一種對(duì)照提取物的標(biāo)定方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，對(duì)照提取物共有n批，每批均含有m個(gè)成分，將它們配成溶液，分別利用色譜法將其分離檢測(cè)，以不同的進(jìn)樣體積進(jìn)樣并對(duì)各個(gè)成分進(jìn)行線性回歸，得出回歸方程，利用此方程計(jì)算出同一成分在不同批次對(duì)照提取物中的信號(hào)質(zhì)量比，列出一個(gè)n行的m元一次方程組，這個(gè)方程組的根共有Cnm種解，統(tǒng)計(jì)每種根，在相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于可接受的判別誤差R時(shí)，標(biāo)定成功。此標(biāo)定方法可成功的解決對(duì)照品來源困難的問題，為中藥、天然藥物提供更科學(xué)合理的標(biāo)準(zhǔn)制定思路，為化藥品種中有關(guān)物質(zhì)的準(zhǔn)確定量提供混合對(duì)照品，還為歸一法定對(duì)照品純度的缺限提供了一個(gè)更好的補(bǔ)充。
【專利說明】-種對(duì)照提取物的標(biāo)定方法及應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及分析領(lǐng)域，具體的涉及一種對(duì)照提取物的標(biāo)定方法及應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 在進(jìn)行藥品的研發(fā)和檢驗(yàn)過程中，對(duì)照品起著一個(gè)非常重要的角色，然而對(duì)照品 的分離和精制是一項(xiàng)繁瑣而又困難的工作?，F(xiàn)行新藥注冊(cè)法規(guī)上對(duì)于含量測(cè)定用對(duì)照品的 技術(shù)要求是；一般化藥對(duì)照品的純度要求為99. 5%，有關(guān)物質(zhì)對(duì)照品純度要求為95%，中藥 對(duì)照品的純度要求為98%，所述的純度檢測(cè)方法大都采用歸一法，為了達(dá)到該個(gè)純度，研究 者用盡各種分離方法如萃取、柱色譜、高速逆流色譜、制備液相色譜、反復(fù)重結(jié)晶等手段，即 便該樣，還不能達(dá)到含量測(cè)定所需的純度，期間所用到的大量有機(jī)溶劑，試驗(yàn)過程中試劑的 消耗帶來的環(huán)境污染和人體的健康是巨大的。
[0003] 在進(jìn)行中藥、天然藥物等含多種成分藥物的質(zhì)量研究時(shí)，由于成分復(fù)雜，測(cè)量某一 兩個(gè)成分并不能代表該產(chǎn)品的質(zhì)量，欲分離出其中的純大多數(shù)成分并作為對(duì)照品進(jìn)行含量 測(cè)定時(shí)，就目前的技術(shù)來說是不現(xiàn)實(shí)的，縱然投入大量的物力、人力，浪費(fèi)大量的有機(jī)溶劑， 甚至動(dòng)用制備色譜等，從經(jīng)濟(jì)上和W后的推廣上也是不合算的。
[0004] 對(duì)于有關(guān)物質(zhì)用對(duì)照品，分離則更困難。
[0005] 可喜的是針對(duì)中藥成分復(fù)雜該一現(xiàn)狀，人們提出了使用對(duì)照提取物作為對(duì)照，制 定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，簡(jiǎn)化了應(yīng)用，降低了成本。文獻(xiàn)馬玲云，馬雙成中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的發(fā)展現(xiàn)狀與展 望[J].中國藥事，2010,24 (12):1232-1235.上提到了對(duì)照提取物的標(biāo)定要求；1)原料 的來源、提取部位及制備工藝應(yīng)明確；2)主成分及含量相對(duì)固定（TLC、HPLC、GC);3)理化特 征換批間應(yīng)一致(溶解度、相對(duì)密度、折光率、旋光度等)。從上述要求可知，對(duì)照提取物中的 主成分只是含量相對(duì)固定，并不能標(biāo)定出其具體的含量比例，如若確定其具體的主成分含 量，還得使用對(duì)照品進(jìn)行測(cè)定。
[0006] 就目前的行業(yè)現(xiàn)狀，對(duì)照品的純度檢測(cè)方法通常是用歸一法進(jìn)行檢測(cè)，W主成分 峰面積占所有成分的峰面積的百分比，此種檢測(cè)方法有一個(gè)缺限，不同成分的峰面積與質(zhì) 量比通常是不同的，因此歸一法測(cè)定對(duì)照品的純度實(shí)際上是有一定的方法誤差，如同一對(duì) 照品，采用HPLC-UV法檢測(cè)純度，當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)不同時(shí)，檢測(cè)結(jié)果是不一樣的。
[0007] 如上，在新藥研發(fā)和藥品的質(zhì)量控制中，對(duì)照品的來源是相當(dāng)?shù)睦щy，歸一法測(cè)定 對(duì)照品純度有一定的缺限，如何突破技術(shù)難關(guān)，弄清中藥中的大部分成分的質(zhì)量，還能解決 化藥中有關(guān)物質(zhì)對(duì)照品來源困難，完善對(duì)照品的純度標(biāo)定方法，對(duì)多成分對(duì)照提取物中各 成分的含量進(jìn)行標(biāo)定，并將對(duì)照提取物作為對(duì)照進(jìn)行新藥研發(fā)和藥品的質(zhì)量控制是本發(fā)明 所要解決的問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明針對(duì)上述問題，提出了一種對(duì)照提取物的各組分的標(biāo)定方法，在標(biāo)定過程 中不需要使用高純度的對(duì)照品，而只需多批對(duì)照提取物。
[0009] 本發(fā)明是該樣實(shí)現(xiàn)的： 一種對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，對(duì)照提取物共有n個(gè)批次，分別為第1、2、3…… i……n化每個(gè)批次均含有m個(gè)成分，它們分別為V A2、As……k;……A。，其中n > m， Ki《n，Kj《m，每批對(duì)照提取物通過色譜法W在儀器中進(jìn)行檢測(cè)，各種成分均能達(dá)到分 離的效果，成分Aj.的信號(hào)質(zhì)量Nj.與一定范圍巧j,，Dj,]內(nèi)的信號(hào)值Sj.存在如下的一一對(duì)應(yīng) 函數(shù)關(guān)系式： Sj 二 fj(Nj)，式中，j=l、2、3......m。
[0010] 步驟一、各批對(duì)照提取物中的各成分關(guān)系式 每批對(duì)照提取物如第i批對(duì)照提取物，均配制成一定的濃度W-定的進(jìn)樣體積Vi 進(jìn)樣，進(jìn)樣質(zhì)量為Mi=。* Vi，第i批對(duì)照提取物中的成分Ai、A2、As......Aj......Am的進(jìn)樣濃 度分別為C。、、C。......Cy...... Cim，在儀器中的信號(hào)質(zhì)量分別為N。、Nc、Ni3 ...... N?！璑im ，它們?cè)趦x器中的信號(hào)值分別為S。、Si2、Si3……S?！璖im,各批對(duì)照提取 物中的各組分存在如下的關(guān)系式：

【權(quán)利要求】
1. 一種對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 對(duì)照提取物共有η個(gè)批次，分別為第1、2、3……i……η批，每個(gè)批次均含有m個(gè)成分， 它們分別為Αρ A2、A3……Α』……Am，其中η彡m，l〈i彡n，l〈j彡m，每批對(duì)照提取物通過 色譜法W在儀器中進(jìn)行檢測(cè)，各種成分均能達(dá)到分離的效果，成分?的信號(hào)質(zhì)量％與一定 范圍[Df D"]內(nèi)的信號(hào)值&存在如下的一一對(duì)應(yīng)函數(shù)關(guān)系式： Sj =心叫），式中，j=l、2、3……m 步驟一、各批對(duì)照提取物中的各成分關(guān)系式 每批對(duì)照提取物如第i批對(duì)照提取物，均配制成一定的濃度Q，以一定的進(jìn)樣體積\ 進(jìn)樣，進(jìn)樣質(zhì)量為吣=(；* \，第i批對(duì)照提取物中的成*ApA2、A3……A」……進(jìn)樣濃 度分別為C n、Ci2、Ci3……Cu……Cim，在儀器中的信號(hào)質(zhì)量分別為N n、Ni2、Ni3…… Njj……Nim ，它們?cè)趦x器中的信號(hào)值分別為Sn、Si2、Si3……Si」……S im，各批對(duì)照提取 物中的各組分存在如下的關(guān)系式： Ml = Nn+ N12 + N13 ……&……+ Nlm - N21+ N22 +N23......N2j......+ N2m Mi = Nn+ Ni2 + Ni3 ……心……+ Nim Mn = Nnl+ Nn2 + Nn3......NnJ......+ N· S?！?= f爲(wèi)） NfC# ν, 其中，i=l、2、......n j=l、2、......m 步驟二、方程組的建立 由于成分?的信號(hào)質(zhì)量與信號(hào)值存在一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系，將任一批對(duì)照提取物溶 液如第1批，以不同的進(jìn)樣體積（V)通過色譜法W分離并進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)函數(shù)& = &(%)= f^CjV)可知： 由于是一個(gè)固定的未知值，因此對(duì)于第1批對(duì)照提取物所配制的溶液，存在函數(shù)關(guān) 系式4 = g^v)及它的反函數(shù)v= g^(sp，即第1批對(duì)照提取物的溶液的不同進(jìn)樣體積 (V)，有一個(gè)固定的信號(hào)值與之相對(duì)應(yīng)，同樣，一個(gè)固定的信號(hào)值，存在第1批對(duì)照提取物溶 液的某個(gè)進(jìn)樣體積與之相對(duì)應(yīng)，且這兩個(gè)函數(shù)的相關(guān)系數(shù)是通過線性回歸可確定出具體數(shù) 值，令隊(duì)』=λ υ = λ u ，式中，λ υ是信號(hào)質(zhì)量比，則存在下列等式： s ij = f j (N i j) = f j (Νυ* λ ij) = f j (cu*vi* λ ij) = gj (νι* λ ij ) s u = fj(N ij) =gj(vi) λ u = gj-1(S u )/ V!，其中 i=2、3......n，j=l、2、......m 在上式中，SpSn、％是具體的固定值，函數(shù)& (V)的相關(guān)系數(shù)是固定的，因此入^ 是可以計(jì)算出的一個(gè)具體值，這樣，根據(jù)步驟一中的關(guān)系式，可得到如下的方程組： 1. Ml = Nn+ N12 + N13……&……+ Nlm 2. M2 = N21+ N22 +N23......N2j......+ N2ni =λ 21*Nn+ λ 22* N12 + λ 23* N13......入 2產(chǎn)心......+ 入 2ηι*Ν1ηι i) Mi = Nn+ Ni2 + Ni3……心……+ Nim =λ n*Nn+ λ i2* N12 + λ i3* N13...... λ ......+ λ ini*Nlni n) Mn = Nnl+ Nn2 + Nn3......Nnj......+ N· =λ nl*Nn+ λ n2* N12 + λ n3* N13...... λ jNu.......+、*?"> 步驟三、方程組的求解 選擇其中的m行，共有u=Cn°'種m行組成的方程組， 解第1種m行的方程組，得出第1批對(duì)照提取物中各成分在儀器中的信號(hào)質(zhì)量為： (Nm、N121......Njjj......Nlml )， 各成分的信號(hào)質(zhì)量和為： Ni〇i= Nm+ N121 + N131......Nij!......+ Nlml, 記 Qn- (Nm，Nm......Ν。、......Nlml，N101); 解第2種m行的方程組，得出第1批對(duì)照提取物中各成分在儀器中的信號(hào)質(zhì)量為： (N112、N122......N1J2......Nlm2), 各成分的信號(hào)質(zhì)量和為： Ni〇2_ N112+ N122 + Ν132......N1J2......+ Nlm2， 記 Q12_ (Ν112, Ν122......Nlj2......Nlm2, Ν1(ι2); 解第k種m行的方程組，其中1 < k < u，得出第1批對(duì)照提取物中各成分在儀器中的 信號(hào)質(zhì)量為： (Nllk、N12k......Nljk......Nlmk)， 各成分的信號(hào)質(zhì)量和為： Ni〇k_Nllk+ N12k + N13k......N1Jk......+ Nlmk, 記 Qik_ (Nnk，N12k......Nljk......Nlmk，N 1(lk); 解第u種m行的方程組，得出第1批對(duì)照提取物中各成分在儀器中的信號(hào)質(zhì)量為： (Nllu、N12u......Nlju......Nlmu)， 各成分的信號(hào)質(zhì)量和為： Ni〇u=Nllu+ N12u + N13u......Nlju......+ Nlmu， 記 Qlu- (Nllu，N12u......Nlju......Nlmu，N 10u) 步驟四、統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物中各成分的信號(hào)質(zhì)量及信號(hào)質(zhì)量總和 統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物的第1種成分Ai信號(hào)質(zhì)量的U種值（Nm，N112，……Nllk…… Nllu)，得出統(tǒng)計(jì)值（Tn，en)，其中Tn為平均值，e n為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Pn= en/ T11; 統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物的第2種成分Α2信號(hào)質(zhì)量的u種值（Ν121，Ν122,……N 12k……N12u)， 得出統(tǒng)計(jì)值（T12, e12)，其中T12為平均值，e12為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差P 12 = e12/ T12 ; 統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物的第j種成分Α」信號(hào)質(zhì)量的u種值（Nw，Nlj2,……Nljk……N lju)， 得出統(tǒng)計(jì)值（L，eij)，其中為平均值，eij為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Ρυ_ = eij/ ; 統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物的第m種成分信號(hào)質(zhì)量的u種值（Ν1η?，Ν1ηι2，......N lnik...... Nlmu)，得出統(tǒng)計(jì)值（Tlm，elm)，其中Tlm為平均值，e lm為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Plm = elm/Tlm ; 統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物的m種成分信號(hào)質(zhì)量總和的u種值（N1CI1，N1CI2,......N 1(lk......N1(lu)， 得出統(tǒng)計(jì)值（T1CI，e1(l)，其中T1(l為平均值，e1(l為標(biāo)準(zhǔn)偏差；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差P 1(l = e1(l/T1(l ; 當(dāng)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差Pn、P12……Pu……。均低于可接受的判另Ο誤差R時(shí)，貝1J標(biāo)定成功， 第1批對(duì)照提取物的各成分在儀器中的信號(hào)質(zhì)量為（Tn，T12…………Tlm)，總信號(hào)質(zhì)量為 T1(l，第1批對(duì)照提取物的各成分的百分含量或者為（Τη/ Μ。L/X…………Tlm/ ΜΡ， 或者為（Tn/ T1(l，T12/ T1(l……IV Τ1(ι……Tlm/ Τ1(ι)，其中，可接受的判別誤差R與儀器的精 密度、操作人員的操作誤差、提取物純化的難易程度、提取物中成分的穩(wěn)定性等有關(guān)，其值 或者是5%，或者3%，或者2%，或者1%等。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 在步驟三中解出了第1批對(duì)照提取物中各成分的信號(hào)質(zhì)量及信號(hào)質(zhì)量總和的u種值， 即 Qik_ (Nnk，N12k......Nljk......Nlmk，N 10k)，其中，k-l、2......u ; 于是可計(jì)算出第i批對(duì)照提取物中各成分的信號(hào)質(zhì)量及信號(hào)質(zhì)量總和的U種值，即 Qik_ (Nnk，Ni2k......Nijk......Nimk，N i0k) =(λ n*Nllk，λ i2*N12k......入 ij*N1Jk......入 im*Nlnik，Ni0k)， 其中，i=2、3......n，k=l、2、......u ; 在步驟四中，除了統(tǒng)計(jì)第1批對(duì)照提取物各成分的信號(hào)質(zhì)量及信號(hào)質(zhì)量總和的相對(duì)標(biāo) 準(zhǔn)偏差（Pn，P12…………Plm，P10)夕卜，還應(yīng)統(tǒng)計(jì)： 第i批對(duì)照提取物中各成分的信號(hào)質(zhì)量及信號(hào)質(zhì)量總和的u種值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（Ρη， Pi2……Pi」……？^--))，其中1=2、3……η; 當(dāng)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差？^均低于可接受的判別誤差R時(shí)，則標(biāo)定成功，其中i=l、2、3……n， j=l、2、3......m、0〇
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 函數(shù)S」=fj(Nj)為直線線性關(guān)系時(shí)，即 sj= f j (Nj) =aj*Nj+bj 對(duì)第1批對(duì)照提取物溶液，作如下的函數(shù)變換： Sj= fj(Nj)=aj*Nj+bj= a/KQ/lAO+bj: (afQj) *V+bj=gj(V) 以不同的進(jìn)樣體積（V)進(jìn)樣，可回歸出函數(shù)g」(V)= (a」％」）*V+bj的相關(guān)系數(shù)（a'Cy、 bj)的具體值，這樣對(duì)于第1批和第i批對(duì)照提取物，令Nu= λ Ny_，有下列的關(guān)系式： sij= f j (Nij) =aj*Nij+bj= aj* ( λ ij*Nij) +bj su= f j (Nij) =aj*Nij+bj 解上二式，可得(δ。一 bj)/ ( Si」一 bj)， 其中，i=2、3……n j=l、2、......m 當(dāng)b j的絕對(duì)值與Su中最小的信號(hào)值的比值很小如低于1%時(shí)，線性關(guān)系式可以近似的 認(rèn)為是通過原點(diǎn)的，λ 的大小可以估算為Sij/Sij，此時(shí)信號(hào)質(zhì)量比就是信號(hào)值的比。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 函數(shù)S」=fj(Nj)為對(duì)數(shù)線性關(guān)系時(shí)，即 sj= f j (Nj) =10~ (aj*ig (Nj) +bj) 對(duì)第一批對(duì)照提取物溶液，作如下的函數(shù)變換：sj= fj(Nj)=l〇~ (aJ*lg(NJ)+bJ) =10~ ( a^lg(Cu^V)+bj) =10~( aj*lg(V)+bj+ a^lgiX^j)) = gj(V) 函數(shù) Sj =g」(V) =10~( a」*lg(V)+bj+ aflgiX^j))中的相關(guān)系數(shù)（a」、bj+ aflg^j))是 通過試驗(yàn)及線性回歸能得出具體值，這樣對(duì)于第一批和第i批，令Nij= λ ，有下列的關(guān) 系式 ^(8^-)= aJ*lg(N1J)+bJ ^(8^·)= aJ*lg(NiJ)+bJ= aj*lg( λ )+bj saflgOijHaflgCNuO+bj =aj*lg( λ u ) + lgGu) 解上二式，可得 ％=1〇~{ [lgGij) - lg^j)] / a』} 其中，i=2、3……η j=l、2、......m 。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 對(duì)于第i批對(duì)照提取物的八」成分，若Su不在區(qū)間[DfD#]內(nèi)，可通過調(diào)節(jié)第i批的進(jìn) 樣質(zhì)量為V 使進(jìn)樣后的信號(hào)值Si/落在區(qū)間[DyDp]內(nèi)， Yu是一個(gè)通過試驗(yàn)?zāi)艿玫降木唧w數(shù)值，此時(shí)，隊(duì)/ =Yu*N^入^的計(jì)算方法如下： Slj= aj*Nlj+bj su ' =aj*Nij ； + bj = aj*Nij* Y ij + bj = aj* λ ij * Nu * Y ij + bj =(Su. - bj * λ u u + bj λ ij= (SiJ ' 一 bj) / ( Su - bj)/ Y ij 其中，i=2、3……n j=l、2、......m〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 對(duì)于第i批對(duì)照提取物的八」成分，若Su不在區(qū)間[DfD#]內(nèi)，可通過調(diào)節(jié)第i批的進(jìn) 樣質(zhì)量為V 使進(jìn)樣后的信號(hào)值Si/落在區(qū)間[DyDp]內(nèi)， Yu是一個(gè)通過試驗(yàn)?zāi)艿玫降木唧w數(shù)值，此時(shí)，隊(duì)/ =Yu*N^入^的計(jì)算方法如下： lg^j ' )= a^lg^j ' )+bj = aflg^^Yj+bj = *Υυ)+?3』 =)+ aj*lg( y iJ)+aJ*lg(N1J )+bj =a'lgOij ) + a/^lgOu) 入。_=1〇~{[ lg (Si/ )_ aflgOij) -lgGu)]/ a』} 其中，i=2、3……n j=l、2、......m 上式中，Sp Si/、均是實(shí)驗(yàn)后所得的具體值，a」是線性回歸后所得的具體值，因 此，λ 也是可以計(jì)算出來的一個(gè)具體值。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 若函數(shù)關(guān)系時(shí)，步驟二、三、四作如下的更改： 步驟二、方程組的建立 對(duì)第一批對(duì)照提取物所配制的溶液，存在函數(shù)：3」=&(%)=&^>」= &」*(：1」轉(zhuǎn)+13」，以不 同進(jìn)樣體積（V)所對(duì)應(yīng)的信號(hào)值作線性回歸，得出信號(hào)值在[DpD"]范圍內(nèi)的線性關(guān)系式， 且值afQj和bj是固定值，但a』和Qj均是固定的未知值； 由 Sfa^Nj+bj 可知：Ν」=?Αι」* (Sj-bj)，其中 S」e [DfDj ; 令 α j=1/aj ， 若第i批對(duì)照提取物的第j個(gè)成分的信號(hào)值在區(qū)間[Df D"]內(nèi)，則 Nfl/aj* (Sij-bj) = (Sij-bj) * α』 式中，％是一個(gè)未知值，系數(shù)Sij-bj是一個(gè)可計(jì)算出結(jié)果的值，記 若第i批對(duì)照提取物的第j個(gè)成分的信號(hào)值不在區(qū)間[DjpDjJ內(nèi)，可調(diào)節(jié)第i批 對(duì)照提取物的進(jìn)樣質(zhì)量為乂 ' =Y#Mi，使進(jìn)樣后的信號(hào)值Si/落在區(qū)間[DyDp]內(nèi)，Yij 是一個(gè)通過試驗(yàn)?zāi)艿玫降木唧w數(shù)值，此時(shí)，隊(duì)/ =Υυ*Νυ， Nij ; =l/aj* (Su ' _bj)= α 產(chǎn)以』'_bj)= γ Ni「α j * (? _bj) / y jj 式中，％是一個(gè)未知值，系數(shù)（Si/ -bp/Yu是一個(gè)可計(jì)算出結(jié)果的值，為方便方程 的書寫，也記作ω u，因此，對(duì)于第i批對(duì)照提取物溶液的第j個(gè)成分、，存在如下的關(guān)系 式： Nij=coij*a j，是一個(gè)可計(jì)算出結(jié)果的固定值，α j是一個(gè)未知值，i=1、2、3......η ， j=l、2、......m ； 當(dāng)bj很小時(shí)，ω u的近似值是Su或S，/ γ u 根據(jù)步驟一的結(jié)果，存在下列的方程組： Ml = ?11*^1 +?12*a2 +ω!3*α3 ......ω lj* α j......+ ω lm* α m Μ2 = ω21木 a 1 +ω22φα 2 +ω23φα 3 ......ω2J* a j......+ ω2m* a m Mi = ω η* α ι + ω i2* α 2 + ω i3* α 3 ......ω a j......+ ω im* a m Μη= ωη1*α? +ωη2*α2 + ω η3* Q 3 ......ω nj* Q j......+ ω ?* Q m 步驟三、方程組的求解 選擇其中的m行，共有u=Cnm種m行組成的方程組，解第k種方程組，得根為（a lk、 a2k> ...... a ik> ...... a^k)，其中，k=l、2......u ； 步驟四、統(tǒng)計(jì) 統(tǒng)計(jì)h的11種值（an，a12，……alk……a lu)，得出統(tǒng)計(jì)值（Γ ^ θι)，其中Γ i為平 均值，ei為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差ε e e1；/r i ; 統(tǒng)計(jì)a2的11種值（a21，a22，……a 2k……a 2u)，得出統(tǒng)計(jì)值（Γ 2, e2)，其中Γ 2為平 均值，e2為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差ε 2= e2/r2 ; 統(tǒng)計(jì)a j的u種值（a f a j2，……a jk……a ju)，得出統(tǒng)計(jì)值（?！?，ep，其中?！粸槠?均值，e」為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差ε」=ej/?！?； 統(tǒng)計(jì)％的1!種值（απ1，απ2,……amk……a mu)，得出統(tǒng)計(jì)值（Γ m，em)，其中Γ m為平 均值，em為標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差ε m= em/rm ; 當(dāng)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差h、ε2……^……επ均低于可接受的判別誤差R時(shí)，則標(biāo)定成功， 第1批對(duì)照提取物的各成分在儀器中的信號(hào)質(zhì)量為（ω^Γρ ω12*Γ2……ωυ*Γ^…… ω im* F m)，各成分在僅器中的可質(zhì)里和N1q= ωη* Γ丨+ ω 12* Γ 2+......+ ω丨」* ?！?...... + ωlm*Γm，第l批對(duì)照提取物的各成分的百分含量或者為（ω11*Γ 1/M1，ω12*Γ2/M1…… ωυ*?！?Μ!..../Μ!)，或者為（ω^Γ^/Ν!。，ω12*Γ2 / Ν10......ω υ* Γ』/ Ν10...... ω?πι*「πι / Ν10)。
8. 根據(jù)上述任一權(quán)利要求所述對(duì)照提取物的標(biāo)定方法，其特征在于： 色譜法W可以是液相色譜法、氣相色譜法、薄層色譜法等； 檢測(cè)成分信號(hào)的儀器可以是紫外檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、電噴霧 檢測(cè)器、質(zhì)譜等，還可以是通過化學(xué)反應(yīng)來檢測(cè)成分的信號(hào)，如薄層色譜掃描法中的顯色方 法及掃描方法、化學(xué)成分的衍生化等； 目前分析行業(yè)中所能接受的分析方法如TLCS、HPLC-UV、HPLC-ELSD、GC、液質(zhì)、氣質(zhì)等， 可以是一種，也可以是多種組合； 所述統(tǒng)計(jì)方法為統(tǒng)計(jì)學(xué)上可接受的通用方法，如算術(shù)平均、加權(quán)平均等。
9. 一種對(duì)照提取物的應(yīng)用，其特征在于： 選用權(quán)利要求Γ8中任一權(quán)利要求所述的標(biāo)定方法標(biāo)得的對(duì)照提取物作為對(duì)照品來 進(jìn)打藥品研究或藥品檢驗(yàn)。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104237398SQ201310598508
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2013年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月13日
【發(fā)明者】陳浩達(dá) 申請(qǐng)人:陳浩達(dá)