(shù)衍生自SVM(支持向量機)。SVM是被設(shè)計以基于拉格朗日最優(yōu)化理論評估滿足給定條件的函數(shù)的算法。其中，使用最大間隔分類器進行分類分析的情況被稱為SVC(支持向量分類機)。當將CA19-9，LRG1，以及TTR、C1R、CLU和KLKB1中任一個的相對MRM測量值應(yīng)用于此函數(shù)時，函數(shù)值為1則診斷為胰腺癌發(fā)病的高可能性，而函數(shù)值為-1則說明為正常狀態(tài)。根據(jù)本公開內(nèi)容的方法，基于通過將CA19-9，LRG1，以及TTR、C1R、CLU和KLKB1中的任一種的蛋白或mRNA表達水平應(yīng)用于所述胰腺癌診斷公式而得到的結(jié)果可容易地確定胰腺癌發(fā)病的可能性。盡管由SVM構(gòu)建，所述診斷函數(shù)可由多種類型的區(qū)別分析構(gòu)成，包括機器學(xué)習(xí)，例如神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、隨機森林等。此外，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的方法，其包括(a)從待進行胰腺癌發(fā)病診斷的受試者中獲得樣品；(b)測量樣品中CA19-9的蛋白表達水平或編碼CA19-9蛋白的基因的mRNA表達水平，及LRG1的蛋白表達水平或編碼LRG1蛋白的基因的mRNA表達水平；(c)測量樣品中選自TTR、C1R、CLU和KLKB1中的至少一種的蛋白表達水平，或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達水平；以及(d)通過將步驟(b)和(c)的測量值應(yīng)用于以下公式1來確定胰腺癌發(fā)病的可能性：[公式1]其中，x是胰腺癌的診斷標記物CA19-9、LRG1，及TTR、C1R、CLU和KLKB1中任一個的表達水平測量值，αi是SVM中的拉格朗日乘數(shù)，yi是正常組/胰腺癌組的分離系數(shù)，xi是參考測量值，以及b是校正值。在本公開內(nèi)容的方法中，可使用特異性結(jié)合至相應(yīng)蛋白的各抗體來測量和比較蛋白表達水平。允許所述抗體與生物樣品中的相應(yīng)蛋白形成抗原-抗體復(fù)合物并檢測所述復(fù)合物。本文所用的術(shù)語“抗原-抗體復(fù)合物”意指其中抗原與識別所述抗原的抗體結(jié)合的復(fù)合物，其被用于確定生物樣品中是否存在相應(yīng)的基因?？乖?抗體復(fù)合物的檢測可使用本領(lǐng)域熟知的方法實現(xiàn)，例如光譜法、光化學(xué)法、生物化學(xué)法、免疫化學(xué)法、電學(xué)法、光化學(xué)法、化學(xué)法等。出于本公開內(nèi)容的目的，蛋白表達的測量或比較可使用本領(lǐng)域熟知的方法實現(xiàn)，其實例包括但不限于：蛋白芯片測定、免疫測定、配體結(jié)合測定、MALDI-TOF(基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜)、SELDI-TOF(表面增強激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜)、放射免疫測定、放射免疫擴散、雙向免疫擴散(Ouchterlonyimmunodiffusion)、火箭免疫電泳、免疫組化染色、補體結(jié)合試驗、2-D電泳、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC-MS/MS)、蛋白質(zhì)印跡法、和ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)。在本公開內(nèi)容中，LC-MRM可用于測量和比較CA19-9、LRG1、C1R、CLU和KLKB1蛋白的表達水平。簡言之，生物樣品中的靶蛋白可通過LC進行分離，所述分離使用LC分析柱，并使用濃度梯度為95∶5至15∶85的含95體積％蒸餾水、5體積％乙腈和0.1體積％甲酸的溶液以及含5體積％蒸餾水、95體積％乙腈和0.1體積％甲酸的溶液。由于某些物質(zhì)的解析度可隨溶液的混合比而變化，因而設(shè)定了濃度梯度。所述梯度范圍對于同時分離多種蛋白是最佳的。首先，使用溶液A(95體積％蒸餾水、5體積％乙腈和0.1體積％甲酸)使柱平衡10分鐘，然后使用溶液B(5體積％蒸餾水、95體積％乙腈、0.1％體積甲酸)以5％至85％的濃度梯度對肽洗脫50分鐘，并以85％的濃度對肽洗脫5分鐘。對于質(zhì)譜分析，MRM(多反應(yīng)監(jiān)測)以MS/MS模式進行。SIM(選擇性離子監(jiān)測)利用碰撞到質(zhì)譜儀的離子源而形成的離子，而MRM利用從已經(jīng)碎裂的離子中選出特定離子然后使其再次碰撞串聯(lián)的不同的MS源后而產(chǎn)生的離子。SIM的問題在于如果所選擇的定量離子與在血清中檢測到的離子相同，則其可能干擾定量分析。另一方面，當離子再次碰撞時，盡管它們與未碰撞的離子具有相同的質(zhì)量，但它們的分子結(jié)構(gòu)與未碰撞的離子不同，它們表現(xiàn)出不同的特征。因此，使用這類離子去除背景中的噪聲峰，以使MRM允許甚至更清楚的基線。此外，合成穩(wěn)定的同位素標準(SIS)肽并與靶肽對比測量，從而使得以更高的靈敏度同時對所需物質(zhì)進行精確分析。使用以上分析方法，可比較正常對照和疑似有胰腺癌發(fā)病的受試者之間的蛋白水平，并且評估胰腺癌標記物的蛋白表達水平的顯著升高以確定胰腺癌發(fā)病的可能性?？捎糜跍y量和比較編碼CA19-9、LRG1、C1R、CLU及KLKB1蛋白的各基因的mRNA表達水平的分析方法包括但不限于：RT-PCR、競爭性RT-PCR、實時RT-PCR、核糖核酸酶保護測定、RNA印跡法和DNA芯片。使用所述分析方法，可測量與正常對照相比疑似受試者的胰腺癌標記物的mRNA表達水平，以診斷或預(yù)測胰腺癌的發(fā)病可能性。此外，本公開內(nèi)容提供了提供用于胰腺癌診斷的信息的方法，其包括：(a)從待進行胰腺癌發(fā)病診斷的受試者中獲得樣品；(b)測量樣品中CA19-9的蛋白表達水平或編碼CA19-9蛋白的基因的mRNA表達水平，及LRG1的蛋白表達水平或編碼LRG1蛋白的基因的mRNA表達水平；(c)測量樣品中選自TTR、C1R、CLU和KLKB1中的至少一種的蛋白表達水平，或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達水平；以及(d)將樣品中CA19-9的蛋白表達水平或編碼CA19-9蛋白的基因的mRNA表達水平，及LRG1的蛋白表達水平或編碼LRG1蛋白的基因的mRNA表達水平與正常對照中的表達水平進行比較；以及(e)將樣品中選自TTR、C1R、CLU和KLKB1中的至少一種的蛋白表達水平，或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達水平與正常對照中的表達水平進行比較。在根據(jù)本公開內(nèi)容的用于診斷胰腺癌的標記物、組合物、試劑盒以及方法中，胰腺癌可為IPMN，特別為高危IPMN。所述組合物可用于區(qū)分高危IPMN與低危IPMN，或用于選擇性診斷與正常組、患有除IPMN或胰腺導(dǎo)管腺癌以外的胰腺疾病的患者或患有低危IPMN的對照組區(qū)分的高危IPMN。所述高危IPMN可包括高度非典型增生和侵襲型IPMN。此外，所述高危IPMN可包括IPMN衍生的胰腺導(dǎo)管腺癌。在一些實施方案中，本公開內(nèi)容提供了選擇性診斷高危IPMN的組合物，其包含用于測量IPMN(胰腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀黏液腫瘤)標記物的表達水平或編碼所述標記物的基因的mRNA表達水平的試劑，所述IPMN標記物包括LRG1(富含亮氨酸的α-2-糖蛋白1)。所述IPMN標記物還可包含至少一種選自CA19-9(糖類抗原19-9)、TTR、C1R、CLU及KLKB1中的標記物。例如，所述IPMN標記物可為LRG1與選自TTR、C1R、CLU及KLKB1中的一種的結(jié)合物，或LRG1與選自TTR、C1R、CLU及KLKB1中的兩種的結(jié)合物。根據(jù)一些實施方案，本公開內(nèi)容提供了用于選擇性診斷高危IPMN的組合物，其包含用于測量IPMN標記物蛋白的各表達水平或編碼所述IPMN標記物蛋白的基因的各mRNA表達水平的試劑，所述IPMN標記物蛋白包含CLU(叢生蛋白前蛋白原)；以及選自LRG1(富含亮氨酸的α-2-糖蛋白1，LRG1)、CA19-9(糖類抗原19-9)、TTR(甲狀腺素轉(zhuǎn)運蛋白，ATTR，前白蛋白，TBPA)、C1R(補體C1r亞成分前體)及KLKB1(血漿激肽釋放酶蛋白)的至少一種。根據(jù)一些實施方案，本公開內(nèi)容提供了用于診斷高危IPMN的方法，其包括：測量受試者樣品中的IPMN標記物蛋白的各表達水平或編碼所述蛋白的基因的各mRNA表達水平，將所述表達水平測量值與對照標記物的表達水平進行比較，以及基于所述標記物表達水平的比較結(jié)果，確定受試者中高危IPMN的發(fā)病可能性。在進行測量步驟前，所述方法可還包括檢查受試者是否患有IPMN。這個檢查可通過影像學(xué)診斷或活檢，或利用遺傳標記物來進行。例如，所述影像學(xué)診斷包括，但并不限于，腹部超聲、計算機斷層掃描(CT)、內(nèi)窺鏡逆行胰膽管造影(ERCP)、磁共振胰膽管造影(MRCP)及超聲內(nèi)鏡(EUS)。適用于所述檢查的生物標記物可為CA19-9，其是公眾熟知的胰腺癌診斷標記物。所述活檢可為FNA(細針穿刺)活檢。當對照為正常組、患有除IPMN或胰腺導(dǎo)管腺癌以外的胰腺疾病的患者或患有低危IPMN的患者時，使用IPMN標記物可診斷出高危IPMN患者，以與正常狀態(tài)及各種其他胰腺疾病區(qū)分。此外，當對照為低危IPMN患者時，則可選擇性地診斷出高危IPMN，以與低危IPMN區(qū)分。當受試者被確定為具有高危IPMN時，則所述方法還可包括進行處理措施，例如手術(shù)切除、給藥等。當受試者被確定為具有低危IPMN時，則所述方法還可包括進行處理措施，例如給藥、預(yù)后監(jiān)測等。IMPN標記物、表達水平的測量值以及確定的詳細說明如以上所述。通過以下實施例可獲得對本發(fā)明的更好的理解，這些實施例只是用于說明而不應(yīng)被解釋為限制本發(fā)明。實施例1：實驗樣品的制備為發(fā)掘適用于診斷胰腺癌的蛋白結(jié)合物，經(jīng)患者的同意，從5家醫(yī)院中患有胰腺癌、其他癌癥、胰腺炎或膽囊炎的患者組，以及從正常組獲得樣品，如表2及表3中所示。對于區(qū)分PDAC的試驗1，用正常組、胰腺炎組以及膽囊炎組作為對照，同時對胰腺癌(PDAC)患者進行分組。使用1期或2期胰腺癌(PDAC)患者的樣品來進行區(qū)分早期PDAC的試驗2，同時用正常人及胰腺炎或膽囊炎患者作為對照。設(shè)計試驗3用于癌癥/胰腺癌選擇。在這方面，實驗組由胰腺癌樣品組成，同時對照包含其他癌癥的樣品，即54例乳腺癌、45例結(jié)直腸癌以及53例甲狀腺癌。在試驗4中，在CA19-9不能在臨床上起作用的條件下區(qū)分出PDAC。對照包括CA19-9水平小于37U/ml的正常組、胰腺炎組及膽囊炎組，同時用CA19-9水平小于37U/ml的胰腺癌(PDAC)組作為實驗組。[表2][表3]-AMC：Asan醫(yī)療中心-NCC：國家癌癥中心-SMC：三星醫(yī)療中心-SNUH：首爾國立大學(xué)醫(yī)院-YMC：Yonsei醫(yī)療中心*所有試驗均使用從訓(xùn)練集中扣除的分類器來進行。實施例2：通過MRM-MS進行胰腺癌診斷標記物的發(fā)掘和性能分析<2-1>血液樣品的預(yù)處理使用消耗柱(depletioncolumn)耗盡40μl的各血液樣品中最豐富的7種蛋白，并經(jīng)3kDa過濾器濃縮殘余物。通過BCA對濃縮液進行定量。從所述濃縮液中取出相當于200μg的血漿，用6M尿素使其變性，用20mMDTT和50mM碘乙酸使其還原并烷基化。通過使用胰蛋白酶以50∶1(蛋白∶胰蛋白酶，w/w)的比例在37℃下處理16小時將蛋白分解為肽，使用C18OASIS柱(Waters，美國)使所述肽脫鹽并將其凍干。在進行MRM分析之前，將凍干物溶解于溶液A(98％蒸餾水、2％乙腈、0.1％甲酸)中。<2-2>轉(zhuǎn)換選擇為了進行MRM分析，選擇具有某種蛋白(Q1)的荷質(zhì)比(m/z)特征的肽。此外，在通過電碰撞從所述肽中產(chǎn)生的多種碎片離子中，選擇具有某種蛋白的m/z特征的離子(Q3)。將其中組合了某種蛋白的離子特征的Q1與Q3的結(jié)合物指定為轉(zhuǎn)換(transition)。將通過Q1和Q3中的特征離子連續(xù)經(jīng)過高分辨率(三級-四極)質(zhì)譜儀而獲得的信號簡化為定量信息，用于定量分析。使用美國華盛頓大學(xué)醫(yī)學(xué)院(UniversityofWashingtonSchoolofMedicine，Seattle，Washington，USA)的MacCoss研究小組研發(fā)的軟件SKYLine，基于NIST(美國國家標準與技術(shù)研究院)的肽串聯(lián)質(zhì)譜，對于由ms/ms提供的肽，每種蛋白選擇最多達10種肽。肽的長度為至少7個氨基酸至最多達24個氨基酸。然而，從可由胰蛋白酶作用產(chǎn)生的總的肽中，具有以下氨基酸或基序(motif)的肽由于信號條件差而被排除：當甲硫氨酸存在于目的肽中時，它在體內(nèi)易于被ROS(活性氧簇)氧化，從而增加32Da的質(zhì)量；當組氨酸存在于目的肽中時，R基團的正電荷可改變所述目的肽的電荷狀態(tài)；目的肽中存在的NxS/T基序可能經(jīng)過N-糖基化，導(dǎo)致質(zhì)量值的改變；當目的肽中脯氨酸殘基緊隨R或K殘基之后存在時，錯誤裂解可發(fā)生在R或K位點，所述位點可被胰蛋白酶切割。對于前體電荷，選擇電荷為+2的肽，將+1的電荷用作離子電荷，其具有y離子型。使用ProteinBlastP和Skyline來選擇不同的轉(zhuǎn)換和肽。最終，使用落入預(yù)期保留時間(RT)范圍的轉(zhuǎn)換。對于RT預(yù)期，進行600SIS肽的MRM分析，并基于使用疏水性范圍和RT色譜圖的分析結(jié)果繪制校準曲線。<2-3>LC和MRM對于LC分析，采用AgilentTechnologies的1260-毛細管LC，其裝配有用于肽分離的毛細管RR0.5×1503.5μm柱。樣品的注入量為5μl，流速為20μl/min。首先，使用溶液A(95體積％蒸餾水、5體積％乙腈、0.1體積％甲酸)使柱平衡10分鐘，然后使用溶液B(5體積％蒸餾水、95體積％乙腈、0.1％體積甲酸)以5％至85％的濃度梯度對肽洗脫50分鐘以及以85％的濃度對肽洗脫5分鐘。使用AgilentTechnologies的三級四極質(zhì)譜儀6490-QQQ，以MRM模式監(jiān)測所選擇的蛋白的轉(zhuǎn)換。為補償批次之間的偏差，同時監(jiān)測每個樣品所摻有的5fmolβ-半乳糖苷酶肽(GDFQFNISR[C13N15]，547.3/646.4)。<2-4>數(shù)據(jù)的定量分析對于定量分析，將內(nèi)標β-半乳糖苷酶肽(GDFQFNISR[C13N15]，547.3/646.4m/z)稀釋至0.09、0.27、0.82、2.5、7.4、22.2、66.7和200fmol，并將基質(zhì)用10μg血漿增補，如用于靶肽分析的條件中。也在不存在內(nèi)標肽的情況下進行分析以確定內(nèi)源性信號。將MRM定量在所有9個濃度點重復(fù)三次以構(gòu)建標準曲線。對于每個個體的MRM結(jié)果，使用SKYLine(MacCossLab，ver1.4.1)產(chǎn)生相應(yīng)的MRM轉(zhuǎn)換的提取離子色譜(XIC)，并計算各轉(zhuǎn)換的峰面積并隨時間制圖。另外，合成并測量穩(wěn)定同位素標準(SIS)肽。用標準物的XIC峰面積將各轉(zhuǎn)換的XIC峰面積標準化，并基于所述標準化，進行各蛋白的定量分析?；贛RM分析的結(jié)果，胰腺癌患者組中的由表1的方法推斷出的四種標記物結(jié)合物中的蛋白顯示出具有以下表達模式。如圖1和2中可以看出，相比于正常組，胰腺癌患者組中的CA19-9和LRG1的表達水平顯著升高，因此選擇CA19-9和LRG1作為胰腺癌診斷的標記物。如圖3至6中可以看出，相比于正常組，胰腺癌患者組中的TTR、CLU和KLKB1的表達水平特別地降低，而C1R的表達水平升高。實施例3：通過ELISA進行診斷胰腺癌的蛋白結(jié)合物的發(fā)掘和性能分析通過ELISA，測量胰腺癌組和正常組中的LRG1、TTR和CLU的表達水平。根據(jù)制造商的指示，IBL的hLRG1ELISA用于LRG1，AssayPro的前白蛋白ELISA試劑盒用于TTR，并且R&DSystems的HumanClusterinQuantikine試劑盒用于CLU。簡言之，將ELISA試劑盒及樣品置于室溫下，然后將樣品用稀釋緩沖液進行稀釋(LRG1：1,000倍；TTR：80,000倍；CLU：2,091倍)。在每個孔中加入50μl的各標準物、對照及樣品，然后在室溫下孵育2小時并向各孔施加封閉劑。除去溶液后用蒸餾水洗滌孔。反復(fù)洗滌四次。隨后，將200μl的綴合物加入到各孔中，在室溫下孵育2小時，并向各孔施加新鮮的封閉劑。用蒸餾水洗滌孔。這些操作再次重復(fù)四次。然后，將200μl底物溶液加入到各孔中，并在室溫下孵育30分鐘。向各孔中加入50μl終止液后，讀取540nm或570nm處的吸收值，以計算濃度。ELISA分析結(jié)果示于圖7和圖9中。與實施例2中MRM-MS的結(jié)果一致，觀察到相比于正常組，胰腺癌患者組中的LRG1的蛋白表達水平特別地升高，而TTR和CLU的蛋白表達水平特別地降低。實施例4：通過免疫比濁試驗進行胰腺癌的發(fā)掘和性能分析通過免疫比濁試驗，測量胰腺癌組和正常組中TTR的蛋白表達水平。根據(jù)制造商的指示，使用RocheDiagnostics的COBASINTEGRA800Prealbumin進行免疫比濁試驗。簡言之，在開始試驗前，將儀器和樣品置于室溫下。然后，將50μl的樣品加入到各孔中，并用專用的稀釋溶液稀釋四倍。將200μl經(jīng)稀釋的樣品加入到儀器，并由該儀器采集濃度輸出值作為結(jié)果。與實施例2和3中的MRM-MS和ELISA的結(jié)果一致，免疫比濁試驗的結(jié)果表明，相比于正常組，胰腺癌患者組中的TTR的蛋白表達水平特別地降低，如圖10中所理解的。實施例5：通過MRM-MS測定CA19-9、LRG1及TTR的標記物結(jié)合物的診斷性能的試驗<5-1>CA19-9、LRG1及TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1及TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。使用RocheDiagnostics的COBASElecsysCA19-9儀器通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。當使用胰腺癌診斷函數(shù)時，ROC曲線中的AUC和Sn|Sp＝0.9表示CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物對胰腺癌的診斷性能。ROC曲線在2D平面上表示靈敏度和特異性之間的關(guān)系。曲線下更大的面積(AUC；0≤AUC≤1)代表更準確的信息。Sn|Sp＝0.9是在0.9的特異性下的靈敏度值，其顯示出檢測靈敏度。更高的Sn|Sp＝0.9值提供更準確的信息。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表4和圖11中。[表4]標記物結(jié)合物AUCSn|Sp＝0.9CA19-9+LRG1+TTR0.93120.8250CA19-9+LRG10.93050.8125CA19-9+TTR0.88230.7125LRG1+TTR0.80270.5375CA19-90.82590.7250LRG10.71040.4375TTR0.65730.1375如表4和圖11中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9312且Sn|Sp＝0.9為0.8250，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的CA19-9、LRG1和TTR，或其任何兩種的結(jié)合物，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的胰腺癌診斷性能。<5-2>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表5和圖12中。[表5]如表5和圖12中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9070且Sn|Sp＝0.9為0.7600，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的胰腺癌診斷性能。<5-3>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表5和圖13中。如表5和圖13中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.8994且Sn|Sp＝0.9為0.8250，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<5-4>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。在大多數(shù)臨床病例中，當測量CA19-9為37U/ml或更高時，則確定受試者患有胰腺癌。因此，在CA19-9＜37U/ml的受試者中，CA19-9不能用作胰腺癌的診斷標記物。使用RocheDiagnostics的COBASElecsysCA19-9儀器通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。當使用胰腺癌診斷函數(shù)時，ROC曲線中的AUC和Sn|Sp＝0.9表示CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物對胰腺癌的診斷性能。ROC曲線在2D平面上表示靈敏度和特異性之間的關(guān)系。曲線下更大的面積(AUC；0≤AUC≤1)代表更準確的信息。Sn|Sp＝0.9是在0.9的特異性下的靈敏度值，其顯示出檢測靈敏度。更高的Sn|Sp＝0.9值提供更準確的信息。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表5和圖14中。如表5和圖14中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.8295且Sn|Sp＝0.9為0.5172，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例6：通過ELISA測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物的診斷性能的試驗檢查ELISA是否會重現(xiàn)出實施例5中MRM-MS測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的結(jié)果。如通過ELISA所測定的，也證實了CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物對胰腺癌的優(yōu)異診斷性能。<6-1>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表6和圖15中。[表6]如表6和圖15中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9315且Sn|Sp＝0.9為0.8250，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<6-2>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表6和圖16中。如表6和圖16中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9144且Sn|Sp＝0.9為0.7800，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的胰腺癌診斷性能。<6-3>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表6和圖17中。如表6和圖17中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.8981且Sn|Sp＝0.9為0.8250，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<6-4>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。在大多數(shù)臨床病例中，當測量CA19-9為37U/ml或更高時，則確定受試者患有胰腺癌。因此，在CA19-9＜37U/ml的受試者中，CA19-9不能用作胰腺癌的診斷標記物。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表6和圖18中。如表6和圖18中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.8287且Sn|Sp＝0.9為0.5172，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例7：CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物的診斷性能的免疫比濁試驗檢查免疫比濁試驗是否會重現(xiàn)出實施例5中MRM-MS測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的結(jié)果。如通過免疫比濁試驗所測量的，也證實了CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物對胰腺癌的診斷性能。<7-1>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例4的免疫比濁試驗，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行分析，通過ELISA對LRG1進行分析，并且通過免疫比濁試驗對TTR進行分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表7和圖19中。[表7]如表7和圖19中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9402且Sn|Sp＝0.9為0.8250，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<7-2>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例4的免疫比濁試驗，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行分析，通過ELISA對LRG1蛋白進行分析，并且通過免疫比濁試驗對TTR進行分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表7和圖20中。如表7和圖20中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9146且Sn|Sp＝0.9為0.7600，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<6-3>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例4的免疫比濁試驗，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行分析，通過ELISA對LRG1蛋白進行分析，并且通過免疫比濁試驗對TTR進行分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表7和圖21中。如表7和圖21中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.8965且Sn|Sp＝0.9為0.8250，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<7-4>CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例4的免疫比濁試驗，測定CA19-9、LRG1和TTR的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。在大多數(shù)臨床病例中，當測量CA19-9為37U/ml或更高時，則確定受試者患有胰腺癌。因此，在CA19-9＜37U/ml的受試者中，CA19-9不能用作胰腺癌的診斷標記物。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行分析，通過ELISA對LRG1蛋白進行分析，并且通過免疫比濁試驗對TTR進行分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表7和圖22中。如表7和圖22中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.8439且Sn|Sp＝0.9為0.5172，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例8：通過MRM-MS測定CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物的診斷性能的試驗<8-1>CA19-9、LRG1和PDAC的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。使用RocheDiagnostics的COBASElecsysCA19-9儀器通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表8和圖23中。[表8]標記物結(jié)合物AUCSn|Sp＝0.9CA19-9+LRG1+C1R0.92960.8375CA19-9+TTR0.88230.7125CA19-90.82590.7250如表8和圖23中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物的AUC為0.9296且Sn|Sp＝0.9為0.8375，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的CA19-9、LRG1和C1R，或其任意兩種的結(jié)合物，CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物具有更高的胰腺癌的診斷性能。<8-2>CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表9和圖24中。[表9]標記物結(jié)合物AUCSn|Sp＝0.9CA19-9+LRG1+C1R0.90970.7800CA19-9+LRG10.90940.7400CA19-9+C1R0.86580.6600LRG1+C1R0.72970.3800CA19-90.79240.6400LRG10.63620.3800C1R0.51370.1400如表9和圖24中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物的AUC為0.9097且Sn|Sp＝0.9為0.7800，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物具有更高的用于早期胰腺癌的診斷性能。<8-3>CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表10和圖25中。[表10]如表10和圖25中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物的AUC為0.9088且Sn|Sp＝0.9為0.8375，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<8-4>CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和C1R的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和C1R進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表10和圖26中。如表10和圖26中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物的AUC為0.8160且Sn|Sp＝0.9為0.5517，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和C1R的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例9：通過MRM-MS測定CA19-9、LRG1和CLU的診斷性能的試驗<9-1>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表11和圖27中。[表11]標記物結(jié)合物AUCSn|Sp＝0.9CA19-9+LRG1+CLU0.93380.8500CA19-9+LRG10.93050.8125CA19-9+CLU0.86620.7250LRG1+CLU0.80040.6125CA19-90.82590.7250LRG10.71040.4375CLU0.64560.2250如表11和圖27中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.9338且Sn|Sp＝0.9為0.8500，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的CA19-9、LRG1和CLU，或其任意兩種的結(jié)合物，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于胰腺癌的診斷性能。<9-2>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表12和圖28中。[表12]如表12和圖28中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.9027且Sn|Sp＝0.9為0.7800，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于早期胰腺癌的診斷性能。<9-3>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表12和圖29中。如表12和圖29中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.9093且Sn|Sp＝0.9為0.8500，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<9-4>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表12和圖30中。如表12和圖30中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.8384且Sn|Sp＝0.9為0.5862，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例10：通過ELISA測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物的診斷性能的試驗檢查ELISA是否會重現(xiàn)出實施例9中MRM-MS測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的結(jié)果。如通過ELISA所測定的，也證實了CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物用于胰腺癌的優(yōu)異診斷性能。<10-1>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表13和圖31中。[表13]標記物AUCSn|Sp＝0.9CA19-9+LRG1+CLU0.93990.8000CA19-9+LRG10.93230.8000CA19-9+CLU0.89800.8000LRG1+CLU0.86070.5750CA19-90.82590.7250LRG10.83200.5750CLU0.70830.3000如表13和圖31中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.9399且Sn|Sp＝0.9為0.8000，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的CA19-9、LRG1和CLU，或其任意兩種的結(jié)合物，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于胰腺癌的診斷性能。<10-2>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表14和圖32中。[表14]如表14和圖32中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.9193且Sn|Sp＝0.9為0.6400，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于胰腺癌的診斷性能。<10-3>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表14和圖33中。如表14和圖33中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物的AUC為0.9079且Sn|Sp＝0.9為0.8000，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<10-4>CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例3的ELISA方法，測定CA19-9、LRG1和CLU的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行ELISA。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表14和圖34中。如表14和圖34中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物的AUC為0.8435且Sn|Sp＝0.9為0.4828，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例11：通過MRM-MS測定CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物的診斷性能的試驗<11-1>CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和KLKB1進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表15和圖35中。[表15]標記物AUCSn|Sp＝0.9CA19-9+LRG1+KLKB10.93820.8625CA19-9+LRG10.93050.8125CA19-9+KLKB10.87440.7250LRG1+KLKB10.86080.7000CA19-90.82590.7250LRG10.71040.4375KLKB10.60760.1750如表15和圖35中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物的AUC為0.9382且Sn|Sp＝0.9為0.8625，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的CA19-9、LRG1和KLKB1，或其任意兩種的結(jié)合物，CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物具有更高的用于胰腺癌的診斷性能。<11-2>CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于區(qū)分早期PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于早期胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析測定(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和KLKB1進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表16和圖36中。[表16]如表16和圖36中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物的AUC為0.9148且Sn|Sp＝0.9為0.8000，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物具有更高的用于早期胰腺癌的診斷性能。<11-3>CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥/胰腺癌的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和CLU進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表16和圖37中。如表16和圖37中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物的AUC為0.8924且Sn|Sp＝0.9為0.8625，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和CLU的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。<11-4>CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的試驗組中區(qū)分PDAC的診斷性能使用實施例2的MRM-MS方法，測定CA19-9、LRG1和KLKB1的標記物結(jié)合物用于在CA19-9＜37U/ml的組中區(qū)分胰腺癌的診斷性能。通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和KLKB1進行MRM定量分析。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表16和圖38中。如表16和圖38中所示，觀察到本公開內(nèi)容的CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物的AUC為0.8349且Sn|Sp＝0.9為0.6207，表明所述結(jié)合物作為胰腺癌的診斷標記物表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。特別地，觀察到相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，CA19-9、LRG1和KLKB1的結(jié)合物具有更高的用于區(qū)分癌癥與胰腺癌的診斷性能。實施例12：胰腺癌的診斷——數(shù)據(jù)統(tǒng)計<12-1>CA19-9+LRG1+TTR對于統(tǒng)計分析，使用SVM(支持向量機)。SVM是被設(shè)計以基于拉格朗日最優(yōu)化理論評估滿足給定條件的函數(shù)的算法。在SVM中，使用最大間隔分類器進行分類分析的情況被稱為SVC(支持向量分類)。在此實施例中，采用兩個樣品組之一。在樣品組中，最大差異存在于兩個組(正常組和胰腺癌組)之間的SVC來源于機器學(xué)習(xí)，并且被用于構(gòu)建以下胰腺癌診斷函數(shù)。其中，x是胰腺癌診斷標記物的表達水平測量值，αi是SVM中的拉格朗日乘數(shù)，yi是正常組/胰腺癌組的分離系數(shù)，xi是參考測量值，以及b是校正值。此公式的函數(shù)值為1時說明胰腺癌發(fā)病，函數(shù)值為-1時說明是正常狀態(tài)。使用此函數(shù)確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性。具體而言，從三個正常人得到CA19-9的測量值及TTR和LRG1的MRM值分別如下：(7.4，1.451，3.2359)、(6.3，1.0718，2.136)和(26.1，1.2053，3.1797)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(7.4，1.451，3.2359)＝-1、f(6.3，1.0718，2.136)＝-1和f(26.1，1.2053，3.1797)＝-1，表明這三個人是正常的。另外，從三個胰腺癌患者得到CA19-9的測量值及TTR和LRG1的MRM值分別如下：(45318，4.898，1.2514)、(145，2.4608，1.6616)和(889，2.5153，1.5474)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(45318，4.898，1.2514)＝1、f(145，2.4608，1.6616)＝1和f(889，2.5153，1.5474)＝1，表明這三個人患有胰腺癌。<12-2>CA19-9+LRG1+C1R基于用于統(tǒng)計分析的SVM(支持向量機)，使用公式1確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性。從三個正常人得到CA19-9的測量值及LRG1和C1R的MRM值分別如下：(7.4，1.451，1.0748)、(6.3，1.0718，0.4531)和(26.1，1.2053，1.0929)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(7.4，1.451，1.0748)＝-1、f(6.3，1.0718，0.4531)＝-1和f(26.1，1.2053，1.0929)＝-1，表明這三個人是正常的。另外，從三個胰腺癌患者得到CA19-9的測量值及LRG1和C1R的MRM值分別如下：(45318，4.893，1.3742)、(145，2.4608，1.483)和(889，2.5153，1.474)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(45318，4.893，1.3742)＝1、f(145，2.4608，1.483)＝1和f(889，2.5153，1.474)＝1，表明這三個人患有胰腺癌。<12-3>CA19-9+LRG1+CLU基于用于統(tǒng)計分析的SVM(支持向量機)，使用公式1確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性。從三個正常人得到CA19-9的測量值及LRG1和CLU的MRM值分別如下：(7.4，1.451，3.3803)、(6.3，1.0718，3.1325)和(26.1，1.2053，2.8642)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(7.4，1.451，3.3803)＝-1、f(6.3，1.0718，3.1325)＝-1和f(26.1，1.2053，2.8642)＝-1，表明這三個人是正常的。另外，從三個胰腺癌患者得到CA19-9的測量值及LRG1和CLU的MRM值分別如下：(45318，4.893，1.6821)、(145，2.4608，2.545)和(889，2.5153，1.5101)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(45318，4.893，1.6821)＝1、f(145，2.4608，2.545)＝1和f(889，2.5153，1.5101)＝1，表明這三個人患有胰腺癌。<12-4>CA19-9+LRG1+KLKB1基于用于統(tǒng)計分析的SVM(支持向量機)，使用公式1確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性。從三個正常人得到CA19-9的測量值及LRG1和KLKB1的MRM值分別如下：(7.4，1.451，1.2801)、(6.3，1.0718，0.961)和(26.1，1.2053，1.5657)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(7.4，1.451，1.2801)＝-1、f(6.3，1.0718，0.961)＝-1和f(26.1，1.2053，1.5657)＝-1，表明這三個人是正常的。另外，從三個胰腺癌患者得到CA19-9的測量值及LRG1和KLKB1的MRM值分別如下：(45318，4.893，0.555)、(145，2.4608，0.5347)和(889，2.5153，0.8084)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(45318，4.893，0.555)＝1、f(145，2.4608，0.5347)＝1和f(889，2.5153，0.8084)＝1，表明這三個人患有胰腺癌。實施例13：早期胰腺癌的診斷——數(shù)據(jù)統(tǒng)計基于用于統(tǒng)計分析的SVM(支持向量機)，使用公式1確定早期胰腺癌的發(fā)病。從三個正常人得到CA19-9的測量值及LRG1和KLKB1的MRM值分別如下：(7.4，1.451，1.2801)、(6.3，1.0718，0.961)和(26.1，1.2053，1.5657)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(7.4，1.451，1.2801)＝-1、f(6.3，1.0718，0.961)＝-1和f(26.1，1.2053，1.5657)＝-1，表明這三個人是正常的。另外，從三個早期胰腺癌患者得到CA19-9的測量值及LRG1和KLKB1的MRM值分別如下：(154.52，4.0994，1.2722)、(190.16，4.5008，0.7645)和(1052.8，3.5696，0.6775)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(154.52，4.0994，1.2722)＝1、f(190.16，4.5008，0.7645)＝1和f(1052.8，3.5696，0.6775)＝1，表明這三個人是早期胰腺癌患者。實施例14：從其他癌癥中區(qū)分診斷出胰腺癌——數(shù)據(jù)統(tǒng)計基于用于統(tǒng)計分析的SVM(支持向量機)，使用公式1確定早期胰腺癌的發(fā)病。從三個胰腺癌以外的癌癥患者得到CA19-9的測量值及LRG1和KLKB1的MRM值分別如下：(8，1.3985，0.7085)、(10.68，0.9864，0.776)和(7.32，1.1431，0.9214)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(8，1.3985，0.7085)＝-1、f(10.68，0.9864，0.776)＝-1和f(7.32，1.1431，0.9214)＝-1，由此這三個人可確定為患有胰腺癌以外的癌癥。另外，從三個胰腺癌患者得到CA19-9的測量值及LRG1和KLKB1的MRM值分別如下：(280.72，4.0849，0.9165)、(4000，5.7558，0.7216)和(120.32，6.2917，0.555)。當將這些值應(yīng)用于所述公式時，計算各函數(shù)值為f(154.52，4.0994，1.2722)＝1、f(190.16，4.5008，0.7645)＝1和f(1052.8，3.5696，0.6775)＝1，表明這三個人患有胰腺癌。實施例15：實驗樣品的制備為了有效地檢測IPMN的惡性亞型，將首爾國立大學(xué)醫(yī)院中的知情同意的患者分成以下各組，包括正常組、試驗組(高危組)等，如以下表17中所示。[表17]在試驗5中，將高度非典型增生和侵襲型IPMN用作惡性(高危)亞型IPMN試驗組，而將正常人、低度非典型增生IPMN患者、中度非典型增生IPMN患者以及有良性腫瘤的膽囊炎患者分到對照組。用于檢測是否可通過MMS測定來相互區(qū)分高危組和低危組的試驗6，使用惡性(高危)亞型IPMN試驗組(由高度非典型增生和侵襲型IPMN組成)和低危組(由低度非典型增生IPMN和中度非典型增生IPMN組成)來進行。用于檢測是否可通過ELISA測定來相互區(qū)分高危組和低危組的試驗7，使用惡性(高危)亞型IPMN試驗組(由高度非典型增生和侵襲型IPMN組成)和低危組(由低度非典型增生IPMN和中度非典型增生IPMN組成)來進行。[表17]實施例16：通過MRM-MS檢測高危IPMN使用實施例2的MRM-MS，測定以下表32的標記物用于區(qū)分高危IPMN的診斷性能。使用RocheDiagnostics的COBASElecsysCA19-9儀器通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)對CA19-9蛋白進行定量分析，而對LRG1和TTR進行MRM定量分析。當以與所述胰腺癌診斷函數(shù)相同的方式使用胰腺癌診斷函數(shù)時，ROC曲線中的AUC和Sn|Sp＝0.9表示CA19-9、LRG1和TTR的結(jié)合物對胰腺癌的診斷性能。ROC曲線在2D平面上表示靈敏度和特異性之間的關(guān)系。曲線下更大的面積(AUC；0≤AUC≤1)代表更準確的信息。Sn|Sp＝0.9是在0.9的特異性下的靈敏度值，其顯示出檢測靈敏度。更高的Sn|Sp＝0.9值提供更準確的信息。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表18和圖39至63中。[表18]如表18和圖39至63中所示，觀察到本公開內(nèi)容的單獨的標記物或其任意兩種以上的結(jié)合物具有選擇性診斷與對照區(qū)分的高危IPMN的優(yōu)異性能。特別地，證實了相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，本公開內(nèi)容的標記物的結(jié)合物對高危IPMN具有更高的診斷性能。實施例17：通過MRM-MS在高危IPMN和低危IPMN之間進行選擇性診斷為了區(qū)分高危IPMN與低危IPMN，以與實施例16的MMS測定基本相同的方式進行以下表33中所示的試驗。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表19和圖64至89中[表19]如表19和圖64至89中所示，觀察到本公開內(nèi)容的單獨的標記物或其任意兩種以上的結(jié)合物具有選擇性區(qū)分高危IPMN與低危IPMN的優(yōu)異性能。特別地，證實了相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，本公開內(nèi)容的標記物的結(jié)合物對高危IPMN具有更高的診斷性能。實施例18：通過MRM-MS在高危IPMN和低危IPMN之間進行選擇性診斷檢查ELISA是否會重現(xiàn)出實施例17中MRM-MS測定標記物結(jié)合物用于區(qū)分胰腺癌的結(jié)果。如通過ELISA所測定的，也證實了表20的標記物結(jié)合物對高危IPMN的優(yōu)異診斷性能。為了區(qū)分實施例15的試驗7的高危IPMN與低危IPMN，以與實施例6的ELISA基本上相同的方式進行以下表20中所示的試驗。AUC和Sn|Sp＝0.9的測量值列于表34和圖90至100中。[表20]如表20和圖90至100中所示，觀察到本公開內(nèi)容的單獨的標記物或其任意兩種以上的結(jié)合物具有選擇性區(qū)分高危IPMN與低危IPMN的優(yōu)異性能。特別地，證實了相比于單獨的市售診斷標記物CA19-9，本公開內(nèi)容的標記物的結(jié)合物對高危IPMN具有更高的診斷性能。當前第1頁1 2 3