專利名稱：特種蛋白定量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種特種蛋白定量檢測(cè)方法，使用特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)，通過(guò)特種蛋
白檢測(cè)卡上的質(zhì)控線、檢測(cè)線的灰度變化，確定試樣中待測(cè)特種蛋白是否存在以及其含量， 屬于醫(yī)療檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
申請(qǐng)?zhí)枮?00410011165. 5、名稱為"氮末端腦利鈉肽前體的免疫膠體金的快速定 性檢測(cè)盒"一件中國(guó)專利申請(qǐng)公開了一項(xiàng)有關(guān)特種蛋白檢測(cè)的技術(shù)方案，在該方案中，使用 特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)試樣中是否存在待檢特種蛋白。在特種蛋白檢測(cè)卡1正面有加樣孔2、 顯示窗口 3，見圖l所示，在特種蛋白檢測(cè)卡l內(nèi)部，硝酸纖維素膜從加樣口 2延續(xù)到顯示窗 口 3。依據(jù)膠體金免疫技術(shù)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。根據(jù)檢測(cè)的特種蛋白的不同，采用不同的標(biāo)記抗體處 理硝酸纖維素膜。自加樣口 2滴入試樣，因毛細(xì)作用試樣沿著硝酸纖維素膜滲透，并在顯示 窗口 3處的硝酸纖維素膜上與標(biāo)記抗體相遇。如果發(fā)生質(zhì)控反應(yīng)則顯現(xiàn)質(zhì)控線4，證明特種 蛋白檢測(cè)卡l有效。如果還發(fā)生檢測(cè)反應(yīng)，即試樣中的待測(cè)特種蛋白與標(biāo)記抗體結(jié)合形成 抗原抗體復(fù)合物，則顯現(xiàn)檢測(cè)線5，說(shuō)明試樣中存在待測(cè)特種蛋白，見圖2所示。通過(guò)肉眼觀 察上述過(guò)程，判斷試樣中是否攜帶了待測(cè)特定蛋白。檢測(cè)線5的灰度較淺，則認(rèn)為試樣沒(méi)有 攜帶待測(cè)特定蛋白。這種采用特種蛋白檢測(cè)卡1檢測(cè)的方法只能實(shí)現(xiàn)定性檢測(cè)，即判斷試 樣中待測(cè)特種蛋白的有無(wú)，而無(wú)法定量檢測(cè)，即無(wú)法檢測(cè)試樣中待測(cè)特種蛋白的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于實(shí)現(xiàn)特種蛋白的定量檢測(cè)。為此，我們發(fā)明了一種特種蛋白定量 檢測(cè)方法。 本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，見圖3所示，第一步，配制某種特種蛋白系列試樣，該系列 試樣的特種蛋白濃度值已知并依次由零到高變化。第二步，采用特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)各試 樣，顯現(xiàn)不同濃度試樣的灰度不同的檢測(cè)線。第三步，采用圖像探測(cè)器攝取各個(gè)灰度不同 的檢測(cè)線圖像，經(jīng)光電轉(zhuǎn)換得到與不同灰度對(duì)應(yīng)的具有不同電壓的電信號(hào)，作為預(yù)置信號(hào) 存入計(jì)算機(jī)，形成濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系。第四步，采用特種蛋白檢測(cè)卡實(shí)測(cè)某 一試樣，顯現(xiàn)灰度檢測(cè)線，采用圖像探測(cè)器攝取該檢測(cè)線圖像，并將相應(yīng)的電信號(hào)送入計(jì)算 機(jī)。第五步，由計(jì)算機(jī)在濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系中找到與該實(shí)測(cè)試樣灰度上下 相鄰的兩個(gè)預(yù)置信號(hào)，再通過(guò)插值運(yùn)算得到實(shí)測(cè)試樣中待測(cè)特種蛋白的濃度值。
在上述過(guò)程中，配制待測(cè)特種蛋白某一濃度的試樣，或者說(shuō)該試樣濃度已知，由特 種蛋白檢測(cè)卡顯現(xiàn)具有某一灰度的檢測(cè)線，再通過(guò)裝置取得該檢測(cè)線的具有某一電壓的圖 像電信號(hào)，建立起濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)。所述技術(shù)方案其效果在于，能夠在30秒 3分鐘內(nèi)完成檢測(cè)試樣中待測(cè)特種蛋白的定量檢測(cè)。


圖1是現(xiàn)有特種蛋白檢測(cè)卡結(jié)構(gòu)及檢測(cè)時(shí)顯現(xiàn)質(zhì)控線示意圖。圖2是現(xiàn)有特種蛋 白檢測(cè)卡結(jié)構(gòu)及檢測(cè)時(shí)顯現(xiàn)質(zhì)控線、檢測(cè)線示意圖。圖3是本發(fā)明之方法步驟框圖，該圖兼 作為摘要附圖。
具體實(shí)施例方式
第一步，配制某種特種蛋白系列試樣，該系列試樣的特種蛋白濃度值已知并依次 由零到高變化。如配制人心肌肌鈣蛋白系列血樣，濃度由零到高依次為
0. 0ng/ml、0. 75ng/ml、l. 5ng/ml、3. 0ng/ml、6. 0ng/ml、12. 0ng/ml、24. Ong/ml、 48. 0ng/ml、96. 0ng/ml、192. Ong/ml。 或者配制人肌酸激酶同工酶蛋白系列血樣，濃度由零到高依次為0. Ong/ml、l. 0ng/ml、2. 0ng/ml、4. 0ng/ml、8. 0ng/ml、16. 0ng/ml、32. Ong/ml、
64. 0ng/ml、128. 0ng/ml、256. 0ng/ml、512. Ong/ml。 第二步，采用特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)各試樣，顯現(xiàn)不同濃度試樣的灰度不同的檢測(cè) 線。 第三步，采用圖像探測(cè)器攝取各個(gè)灰度不同的檢測(cè)線圖像，經(jīng)光電轉(zhuǎn)換得到與不 同灰度對(duì)應(yīng)的具有不同電壓的電信號(hào)，作為預(yù)置信號(hào)存入計(jì)算機(jī)。所述的圖像探測(cè)器由CCD 器件及其驅(qū)動(dòng)和數(shù)據(jù)采集電路構(gòu)成。 每一種濃度的試樣檢測(cè)多次，如3 100次，剔除偏差較大的試樣，取其他試樣測(cè) 量結(jié)果的平均值作為標(biāo)準(zhǔn)值，將該標(biāo)準(zhǔn)值作為預(yù)置信號(hào)存入計(jì)算機(jī)，形成濃度——電信號(hào) 關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系。 第四步，采用特種蛋白檢測(cè)卡實(shí)測(cè)某一試樣，顯現(xiàn)灰度檢測(cè)線，采用圖像探測(cè)器攝 取該檢測(cè)線圖像，并將相應(yīng)的電信號(hào)送入計(jì)算機(jī)。 第五步，由計(jì)算機(jī)在濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系中找到與該實(shí)測(cè)試樣灰度 上下相鄰的兩個(gè)預(yù)置信號(hào)，再通過(guò)插值運(yùn)算得到實(shí)測(cè)試樣中待測(cè)特種蛋白的濃度值。
運(yùn)算公式如下 /(x) = (_x - 6)刷刷+ ,
a — 6 其中X表示某一灰度檢測(cè)線的圖像信號(hào)電壓； f(x)表示與某一灰度檢測(cè)線的圖像信號(hào)電壓對(duì)應(yīng)的試樣中待測(cè)特種蛋白的濃 度； a、b表示與x上下相鄰的兩個(gè)預(yù)置信號(hào)，其中a大于b ; f(a)、f(b)表示所述兩個(gè)預(yù)置信號(hào)a、b對(duì)應(yīng)的特種蛋白的濃度。
權(quán)利要求
一種特種蛋白定量檢測(cè)方法，其特征在于第一步，配制某種特種蛋白系列試樣，該系列試樣的特種蛋白濃度值已知并依次由零到高變化；第二步，采用特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)各試樣，顯現(xiàn)不同濃度試樣的灰度不同的檢測(cè)線；第三步，采用圖像探測(cè)器攝取各個(gè)灰度不同的檢測(cè)線圖像，經(jīng)光電轉(zhuǎn)換得到與不同灰度對(duì)應(yīng)的具有不同電壓的電信號(hào)，作為預(yù)置信號(hào)存入計(jì)算機(jī)，形成濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系；第四步，采用特種蛋白檢測(cè)卡實(shí)測(cè)某一試樣，顯現(xiàn)灰度檢測(cè)線，采用圖像探測(cè)器攝取該檢測(cè)線圖像，并將相應(yīng)的電信號(hào)送入計(jì)算機(jī)；第五步，由計(jì)算機(jī)在濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系中找到與該實(shí)測(cè)試樣灰度上下相鄰的兩個(gè)預(yù)置信號(hào)，再通過(guò)插值運(yùn)算得到實(shí)測(cè)試樣中待測(cè)特種蛋白的濃度值。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的特種蛋白定量檢測(cè)方法，其特征在于，每一種濃度的試樣檢 測(cè)3 100次，剔除偏差較大的試樣，取其他試樣測(cè)量結(jié)果的平均值作為標(biāo)準(zhǔn)值，將該標(biāo)準(zhǔn) 值作為預(yù)置信號(hào)存入計(jì)算機(jī)，形成濃度——電信號(hào)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)體系。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的特種蛋白定量檢測(cè)方法，其特征在于，運(yùn)算公式如下 <formula>formula see original document page 0</formula>式中x表示某一灰度檢測(cè)線的圖像信號(hào)電壓；f (x)表示與某一灰度檢測(cè)線的圖像信號(hào)電壓對(duì)應(yīng)的試樣中待測(cè)特種蛋白的濃度；a、b表示與x上下相鄰的兩個(gè)預(yù)置信號(hào)，其中a大于b ;f (a) 、 f (b)表示所述兩個(gè)預(yù)置信號(hào)a、b對(duì)應(yīng)的特種蛋白的濃度。
全文摘要
特種蛋白定量檢測(cè)方法屬于醫(yī)療檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。現(xiàn)有方法通過(guò)肉眼觀察特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)線的灰度變化，判斷待測(cè)特種蛋白的有無(wú)，無(wú)法定量檢測(cè)。本發(fā)明之方法為，配制某種特種蛋白系列試樣，該系列試樣的特種蛋白濃度值已知并依次由零到高變化；采用特種蛋白檢測(cè)卡檢測(cè)各試樣，顯現(xiàn)不同濃度試樣的灰度不同的檢測(cè)線；采用圖像探測(cè)器攝取各個(gè)灰度不同的檢測(cè)線圖像，經(jīng)光電轉(zhuǎn)換得到與不同灰度對(duì)應(yīng)的具有不同電壓的電信號(hào)，作為預(yù)置信號(hào)存入計(jì)算機(jī)；采用特種蛋白檢測(cè)卡實(shí)測(cè)某一試樣，顯現(xiàn)灰度檢測(cè)線，采用圖像探測(cè)器攝取該檢測(cè)線圖像，并將相應(yīng)的電信號(hào)送入計(jì)算機(jī)；由計(jì)算機(jī)找到與該實(shí)測(cè)試樣灰度上下相鄰的兩個(gè)預(yù)置信號(hào)，通過(guò)插值運(yùn)算得到實(shí)測(cè)試樣中待測(cè)特種蛋白的濃度值。
文檔編號(hào)G01J3/50GK101710126SQ20091021792
公開日2010年5月19日 申請(qǐng)日期2009年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月30日
發(fā)明者方艷秋, 杜博, 石曉光, 蔡紅星, 譚巖 申請(qǐng)人:譚巖