專(zhuān)利名稱：基于穩(wěn)定同位素比值鑒別葡萄酒產(chǎn)地的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及基于穩(wěn)定同位素比值鑒別產(chǎn)地葡萄酒真實(shí)性(例如產(chǎn)地來(lái)源真實(shí)性)的方法。本發(fā)明屬于葡萄酒產(chǎn)品真實(shí)性識(shí)別技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
葡萄酒產(chǎn)品質(zhì)量與產(chǎn)地、品種和年份密切相關(guān)。在葡萄酒的發(fā)展進(jìn)程中，產(chǎn)地逐漸成為其品質(zhì)的標(biāo)志性特征。產(chǎn)地葡萄酒是以產(chǎn)地葡萄原料、釀造工藝技術(shù)和微生物共同作用的產(chǎn)物，具有獨(dú)特的風(fēng)格和典型特征。世界上著名的葡萄酒都是來(lái)自優(yōu)良的葡萄酒產(chǎn)地，產(chǎn)地逐漸作為葡萄酒品質(zhì)的標(biāo)志性特征，以防止假冒偽劣產(chǎn)品。
近幾年來(lái)，隨著葡萄酒產(chǎn)業(yè)的不斷壯大，我國(guó)釀酒葡萄生產(chǎn)也正在朝著“區(qū)域化、基地化、良種化”方向發(fā)展。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 15037《葡萄酒》中定義了產(chǎn)地葡萄酒的概念，規(guī)定“用所標(biāo)注的產(chǎn)地葡萄釀制的酒所占比例不低于酒含量的80%(體積分?jǐn)?shù))”才能成為產(chǎn)地葡萄酒，但我國(guó)尚缺乏產(chǎn)地葡萄酒的有效鑒別技術(shù)手段和方法，僅僅依靠企業(yè)自律和現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)管理體系無(wú)法有效規(guī)范市場(chǎng)，極少部分企業(yè)受到利益驅(qū)動(dòng)，利用假冒偽劣產(chǎn)品冒充優(yōu)質(zhì)產(chǎn)地葡萄酒在市場(chǎng)上銷(xiāo)售，獲取高額利潤(rùn)，對(duì)葡萄酒市場(chǎng)造成較大沖擊，不利于我國(guó)葡萄酒工業(yè)的良性發(fā)展和有序競(jìng)爭(zhēng)，同時(shí)也損害了消費(fèi)者的利益和知情權(quán)。因此開(kāi)發(fā)一種能夠有效鑒別產(chǎn)地葡萄酒的技術(shù)方法對(duì)于規(guī)范市場(chǎng)行為，促進(jìn)我國(guó)葡萄酒行業(yè)健康發(fā)展，維護(hù)合法企業(yè)和消費(fèi)者利益具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本領(lǐng)域急需準(zhǔn)確鑒定酒精飲料，尤其是葡萄酒的產(chǎn)地真實(shí)性的方法，促進(jìn)我國(guó)飲料酒，例如葡萄酒行業(yè)的健康發(fā)展，維護(hù)合法企業(yè)和消費(fèi)者利益為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問(wèn)題，本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的不懈努力發(fā)現(xiàn)，不同地域的植物在生長(zhǎng)過(guò)程中不斷與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換，植物體內(nèi)同位素(例如，O)組成受氣候、環(huán)境、等因素影響而發(fā)生自然分餾效應(yīng)，導(dǎo)致不同產(chǎn)地的植物體內(nèi)的同位素自然豐度產(chǎn)生差異；而植物體的同位素豐度在一定程度上能夠反映其所處環(huán)境的同位素特征，葡萄酒在發(fā)酵過(guò)程中將糖類(lèi)轉(zhuǎn)化為乙醇，保留了產(chǎn)地特征信息。因此利用穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜檢測(cè)葡萄酒中乙醇的氧穩(wěn)定性同位素比值的差異可鑒別區(qū)分不同產(chǎn)地的葡萄酒。本發(fā)明采用穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀對(duì)來(lái)自真實(shí)的不同產(chǎn)地的葡萄酒中乙醇中氧同位素比值進(jìn)行測(cè)定，以及對(duì)待測(cè)樣品(例如待測(cè)葡萄酒)的乙醇中氧同位素比值進(jìn)行測(cè)定，然后將待測(cè)樣品中乙醇成分的氧同位素比值與參考的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒中乙醇氧同位素比值進(jìn)行顯著性差異性分析，若不存在顯著差異，則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自同一產(chǎn)地；反之則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自不同的產(chǎn)地。優(yōu)選的，在實(shí)施本發(fā)明的過(guò)程中，可構(gòu)建產(chǎn)地葡萄酒中乙醇的氧同位素信息數(shù)據(jù)庫(kù)，從而在使用本發(fā)明的方法鑒定葡萄酒時(shí)，不需要每次都測(cè)定來(lái)自真實(shí)的同一產(chǎn)地或不同產(chǎn)地的葡萄酒中乙醇中氧同位素比值，而是使用已經(jīng)建立起來(lái)的產(chǎn)地葡萄酒中氧同位素信息數(shù)據(jù)庫(kù)。本發(fā)明的方法包括測(cè)定待測(cè)樣品(例如待測(cè)葡萄酒)中乙醇的δ 180，然后將其與已經(jīng)建立的參考的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒中乙醇的S18O進(jìn)行顯著性差異性分析，若不存在顯著差異，則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自同一產(chǎn)地；反之則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自不同的產(chǎn)地?？蛇x擇的，本發(fā)明的方法包括測(cè)定待測(cè)樣品(例如待測(cè)葡萄酒)中乙醇的δ 180，然后將其與已經(jīng)建立的參考的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒中乙醇的S18O區(qū)間值進(jìn)行比較，如果待測(cè)樣品的S18O落入所述區(qū)間，則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自同一產(chǎn)地；反之則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自不同的產(chǎn)地。當(dāng)然，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以選擇在同一個(gè)試驗(yàn)周期中，既測(cè)定參考的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒中乙醇的δ180，又測(cè)定待測(cè)樣品中乙醇的δ180。優(yōu)選的，本發(fā)明的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒樣品是從葡萄酒主要產(chǎn)區(qū)生產(chǎn)企業(yè)獲得以當(dāng)?shù)?葡萄為原料生產(chǎn)的產(chǎn)地葡萄酒的真實(shí)樣品(符合GB 15037產(chǎn)地葡萄酒定義要求)。本發(fā)明的待測(cè)樣品可以是從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)標(biāo)注特定產(chǎn)地的葡萄酒樣品。本發(fā)明的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒樣品的乙醇δ 18O數(shù)據(jù)庫(kù)可通過(guò)如下方法構(gòu)建采集樣品，其中某一產(chǎn)地葡萄酒的樣品選擇至少20批次以上，然后測(cè)定乙醇中δ180，建立產(chǎn)地葡萄酒乙醇δ 18O數(shù)據(jù)庫(kù)，其中采用統(tǒng)計(jì)方法分析原產(chǎn)地乙醇中δ 18O數(shù)值范圍與產(chǎn)地的相關(guān)性。本發(fā)明中乙醇中δ 18O測(cè)定方法可為將樣品和丙酮按照一定比例混勻，取混合溶液于2mL進(jìn)樣瓶，按如下方法測(cè)定樣品的乙醇中和δ 180，色譜條件如下分子篩毛細(xì)色譜柱(例如規(guī)格為50mX0. 32mmX0. 45mm);載氣為高純氦氣(例如為99. 999%);采取恒流模式(例如，I. 2mL/min);柱溫采用程序升溫:初始溫度110°C,保持Imin,以5°C /min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度1030°C;裂解管溫度為1280°C;進(jìn)樣量LOyL ;質(zhì)譜參數(shù) 離子源真空I. 8X 10_6mBar，電壓3. 06KV ;其中，優(yōu)選的，在樣品測(cè)定前，用標(biāo)準(zhǔn)樣品校準(zhǔn)儀器。本發(fā)明的方法無(wú)需復(fù)雜的前處理，操作簡(jiǎn)單，成本低，解決了葡萄酒的產(chǎn)地真實(shí)性鑒別的技術(shù)問(wèn)題，有利于促進(jìn)我國(guó)葡萄酒行業(yè)健康發(fā)展，維護(hù)合法企業(yè)和消費(fèi)者的利益。在本發(fā)明中，氧同位素比值可為δ180。


附圖I :氣相色譜-同位素質(zhì)譜(GC-IRMS)測(cè)定葡萄酒中乙醇的氧同位素28，29，30離子流圖。附圖2 :不同產(chǎn)地葡萄酒樣品δ 18O測(cè)定描述統(tǒng)計(jì)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例一葡萄酒中乙醇δ 18O測(cè)定a)取已知δ 18O的乙醇用丙酮稀釋后混勻，待進(jìn)樣；b)取待測(cè)葡萄酒用丙酮稀釋?zhuān)靹虼M(jìn)樣；
c)按如下方法分別測(cè)定步驟a)和b)溶液中乙醇δ 18O色譜條件如下分子篩毛細(xì)色譜柱(50mX0.32mmX0.45mm);載氣為高純氦氣(99. 999%);采取恒流模式(I. 2mL/min);柱溫采用程序升溫初始溫度110°C，保持lmin，以5°C /min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度1030°C ;裂解管溫度為1280°C ;進(jìn)樣量l.OyL ;質(zhì)譜參數(shù)離子源真空I. 8X10_6mBar，電壓3. 06KV ;在樣品測(cè)定前，用標(biāo)準(zhǔn)樣品校準(zhǔn)儀器；c)采用已知δ 18O的乙醇進(jìn)行標(biāo)定同位素質(zhì)譜參考?xì)釩O2的δ 18O ；d)將待測(cè)樣品注入GC-P-IRMS得到葡萄酒中乙醇δ 180，見(jiàn)附圖I。實(shí)施例二 產(chǎn)地葡萄酒鑒別實(shí)例a)分別從新疆、山東、云南等企業(yè)征集標(biāo)注產(chǎn)地信息真實(shí)的葡萄酒樣品，其中山東產(chǎn)地葡萄酒樣品21個(gè)，新疆產(chǎn)地葡萄酒樣品20個(gè)，云南產(chǎn)地葡萄酒樣品20個(gè)；b)從市場(chǎng)上所購(gòu)買(mǎi)標(biāo)注產(chǎn)地為新疆、山東、云南等地的葡萄酒樣品5個(gè)；c)葡萄酒中乙醇δ 18O測(cè)定吸取待測(cè)葡萄酒樣品于進(jìn)樣小瓶中，加入丙酮溶液稀釋混勻，按如下方法測(cè)定樣品中乙醇的s18o，色譜條件如下色譜條件如下分子篩毛細(xì)色譜柱(50mX(X32mmX(X45mm);載氣為高純氦氣(99.999%);采取恒流模式(I. 2mL/min);柱溫采用程序升溫初始溫度110°C，保持lmin，以5°C/min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度10300C ;裂解管溫度為1280°C ;進(jìn)樣量I. Oy L ;質(zhì)譜參數(shù)離子源真空I. 8X 10_6mBar，電壓3. 06KV ;在樣品測(cè)定前，用標(biāo)準(zhǔn)樣品校準(zhǔn)儀器。不同產(chǎn)地葡萄酒樣品乙醇δ 18O范圍見(jiàn)下表I。表I不同產(chǎn)地葡萄酒樣品δ 18O測(cè)定描述統(tǒng)計(jì)
權(quán)利要求
1.基于氧穩(wěn)定同位素比值鑒別葡萄酒的產(chǎn)地的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟 1)測(cè)定待測(cè)葡萄酒中乙醇的S18O; 2)將待測(cè)葡萄酒樣品中乙醇成分S18O與參考的真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒中乙醇S 18O進(jìn)行顯著性差異性分析，若不存在顯著差異，則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自同一產(chǎn)地；反之則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自不同的產(chǎn)地。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，其中所述真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒符合GB15037葡 萄酒標(biāo)準(zhǔn)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的方法，其中采用氣相色譜/同位素質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC/IRMS)測(cè)定葡萄酒中乙醇的5 180。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中在測(cè)定葡萄酒中乙醇的S18O時(shí)，利用丙酮對(duì)葡萄酒進(jìn)行稀釋。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中，當(dāng)測(cè)定葡萄酒中乙醇的S18O時(shí)，色譜條件如下采用分子篩填料色譜柱；載氣為高純氦氣；采取恒流模式；柱溫采用程序升溫初始溫度110°c，保持lmin，以5°C /min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度1030°C ;裂解管溫度為1280 0C ;進(jìn)樣量LOuL ;質(zhì)譜參數(shù)離子源真空I. 8X10_6mBar，電壓3. 06KV。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中高純氦氣的純度為至少99.999%。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中恒流模式為I.2mL/min。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述的分子篩填料色譜柱為毛細(xì)色譜柱。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種基于穩(wěn)定同位素比值鑒別產(chǎn)地葡萄酒的方法，屬葡萄酒真實(shí)性識(shí)別技術(shù)領(lǐng)域。主要步驟如下(1)采用氣相色譜/穩(wěn)定同位素質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒樣品中乙醇的δ18O，構(gòu)建真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒樣品δ18O數(shù)據(jù)庫(kù)；(2)測(cè)定待測(cè)葡萄酒樣品中乙醇的δ18O；(3)將待測(cè)樣品中乙醇成分δ18O與真實(shí)產(chǎn)地葡萄酒中乙醇δ18O進(jìn)行顯著性差異分析，若無(wú)顯著差異，則表明待測(cè)樣品與真實(shí)樣品來(lái)自同一產(chǎn)地，反之則表明來(lái)自不同的產(chǎn)地。本發(fā)明利用穩(wěn)定同位素質(zhì)譜技術(shù)建立了一種能夠準(zhǔn)確鑒別產(chǎn)地葡萄酒的方法，解決我國(guó)產(chǎn)地葡萄酒在市場(chǎng)監(jiān)管存在的技術(shù)難題，利于規(guī)范市場(chǎng)行為，保護(hù)消費(fèi)者和合法企業(yè)利益，促進(jìn)葡萄酒行業(yè)健康有序發(fā)展。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102967668SQ201210472459
公開(kāi)日2013年3月13日 申請(qǐng)日期2012年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月20日
發(fā)明者鐘其頂, 王道兵, 熊正河 申請(qǐng)人:中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院