1.一種藏藥螃蟹甲的檢測(cè)方法,特征在于,包括如下鑒別和/或特征圖譜方法:
A、薄層鑒別方法
取螃蟹甲藥材粉末0.5﹣2g,加乙醇5-20ml,加熱回流20-40分鐘,濾過(guò),濾液作為供試品溶液;按照以上供試品溶液制備相同的方法制得對(duì)照藥材溶液;取上述兩種溶液各5﹣10μl點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上,照薄層色譜法試驗(yàn),以體積比4-8:1:0.2的異丙醇﹣甲醇-甲酸為展開劑展開,取出后晾干;采用M法和/或N法顯色后,供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn);所述的M法為:置254nm紫外光燈下檢視;N法為:噴以體積比10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;
B、HPLC特征圖譜檢測(cè)方法
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈﹣體積分?jǐn)?shù)比為0.05%的磷酸水溶液為流動(dòng)相,梯度洗脫:乙腈體積百分變化為,0﹣15分鐘保持4%,15﹣60分鐘由12%升至40%,檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm;流速:0.8﹣1.2ml/min;分析時(shí)間60分鐘;
對(duì)照品溶液的制備:取山梔苷甲酯對(duì)照品適量,加甲醇制成每1ml含山梔苷甲酯0.2mg的溶液,即得;
供試品溶液的制備:取藏藥螃蟹甲粉末0.5﹣2g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,稱定重量,超聲處理60分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得;
測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5﹣10μl,注入高效液相色譜儀,記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖,即得螃蟹甲的HPLC特征圖譜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,特征在于,薄層鑒別方法為取螃蟹甲藥材粉末1g,加乙醇10ml,加熱回流30分鐘,濾過(guò),濾液作為供試品溶液;按照以上供試品溶液制備相同的方法制得對(duì)照藥材溶液;取上述兩種溶液各5μl點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上,照薄層色譜法試驗(yàn),以體積比6:1:0.2的異丙醇﹣甲醇﹣甲酸為展開劑展開,取出晾干,采用M法和/或N法顯色后,供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn);所述的M法為:置254nm紫外光燈下檢視;N法為:噴以體積比10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,特征在于,HPLC特征圖譜檢測(cè)方法為
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈﹣體積分?jǐn)?shù)比為0.05%的磷酸水溶液為流動(dòng)相,梯度洗脫:乙腈體積百分變化為,0﹣15分鐘保持4%,15﹣60分鐘由12%升至40%;檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm;流速:1.0ml/min;分析時(shí)間60分鐘;
對(duì)照品溶液的制備:取山梔苷甲酯對(duì)照品適量,加甲醇制成每1ml含山梔苷甲酯0.2mg的溶液,即得;
供試品溶液的制備:取藏藥螃蟹甲粉末1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,稱定重量,超聲處理60分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得;
測(cè)定:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl,注入高效液相色譜儀,記錄60分鐘內(nèi)的色譜圖,即得螃蟹甲的HPLC特征圖譜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的檢測(cè)方法,特征在于,螃蟹甲HPLC特征圖譜中的特征峰為13個(gè),其中6號(hào)峰山梔苷甲酯為標(biāo)準(zhǔn)峰,13個(gè)峰與標(biāo)準(zhǔn)峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為0.133﹣0.147、0.363﹣0.401、0.752﹣0.831、0.817﹣0.903、0.854﹣0.944、1.000、1.090﹣1.205、1.132﹣1.251、1.267﹣1.401、1.307﹣1.438、1.365﹣1.509、1.393﹣1.540、1.522﹣1.683。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,特征在于,螃蟹甲HPLC特征圖譜中的特征峰為13個(gè),其中6號(hào)峰山梔苷甲酯為標(biāo)準(zhǔn)峰,13個(gè)峰與標(biāo)準(zhǔn)峰的相對(duì)保留時(shí)間分別為0.140、0.382、0.791、0.860、0.899、1.000、1.148、1.191、1.334、1.369、1.437、1.466、1.602。