一種使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法，其包括以下色譜條件：所述流動相為體積比為90：10～100：0的含有焦磷酸鈉和四丁基溴化銨的水溶液和甲醇的混合溶液，所述水溶液pH為7.0～8.0，其中焦磷酸鈉的濃度為0.02～0.04mol/L，四丁基溴化銨的濃度為0.272～0.322g/L；所用色譜柱以十八基硅烷鍵合硅膠為填充劑，高效液相色譜儀的流速為0.8-1.2ml/min，檢測波長218～282nm，進樣量為5～50μl。使用本發(fā)明所提供的檢測方法，供試品及原料中主峰與相鄰雜質峰的分離度均大于1.5，主峰的柱效均大于3000，拖尾因子好，系統(tǒng)適用性良好。
【專利說明】—種使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物檢測【技術領域】，尤其涉及使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法。
【背景技術】
[0002]骨質疏松癥(OP)是由多種原因引起的，以骨強度降低和骨折危險性增加為特征的一種全身性骨疾病，所述骨折危險性增加歸因于骨的脆性增加。骨強度主要取決于兩個因素:骨礦密度和骨質量。影響骨質量的因素包括骨微結構、骨轉化、損傷積累(如微骨折)和骨的礦化狀況等。骨強度的降低使骨在遭受外力時易發(fā)生骨折。隨著人類壽命的延長，老齡化是影響人類健康的新問題。骨質疏松癥及其引起的骨折在當前常見疾病中位居第7位，嚴重威脅著中、老年人的健康，成為全球公共衛(wèi)生問題。
[0003]根據我國“九五”攻關課題對我國五大行政區(qū)(華北、華東、中南、西南、東北)48615人(其中7182人用雙能X線吸收測定儀測量腰椎及股骨骨礦密度)的流行病學研究結果表明，在40歲以上人群中，骨質疏松癥及低骨量的患病率女性分別為19.9%和32.4%，男性分別為11.5%和45.8%。60歲以上人群的骨質疏松癥及低骨量患病率女性分別為28.6%和13.8%，男性分別為15%和12.7%?？偦疾÷史謩e為22.6%和13.3%。據此推測，我國60歲以上骨質疏松癥患者大約為2900萬例，低骨量患者為1700萬例。
[0004]雙膦酸類藥物(雙膦酸和雙膦酸鹽)是一種焦磷酸鹽類似物，是將后者中的P-O-P連接用P-C-P連接代替，其為人體富含的焦磷酸化合物的類似物，它在血中濃度低，一經吸收，迅速進入骨組織，吸附于羥磷灰石晶體表面，抑制磷酸鈣結晶形成聚集和溶解，并抑制軟組織異位鈣化，影響破骨細胞的活性。70年代中期開始應用于治療0P，但長期應用會阻止正常骨組織鈣化，增加骨折發(fā)生率。80年代后期通過改變其結構，消除了抑制骨鈣化的缺陷，還加強了抑制骨質吸收的功效。雙膦酸鹽療法可增加骨量已被證實，但該藥對骨骼結構損害后的潛在保護作用不清楚，其主要不良反應為胃腸道刺激和腎損害。目前雙膦酸鹽已成為防治OP最具潛力的藥物之一。該類藥物對于治療各種骨骼疾病如惡性高鈣血癥、骨質疏松和變形性骨炎等有很好的療效。
[0005]雙膦酸鹽類的藥物的發(fā)展按藥效學可分為三代。第一代系不含氮的雙膦酸鹽，最早應用的是依替膦酸鈉(etidronate)，早在20世紀70年代就已用于臨床。由于在治療劑量下長期使用會導致骨軟化，故目前已很少使用。應用最廣泛的第一代雙膦酸鹽是氯屈膦酸鈉。第二代雙膦酸鹽抗骨質吸收的作用明顯優(yōu)于第一代產品，其以含氨基結構為主要特點，其中帕米膦酸鈉的應用最為廣泛。第三代為異環(huán)型含氮雙膦酸鹽，以唑來膦酸為代表，其抗骨吸收的作用更強，臨床應用也更方便。米諾膦酸屬于第三代氮雜芳基雙膦酸鹽衍生物，用于治療骨質疏松，其主要成分為米諾膦酸水合物，化學名為:U-羥基-2-[咪唑并(l，2-a)吡啶-3-基]亞乙基}雙膦酸一水合物，結構如式I所示。
[0006]
【權利要求】
1.一種使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法，其特征在于，包括以下色譜條件: 所述流動相為體積比為90:10?100:0的含有焦磷酸鈉和四丁基溴化銨的水溶液和甲醇的混合溶液，所述水溶液pH為7.0?8.0，其中焦磷酸鈉的濃度為0.02?0.04mol/L,四丁基溴化銨的濃度為0.272?0.322g/L ;所用色譜柱以十八基硅烷鍵合硅膠為填充劑，高效液相色譜儀的流速為0.8-1.2ml/min，檢測波長218?282nm，進樣量為5?50 μ I。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述含焦磷酸鈉、四丁基溴化銨的水溶液與甲醇的體積為95:5。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述含焦磷酸鈉、四丁基溴化銨的水溶液中，焦磷酸鈉的濃度為0.02mol/L ;四丁基溴化銨的濃度為0.322g/L。
4.根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述含焦磷酸鈉、四丁基溴化銨的水溶液的pH為8.0。
5.根據權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，供試品為米諾膦酸片劑研磨成的粉末。
6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為規(guī)格為4.6mmX 250mm, 5 μ m 的 Unimate AQ-C18 色譜柱。
7.根據權利要求1-6任一項所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀使用的流速為 1.0ml/min。
8.根據權利要求1-7任一項所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀的檢測波長優(yōu)選為218nm。
9.根據權利要求1-8任一項所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀的進樣量為 20 μ I。
10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下色譜條件: 所述流動相為體積比為95:5的含有焦磷酸鈉和四丁基溴化銨的水溶液和甲醇的混合溶液，所述水溶液PH為8.0，其中焦磷酸鈉的濃度為0.02mol/L,四丁基溴化銨的濃度為.0.322g/L ;所用色譜柱為規(guī)格為4.6mmX 250mm, 5 μ m的Unimate AQ-C18色譜柱，高效液相色譜儀的流速為lml/min，檢測波長218nm，進樣量為20 μ I。
【文檔編號】G01N30/02GK103983709SQ201410203463
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月14日 優(yōu)先權日:2014年5月14日
【發(fā)明者】劉佳, 王莉, 林維政 申請人:永信藥品工業(yè)(昆山)有限公司