氣相色譜法檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明建立一種檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于以乙酸乙酯為提取劑，提取液經(jīng)氮吹儀濃縮，用丙酮定容后，直接在氣相色譜儀上痕量分析。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：一是毒死蜱含量與峰面積具有良好的線性關(guān)系(0.05-5.0mg/kg范圍內(nèi))，準(zhǔn)確度、精密度高；二是前處理簡便快速，檢測成本低；三是乙酸乙酯毒性小(基本沒有毒性)，在檢測過程中，實(shí)驗(yàn)人員避免了有毒氣體的吸入。
【專利說明】氣相色譜法檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明建立一種檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，屬于農(nóng)藥殘留檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]中國是世界上稻谷生產(chǎn)與消費(fèi)大國，水稻的種植面積約占全球23%，產(chǎn)量占30%以上，居世界第一。由于水稻生育期長，病蟲害頻發(fā)，因此農(nóng)用化學(xué)品被大面積、高濃度、高頻次地使用，這在減輕病蟲害損失上，起到了至關(guān)重要的作用，但是由此帶來了稻谷的食用安全問題。
[0003]毒死蜱是1965年由美國陶氏益農(nóng)化學(xué)公司開發(fā)的硫代磷酸酯類殺蟲劑，40多年來已成為一種久盛不衰的最大噸位的有機(jī)磷農(nóng)藥?，F(xiàn)在，已被認(rèn)為是防治水稻害蟲中取代甲胺磷、對硫磷、甲基對硫磷、磷胺、水胺硫磷等高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的最好選擇，成為防治稻縱卷葉螟、二化螟及稻飛虱的當(dāng)家藥劑之一，在水稻生產(chǎn)上大量使用。毒死蜱內(nèi)吸性好、滲透性強(qiáng)，在水稻中后期施藥后，各易在谷粒內(nèi)殘留。
[0004]稻谷不僅給我們提供大米，由稻殼產(chǎn)生的米糠，也是畜牧生產(chǎn)的飼料，也會(huì)進(jìn)入人們的食物鏈中。在《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB2763-2012)中，對毒死蜱的規(guī)定是，稻谷最大殘留限量0.5mg/kg。而目前，對稻谷中毒死蜱殘留量的檢測，大多采用的是國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.145-2003方法(植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留量的測定)，該方法提取凈化過程比較復(fù)雜、耗時(shí)較長，效率較低。
[0005]本發(fā)明旨在建立一種廉價(jià)、快速、準(zhǔn)確、靈敏的方法來檢測稻谷中毒死蜱的殘留量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明有如下二方面內(nèi)容:
[0007]1、稻谷樣品前處理
[0008]2、氣相色譜儀檢測
[0009]本發(fā)明所采用的技術(shù)，包括以下內(nèi)容:
[0010](I)稻谷樣品的制備
[0011]將稻谷樣品曬干，用植物粉碎機(jī)粉碎，過篩(Imm)，制成待檢樣。
[0012](2)儀器與試劑
[0013]①儀器Agilent6890氣相色譜儀、配有火焰光度檢測器(FPD)，DB-608(30mX0.32mmX0.5ym)、HP_5(30mX0.32mmX0.25 μ m)毛細(xì)管色譜柱，電子天平，水浴恒溫振蕩機(jī)，美國N-EVAP24水浴氮吹儀。
[0014]②試劑乙酸乙酯:分析純；丙酮:色譜純；無水硫酸鈉:分析純，650°C馬福爐中烘6h。
[0015]③農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所，質(zhì)量濃度為100 μ g/mlο
[0016](3)樣品前處理[0017]①提取用電子天平準(zhǔn)確稱取25.0g樣品于250ml具塞三角燒瓶中，加IOml蒸餾水濕潤樣品，加75.0ml乙酸乙酯、加15g無水硫酸鈉(1.0g無水硫酸鈉能吸收1.0g-1.2g水分)，在水浴(25±1) °C振蕩器上以200r/min振蕩30min，接著用濾紙過濾，收集濾液靜置IOmin ；
[0018]②濃縮吸取10.0ml上清液于IOml刻度試管中，將試管放入水浴鍋中加熱，水浴溫度控制在65°C _70°C，試管內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬?，待樣品溶劑揮發(fā)、濃縮至近干(余留4-5滴)時(shí),用丙酮定容,定容至5.0ml,再加1.0g無水硫酸鈉脫水,充分搖勻,靜置5min,取上清液，供氣相色譜儀檢測。
[0019](4)氣相色譜儀檢測
[0020]①色譜參數(shù)設(shè)定色譜柱:DB_608毛細(xì)管色譜柱作為分離柱；載氣:高純氮?dú)?純度99.999%);檢測器的燃?xì)馀c助燃?xì)?121501111/1^11、空氣110ml/min ;進(jìn)樣模式:恒流，流量為1.8ml/min ;進(jìn)樣口溫度:235°C ;檢測器溫度:270°C ;柱升溫程序:初始溫度90°C，保持lmin,以 35°C /min 上升至 210°C，以 20°C /min 上升至 250°C，以 25°C /min 上升至 270°C，保持6min ;進(jìn)樣方式:不分流；進(jìn)樣量I μ I。
[0021]②定性和定量方法以毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間來定性，對于陽性樣品采用ΗΡ-5毛細(xì)管色譜柱確認(rèn)；以樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較來定量。
[0022](5)方法驗(yàn)證
[0023]①線性和范圍分別配制濃度為0.05,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0mg/kg的毒死蜱系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述色譜條件下依次進(jìn)樣，以色譜峰面積I對相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度X (mg/kg)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.999以上。
[0024]②準(zhǔn)確度與精密度以添加回收率來衡量方法的準(zhǔn)確度，以變異系數(shù)(CV)來表示方法的精密度。在本底不含毒死蜱的稻谷樣品中添加毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加濃度為0.05、0.1U.0,5.0mg/kg,同時(shí)設(shè)置6個(gè)重復(fù)，再按前述的樣品處理方法及色譜條件進(jìn)行添加回收率試驗(yàn),在4個(gè)添加水平上，毒死蜱的平均回收率為80.6% -100.4%，變異系數(shù)在8.7%以下。
[0025]③檢出限體現(xiàn)了方法的靈敏度。用毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋添加，按上述方法檢測，以3倍噪聲強(qiáng)度的信號(hào)計(jì)算，測得最低檢出濃度為0.01mg/kgo
[0026]本發(fā)明利用相似相溶原理，以乙酸乙酯為提取劑，提取液經(jīng)氮吹儀濃縮，用丙酮定容后，直接在氣相色譜儀上痕量分析。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于:一是毒死蜱含量與峰面積具有良好的線性關(guān)系(0.05-5.0mg/kg范圍內(nèi))，準(zhǔn)確度、精密度高；二是前處理簡便快速，檢測成本低；三是乙酸乙酯毒性小(基本沒有毒性)，在檢測過程中，實(shí)驗(yàn)人員避免了有毒氣體的吸入。
【具體實(shí)施方式】
[0027]方式1:秈谷中毒死蜱殘留量的檢測
[0028](I)樣品前處理
[0029]①提取用電子天平準(zhǔn)確稱取25.0g樣品于250ml具塞三角燒瓶中，加IOml蒸餾水濕潤樣品，加75.0ml乙酸乙酯、加15g無水硫酸鈉(1.0g無水硫酸鈉能吸收1.0g-1.2g水分)，在水浴(25 ± I) °C振蕩器上以200r/min振蕩30min，接著用濾紙過濾，收集濾液靜置IOmin ；
[0030]②濃縮吸取10.0ml乙酸乙酯上清液，放入IOml刻度試管中，將試管放入水浴鍋中加熱，水浴溫度控制在65°C，試管內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬?，待樣品溶劑揮發(fā)、濃縮至近干(余留4-5滴)時(shí)，用丙酮定容，定容至5.0ml，再加1.0g無水硫酸鈉脫水，充分搖勻，靜置5min,取上清液，供氣相色譜儀檢測。
[0031](2)氣相色譜儀檢測
[0032]①色譜參數(shù)設(shè)定色譜柱:DB_608彈性石英毛細(xì)管柱作為分離柱；載氣:高純氮?dú)?純度99.999% );檢測器的燃?xì)馀c助燃?xì)釮2150ml/min、空氣110ml/min ;進(jìn)樣模式:恒流，流量為1.8ml/min ;進(jìn)樣口溫度:235°C;檢測器溫度:270°C;柱升溫程序:初始溫度90°C，保持 lmin，以 35°C /min 上升至 210°C，以 20°C /min 上升至 250°C，以 25°C /min 上升至 270°C，保持6min ;進(jìn)樣方式:不分流；進(jìn)樣量I μ I。
[0033]②定性和定量方法以毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間來定性，對于陽性樣品采用ΗΡ-5毛細(xì)管色譜柱確認(rèn)；以樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較來定量。
[0034](3)方法的準(zhǔn)確度和精密度
[0035]在本底不含毒死蜱的秈谷樣品中進(jìn)行毒死蜱添加回收率實(shí)驗(yàn)，添加濃度為0.05mg/kg、0.lmg/kg、l.0mg/kg、5.0mg/kg4個(gè)水平,各處理重復(fù)6次。結(jié)果:毒死蝶的平均回收率為80.6 % -99.4 % (見表1)，變異系數(shù)為3.4 % -8.7 %，完全符合農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測的要求。
[0036]表1秈谷中毒死蜱不同濃度的添加回收率
【權(quán)利要求】
1.一種檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于包括下述步驟: ①提取用電子天平準(zhǔn)確稱取25.0g樣品于250ml具塞三角燒瓶中，加IOml蒸餾水濕潤樣品，加75.0ml乙酸乙酯、加15g無水硫酸鈉(1.0g無水硫酸鈉能吸收1.0g-1.2g水分)，在水浴(25±1)°C振蕩器上以200r/min振蕩30min，接著用濾紙過濾，收集濾液靜置IOmin ； ②濃縮吸取10.0ml上清液于IOml刻度試管中，將試管放入水浴鍋中加熱，水浴溫度控制在65°C -70°C，試管內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)饣蚩諝饬?，待樣品溶劑揮發(fā)、濃縮至近干(余留4-5滴)時(shí)，用丙酮定容，定容至5.0ml,再加1.0g無水硫酸鈉脫水,充分搖勻,靜置5min,取上清液，供氣相色譜儀檢測； ③色譜參數(shù)設(shè)定色譜柱:DB-608毛細(xì)管色譜柱作為分離柱；載氣:高純氮?dú)?純度99.999% );檢測器的燃?xì)馀c助燃?xì)?121501111/1^11、空氣110ml/min ;進(jìn)樣模式:恒流，流量為1.8ml/min ;進(jìn)樣口溫度:235°C ;檢測器溫度:270°C ;柱升溫程序:初始溫度90°C，保持lmin，以 35°C /min 上升至 210°C，以 20°C /min 上升至 250°C，以 25°C /min 上升至 270°C，保持6min ;進(jìn)樣方式:不分流；進(jìn)樣量I μ I ; ④定性和定量方法以毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間來定性，對于陽性樣品采用ΗΡ-5毛細(xì)管色譜柱確認(rèn)；以樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較來定量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于稻谷中的毒死蜱用乙酸乙酯提取，提取液經(jīng)氮吹儀濃縮，用丙酮定容后，直接在氣相色譜儀上痕量分析。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于檢測設(shè)備為Agilent6890氣相色譜儀，配有火焰光度檢測器(FPD)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測稻谷中毒死蜱農(nóng)藥殘留量的氣相色譜方法，其特征在于用雙柱確認(rèn)定性，用外標(biāo)法定量。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK103472172SQ201310420066
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月1日
【發(fā)明者】鄔金飛 申請人:鄔金飛