一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，該方法包括取魚體組織的重量百分比為腹脂0.2-0.5、肝臟0.8-1.0、肌肉1-2和鰓1.5-1.8，然后加入氯仿甲醇混合液研磨；然后通過回流過濾提取脂肪溶液；然后利用氮氣吹干溶液，提取到結(jié)晶脂肪；然后將結(jié)晶脂肪溶解于氫氧化鉀甲醇溶液中，并充氮氣防氧化和冷卻容器壁減少揮發(fā)；然后將脂肪酯化為脂肪酸，再用正庚烷溶解脂肪酸；然后取上清液離心處理后再取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖，即可通過色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。從而可以實現(xiàn)對魚類的脂肪結(jié)構(gòu)的認(rèn)識，進一步對魚類的保護和飼養(yǎng)。
【專利說明】一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及魚類組織脂肪酸的領(lǐng)域，具體涉及一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前野生魚類面臨越來越多的威脅，很多面臨著滅絕，或者其他常見魚類的養(yǎng)殖遇到飼養(yǎng)營養(yǎng)搭配的困難。雖然魚體中含有豐富的脂肪酸，有的脂肪酸魚體本身可以生物合成，但是有的則不能或合成量很少，遠不能滿足魚類生長發(fā)育各階段的需要，必須由外源供給補充。因此，研究、測定魚類脂肪酸組成、生理功能、需要量，對于提高養(yǎng)殖魚類的產(chǎn)量及品質(zhì)，具有十分重要的意義。
[0003]為了很好地保護野生魚類的種族和長存及及魚類的養(yǎng)殖，不但需要不斷地關(guān)注魚類的生存環(huán)境，還應(yīng)該不斷地研究魚類的結(jié)構(gòu)及其相對應(yīng)的生活需求，所以需要對其組織脂肪酸的組成成分進行準(zhǔn)確提取測定，從而可以進一步保護野生魚類和人工養(yǎng)殖，以免野生魚類的種族遭受滅絕，及解決人工養(yǎng)殖的困難。但是目前提取魚類組織脂肪的方法采用氮吹的方法吹干氯仿甲醇混合液，未對氯仿甲醇混合液做其他處理，導(dǎo)致氮吹用時過長，且由于氮氣的制冷作用導(dǎo)致氯仿甲醇混合液難于揮發(fā)，影響脂肪酸測定結(jié)果，并且提取魚體組織脂肪酸時，組織取樣量無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，影響對魚類的組織脂肪酸的成分測定，浪費資源，準(zhǔn)確度不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是通過合理地提取魚體各組織的比例成分，快速全面地研磨提取脂肪酸，再利用氣相色譜儀獲得色譜圖和面積歸一化法計算出脂肪酸組分的相對含量，最終實現(xiàn)對魚類的脂肪結(jié)構(gòu)的認(rèn)識，從而可以進一步對魚類的保護和飼養(yǎng)。
[0005]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其包括如下步驟:
[0006](I)取一類魚中的一條成熟魚剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.2-0.5、肝臟0.8-1.0、肌肉1-2和觸1.5-1.8,然后加入4_6ml氯仿甲醇混合液,混合研磨5_10分鐘；
[0007](2)將研磨液轉(zhuǎn)至可加熱容器中，向該可加熱容器中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋容器底部，將容器與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2-2.5h，保持水浴鍋溫度為50°C?55°C ；
[0008](3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣；
[0009](4)取出1ml濾液于b容器中，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪；
[0010](5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，振搖b容器2_4分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁；
[0011](6)加入2ml 10%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫；
[0012](7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用15ml_20ml飽和食鹽水淋洗上層清液；
[0013](8)取上清液置于離心管中,加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.2-0.5% ；
[0014](9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖；
[0015](10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。
[0016]本方法經(jīng)過對魚體各組織按一定比例進行提取，并加入適量的氯仿甲醇混合液來研磨魚體各組織，使研磨得更加充分，各組織脂肪滲出得更加充分；然后再次添加氯仿甲醇混合液進行回流加熱處理使脂肪充分溶于氯仿甲醇混合液中進一步提取比較純的脂肪溶液；然后為了防止脂肪被氧化，使用氮氣吹干脂肪溶液獲得結(jié)晶脂肪，然后經(jīng)過步驟(5)既能實現(xiàn)預(yù)防脂肪被氧化，又能快速將結(jié)晶脂肪溶解于氫氧化鉀甲醇溶液中，減少脂肪的破壞，促使接下來測定脂肪酸組分更加準(zhǔn)確；再經(jīng)過步驟(6)可以快速將脂肪酯化成脂肪酸，而且可以大大減少脂肪和脂肪酸被氧化和損壞，提高純度，確保測定脂肪酸組分的準(zhǔn)確性；然后經(jīng)過步驟(7)將脂肪酸溶于正庚烷中并用食鹽水去除氣泡提純；然后經(jīng)過步驟(8)可以防止外界水分進入上清液，再進入步驟(9)和(10)將提純的脂肪酸溶液送入氣相色譜儀獲得色譜圖，然后用面積歸一化法將色譜圖計算出脂肪酸組分。其中能測定出的脂肪酸包括有肉豆蘧酸、肉豆蘧烯酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、十七烷酸、硬脂酯酸、油酸、反油酸、亞油酸、亞麻酸、花生酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、花生四烯酸、芥酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸，經(jīng)過本測定的方法，可以確定出每一類魚不同的脂肪酸組分占總脂肪酸的比值，也可以對應(yīng)計算出每一類魚不同的脂肪酸組分的具體含量值，實現(xiàn)對魚類的脂肪結(jié)構(gòu)的認(rèn)識，從而可以進一步研究魚類的保護和飼養(yǎng)，配制適合各個魚類所需的飼料。
[0017]優(yōu)選的是，所述氯仿甲醇混合液為氯仿和甲醇的比例是2: I。
[0018]優(yōu)選的是,所述的魚為紅羅非魚、黃顙魚、淡水鯊魚、大刺鰍。
[0019]優(yōu)選的是，所述步驟(I)取每條成熟魚體各組織的重量百分比為腹脂0.5、肝臟
1.0、肌肉1.5和觸1.8,加入的氯仿甲醇混合液為5ml。
[0020]優(yōu)選的是，所述步驟(2)的可加熱容器為圓底燒瓶。
[0021]優(yōu)選的是，所述步驟(2)的回流為用氯仿甲醇混合液類的易揮發(fā)有機溶劑提取脂肪成分的過程，其為將研磨液與有機溶劑混合，并加熱混合液，同時冷卻揮發(fā)的有機溶劑使其恢復(fù)液態(tài)混入研磨液中繼續(xù)溶解脂肪，反復(fù)進行加熱液態(tài)的有機溶劑和冷卻氣態(tài)的有機溶劑直至脂肪成分溶于有機溶劑中。
[0022]優(yōu)選的是，所述步驟(4)氮吹過程中還包括有將b容器放至30°C水浴鍋中，且放置水深為5cm，可加快氯仿甲醇混合液揮發(fā)速度且不會導(dǎo)致樣品中的脂肪隨提取液而揮發(fā)，確保脂肪的活性和純度。
【具體實施方式】
[0023]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
[0024]實施例1
[0025]本技術(shù)方案提供了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其包括如下步驟:
[0026](I)取一條成熟的紅羅非魚剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.5、肝臟1.0、肌肉1.5和鰓1.8，然后加入5ml氯仿甲醇混合液，混合研磨7分鐘；
[0027](2)將研磨液轉(zhuǎn)至圓底燒瓶中，向該圓底燒瓶中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋圓底燒瓶底部，將圓底燒瓶與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2h，保持水浴鍋溫度為55°C，其中該回流為用氯仿甲醇混合液類的易揮發(fā)有機溶劑提取脂肪成分的過程，其為將研磨液與有機溶劑混合，并加熱混合液，同時冷卻揮發(fā)的有機溶劑使其恢復(fù)液態(tài)混入研磨液中繼續(xù)溶解脂肪，反復(fù)進行加熱液態(tài)的有機溶劑和冷卻氣態(tài)的有機溶劑直至脂肪成分溶于有機溶劑中，其中所用的有機溶劑可以選氯仿甲醇混合液。
[0028](3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣；
[0029](4)取出1ml濾液于b容器中，并將b容器放至30°C水浴鍋中，且放置水深為5cm，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪，可加快氯仿甲醇混合液揮發(fā)速度且不會導(dǎo)致樣品中的脂肪隨提取液而揮發(fā)，確保脂肪的活性和純度；
[0030](5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，上下左右振搖b容器2分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁；
[0031](6)加入2ml 10%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫；
[0032](7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用15ml飽和食鹽水淋洗上層清液；
[0033](8)取上清液置于離心管中，加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.3% ;
[0034](9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖；
[0035](10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。
[0036]其中所用的氯仿甲醇混合液為氯仿和甲醇比例為2: I。
[0037]實施例2
[0038]本技術(shù)方案提供了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其包括如下步驟:
[0039](I)取一條成熟的黃顙魚剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.3、肝臟0.9、肌肉1.5和鰓1.5，然后加入4ml氯仿甲醇混合液，混合研磨6分鐘；
[0040](2)將研磨液轉(zhuǎn)至可加熱容器中，向該可加熱容器中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋容器底部，將容器與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2.5h，保持水浴鍋溫度為 53。。；
[0041](3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣；
[0042](4)取出1ml濾液于b容器中，并將b容器放至30°C水浴鍋中，且放置水深為5cm，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪，可加快氯仿甲醇混合液揮發(fā)速度且不會導(dǎo)致樣品中的脂肪隨提取液而揮發(fā)，確保脂肪的活性和純度；
[0043](5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，振搖b容器3分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁；
[0044](6)加入2mll0%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫；
[0045](7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用17ml飽和食鹽水淋洗上層清液；
[0046](8)取上清液置于離心管中，加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.2% ;
[0047](9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖；
[0048](10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。[0049]其中所用的氯仿甲醇混合液為氯仿和甲醇比例為2: I。
[0050]實施例3
[0051]本技術(shù)方案提供了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其包括如下步驟:
[0052](I)取一條成熟的淡水鯊魚剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.5、肝臟
1.0、肌肉2和鰓1.8，然后加入6ml氯仿甲醇混合液，混合研磨10分鐘；
[0053](2)將研磨液轉(zhuǎn)至可加熱容器中，向該可加熱容器中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋容器底部，將容器與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2.5h，保持水浴鍋溫度為 55 0C ；
[0054](3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣；
[0055](4)取出1ml濾液于b容器中，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪；
[0056](5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，振搖b容器4分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁；
[0057](6)加入2ml 10%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫；
[0058](7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用20ml飽和食鹽水淋洗上層清液；
[0059](8)取上清液置于離心管中,加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.5% ；
[0060](9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖；
[0061](10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。
[0062]實施例4
[0063]本技術(shù)方案提供了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其包括如下步驟:
[0064](I)取一條成熟的大刺鰍剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.2、肝臟0.8、肌肉I和鰓1.5，然后加入4ml氯仿甲醇混合液，混合研磨5分鐘；
[0065](2)將研磨液轉(zhuǎn)至可加熱容器中，向該可加熱容器中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋容器底部，將容器與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2h，保持水浴鍋溫度為50 0C ；
[0066](3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣；
[0067](4)取出1ml濾液于b容器中，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪；
[0068](5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，振搖b容器2_4分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁；
[0069](6)加入2mll0%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫；
[0070](7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用15ml飽和食鹽水淋洗上層清液；
[0071](8)取上清液置于離心管中，加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.2% ；
[0072](9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖；
[0073](10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。
[0074]實施例5
[0075]本技術(shù)方案提供了一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其包括如下步驟:
[0076](I)取一條成熟的大刺鰍剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.5、肝臟1.0、肌肉1.5和觸1.8,然后加入6ml氯仿甲醇混合液,混合研磨5_10分鐘；[0077](2)將研磨液轉(zhuǎn)至可加熱容器中，向該可加熱容器中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋容器底部，將容器與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2.3h，保持水浴鍋溫度為 55 0C ；
[0078](3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣；
[0079](4)取出1ml濾液于b容器中，并將b容器放至30°C水浴鍋中，且放置水深為5cm，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪，可加快氯仿甲醇混合液揮發(fā)速度且不會導(dǎo)致樣品中的脂肪隨提取液而揮發(fā)，確保脂肪的活性和純度；
[0080](5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，振搖b容器2_4分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁；
[0081](6)加入2mll0%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫；
[0082](7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用15ml飽和食鹽水淋洗上層清液；
[0083](8)取上清液置于離心管中，加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.4% ；
[0084](9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖；
[0085](10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。
[0086]本方法經(jīng)過對魚體各組織按一定比例進行提取，并加入適量的氯仿甲醇混合液來研磨魚體各組織，使研磨得更加充分，各組織脂肪滲出得更加充分；然后再次添加氯仿甲醇混合液進行回流加熱處理使脂肪充分溶于氯仿甲醇混合液中進一步提取比較純的脂肪溶液；然后為了防止脂肪被氧化，使用氮氣吹干脂肪溶液獲得結(jié)晶脂肪，然后經(jīng)過步驟(5)既能實現(xiàn)預(yù)防脂肪被氧化，又能快速將結(jié)晶脂肪溶解于氫氧化鉀甲醇溶液中，減少脂肪的破壞，促使接下來測定脂肪酸組分更加準(zhǔn)確；再經(jīng)過步驟(6)可以快速將脂肪酯化成脂肪酸，而且可以大大減少脂肪和脂肪酸被氧化和損壞，提高純度，確保測定脂肪酸組分的準(zhǔn)確性；然后經(jīng)過步驟(7)將脂肪酸溶于正庚烷中并用食鹽水去除氣泡提純；然后經(jīng)過步驟(8)可以防止外界水分進入上清液，，再進入步驟(9)和(10)將提純的脂肪酸溶液送入氣相色譜儀獲得色譜圖，然后用面積歸一化法將色譜圖計算出脂肪酸組分。其中能測定出魚類的脂肪酸包括有肉豆蘧酸、肉豆蘧烯酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、十七烷酸、硬脂酯酸、油酸、反油酸、亞油酸、亞麻酸、花生酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、花生四烯酸、芥酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸，經(jīng)過本測定的方法，可以確定出每一類魚不同的脂肪酸組分占總脂肪酸的比值，也可以對應(yīng)計算出每一類魚不同的脂肪酸組分的具體含量值，實現(xiàn)對魚類的脂肪結(jié)構(gòu)的認(rèn)識，從而可以進一步研究魚類的保護和飼養(yǎng)，配制適合各個魚類所需的飼料。
[0087]本發(fā)明用的氣相色譜儀的原理是利用樣品中各組分的沸點、極性或吸附性能不同，導(dǎo)致各組分在色譜柱中的氣相和固定液相間的分配系數(shù)不同，當(dāng)氣化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運行時，組分就在其中的兩項間反復(fù)多次的分配，由于固定相對各組分的吸附或溶解能力不同，因此各組分在色譜柱中的運行速度就不相同，經(jīng)過一定的柱長后，便彼此分離，順利離開色譜柱進入檢測器產(chǎn)生的訊號經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組分的色譜圖。面積歸一化法是根據(jù)樣品中各脂肪酸組分分別出峰在色譜圖上，而魚體內(nèi)可檢測出的大約有12-17種脂肪酸，這些脂肪酸中的每一種都會在色譜圖上形成一個峰，每個峰的面積加起來設(shè)為100，每個脂肪酸形成的峰在100中占多少就是這種脂肪酸在所有脂肪酸中所占的比例，既為本發(fā)明要測定的魚體脂肪酸組分的相對含量。[0088]盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)。
【權(quán)利要求】
1.一種測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)取一類魚中的一條成熟魚剖腹，取出魚體組織的重量百分比為腹脂0.2-0.5、肝臟0.8-1.0、肌肉1-2和觸1.5-1.8,然后加入4_6ml氯仿甲醇混合液,混合研磨5_10分鐘； (2)將研磨液轉(zhuǎn)至可加熱容器中，向該可加熱容器中再加入15ml氯仿甲醇混合液以覆蓋容器底部，將容器與冷凝管連接好并置于恒溫水浴鍋中，回流2-2.5h，保持水浴鍋溫度為50°C~55? ； (3)將液體過濾到a容器中，去除殘渣； (4)取出1ml濾液于b容器中，用氮氣吹干濾液，提取到結(jié)晶脂肪； (5)加2ml0.5mol/L氫氧化鉀甲醇溶液到結(jié)晶脂肪中，充入氮氣，振搖b容器2_4分鐘至結(jié)晶脂肪完全溶解，同時用自來水冷卻容器外壁； (6)加入2mll0%三氟化硼乙醚或三氟化硼甲醇溶液到b容器中，混合均勻，充入氮氣后將b容器置于50°C水浴中并靜置3分鐘后冷卻至常溫； (7)加2ml的正庚烷并振蕩均勻后靜置，用15ml-20ml飽和食鹽水淋洗上層清液； (8)取上清液置于離心管中,加入無水硫酸鈉占所述上清液質(zhì)量的0.2-0.5% ； (9)取上層清液送入氣相色譜儀獲得色譜圖； (10)將色譜圖用面積歸一化法計算脂肪酸組分的相對含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，所述氯仿甲醇混合液為氯仿和甲醇的比例是2: I。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，所述的魚為紅羅非魚、黃顙魚、淡水鯊魚、大刺鰍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，所述步驟(1)取每條成熟魚體各組織的重量百分比為腹脂0.5、肝臟1.0、肌肉1.5和鰓1.8，加入的氯仿甲醇混合液為15ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，所述步驟(2)的可加熱容器為圓底燒瓶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，所述步驟(2)的回流為用氯仿甲醇混合液類的易揮發(fā)有機溶劑提取脂肪成分的過程，其為將研磨液與有機溶劑混合，并加熱混合液，同時冷卻揮發(fā)的有機溶劑使其恢復(fù)液態(tài)混入研磨液中繼續(xù)溶解脂肪，反復(fù)進行加熱液態(tài)的有機溶劑和冷卻氣態(tài)的有機溶劑直至脂肪成分溶于有機溶劑中。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述測定魚體組織脂肪酸組分的方法，其特征在于，所述步驟(4)氮吹過程中還包括將b容器放至30°C水浴鍋中，且放置水深為5cm。
【文檔編號】G01N30/88GK104034837SQ201410269446
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】陳濤 申請人:南寧學(xué)院