一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法及使用其的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，包括：取絞碎的待測果蔬制品1克，加入碳酸鹽溶液定容至20毫升后混合，得到混合液；和將混合液的pH值調(diào)節(jié)至7至14后超聲提取，超聲提取后離心取上清液；其中碳酸鹽溶液的配制方法為：取1.0mL濃度為1.0mol/L碳酸鈉溶液和1.0mL濃度為1.0mol/L碳酸氫鈉溶液用水定容至1000毫升。前處理過程中亞硝酸鹽與硝酸鹽的損失較小。本發(fā)明還提供了一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，其檢測的回收率及精密度較高，且無需使用Ag柱和Na柱即可排除氯離子對檢測結(jié)果的影響。
【專利說明】一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法 及使用其的檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測食品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法及使用其的檢 測方法，尤其適用于果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量的測定。

【背景技術(shù)】
[0002] 目前，常用于果蔬制品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的檢測方法為《GB 5009. 33- 2010食 品安全國家標準食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定》中"第一法離子色譜法"的針對水果中 亞硝酸鹽與硝酸鹽的檢測方法，其中提取方法為將樣品勻漿后加水超聲提取，再于75 °C水 浴中放置5分鐘，用水稀釋后離心取上清。這種提取方法對亞硝酸鹽與硝酸鹽的損失較大， 尤其是在亞硝酸鹽與硝酸鹽含量較低的情況下，使得檢測的回收率及精密度較低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法， 前處理過程中亞硝酸鹽與硝酸鹽的損失較小。
[0004] 本發(fā)明的另一個目的是提供一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，其檢 測的回收率及精密度較高。
[0005] 本發(fā)明提供了一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，包括： 取絞碎的待測果蔬制品1克，加入碳酸鹽溶液定容至20毫升后混合，得到混合液；和將混合 液的pH值調(diào)節(jié)至7至14后超聲提取，超聲提取后離心取上清液；其中碳酸鹽溶液的配制方 法為：取1· OmL濃度為1. Omol/L碳酸鈉溶液和1. 〇mL濃度為1. 0 mol/L碳酸氫鈉溶液用 水定容至1000毫升。
[0006] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法的一種示意性實施方式 中，超聲提取的時長為10至20分鐘。
[0007] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法的一種示意性實施方式 中，將混合液的pH值調(diào)節(jié)至12后進行超聲提取。
[0008] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法的一種示意性實施方式 中，離心的轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘，時長為10至15分鐘。
[0009] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法的一種示意性實施方式 中，還包括，將上清液用碳酸鹽溶液稀釋后依次過〇· 22微米水相濾膜針頭濾器和RP固相萃 取柱凈化。
[0010] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法的一種示意性實施方式 中，上清液用碳酸鹽溶液稀釋的倍數(shù)為2倍。
[0011] 本發(fā)明還提供了一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，包括：根據(jù)上述 樣本前處理方法對待測果蔬制品進行前處理，得到待測液；和用離子色譜法對待測液中的 硝酸鹽和亞硝酸鹽進行檢測。
[0012] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法的一種示意性實施方式中，離子色譜 法中分離柱為陰離子交換色譜柱，檢測器為電導(dǎo)檢測器，抑制器為陰離子抑制器，柱溫^ 30°C，流速為0· 7 mL/分鐘，進樣量為50 μ L。 '
[0013] 在檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法的一種示意性實施方式中，離子色譜 法中流動相包括：Α淋洗液為1. Ommol/L碳酸鈉和1. 0 mmol/L碳酸氫鈉的水溶液，Β淋洗 液為40mmol/L碳酸鈉的水溶液；梯度時間程序為：〇· 〇分鐘至18. 0分鐘使用a淋洗液； IS. 1分鐘至27· 0分鐘使用B淋洗液；27. 1分鐘至45. 0分鐘使用A淋洗液。 '
[0014] 本發(fā)明提供的一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，前處理 過程中亞硝酸鹽與硝酸鹽的損失較小。
[0015] 本發(fā)明提供的一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，其樣本前處理過程 中亞硝酸鹽與硝酸鹽的損失較小，檢測的回收率及精密度較高，且無需使用Ag柱和Na柱 即可排除氯離子對檢測結(jié)果的影響。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016] 以下附圖僅對本發(fā)明做示意性說明和解釋，并不限定本發(fā)明的范圍。
[0017] 圖1是本發(fā)明第一實施例的檢測待測果蔬制品的色譜圖。
[0018] 圖2是本發(fā)明第二實施例的檢測待測果蔬制品的色譜圖。
[0019] 圖3是本發(fā)明第三實施例的檢測待測果蔬制品的色譜圖。
[0020] 圖4是本發(fā)明第四實施例的檢測待測果蔬制品的色譜圖。
[0021] 圖5是本發(fā)明第五實施例的檢測待測果蔬制品的色譜圖。
[0022] 圖6是本發(fā)明第六實施例的檢測待測果蔬制品的色譜圖。

【具體實施方式】
[0023]為了對發(fā)明的技術(shù)特征、目的和效果有更加清楚的理解，現(xiàn)結(jié)合以下實施例說明 本發(fā)明的【具體實施方式】。
[0024] 第一實施例。
[0025] 一、待測果蔬制品和試劑： 待測果蔬制品：燕麥黃桃果粒； 碳酸鹽溶液：取1· 〇mL濃度為1· Omol/L碳酸鈉溶液和1. 〇mL濃度為1. 〇 mol/L碳酸 氫鈉溶液用水定容至1〇〇〇毫升，即得到碳酸鹽溶液； 標準溶液：移取亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含 亞硝酸根離子濃度依次為 〇.〇〇mg/L、0. 01 mg/L、0. 05 mg/L、0.10 mg/L、0. 40 mg/L、〇_8〇 mg/L、l. 00 mg/L;硝酸根咼子濃度依次為 0·00 mg/L、0. 10 nig/L、0.50 mg/L、l_〇〇 mg/L、 4.00 mg/L、8· 00 mg/L、10.00 mg/L。
[0026] 二、步驟。
[0027] 1、樣本前處理： a、 取經(jīng)組織絞碎機絞碎且均勻的待測果蔬制品1克于5〇1^離心管中，加入碳酸鹽溶液 定容至20毫升后漩渦混勻1分鐘，得到混合液； b、 用氫氧化鈉溶液將混合液的pH值調(diào)節(jié)至7后超聲提取1〇分鐘，超聲提取后離心取 上清液，其中離心的轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘，時長為10分鐘； C、將上清液用碳酸鹽溶液稀釋2倍后先過0· 22微米水相濾膜針頭濾器，再過RP固相 萃取柱(使用OnGuard II RP柱）并棄去前6mL，收集后面洗脫液，即得到待測液。
[0028] 2、用離子色譜法對待測液和標準溶液中的硝酸鹽和亞硝酸鹽進行檢測，并根據(jù)標 準溶液的儀器檢測結(jié)果繪制標準曲線，根據(jù)標準曲線及待測液的儀器檢測結(jié)果計算得到待 測液中亞硝酸根離子及硝酸根離子濃度，其中： 檢測參數(shù)為：分離柱為陰離子交換色譜柱Metrosep A Supp 5-250/4.0,檢測器為電導(dǎo) 檢測器，抑制器為陰離子抑制器，柱溫為30?，流速為〇. 7 mL/分鐘，進樣量為50 μ L ; 流動相：Α淋洗液為1.0mmol/L碳酸鈉和1.0 mmol/L碳酸氫鈉的水溶液；Β淋洗液為 40 mmol/L碳酸鈉的水溶液； 梯度時間程序為：〇· 〇分鐘至1S. 〇分鐘使用所述A淋洗液；18. 1分鐘至27. 0分鐘使用 所述B淋洗液；27. 1分鐘至45. 0分鐘使用所述A淋洗液。
[0029] 3、按照如下公式計算待測果蔬制品中亞硝酸根離子或硝酸根離子的含量： X= (CXVXfXIOOO) / (MX1000)； 式中： x--待測果蔬制品中亞硝酸根離子或硝酸根離子的含量，單位為毫克每千克（mg/ kg)； C--待測液中的亞硝酸根離子或硝酸根離子濃度，單位為毫克每升（mg/L); V--待測液的體積，單位為毫升(mL); f--用碳酸鹽溶液稀釋上清液的稀釋倍數(shù)； Μ--待測果蔬制品的取樣量，單位為克（g); 說明：待測果蔬制品中測得的亞硝酸根離子含量乘以換算系數(shù)1. 5,即得亞硝酸鹽(按 亞硝酸鈉計)含量；待測果蔬制品中測得的硝酸根離子含量乘以換算系數(shù)1. 37,即得硝酸鹽 (按硝酸鈉計）含量。結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。本實施例的檢測結(jié)果參見圖1。
[0030] 第二實施例。
[0031 ] 一、待測果蔬制品和試劑： 待測果蔬制品：草莓果醬； 碳酸鹽溶液：與第一實施例所述碳酸鹽溶液相同； 標準溶液：與第一實施例所述標準溶液相同。
[0032] 二、步驟：與第一實施例所述步驟相同。本實施例的檢測結(jié)果參見圖2。
[0033] 第三實施例。
[0034] 一、待測果蔬制品和試劑： 待測果蔬制品：桑椹椰果果粒； 碳酸鹽溶液：與第一實施例所述碳酸鹽溶液相同； 標準溶液：與第一實施例所述標準溶液相同。
[0035] 二、步驟。
[0036] 1、樣本前處理： a、取經(jīng)組織絞碎機絞碎且均勻的待測果蔬制品1克于50mL離心管中，加入碳酸鹽溶液 定容至20毫升后漩渦混勻1. 5分鐘，得到混合液； b、 用氫氧化鈉溶液將混合液的pH值調(diào)節(jié)至12后超聲提取15分鐘，超聲提取后離心取 上清液，其中離心的轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘，時長為13分鐘； c、 將上清液用碳酸鹽溶液稀釋2倍后先過0· 22微米水相濾膜針頭濾器，再過RP固相 萃取柱(使用OnGuard II RP柱）并棄去前6mL收集后面洗脫液，即得到待測液。
[0037] 2、與第一實施例所述步驟2相同。
[0038] 3、與第一實施例所述步驟3相同。本實施例的檢測結(jié)果參見圖3。
[0039] 第四實施例。
[0040] 一'、待測果蔬制品和試劑： 待測果蔬制品：大麥蘆薈果醬； 碳酸鹽溶液：與第一實施例所述碳酸鹽溶液相同； 標準溶液：與第一實施例所述標準溶液相同。
[0041] 二、步驟：與第三實施例所述步驟相同。本實施例的檢測結(jié)果參見圖4。
[0042] 第五實施例。
[0043] 一、待測果蔬制品和試劑： 待測果蔬制品：椰果果粒； 碳酸鹽溶液：與第一實施例所述碳酸鹽溶液相同； 標準溶液：與第一實施例所述標準溶液相同。
[0044] 二、步驟。
[0045] 1、樣本前處理： a、 取經(jīng)組織絞碎機絞碎且均勻的待測果蔬制品1克于50mL離心管中，加入碳酸鹽溶液 定容至20毫升后漩渦混勻2分鐘，得到混合液； b、 用氫氧化鈉溶液將混合液的pH值調(diào)節(jié)至14后超聲提取2〇分鐘，超聲提取后離心取 上清液，其中離心的轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘，時長為15分鐘； c、 將上清液用碳酸鹽溶液稀釋2倍后先過0. 22微米水相濾膜針頭濾器，再過RP固相 萃取柱(使用OnGuard II RP柱）并棄去前6mL收集后面洗脫液，即得到待測液。
[0046] 2、與第一實施例所述步驟2相同。
[0047] 3、與第一實施例所述步驟3相同。本實施例的檢測結(jié)果參見圖5。
[0048] 第六實施例。
[0049] 一、待測果蔬制品和試劑： 待測果蔬制品：黃桃果醬； 碳酸鹽溶液：與第一實施例所述碳酸鹽溶液相同； 標準溶液：與第一實施例所述標準溶液相同。
[0050] 二、步驟：與第五實施例所述步驟相同。本實施例的檢測結(jié)果參見圖6。
[0051 ] 檢出限驗證。
[0052] 按照《GB/T 50〇9· 1-2003食品衛(wèi)生檢驗方法-理化部分-總則》中的附錄A的 "A. 2檢出限"中的要求，驗證第一至第六實施例的檢測方法的檢出限，結(jié)果如下所示： 第一實施例：亞硝酸鹽為0. 〇13mg/kg，硝酸鹽為0. 014mg/kg ; 第二實施例：亞硝酸鹽為0. 〇13mg/kg，硝酸鹽為0. 013mg/kg ; 第三實施例：亞硝酸鹽為0. 〇13mg/kg，硝酸鹽為0· 015mg/kg ; 第四實施例：亞硝酸鹽為〇· 〇13mg/kg，硝酸鹽為0. 015mg/kg ; 第五實施例：亞硝酸鹽為〇· 〇13mg/kg，硝酸鹽為0. 014mg/kg ; 第六實施例：亞硝酸鹽為0. 〇13mg/kg，硝酸鹽為0. 014mg/kg。
[0053] 回收率驗證。
[0054] 方法：在果蔬制品中添加硝酸根或亞硝酸根標準品，得到加標樣本，用第一至第六 實施例及《GB 5009. 33- 2010食品安全國家標準食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定》中"第 一法離子色譜法"的檢測方法對加標樣本進行三次平行檢測并計算平均回收率。結(jié)果如下 表所示。
[0055]

【權(quán)利要求】
1. 一種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，其特征在于，包括： 取絞碎的待測果蔬制品1克，加入碳酸鹽溶液定容至20毫升后混合，得到混合液；和 將所述混合液的pH值調(diào)節(jié)至7至14后超聲提取，所述超聲提取后離心取上清液； 其中所述碳酸鹽溶液的配制方法為：取1. OmL濃度為1. Omol/L碳酸鈉溶液和1. OmL濃 度為1. 0 mol/L碳酸氫鈉溶液用水定容至1000毫升。
2. 如權(quán)利要求1所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，其中所 述超聲提取的時長為10至20分鐘。
3. 如權(quán)利要求1所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，其中將 所述混合液的pH值調(diào)節(jié)至12后進行所述超聲提取。
4. 如權(quán)利要求1所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，其中所 述離心的轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘，時長為10至15分鐘。
5. 如權(quán)利要求1所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，其中還 包括，將所述上清液用所述碳酸鹽溶液稀釋后依次過〇. 22微米水相濾膜針頭濾器和RP固 相萃取柱凈化。
6. 如權(quán)利要求5所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的樣本前處理方法，其中所 述上清液用所述碳酸鹽溶液稀釋的倍數(shù)為2倍。
7. -種檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，其特征在于，包括： 根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣本前處理方法對待測果蔬制品進行前處理，得到待測液；和 用離子色譜法對所述待測液中的硝酸鹽和亞硝酸鹽進行檢測。
8. 如權(quán)利要求7所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，其中所述離子色 譜法中分離柱為陰離子交換色譜柱，檢測器為電導(dǎo)檢測器，抑制器為陰離子抑制器，柱溫為 30°C，流速為0. 7 mL/分鐘，進樣量為50 μ L。
9. 如權(quán)利要求7所述的檢測果蔬制品中硝酸鹽和亞硝酸鹽的方法，其中所述離子色譜 法中流動相包括：Α淋洗液為1.0mm〇l/L碳酸鈉和1.0 mmol/L碳酸氫鈉的水溶液，Β淋洗 液為40 mmol/L碳酸鈉的水溶液；梯度時間程序為：0. 0分鐘至18. 0分鐘使用所述A淋洗 液；18. 1分鐘至27. 0分鐘使用所述B淋洗液；27. 1分鐘至45. 0分鐘使用所述A淋洗液。
【文檔編號】G01N30/02GK104297356SQ201310305991
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2013年7月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月19日
【發(fā)明者】崔曉青, 姜芳, 劉江梅, 繆艷紅, 劉艷玲 申請人:內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團）股份有限公司