通過血漿去除術(shù)降低半乳凝素-3的水平的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及使用在固定床中或為易去除形式(諸如通過與磁性粒子絡(luò)合)的gal-3結(jié)合劑通過血漿去除術(shù)從循環(huán)中去除血清gal-3。該方法就其本身而言帶來了對能被循環(huán)gal-3誘導的炎癥和纖維化的急劇減輕和緩解。所述方法可與gal-3結(jié)合劑(例如柑桔果膠)的施用相結(jié)合以將未結(jié)合gal-3的水平進一步降低到組織中的gal-3可得到解決的點。該方法還可與TNF受體的去除相結(jié)合以提供對癌癥的有效治療。
【專利說明】通過血漿去除術(shù)降低半乳凝素-3的水平
[0001]優(yōu)先權(quán)數(shù)據(jù)和通過引用的并入
[0002]本申請要求于2011年12月8日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/568，210的優(yōu)先權(quán)，該專利申請通過引用以其整體并入。
【背景技術(shù)】發(fā)明領(lǐng)域
[0003]本發(fā)明涉及至少部分由一種或多種半乳凝素(galectins)介導的疾病和生理狀況的治療。半乳凝素是特征在于帶有至少一個具有β_半乳糖苷親和力的糖識別域(CRD)的凝素(糖結(jié)合蛋白)家族。這些蛋白僅在近年來才被識別為一個家族，但發(fā)現(xiàn)其遍及整個動物界，并且在哺乳動物、鳥類、兩棲動物、魚類、海綿、線蟲甚至真菌中都有發(fā)現(xiàn)。本申請集中在哺乳動物(特別是人類)中的半乳凝素。盡管本文的發(fā)明可應(yīng)用于伴侶動物(例如，寵物，諸如狗和貓)和商業(yè)動物(諸如奶牛、豬和綿羊)，但本文所提出的方法和主題特別集中于人類的治療。
[0004]半乳凝素介導并調(diào)節(jié)很多種的胞內(nèi)和胞外功能，因此其既在細胞內(nèi)表達并經(jīng)常靶向特定胞質(zhì)位點，也由細胞分泌用于作為人血漿成分之一的胞外分布。在由胞外半乳凝素介導的多種功能中，有炎癥、纖維化形成、細胞粘附、細胞增殖和轉(zhuǎn)移形成(癌)以及免疫抑制。
[0005]半乳凝素是十五(15)種糖結(jié)合蛋白(凝素)的家族，其在所有動物種類中高度保守。大部分半乳凝素分布廣泛，盡管半乳凝素-5、-10和-12顯示組織特異性分布。雖然半乳凝素由所有免疫細胞可變表達，其在活化的B和T細胞、炎性巨噬細胞、自然殺傷(NK)細胞和FoxP3調(diào)節(jié)性T細胞中上調(diào)。半乳凝素包含多種結(jié)構(gòu)排列，但糖結(jié)合域(CRD)相對保守。大部分半乳凝素展示單一 CRD，而且作為單體有生物活性(半乳凝素_5、-7和-10)，或者需要同源二聚才有功能活性(半乳凝素-1、-2、-11、-13、-14和-15)。或者可選地，串聯(lián)重復型半乳凝素(半乳凝素_4、-8、-9和-12)包含由短連接肽隔開的兩個CRD，而半乳凝素-3 (嵌合型)具有與非凝素域融合的單一 CRD，其可與其它半乳凝素-3單體復合形成寡聚的五聚體。值得注意的是，一些半乳凝素，例如半乳凝素-10，與含甘露糖的聚糖結(jié)合。在半乳凝素家族中，-1、-3和-9作為潛在的治療靶點尤為重要，而-2、-4、-5、-6、-7、-8、-10、-11、-12、-13、-14和-15也顯示參與多種與發(fā)病率和死亡率相關(guān)的生物途徑。
[0006]因此，半乳凝素-7已參與某些形式癌癥的發(fā)展中(St.Pierre等，F(xiàn)ront.Biosc1.,1:17, 438 - 50 (2012))和多種特異性癌中，后者包括gal_2、_4和-8在結(jié)腸癌和乳腺癌的情況中(Barrow 等，Clin.Cancer Res,.15 ; 17 (22) 7035-46 (2011))。舌鱗狀細胞癌(Alves 等，Pathol.Res.Pract.15 ;207 (4) 236-40 (2011))已顯示與 gal-1,-3 和-7 的較高水平相關(guān)，而宮頸鱗癌已顯示與gal-7水平有關(guān)(Zhu等，Int.J.Cancer, (2012年8月))。一些半乳凝素，包括gal-15、gal-13和gal_10，已被證實與移植和懷孕相關(guān)事宜有關(guān)。皇見,例如,Than 等，Eur.J.Biochem.271 (6) 1065-78 (2004)，Lewis 等，Biol.Reprod.77 (6)；1027-36(2007)。多種半乳凝素，包括gal_2、3、8等，已被鑒定為與多種自體免疫疾病關(guān)聯(lián)，諸如，狼瘡(Salwati 等，J.1nfect.Dis.1 ；202(1) 117 - 24(2010) ；Pal 等，Biochim.Biophys.Acta.，1820(10) 1512 - 18(2012);和 Janko 等，Lupus21 (7): 781-3 (2012))。多種半乳凝素(包括gal-3)的較高水平與在傷口愈合等中遇到的炎癥和纖維化相關(guān)(Gal等，Acta.Histochem.Cytochem.26:44 (5) ； 191 - 9 (2011))。
[0007]相當明顯地，炎性和纖維變性途徑的介導使半乳凝素成為多種疾病、損傷和創(chuàng)傷相關(guān)現(xiàn)象的關(guān)鍵元素。在許多情況中，存在不需要濃度的半乳凝素可加重疾病狀況或創(chuàng)傷狀況，或者干擾治療疾病諸如癌癥或充血性心力裳竭的嘗試。在被識別為在人類中具有胞內(nèi)活性的半乳凝素家族中，特別受關(guān)注的是半乳凝素-1、半乳凝素-3和半乳凝素-9。如上面所指出的，這些蛋白一般被稱為且在本文中被稱為gal-1、gal-3和gal_9。人類的多種狀況(其范圍從懷孕中的問題到哮喘到慢性心力衰竭到癌癥到病毒感染到中風以及更多)被高于正常濃度的半乳凝素所介導或因其加重。因此，在其它半乳凝素中，gal-3在纖維化、炎癥和細胞增殖方面特別突出，而gal-Ι在成功懷孕所需的免疫抑制中也起了作用。還認為Gal-1參與神經(jīng)細胞的分化。Gal-9已顯示參與由免疫炎性疾病引起的損傷控制，而且通常參與炎癥中——gal-9顯然在炎性位點中的嗜酸性粒細胞募集中起作用。其還似乎在某些活化的細胞中介導凋亡。
[0008]盡管本文的討論適用于循環(huán)的活性gal-1、gal-3和gal_9，且通常其中較高的循環(huán)半乳凝素水平與疾病或損傷狀況相關(guān)的半乳凝素與任何其它半乳凝素相比更多地闡述了 gal-3在疾病和創(chuàng)傷進展中的作用，所以其在本文中被示例說明。更具體而言，本發(fā)明集中于從哺乳動物特別是人類的血漿中去除gal-3。Gal-3已顯示參與大量生物過程，其中的許多與多種疾病狀態(tài)相關(guān)。因此在循環(huán)中結(jié)合并阻斷gal-3的活性或從循環(huán)中去除大量gal-3可改進現(xiàn)有的醫(yī)學治療，抑制和/或減輕由其它原因?qū)е碌难装Y和纖維化，并使得可以干預在其它方面不容易治療的多種疾病狀態(tài)。本發(fā)明同樣適用于降低其它半乳凝素循環(huán)水平以解決由那些半乳凝素介導的狀況。
[0009]本發(fā)明使用血漿去除術(shù)(有時稱為治療性血漿交換)控制循環(huán)中的gal-3，更具體而言，控制循環(huán)中生物活性半乳凝素的水平。血漿被引入流體通路并且與可從血漿分離的gal-3結(jié)合劑混合或與被阻斷的失活gal-3—起返回身體，或者被引導經(jīng)過結(jié)合gal-3的固體載體，所述血漿隨后以較低的gal-3水平被返回到身體。
[0010]相關(guān)領(lǐng)域
[0011]本申請與2011年6月6日提交的美國專利申請序列號13/153，648有關(guān)聯(lián)。該申請又要求了于2006年7月6日提交的美國專利申請序列號11/485，955的優(yōu)先權(quán)。這兩份專利申請的內(nèi)容通過引用特別并入本文。在美國專利申請序列號13/153，648 (美國專利公開US-2011-0294755A1)中，公開了一種治療細胞增殖狀況、炎癥和嚴重纖維化的方法，其涉及施用可結(jié)合循環(huán)gal-3的試劑，例如修飾柑桔果膠或MCP，具有兩萬(20，000)道爾頓或更低、優(yōu)選一萬(10,000)道爾頓左右的較低分子量的柑桔果膠。MCP可商購自加州SantaRosa的EcoNugenics,并且在美國專利號6，274，566和6，462，029中討論。
[0012]技術(shù)背景
[0013]Gal-3約為30kDa，并且與所有半乳凝素一樣，包含能特異性結(jié)合β -半乳糖苷的約一百三十(130)個氨基酸的糖-識別-結(jié)合域(CRD)。Gal-3由單一基因LGALS3編碼，其位于染色體14基因座q21_q22。該蛋白已顯示參與大量生物過程。本文中所述的列表僅是示例性的，因為gal-3的新的情況和作用不斷被披露。在已顯示至少部分由gal-3介導的細胞水平下的生物過程中，有細胞粘附、細胞遷移、細胞侵襲、細胞活化和化學趨化、細胞生長和分化、細胞周期以及凋亡。
[0014]考慮到gal-3的廣泛生物功能，其已被證實參與大量疾病狀態(tài)或醫(yī)學適應(yīng)癥。研究還顯示gal-3的表達參與多種與心力衰竭相關(guān)的過程，包括肌成纖維細胞增殖、纖維發(fā)生、組織修復、炎癥以及心室和組織重建。已發(fā)現(xiàn)血液中較高水平的gal-3與增加的發(fā)病率和死亡率顯著相關(guān)。還已發(fā)現(xiàn)其與在急性失代償性心力衰竭和慢性心力衰竭人群中的較高死亡風險顯著相關(guān)。
[0015]多種調(diào)查顯示，較高的gal-3水平加重了多種與細胞增殖相關(guān)的疾病狀況。高gal-3水平在足以使人震驚的多種癌癥中與癌癥生長和癌癥進展到轉(zhuǎn)移性階段相關(guān)。多種癌癥已特別地與較聞的gal-3水平相關(guān)或關(guān)聯(lián)，這些癌癥包括肝癌、腎癌、乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、膽囊癌、鼻咽癌、淋巴細胞性白血病、肺癌、黑色素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、多形性成膠質(zhì)細胞瘤、子宮癌、卵巢癌、宮頸癌、腦癌等。較高的gal-3水平也已顯示干擾或抑制常規(guī)抗腫瘤治療方案，諸如化療治療，如順鉬、多柔比星及相關(guān)化療劑。
[0016]炎癥是經(jīng)常遇到的身體狀況一身體對多種疾病和創(chuàng)傷的一種自然反應(yīng)。如上面指出的其它狀況一樣，超出正常水平的gal-3水平參與多種遇到有害炎癥的狀況。同時，狀況和疾病狀態(tài)的列表太過廣泛，以至于無法徹底探討每一個可能性，但與較高的gal-3水平相關(guān)的炎 性狀況包括加重的炎癥，其與以下各項相關(guān):不可降解的病原體，自體免疫反應(yīng),過敏，暴露于電離輻射,糖尿病,心臟病和功能不全,動脈粥樣硬化,支氣管炎,腸潰瘍，腸的腸炎，與硬化相關(guān)的肝炎，與寄生蟲感染相關(guān)的炎癥，與病毒感染相關(guān)的炎癥，與真菌感染相關(guān)的炎癥，與關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化和銀屑病相關(guān)的炎癥。同時，雖然炎癥是身體經(jīng)常應(yīng)用的對許多挑戰(zhàn)回應(yīng)的途徑，但已發(fā)現(xiàn)較高的gal-3水平會加重炎癥，從而在多種以其它方式可控的情況中引起導致發(fā)病率或死亡率的損害和損傷，這些情況包括起因于重金屬中毒和類似毒素的炎癥、中風及相關(guān)的缺血性損傷、起因于對乙酰氨基酚的肝炎、多種通常參與自體免疫疾病中的T細胞介導的反應(yīng)等。Gal-3還參與腎損傷和腎病、肝炎、肺動脈高壓和纖維化、糖尿病以及胃腸道炎性狀況諸如潰瘍性結(jié)腸炎、Chrone^ S、乳糜瀉等。
[0017]如所指出的，較高的循環(huán)活性gal-3水平與多種炎性狀況相關(guān)并明顯使其家中，包括導致心臟、腎、肺和肝疾病的那些炎性狀況。Gal-3還與纖維變性的形成相關(guān)，特別是在對器官損傷的反應(yīng)中。發(fā)現(xiàn)較高水平的循環(huán)gal-3在心血管疾病、胃腸道疾病、心血管創(chuàng)傷、腎組織創(chuàng)傷、腦創(chuàng)傷、肺創(chuàng)傷、肝組織創(chuàng)傷、起因于放療的組織損傷以及結(jié)締組織和皮膚的疾病和狀況諸如系統(tǒng)性硬化病中誘導病原性纖維化。
[0018]因此，本領(lǐng)域充滿著以下觀察結(jié)果:較高的gal-3以及gal-1和gal-9水平能使多種疾病和損傷狀況復雜化或加劇。找到控制炎癥和纖維化形成的途徑將是有價值的，所述炎癥和纖維化是有害的，特別是在上面描述的環(huán)境中，尤其在心臟護理和其它器官組織疾病和創(chuàng)傷中。出于同樣的原因，控制受gal-3介導的細胞反應(yīng)將是有價值的，所述細胞反應(yīng)促進細胞增殖和轉(zhuǎn)化，包括腫瘤的形成和生長、癌細胞的轉(zhuǎn)化和癌的轉(zhuǎn)移性擴散。本領(lǐng)域的另一個目標是避免在癌癥治療中常規(guī)藥劑如博萊霉素、阿霉素、多柔比星、環(huán)磷酰胺和環(huán)孢素帶來的干擾所造成的問題。由這些藥劑引起的一些副作用是gal-3介導的，而且可以通過本發(fā)明處理和改善。較高的gal-3水平還似乎干擾到用于其它應(yīng)用的藥物，例如抗心律失常藥物胺碘酮和他汀類藥物。
[0019]血漿去除術(shù)是一種血液分離技術(shù)，其中血液從身體經(jīng)針或?qū)Ч苻D(zhuǎn)移到分離器中，該分離器移走血細胞并將其返回身體，留下血漿。這一類型的技術(shù)在歷史上用于自體免疫疾病的治療，其中有問題的抗體通過將血漿和與其相結(jié)合的配體接觸來去除。血漿然后根據(jù)需要添加抗凝血劑、治療劑及相關(guān)元素并返回身體。
[0020]用于血漿去除術(shù)的裝置的早期形式在美國專利號3，625，212中闡述，其描述了確保將經(jīng)處理的血漿以及分離的血細胞返回正確供體的措施。美國專利號4，531，932提及了通過離心的血漿去除術(shù)，該方法用于在快速和近乎連續(xù)的基礎(chǔ)上分離出紅細胞。美國專利號6，245，038和6，627，151各自描述了多種方法，這些方法分離出血漿內(nèi)容物并在先去除紅細胞后將處理過的血漿返回患者，一般而言，目的是通過去除高分子量蛋白來降低血粘度。雖然作為本申請的主題，本發(fā)明集中在半乳凝素循環(huán)水平例如gal-3水平的降低，而不是高分子量蛋白或直接針對粘度，但仍將這四(4)個專利的公開內(nèi)容并入本文作為對其關(guān)于可利用的血漿去除術(shù)技術(shù)和裝置的公開內(nèi)容的參考，這些一般可在本發(fā)明中使用。
[0021]在本發(fā)明的開發(fā)之前，本領(lǐng)域技術(shù)人員已在多方面實驗了 gal-3水平的降低。因此，gal-3在加重或促進癌癥以及癌癥轉(zhuǎn)移能力中的活性從2006年開始在文獻中被廣泛評論。這些文獻發(fā)現(xiàn)反復強調(diào)了結(jié)合gal-3或降低gal-3的循環(huán)濃度或滴度和/或通過gal-3結(jié)合劑(例如PectaSol-C MCP)使gal_3失活的重要性。參見，例如，Wang等，Cell Death and Disease, I _ 10 (2010) (gal_3 的抑制促進了 治療)和 Yu 等，J.Biol.Chemistry, Vol.282, 1，773 - 781頁(2007)，其確認了 gal_3相互作用可增強癌的形成或轉(zhuǎn)移癌的轉(zhuǎn)化。
[0022]如在美國專利號6，274，566中公開和聲明的，Gal-3結(jié)合劑例如修飾柑桔果膠(Modified Citrus Pectin)和其它化合物可與循環(huán)腫瘤細胞(CTC’s)結(jié)合并阻止其創(chuàng)造新的轉(zhuǎn)移。這些CTC’s經(jīng)常參與突變和侵襲性更高的疾病。癌干細胞也可循環(huán)并在應(yīng)激和炎癥條件下受到刺激，這為gal-3提供了另一種加重癌癥的機制。這些先前情況的方法可與本申請的發(fā)明協(xié)同使用。特別地，當存在很高量的gal-3分子在血流中循環(huán)時，這使得更難以將gal-3結(jié)合劑祀向這些CTCs。在這一方面,gal-3分子充當了誘館分子。該誘館在本發(fā)明的這一特殊應(yīng)用中阻止了癌細胞在循環(huán)或淋巴系統(tǒng)中的結(jié)合，與組織水平gal-3相反。
[0023]因此，報告將癌癥形成和轉(zhuǎn)化的加速與循環(huán)gal-3濃度聯(lián)系起來，并提出降低gal-3循環(huán)濃度、降低其自由表達或者降低可利用gal-3或gal_3相互作用會改善癌癥的預后。Zhao 等，Cancer Res, 69, 6799 - 6806 (2009), Zhao 等，MolecularCancer9, 154，1-12 (2010)和 Wang 等，Am.J.0f Pathology, 174，4，1515 - 1523 (2009)，其中siRNA誘導的gal-3降低顯示減緩了前列腺癌的進程。類似地，高風險的膀胱癌復發(fā)和預后與 gal-3 水平間接相關(guān)。Rodriguez 等，J.Curr.0pin.Urol.22(5):415 - 20(2012)和Raspollini 等，Appl.1mmunohistochem.Mol.Morphol.(2012 年 7 月)。清楚地，有大量文獻支持該結(jié)論:在組織中和在循環(huán)中降低循環(huán)gal-3，不管是通過阻礙其表達還是通過與其結(jié)合，在控制癌癥中是重要的。
[0024]然而，循環(huán)gal-3經(jīng)驗性地參與多種生物狀況。心肌纖維化在心臟疾病特別是慢性心力衰竭(CHF)中作為一個復雜化風險因素得到了顯著關(guān)注。Lok等，Clin.Res.Cardiol, 99，323 - 328 (2010)。DeFillipi 等，U.S.Cardiology, 7，1，3 - 6 (2010)明確指出循環(huán)gal-3在許多器官和器官系統(tǒng)的纖維化中是一個重要因素，而且降低循環(huán)gal-3可在治療心臟損傷和朝向心力衰竭(HF)的進展中起重要作用。類似地,Psarras等,Eur.HeartJ.，2011年4月26日證明了在心肌中g(shù)al-3水平的降低可減輕心臟中的纖維化并改善前景。De Boer等，Ann.Med.，43，1，60 - 68 (2011)將gal_3識別為心臟健康中的關(guān)鍵指標。Shash等，Eur J.Heart Fail.，12，8，826 - 32(2011)將gal_3水平識別為經(jīng)由纖維化的心力衰竭中的關(guān)鍵劑。De Boer 等，Eur.J.Heart Fail.，11，9，811-817(2009)將 gal_3 表達和存在中的增長與纖維化提高和心力衰竭相關(guān)聯(lián)。同一文章將gal-3與炎癥關(guān)聯(lián)。炎癥是動脈硬化的標志，因此gal-3水平也導致冠狀動脈疾病、外周動脈疾病、中風和血管性癡呆。
[0025]纖維化和炎癥都在某種程度上由gal-3 (細胞或循環(huán))介導，它們參與哺乳動物身體的多種狀況，不僅僅是心臟損傷和心力衰竭。通過施用低分子量果膠(至少如在美國專利申請序列號11/485,955中反映的10，000?20，000道爾頓分子量，例如PectaSol-CMCP)而達到的gal-3結(jié)合,在減輕起因于腎損傷的創(chuàng)傷中是有效的。Kolats1-Jannou等，PlusOne, 6，4，el8683 (2011)。降低循環(huán)gal_3水平在減輕肺中的纖維化和相關(guān)的哮喘中可能是有效的。Cederfur 等,Biochim.Biophys.Acta.1820 (9): 1429 - 36 (2012)。還指出，循環(huán)gal-3水平的降低減輕了與2型糖尿病和類似代謝疾病以及肥胖相關(guān)的炎癥。Weigert等,J.Endocrinol.Metab.95, 3, 1404 - 1411 (2010)。因此，高水平的 gal-3 已與甲狀腺癌關(guān)聯(lián),Sethi 等,J.Exp.Ther.0ncol., 8, 4, 341 - 52 (2010)，而且 gal-3 表達和循環(huán)的降低可延遲或降低腫瘤細胞轉(zhuǎn)化。Chiu 等，Am J.Pathol.176，5，2067-81 (2010)。
[0026]如所指出的，gal-3參與多種生物狀況，而且gal-3活性的降低，例如通過gal_3與PectaSol-C MCP及類似的低分子量果膠的結(jié)合所可以達到的，在治療胃的潰瘍性狀況中可能具有價值。Srikanta, Biochimie, 92, 2, 194 - 203 (2010)。Kim 等，Gastroenterology, 138，1035 - 45(2010)指出降低gal_3水平可能在減輕胃癌進展中具有治療價值。通過同一方法，降低gal-3水平將胃癌細胞對常規(guī)化療劑敏感。Cheong等，CancerSc1.，101，I, 94-102(2010)。Gal-3參與多種胃腸道狀況中。降低gal_3，例如通過結(jié)合，可減輕腸粘膜中的炎癥，將MCP成為治療潰瘍性結(jié)腸炎、非特異性結(jié)腸炎和回腸炎、克羅恩病、乳糜瀉和麩質(zhì)敏感癥的重要藥劑。Fowler等，Cell Microbiol.，81，I, 44 - 54(2006)。
[0027]膽道閉鎖是一種肝臟疾病，其與和較高的gal-3水平有關(guān)的肝臟廣泛纖維化有關(guān)聯(lián)。Honsawek 等，Eur.J.Pediatr.Surg., 2011 年 4 月。gal_3 水平的降低引起了肝健康的總體改善，包括減少了炎癥、肝細胞損傷和纖維化。Federici等，J.Heptal.，54，5，975 - 83 (2011)。也參見 Liu 等，World J.Gastroenterol.14，48，7386 - 9I (2008)，其報告了遵循 申請人:在2005和2006年的教導施用低分子量MCP，該MCP抑制結(jié)腸癌的肝轉(zhuǎn)移并降低了 gal-3的濃度。MCP或其它gal-3結(jié)合劑可用于預防肝的炎癥、肝纖維化和肝硬化以及疾病后的肝損傷，包括多種病毒性肝炎疾病(甲肝、乙肝、丙肝等)，而且在寄生性和化學性肝炎、化學性肝損傷及其它的治療中也可使用。Gal-3水平參與多種肝相關(guān)疾病中。因此，gal-3在C型尼曼匹克病的控制中可能是重要的，該疾病是表征為肝疾病和進行性神經(jīng)退化的溶酶體病癥。Cluzeau 等，Hum.Mol.Geent.14 ；21 (16) 3632 - 46 (2012)。有越來越多的證據(jù)指出較高的gal-3水平與對乙酰氨基酚誘導的肝毒性和炎癥相關(guān)聯(lián)。Radosavljeci 等，Toxicol.Sc1.，127:609 - 19(2012)。gal-3 水平的降低可以改善治療。Dragomir 等，Toxicol.Sc1.127 (2): 609 - 19 (2012)。
[0028]雖然修飾柑桔果膠或類似結(jié)合劑的施用仍然是gal-3誘導的損傷抑制和損傷修復的有希望的治療，但發(fā)明人仍繼續(xù)工作以尋找其它提供更快或更深緩解的方法?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)，通過選擇性使用某些gal-3結(jié)合分子，gal-3，特別是生物活性gal_3可以特別地從血漿中以顯著量去除。將具有較低滴度的活性gal-3返回到血漿中提供了治療和干預的即時時機，這可能與通過向有相同需要的哺乳動物施用結(jié)合分子所達到的降低不同或比其更深。通過去除循環(huán)gal-3分子，本發(fā)明從循環(huán)中去除了那些保護性的但潛在有害的分子。另夕卜，其允許開發(fā)定向gal-3阻斷劑(例如MCP)以及可能的其它寡糖和多種藥劑以更好地在細胞表面和組織水平附著于gal-3。因為gal-3的表達在受傷和發(fā)炎的組織例如重構(gòu)的心肌或癌組織中增加，通過去除循環(huán)gal-3，gal-3結(jié)合劑可更有效地與靶組織中的Gal_3結(jié)
八
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【發(fā)明內(nèi)容】

[0029]本發(fā)明涉及通過血漿去除術(shù)從哺乳動物的循環(huán)中去除生物活性gal-3。該哺乳動物可以是人類、靈長類、模型例如大鼠或小鼠、商業(yè)動物例如奶?；蜇i或山羊或者伴侶動物例如狗或貓。用于治療的非人哺乳動物包括靈長類，作為可受益于從循環(huán)中去除gal-3的治療和干預的模型和測試平臺。去除通過血漿去除術(shù)實現(xiàn)，所述血漿去除術(shù)是一種傳統(tǒng)開發(fā)并用于從患有自體免疫疾病等的那些對象的循環(huán)中去除抗體的方法。
[0030]在血漿去除術(shù)中，從患者處移走血液，并從血漿中分離出血細胞。血細胞被返回到體循環(huán)，用新鮮血漿或替代品稀釋。使用常規(guī)血漿去除術(shù)方法及藥物，所述藥物可包括血液稀釋劑。雖然在典型的血漿去除術(shù)中，血漿流過結(jié)合靶抗體的蛋白，在這一特殊情況下，通過與gal-3結(jié)合分子接觸而選擇性去除或失活gal-3后，血漿與抗體、細胞因子、淋巴細胞及其它血液成分一起返回血液。在自體免疫疾病的情況下，從血漿去除半乳凝素-3可成為在對此類患者進行的傳統(tǒng)血漿去除術(shù)之外的輔助治療。
[0031]這一治療可用于所有g(shù)al-3水平在血液或血清中升高或者gal-3在組織中的表達過高的狀況。組織將過量gal-3散發(fā)到血流中，在這里其可通過本發(fā)明被去除。取決于患者、狀況嚴重程度和哺乳類患者的gal-3表達率，治療可變。通常預期每兩到四星期治療一次，直到狀況得到解決，但在需要時治療可每天進行，或者以其間的任何頻率進行。每日治療包括在指定天內(nèi)的一個或多個血漿交換過程，或在急性狀況中數(shù)小時時期內(nèi)的連續(xù)血漿去除術(shù)。治療可在急性或慢性基礎(chǔ)上施用。有利地，這一治療與gal-3阻斷劑和抑制劑的施用組合，例如在美國專利申請序列號13/153,618中公開的。雖然修飾柑桔果膠是靶標抑制齊U，但可使用其它gal-3抑制劑例如其它修飾糖包括乳果糖-1-亮氨酸,Dermotte等,Can.Res.，70 (19): 476 - 88 (2010年10月)，以及對gal-3特異性的抗體和其它拮抗劑如分子量非常低的果膠，分子量低達 IKD, GCS-100, Streetly 等，Blood, 115 (19): 3939-48 (2010 年 2月26日作為摘要出版)。GCS是源自MCP的多糖，與降低的MCP相反。種類龐大的gal_3結(jié)合抗體可商購自包括 abeam (ab2473)、Novus Biologies (NB100-91778)和 Abgent (AJ13129)的供應(yīng)商?？墒褂闷渌肴槟?3特異性抗體。通過從血液中去除大量血漿活性gal-3，可減輕起因于炎癥或纖維化的疾病和損傷，而且可以阻礙癌癥的進展。類似地，可以使得常規(guī)的治療處理更有效。[0032]在一個優(yōu)選的實施方案中，在去除活性gal-3的同時，根據(jù)狀況還通過同一過程通過將血漿流體在TNF受體結(jié)合劑床上運行而去除了不同比率的可溶性TNF受體R-1和/或R-2。隨后可將TNF直接靶向癌細胞或其它靶標作為有效治療?；钚詆al-3在循環(huán)和組織水平的同時降低將允許TNF發(fā)揮其有益影響，伴有限制其使用的炎癥和纖維化的量的減少。Wu等，Arch.Dermatol.20:1 - 7 (2012)。血清gal_3的有效去除還增強了化療，特別是但不僅限于當與TNF受體的去除組合時?；煹脑鰪妼⑼ㄟ^有效去除血清gal-3而發(fā)生，降低了抗藥性，即使未從循環(huán)中去除TNF受體。Yamamato-Sugitani等，PNAS, 18:108 (42), 178468-73(2012)。Gal_3干擾基于鉬的化療和其它抗癌劑，并增加細胞粘附和血管生成。Wu等，Cell Oncol.35 (3):175 - 80 (2012)。另外，僅通過血漿去除術(shù)或者與循環(huán)gal-3結(jié)合劑如低分子量修飾柑桔果膠的施用一起去除gal-3可有效地治療上面提到的疾病和狀況。另外，這可通過將其與其它治療(一個示例是癌癥中的化療)組合而進一步地增強。
[0033]高加索成人的典型循環(huán)gal-3水平的平均值范圍是7到約20ng/ml，每毫升血清
12?15ng gal-3的值是代表性的報告值。有風險的患者，包括患有晚期疾病的那些，在未經(jīng)治療時展示的水平可遠遠高出該患者的平均或正常水平。依照本發(fā)明，面對起因于gal-3介導的纖維化的重大疾病或持久殘疾、gal-3介導的炎癥以及與較高的gal-3水平相關(guān)的癌的生長、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移的個體用血漿去除術(shù)治療，以達到循環(huán)gal-3滴度的顯著降低。
[0034]通過顯著降低循環(huán)gal-3水平，可控制起因于創(chuàng)傷或疾病狀況的炎癥和/或纖維化。gal-3水平的類似降低可有助于控制多種癌癥的生長、擴散和轉(zhuǎn)化。一般而言，為達到在gal-3介導的纖維化中的顯著進展，循環(huán)gal-3的至少百分之十(10%)的降低是必要的，而且在急性狀況包括炎癥、起因于創(chuàng)傷的纖維化或侵襲性癌癥中，可能需要甚至更多。在功能術(shù)語中，gal-3的降低應(yīng)當足以減輕或抑制所述患者中g(shù)al-3水平對炎癥和纖維化、或癌癥生長和轉(zhuǎn)化的影響。可能需要在持續(xù)基礎(chǔ)上循環(huán)gal-3至少百分之二十(20%)的降低，以及在某些情況下至少百分之四十(40% )或甚至百分之五十(50% )的降低。嚴重的狀況可能需要哺乳類患者中循環(huán)gal-3水平的降低超過該患者循環(huán)gal-3滴度的百分之五十(50%)，直到百分之七十五(75%)或甚至更多。雖然體內(nèi)平衡需要循環(huán)中有一定水平的gal-3，在急性狀況下，可能要求降低循環(huán)gal-3的至少百分之八十(80% )，直到gal_3幾乎從血清中完全去除，因為該水平由身體快速地重新補充。急性狀況可以在各種類型的個體中出現(xiàn)，但一個典型示例是肝炎或侵襲性癌癥如胰腺癌或小細胞肺癌中的轉(zhuǎn)化。
[0035]gal-3水平在高加索人以外的種族和個體中可能有變化，但目標是將gal-3水平降低到適當?shù)恼Ｖ狄韵?。目標水平可以基于狀況、年齡、性別和涉及的其它治療而變化。一般而言，依照本發(fā)明，患者的治療可從血漿去除術(shù)開始，該血漿去除術(shù)設(shè)計為將患者的gal-3降低到與該個體的良好健康和體內(nèi)平衡一致的預設(shè)值。在一些情況下，可能有必要重復或延長該治療，以達到甚至更大的降低。
[0036]本發(fā)明在其應(yīng)用中是明確的。正在認識到這一技術(shù)服務(wù)于多少不同的適應(yīng)癥，這是復雜且驚人的。在當前的發(fā)明中，血液依照對血漿去除術(shù)一般使用的良好制定的程序從患者中移走。一般參見Samuels等編輯,Office Practice of Neurology, 1996。處理移走的血液，以從血漿中移走血細胞。這些血細胞與額外體積的血漿或血漿替代物一起直接返回患者。在單一過程中，可以移走兩到四升血漿，過濾并放回。血液還可以回收并體外再循環(huán)，根據(jù)需要過濾多次(連續(xù))，直到達到所需的半乳凝素-3血清水平的降低。不同的狀況可以定位于不同的血清水平。然后將貧血細胞的血漿引入到室中，在這里將gal-3去除或通過結(jié)合拮抗劑將其失活，可能產(chǎn)生使gal-3失活的永久結(jié)合?？墒褂脙蓚€備選措施之一來去除gal-3，盡管它們可以組合。在第一個備選中，血漿與結(jié)合gal-3的顆?；旌稀?yōu)選地，其是抗體或類似配體或多糖衍生物，其最優(yōu)選地是修飾柑桔果膠(MCP)，但任何可以結(jié)合gal-3的試劑都可以使用。低分子量果膠的制備方法是本領(lǐng)域已知的，而且在美國專利申請序列號13/153，648中闡述。
[0037]對結(jié)合劑進行修飾以與易去除的試劑絡(luò)合。在一個實施方案中，其是磁性顆粒。提供了充足的循環(huán)時間后，對含血漿和MCP絡(luò)合物的流體應(yīng)用磁場，可移走結(jié)合的gal-3。在血漿去除術(shù)過程中可使用包含gal-3結(jié)合劑的不同過濾器。
[0038]在某些狀況例如癌癥中，循環(huán)gal-3可被看作是癌細胞釋放的一類誘餌。它具有保護性品質(zhì)，因為它不允許宿主也不允許gal-3結(jié)合劑(例如MCP)到達半乳凝素-3過表達的靶組織。它還誘導炎癥和纖維化，而且使宿主在組織和細胞表面水平下更難以與gal-3結(jié)合。去除循環(huán)gal-3不但自身提供了治療處理，而且允許其它試劑在靶組織水平結(jié)合并失活gal-3。這與TNFa和循環(huán)TNF a受體類似。此類血漿去除術(shù)可與其它化合物的血漿去除術(shù)組合，而且可以增強免疫反應(yīng)和抗炎癥反應(yīng)。循環(huán)gal-3的降低將允許本領(lǐng)域技術(shù)人員，典型地，除了適當?shù)慕逃?jīng)歷以外具有至少五(5)年實踐經(jīng)驗的執(zhí)業(yè)醫(yī)師，更容易中和并失活由組織表達的gal-3，因此允許局部免疫反應(yīng)具有更少的炎癥和纖維化。像這樣，其可與TNF α受體R-1和R-2的去除組合。其還可與TNF α或增強TNF α活性的藥劑的施用組合。
[0039]去除或降低循環(huán)半乳凝素-3水平可以減輕全身性的和不需要的炎性過程，如在腎MCP研究中證明的，引起IL-6水平降低和因其而起的TNFa和TNF KapaP水平降低。
[0040]因此，本文公開的發(fā)明在兩(2)個水平上起作用:
[0041]1.循環(huán)gal-3的直接降低；和
[0042]2.在組織水平下更好靶向gal-3的能力。
[0043]依據(jù)治療有效性，有數(shù)個效果:
[0044]A.通過降低循環(huán)gal-3，經(jīng)由更大的梯度差異，組織gal_3可以更大地散發(fā)，導致減輕的炎癥、纖維化和組織水平上的重建。
[0045]B.次級促炎細胞因子例如IL-6、TNF α、TNF Kapa β等降低。
[0046]C.一般而言，可以將循環(huán)的多種gal-3阻斷劑效力更大，特別是MCP和低于40Κ道爾頓的聚糖醛酸。
[0047]D.可增加受過量循環(huán)gal-3抑制的其它治療的效力。
[0048]在一個備選實施方案中,含gal-3的血衆(zhòng)可流過固定化的gal-3結(jié)合劑固相。MCP是一個示例，而與柱或管結(jié)合的gal-3特異性抗體是另一個。在優(yōu)選的實施方案中，這兩種從循環(huán)中去除gal-3的途徑組合在一起。它們可以用任何次序組合，但優(yōu)選的是將血漿流過固定相，接著再將血漿與可容易去除的結(jié)合劑組合?；蛘呖蛇x地，拮抗劑對gal-3的結(jié)合可能足以失活該分子，因此可不經(jīng)將其從血漿中去除的步驟就返回身體。
[0049]gal-3與會將其從循環(huán)中去除的血漿去除術(shù)元件結(jié)合是對多種適應(yīng)癥來說有助于身體狀況的事件。在廣義上，適應(yīng)癥主要與抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)化(癌)、炎癥和纖維化相關(guān)。這些參與特定的適應(yīng)癥例如心臟病、腎損傷、肝損傷、肝腎疾病、膀胱疾病、甲狀腺疾病、肺疾病、胃腸道疾病、免疫反應(yīng)、中風、不可降解的病原體導致的持續(xù)性急性炎癥、持續(xù)性異物、自體免疫反應(yīng)、超敏反應(yīng)和過敏、殺蟲劑、環(huán)境毒素和重金屬以及異源狀況例如輻射(示例是醫(yī)學程序例如多種放療、暴露于電離輻射、核輻射、宇宙輻射、電磁輻射)、化療損傷以及輻射和化療后誘發(fā)的炎癥和纖維化、手術(shù)后炎癥上升、急性創(chuàng)傷例如事故，等等。
[0050]較高的循環(huán)Gal-3可以改變局部狀況，例如局部炎癥或纖維化，并將其轉(zhuǎn)化成更大的全身性問題。因此，當gal-3與血液中的成分結(jié)合時，其也結(jié)合毒劑等，或類似地，當局部的毒素與gal-3結(jié)合時，由那些鄰近局部損傷或患病組織的介質(zhì)潛在引起的損害可以變成全身性的。觀察到與潛在的轉(zhuǎn)移癌相關(guān)的同一現(xiàn)象。Gal-3通常是粘附性分子。較高的gal-3水平將加速癌癥從局部腫瘤到全身范圍多器官問題的擴散。將較高的gal-3水平降低到低于15或12ng/ml，降低百分之十(10% )或更多，將幫助將損傷和損害局部化，并最大化不相關(guān)的治療劑在局部損傷或疾病位點的益處。
[0051]如上面指出的，在多種癌癥中，較高的gal-3水平與癌細胞的生長、轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)移性遷移相關(guān)，包括肝癌、腎癌、乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、膽囊癌、鼻咽癌、淋巴細胞性白血病、肺癌、黑色素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、多形性成膠質(zhì)細胞瘤、子宮癌、卵巢癌、宮頸癌和腦癌等，而且降低這些癌癥對常規(guī)抗腫瘤劑的敏感性。
[0052]較高的gal-3水平，在與心血管疾病和心力衰竭相關(guān)的狀況中，在包括腦、肺、腎、肝、心臟和胃腸道狀況的組織損傷以及起因于輻射和化療照射的組織損傷中，還與纖維化超出正常和健康水平的發(fā)展和延伸相關(guān)。
[0053]在與炎癥的關(guān)聯(lián)中也遇到了超出正常的gal-3水平。這可以是疾病或創(chuàng)傷相關(guān)的炎癥以及不可降解的病原體導致的持續(xù)性急性炎癥、持續(xù)性異物、或自體免疫反應(yīng)、超敏反應(yīng)和過敏、電離輻射、核輻射以及可能與疾病或器官衰竭模式相關(guān)的炎癥，包括糖尿病(I和II型)、心臟疾病和功能不全、動脈粥樣硬化、哮喘(支氣管炎癥)、胃和十二指腸潰瘍、腸中的腸炎(炎癥性腸病)、與酒精和非酒精相關(guān)硬化和炎癥相關(guān)的肝炎、肝傳染病例如病毒性肝炎，等等。與炎癥相關(guān)且對通過去除血漿的處理降低gal-3水平的治療敏感的其它適應(yīng)癥，包括多種寄生物誘導的狀況，例如錐蟲病、腦型瘧疾以及炎癥和對多種傳染病的抵抗，包括巴西副球孢子菌病(Paracoccidiosis brasilensis)(真菌感染)、血吸蟲病、granulatomatous支氣管肺炎、萊姆病、結(jié)核病等。報告較高的gal_3水平與感染相關(guān)，包括白色念珠菌(Candida albicans), Reales-Calderon 等，J.Proteomics, 3:75 (15) 4734 - 46 (2012)，曼氏血吸蟲(Schistoma mansoni)( 一 種寄生蟲感染)Brand 等，Histol.Histopathol.，27(8) 1109 - 20(2012)及許多其它感染，包括細菌感染如腦膜炎奈瑟氏菌(Neisseriameningitides)，Quattroni 等,Cell Microbiol., (2012年7月)。CNS疾病中的朊病毒感染也與gal-3水平提升相關(guān)。Mok等，Biochem.Bophys.Res.Commun.3:359:672 - 8 (2007)。較高的gal_3水平在與以下各項相關(guān)的炎癥中是一個重要影響因素:關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、帕金森病、其它神經(jīng)學疾??；以及其它骨骼肌肉和皮膚系統(tǒng)的疾病，包括炎癥和纖維化相關(guān)狀況例如銀屑病和皮膚老化。參見例如Ezzat 等，Int.J.Rheum.Dis., 14 (4): 345-52 (2011)(關(guān)節(jié)炎)，Gal 等，Acta.Histochem.Cytochem., 44 (5): 191 - 9 (2011)和 Liu 等,Invest.Dermatol., 10.1038 (2012)(傷口 愈合)和Larsen等，Dermato1.Sc1.，64(2):85 - 91(2011)(皮膚疾病)。如上面指出的，這些狀況可以通過從循環(huán)中去除生物活性的未結(jié)合的gal-3來治療，單獨地通過本發(fā)明，或通過從循環(huán)中的去除與施用gal-3結(jié)合劑例如MCP的組合，以進一步處理gal-3介導的狀況。
[0054]至少部分由循環(huán)gal-3水平介導的炎癥也在器官精神病學和腦部病癥中起作用。這一類型的炎癥與多種狀況相關(guān)，例如精神分裂癥。Muller等,Adv.Protein Chem Struct.Biol.，88，49 - 68 (2012)和 Palladino 等，J.Neuroinflammation, 22 ；9, 206 (2012)。因此，降低較高的gal-3水平可能是一個幫助控制通過單獨的治療干預難以控制的該類型精神疾病的方法。類似地，一種接受越來越多關(guān)注的狀況——注意力缺失過動癥(ADHD)已顯示在某種程度上由gal-3表達介導。Wu等，Brain Pathol., 20 (6), 1042 - 54 (2010)。較高的gal-3表達水平和與其相關(guān)的炎癥還與器官組織損傷以及精神行為障礙相關(guān)。因此，阿爾茨海默病和增強的Αβ淀粉樣沉積已顯示與促炎狀況例如由較高的gal-3水平介導的那些相關(guān)聯(lián)。Reale 等，Curr.Alzheimer Res.9 (4), 447 - 57 (2012)。Gal-3還顯示涉及到控制髓鞘狀況的少突膠質(zhì)細胞適當分化中，Pasquin等，Cell DeathDiffer., 18(11)，1746 - 56(2012)以及創(chuàng)傷性腦損傷后的康復和再生中。Venkatesan等，J.Neuroinflammation27 (7) 32 (2010) 0因此，除了一般在控制疾病或損傷狀況中的炎癥中具有重要性以外，循環(huán)gal-3水平通過血漿去除術(shù)的降低可能在控制與腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥相關(guān)的物理現(xiàn)象中具有關(guān)鍵價值。
[0055]應(yīng)當指出，一般地，炎癥和纖維化可以由蓄意的治療而不僅僅是創(chuàng)傷或疾病狀況誘發(fā)。循環(huán)的未結(jié)合的gal-3通過本發(fā)明的去除可以對減輕或預防化療和其它藥物誘導的器官損傷有效。一些示例包括博萊霉素，其誘導肺纖維化，以及多種心臟藥物例如胺碘酮。阿霉素和多柔比星是廣泛使用的處方藥物，而且呈現(xiàn)出心臟炎癥和纖維化問題。治療膀胱癌的卡介苗洗滌誘導全身性炎癥，而且環(huán)磷酰胺也誘導膀胱損傷。環(huán)孢素，一種廣泛使用的免疫抑制藥物，Restasis?中的活性劑，它誘導了腎毒性和炎癥。研究指出，由處方藥物引起的器官損傷的廣闊排列至少部分由較高的gal-3水平介導，而且通過本發(fā)明的方法可以限制，如果不是消除的話。
[0056]在一個優(yōu)選的實施方案中，血清在循環(huán)gal-3如描述般降低或去除后，在其返回患者的血流前進一步處理。具體地，特定添加了在缺乏半乳凝素-3或存在降低水平的半乳凝素-3時可能更有效的藥劑。這包括多種活性劑，但具體包括藥劑例如化療藥物和多種狀況的治療劑。舉例來說，抗炎癥藥將起效得更好，心臟藥物、任何遞送以針對gal-3在此是影響因素的問題或gal-3阻礙向靶組織的有效遞送的藥物，將受這一過程增強。這些藥劑然后將有機會在較低水平gal-3的環(huán)境下起效。哪怕僅僅幾小時，它們可以展示出全部的生物活性。一旦炎癥(舉例來說)減輕，自然地，靶組織將生產(chǎn)和表達較少的gal-3，導致長期基礎(chǔ)上的較低的循環(huán)gal-3。
[0057]因此，雖然在一個備選方案中，本發(fā)明涉及長時間的或長期的血漿去除術(shù)以保持降低的gal-3水平，本發(fā)明還預期了短期基礎(chǔ)上的干預，同時去除循環(huán)gal-3并提供否則受gal-3抑制的藥劑，以迅速處理特別是炎癥。Gal-3水平可以作為瞬時事件出現(xiàn)尖峰，例如對創(chuàng)傷的反應(yīng)。擁有在患者中快速降低gal-3水平的技術(shù)，加上通常在某種程度上受高水平gal-3抑制的活性劑的施用，可以提供急救技術(shù)。雖然 申請人:不希望局限于這幾個示例，大量狀況已顯示由未結(jié)合的gal-3介導，使得其通過本文提供的發(fā)明的去除將有助于治療。已證明了在人類中降低自由gal-3可以阻止腎纖維化和腎損傷后的炎癥。已證明甲狀腺癌和肺癌的治療都通過降低gal-3濃度而有效地改善。通過靠本發(fā)明降低活性gal-3的循環(huán)水平，可以得到對輻射和化療干預的增強的敏感度。
[0058]哮喘及相關(guān)狀況，其主要標志為過度的炎癥，可由通過本發(fā)明的過程去除循環(huán)gal-3來避免或抑制。其包括胃腸道炎癥以及肝的炎癥和纖維化發(fā)展、間質(zhì)性膀胱炎、腦和認知功能相關(guān)的炎癥等。寄生物入侵相關(guān)的炎癥也可由通過本發(fā)明去除gal-3或降低其循環(huán)水平來控制。其它炎癥相關(guān)的疾病例如糖尿病和關(guān)節(jié)炎的治療也類似。這些狀況理想上可以是本發(fā)明以及循環(huán)gal-3結(jié)合劑如MCP和不相關(guān)的治療劑施用的目標。
[0059]盡管本發(fā)明已一般地公開且關(guān)于特定備選方案公開，那些備選方案不打算作為限制性的，除非在下面闡述的權(quán)利要求書中有體現(xiàn)。本發(fā)明僅受權(quán)利要求書的條款及其等同物所限，如本申請所指向領(lǐng)域中技術(shù)人員將認識到的。
【權(quán)利要求】
1.一種在哺乳動物中治療至少部分由血液中的活性半乳凝素-3介導的狀況的方法，包括:選擇需要降低半乳凝素-3循環(huán)水平的哺乳動物；和對所述哺乳動物的血液進行血漿去除術(shù)以降低活性gal-3循環(huán)水平，以使該個體血清中的至少10%的循環(huán)gal-3通過所述血漿去除術(shù)去除。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法還包括定期監(jiān)控所述哺乳動物中的循環(huán)gal-3水平，并在所述gal-3水平超出為所述個體預設(shè)的與該個體的gal-3介導的疾病狀態(tài)相一致的gal-3水平時，對所述哺乳動物重復所述血漿去除術(shù)。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述哺乳動物中的半乳凝素-3的循環(huán)水平降低了至少百分之二十五(25% )。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中g(shù)al-3的循環(huán)水平通過所述血漿去除術(shù)降低了所述血漿去除術(shù)前的gal-3水平的約百分之五十(50% )。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述個體的循環(huán)gal-3水平通過所述方法降低了至少百分之七十五(75% )。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述進行血漿去除術(shù)的步驟包括:從所述哺乳動物的身體中移走一部分所述哺乳動物的血液以提供一定體積的分離血液，從所述分離血液中去除紅細胞以提供分離血漿并將所述紅細胞返回所述哺乳動物的循環(huán)中，將所述分離血漿與結(jié)合gal-3的部分相接觸，從所述分離血漿的剩余部分中分離出任何此類部分及其所結(jié)合的gal-3以提供具有降低水平的半乳凝素-3的血漿，并將所述具有降低水平的半乳凝素-3的分離血漿返回所述哺乳動物的循環(huán)中。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述部分包含結(jié)合gal-3的抗體、結(jié)合gal-3的糖及其組合。
8.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述部分與如下元件結(jié)合:該元件使所述部分和其所結(jié)合的gal-3與所述分離血漿的分離更容易。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中所述元件是所述部分附于其上的柱、一批所述部分附于其上的支架、有磁性吸引力的粒子及其混合物。
10.如權(quán)利要求3所述的方法，其中當將所述分離血漿返回所述哺乳動物時，所述哺乳動物中的循環(huán)gal-3水平低于15ng/ml。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中選擇所述哺乳動物是因為其需要抑制至少部分由gal-3介導的癌癥的生長或擴散。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述癌癥是肝癌、腎癌、乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、膽囊癌、鼻咽癌、淋巴細胞性白血病、肺癌、黑色素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、多形性成膠質(zhì)細胞瘤、子宮癌、卵巢癌、宮頸癌或腦癌。
13.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述哺乳動物正在接受對癌癥的抗腫瘤化療，該治療受gal-3抑制。
14.如權(quán)利要求1所述的方法，其中選擇所述哺乳動物是因為其需要抑制由gal-3介導的纖維化的發(fā)展或延伸。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中所述纖維化與心血管疾病、胃腸道疾病、心血管創(chuàng)傷、腦創(chuàng)傷、肺創(chuàng)傷、腎組織創(chuàng)傷、肝組織創(chuàng)傷、起因于放療的組織損傷和起因于化療的組織損傷相關(guān)。
16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中選擇所述患者是因為其需要抑制由gal-3介導的炎癥。
17.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述炎癥與以下各項相關(guān):不可降解的病原體、自體免疫反應(yīng)、過敏、電離輻射、核輻射、糖尿病、心臟疾病和功能不全、動脈粥樣硬化、支氣管炎癥、腸潰瘍、腸中的腸炎、肝炎、與硬化相關(guān)的肝炎、與寄生蟲感染相關(guān)的炎癥、與病毒感染相關(guān)的炎癥、與真菌感染相關(guān)的炎癥、與細菌感染相關(guān)的炎癥、與關(guān)節(jié)炎相關(guān)的炎癥、與器官精神病性病癥或腦部病癥相關(guān)的炎癥、多發(fā)性硬化和銀屑病。
18.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所述炎癥起因于藥物治療。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述藥物包括博萊霉素、胺碘酮、阿霉素、多柔比星、環(huán)磷酰胺和環(huán)孢素。
20.如權(quán)利要求1所述的方法，其中選擇所述哺乳動物是因為需要降低gal-3水平以改善要被施用給所述個體的藥物的效力。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中所述藥物是他汀、抗腫瘤化學劑、抗炎劑、TNF阻斷劑或TNFa活性促進劑。
22.如權(quán)利要求1所述的方法，其中在所述血清返回所述患者前，將其與如下藥劑混合:該藥劑的活性在半乳凝素-3水平降低時得到改善。
23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中所述藥劑是抗腫瘤劑或抗炎劑。
【文檔編號】G01N33/53GK104011544SQ201280059901
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月8日
【發(fā)明者】艾薩克.伊萊亞茲 申請人:艾薩克.伊萊亞茲