修飾的納米金試紙比色法快速檢測三聚氰胺的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提出了一種基于修飾納米金的試紙比色法以可視化快速檢測三聚氰胺，屬于食品分析領域。本發(fā)明的主要特征在于將納米技術和試紙結合引入到三聚氰胺的檢測應用中；探針納米金在試紙上處于分散狀態(tài)，當三聚氰胺存在時，由于三聚氰胺與修飾探針上的二硫蘇糖醇的相互作用，導致探針納米金從分散狀態(tài)變成聚集狀態(tài)，同時顏色由紅色變?yōu)樗{色；通過比對樣品與色卡就可以對三聚氰胺進行定性及半定量分析。該方法相比于常規(guī)的可視化檢測方法具有用量少，價格更為廉價，顏色現(xiàn)象更為明顯等優(yōu)點。
【專利說明】修飾的納米金試紙比色法快速檢測三聚氰胺
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種食品安全分析方法，具體是指通過肉眼對試紙比色，進而對三聚氰胺的含量進行定性及半定量檢測。本方法屬于食品分析領域。
【背景技術】
[0002]三聚氰胺(化學式=C3H6N6)，俗稱密胺、蛋白精，是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，被用作化工原料來制備聚合物樹脂，塑料，涂料，粘合劑等。三聚氰胺對身體有害，不可用于食品加工或作為食品添加物來使用。
[0003]三聚氰胺是一種廉價的材料，含氮量比較高，在66%以上，而傳統(tǒng)的檢測蛋白質含量的方法包括凱氏定氮法是以蛋白質中氮的含量為基準來測定的，因此商家通過違法添加三聚氰胺到食品中這種不法行為來獲取巨額利潤。盡管三聚氰胺是低毒的，但是過量的攝入會對人體產生巨大的危害，導致腎結石，造成動物和人體的腎功能衰竭。三聚氰胺的非法使用引起了一系列食品安全事件，比如，2007年發(fā)生在美國的三聚氰胺事件，導致數千的貓和狗死亡；2008年發(fā)生在中國的成千上萬的嬰幼兒腎結石都是因為食用了添加了三聚氰胺的奶粉或奶制品。
[0004]目前三聚氰胺的檢測方法包括拉曼光譜分析法、液相色譜-質譜聯(lián)用法、高效液相色譜法等。其中，高效液相色譜法是檢測食品中三聚氰胺的常用方法。此方法需要經過樣品提取，過柱純化，濃縮后才能進行分析，過程繁瑣且花費較高，樣品損失也較大，尤其不適合現(xiàn)場快速測定和 普及。因此，迫切需要快速、簡便以及可用于現(xiàn)場檢測三聚氰胺的新方法。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術問題在于將納米技術和試紙結合引入到三聚氰胺的檢測應用中，提供一種基于納米金的試紙比色法實現(xiàn)可視化快速檢測三聚氰胺。該方法相比于常規(guī)的可視化檢測方法具有用量少，價格更為廉價，顏色現(xiàn)象更為明顯的優(yōu)點。
[0006]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所提出的三聚氰胺快速檢測方法，采用試紙分析，實現(xiàn)三聚氰胺的現(xiàn)場快速檢測。其特征在于:
[0007]1.修飾探針的制備:首先采用經典的納米金制備方法，即檸檬酸三鈉還原制備納米金；之后修飾上二硫蘇糖醇，從而得到此方法所需要的修飾探針。制備方法是往3ml納米金中加入500 μ I的1.0X IO-5M 二硫蘇糖醇，于室溫一定轉速漩渦混合2h，制好的修飾探針放于4°C下保存?zhèn)溆谩?br> [0008]2.色板的制備:依據國標，三聚氰胺的食品限量標準為2.5mg/kg,約2.0X 10_5M，此時顏色為藍色。配制系列濃度的三聚氰胺(色卡上，自左至右三聚氰胺濃度分別為:(1.0Χ10-2Μ、1.0Χ10-3Μ、5.0Χ10-4Μ、1.0Χ10-4Μ、2.0Χ10-5Μ、1.0Χ10-5Μ、0)，移取 10μ I 的三聚氰胺于Whatman濾紙上，晾干后，隨即加入30 μ I修飾的納米金，晾干后拍照，制得色卡。其中，當三聚氰胺濃度大于等于2.0X 10_5Μ時，試紙顏色為藍色；當三聚氰胺濃度低于2.0X 10_5M時，顏色為紅色。進一步證明此方法滿足國家標準。
[0009]3.常溫下，移取10 μ I的三聚氰胺樣品于濾紙上，晾干后，隨即加入30 μ I修飾的納米金。晾干后，觀察其顏色變化，依據色板來對比，即得三聚氰胺的大致含量并確定是否超標。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:
[0011]I)室溫下的可視化檢測，視覺現(xiàn)象明顯。
[0012]2)操作簡單，用時短，具有一定的準確性和靈敏度。
[0013]3)樣品及探針用量少，且所用材料均低價。
[0014]4)可進一步優(yōu)化進而應用到牛奶中三聚氰胺的檢測。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0015]圖1是三聚氰胺與二硫蘇糖醇的作用機理示意圖。
[0016]圖2是色卡示意圖:三聚氰胺含量與納米金顏色變化對照圖。
【具體實施方式】
[0017]1.實驗所用到的試劑均為買來直接使用，不需提純；所有的溶液均使用二次去離子水配置，如氯金酸、檸檬酸三鈉、二硫蘇糖醇和三聚氰胺溶液。
[0018]2.納米金制備:將150mL氯金酸溶液(濃度為ImM)置于帶有回流裝置的圓底燒瓶中，加熱至沸，向其中迅速加入15mL檸檬酸三鈉水溶液(38.8mM)。混合溶液繼續(xù)攪拌回流15min直至形成酒紅色納米金溶液，移走加熱裝置，繼續(xù)攪拌溶液，直至冷卻至室溫。用
0.45 μ m濾膜過濾，取出濾液置于4°C條件下備用。
[0019]3.探針的制備:往3ml制得的納米金中加入500 μ I的1.0 X 10_5Μ 二硫蘇糖醇，于室溫一定轉速漩渦混合2h，制好的修飾探針放于4°C下保存?zhèn)溆谩?br> [0020]4.于Whatman濾紙上,滴加10 μ I三聚氰胺樣品，晾干后,加30 μ I探針納米金，晾干后，對比色卡，對三聚氰胺樣品進行定性及半定量分析。
[0021]5.當三聚氰胺含量較低(低于2.0Χ10_5Μ)或沒有時，探針在試紙上處于分散狀態(tài)，呈現(xiàn)紅色；當三聚氰胺含量較高時，由于三聚氰胺與二硫蘇糖醇的相互作用(圖1)，導致探針納米金從分散狀態(tài)變成聚集狀態(tài)，同時顏色由紅色變?yōu)樗{色(圖2)，通過比對樣品與色卡就可以對三聚氰胺進行定性及半定量分析。
[0022]上面結合附圖對本發(fā)明優(yōu)選的【具體實施方式】和實施例作了詳細的說明，但是本發(fā)明并不限于上述實施方式和實施例，在本領域技術人員所具備的知識范圍內，還可以在不脫離本發(fā)明構思的前提下作出各種變化。
【權利要求】
1.基于修飾的納米金試紙比色法以可視化快速檢測三聚氰胺，其特征在于:將納米技術和試紙結合引入到三聚氰胺的檢測應用中；探針納米金在試紙上處于分散狀態(tài)，當三聚氰胺存在時，由于三聚氰胺與修飾探針上的二硫蘇糖醇的相互作用，導致探針納米金從分散狀態(tài)變成聚集狀態(tài)，同時顏色由紅色變?yōu)樗{色；通過比對樣品與色卡就可以對三聚氰胺進行定性及半定量分析。
2.如權利要求1所述的基于修飾的納米金試紙比色法以可視化快速檢測三聚氰胺，其特征在于:制備修飾探針，3ml納米金中加入500 μ I的1.0Χ10_5Μ 二硫蘇糖醇，于室溫一定轉速漩渦混合2h。
3.如權利要求1所述的基于修飾的納米金試紙比色法以可視化快速檢測三聚氰胺，其特征在于:檢測時，濾紙上依次加入三聚氰胺樣品、探針納米金；其中三聚氰胺樣品用量10 μ I ;晾干后再加入探針納米金,其用量為30 μ I。
4.如權利要求1所述的基于修飾的納米金試紙比色法以可視化快速檢測三聚氰胺，其特征在于:三聚氰胺含量較低時，樣品試紙為紅色；含量超標時，樣品試紙為藍色。
5.如權利要求1所述的基于修飾的納米金試紙比色法以可視化快速檢測三聚氰胺，其特征在于:比色時，等待濾紙晾干后進行色卡對比，更好對三聚氰胺樣品進行定性及半定量分析。
【文檔編號】G01N21/78GK103926249SQ201410190920
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年5月7日 優(yōu)先權日:2014年5月7日
【發(fā)明者】趙紅, 肖參 申請人:中國科學院大學