專利名稱：一種中藥前列寧制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，特別涉及一種中藥前列寧制劑的質(zhì)量 檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
前列寧膠囊為金訶藏藥股份有限公司獨(dú)家產(chǎn)品，收載于中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家 標(biāo)準(zhǔn)部分，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)WS-10627(ZD-0627)-2002-2011Z。前列寧膠囊是由如下重量配比的藥 材制成的薪蓂子58. 7g、石韋41. 2g、蒲公英41. 2g、刺柏29. 3g、訶子29. 3g、刀丑22. 8g、 芒果核17. 5g、蒲桃17. 5g、大托葉云實(shí)17. 5g、紫草茸11. 4g、藏茜草17. 5g、紅花11. 4g、豆 蘧5.9g。以上十三味，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，裝入膠囊，制成1000粒。具有清熱解毒，化 瘀通淋之功效。用于熱毒瘀阻所引起的尿頻，尿急，尿痛屬中醫(yī)淋證者。現(xiàn)有關(guān)于前列寧藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅采用TLC薄層鑒別一味藥材紫草茸、HPLC測(cè)定 一個(gè)藥效成分沒(méi)食子酸的含量，現(xiàn)有技術(shù)中也尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)于前列寧膠囊的其他質(zhì)量檢測(cè)方 法，因此現(xiàn)有質(zhì)量檢測(cè)方法不能全面、準(zhǔn)確的控制本品質(zhì)量，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有待提高。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種中藥前列寧膠囊及其制劑的質(zhì)量 檢測(cè)方法。發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種檢測(cè)中藥前列寧膠囊及其制劑中訶子、紅花、菥蓂子、藏茜草的 薄層鑒別方法；采用高效液相色譜法，通過(guò)變化紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)，從而達(dá)到在同一色 譜條件下同時(shí)對(duì)沒(méi)食子酸和羥基紅花黃色素A的含量進(jìn)行測(cè)定，在增強(qiáng)了產(chǎn)品可控性的基 礎(chǔ)上，節(jié)約了分析時(shí)間，提高了工作效率，同時(shí)使用梯度洗脫，保護(hù)了色譜柱，延長(zhǎng)了色譜柱 的使用壽命，降低了成本。術(shù)語(yǔ)說(shuō)明前列寧膠囊是國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編(中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)部分)記載的 藥品名稱，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào) WS-10627 (ZD-0627) -2002-2011Z。前列寧制劑包括前列寧膠囊及用前列寧膠囊原料藥配方制備的其他制劑。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種原料藥組成為菥蓂子58. 7重量份、石韋41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺 柏29. 3重量份、訶子29. 3重量份、刀丑22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量 份、大托葉云實(shí)17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、紅花11. 4重量份、 豆蘧5. 9重量份的中藥前列寧制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定 方法中的一種或幾種鑒別A、訶子的鑒別
取中藥前列寧制劑3-10g,加無(wú)水乙醇25_50ml,超聲處理20_30min,加娃藻土 l_3g，混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取訶子對(duì)照藥材l_2g，加無(wú)水乙醇 25-50ml,超聲處理20-30min,加娃藻土 l_3g,混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml,作為對(duì)照藥材溶 液；另取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜 法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5-10 yl，分別 點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為3-9:2-6:0. 5-1. 5的三氯甲烷-醋酸乙酯-甲 酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以質(zhì)量體積份數(shù)比為1%三氯化鐵乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn) 顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、紅花的鑒別取中藥前列寧制劑3-10g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液25_50ml，密塞，振 搖10-20min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材lg，加體積份數(shù)比為80% 丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振搖10-20min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層 色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5-10 yl， 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為5-9:1-3:2-4:0. 2-0.6的醋酸乙酯-甲 酸-水-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、菥蓂子的鑒別取中藥前列寧制劑3-10g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液25_50ml，密塞，振搖 10-20min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取菥蓂子對(duì)照藥材lg，加體積份數(shù)比為80% 丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振搖10-20min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層 色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5-10 yl， 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5:3-7的正丁醇-冰醋酸-水 混合溶液的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以體積份數(shù)比為10%硫酸乙醇溶液， 100-105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；D、藏茜草的鑒別取中藥前列寧制劑3-10g,加甲醇25-50ml,超聲處理20-30min,濾過(guò)，濾液濃縮至 lml，作為供試品溶液；另取藏茜草對(duì)照藥材l_2g，加甲醇25-50ml，超聲處理20_30min，濾 過(guò)，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一 部附錄VI B)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各5-lOyl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比 為2-6:0. 5-1. 5的石油醚-丙酮為展開(kāi)劑，石油醚沸程為60 90°C，展開(kāi)，取出，晾干，置紫 外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng) 相A，以體積份數(shù)比1 %冰醋酸水溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式0min — 20min — 25m in — 50min — 55min — 60min,按照上述時(shí)間段，乙腈、體積份數(shù)比1 %冰醋酸水溶液同時(shí)進(jìn) 行洗脫，其中，乙腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;體積份數(shù)比1 %冰醋酸水溶液99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 時(shí)間內(nèi)使用 275nm 的檢測(cè)波長(zhǎng)，20min改變檢測(cè)波長(zhǎng)為403nm，21min使檢測(cè)器平衡，21min — 60min時(shí)間內(nèi)使用403nm的檢測(cè)波長(zhǎng)。理論板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ;對(duì)照品溶液的制備取沒(méi)食子酸對(duì)照品、羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加體積份數(shù)比40-60%乙醇水溶液分別制成每Iml含沒(méi)食子酸20 μ g、羥基紅花黃色素A O. 2mg的溶液，即得；
供試品溶液的制備取中藥前列寧制劑粉末3g，過(guò)三號(hào)篩，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數(shù)比40-60%乙醇水溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數(shù)比40-60%乙醇水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。所述的前列寧制劑是指按前列寧膠囊原料藥配方菥蓂子58. 7重量份、石韋41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、訶子29. 3重量份、刀豆22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量份、大托葉云實(shí)17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、紅花11. 4重量份、豆蘧5. 9重量份，經(jīng)過(guò)洗凈，去除雜質(zhì)，溫度低于60°C干燥，混合均勻，超微粉碎機(jī)粉碎成O. 1-50 μ m超微粉，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、軟膠囊、顆粒或口服液。優(yōu)選的，一種原料藥組成為將菥蓂子58. 7重量份、石韋41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、訶子29. 3重量份、刀豆22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量份、大托葉云實(shí)17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、紅花11. 4重量份、豆蘧5. 9重量份的中藥前列寧膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的一種或幾種鑒別A、訶子的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g,加無(wú)水乙醇25ml,超聲處理30min,加娃藻土 2g,混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml,作為供試品溶液；另取訶子對(duì)照藥材lg，加無(wú)水乙醇25ml,超聲處理30min，加硅藻土 2g，混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液；另取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為6:4:1的三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以質(zhì)量體積份數(shù)比為1%三氯化鐵乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、紅花的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材lg，加體積比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為7:2:3:0. 4的醋酸乙酯-甲酸-7K -甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、菥蓂子的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g，加體積份數(shù)比為80%丙酮溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取菥蓂子對(duì)照藥材lg，加體積比為80%丙酮溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為4:1:5的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以體積份數(shù)比為10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； D、藏茜草的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g,加甲醇30ml,超聲處理30min,濾過(guò)，濾液濃縮至Iml，作為供試品溶液；另取藏茜草對(duì)照藥材lg，加甲醇30ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為4:1的石油醚-丙酮為展開(kāi)劑，石油醚沸程為60 90°C，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式0min — 20min — 25min — 50min — 55min — 60min,按照上述時(shí)間段，乙腈、體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液同時(shí)進(jìn)行洗脫，其中，乙腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 時(shí)間內(nèi)使用 275nm 的檢測(cè)波長(zhǎng)，20min改變檢測(cè)波長(zhǎng)為403nm，21min使檢測(cè)器平衡，21min — 60min時(shí)間內(nèi)使用403nm的檢測(cè)波長(zhǎng)。理論板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備取沒(méi)食子酸對(duì)照品、羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加體積份數(shù)比50%乙醇水溶液分別制成每Iml中含沒(méi)食子酸20 μ g、羥基紅花黃色素AO. 2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物粉末3g，過(guò)三號(hào)篩，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數(shù)比50 %乙醇水溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數(shù)比50 %乙醇水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本發(fā)明中藥前列寧膠囊中訶子的含量以沒(méi)食子酸(C7H6O5)計(jì)，不得少于2. Omg/g ；紅花含量以羥基紅花黃色素A (C27H30O15)計(jì)，不得少于O. 26mg/g。本說(shuō)明書(shū)中所述的重量份與體積份的單位對(duì)應(yīng)關(guān)系為g/ml或kg/1。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下現(xiàn)有關(guān)于前列寧藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅采用TLC薄層鑒別一味藥材紫草茸、HPLC測(cè)定ー個(gè)藥效成分沒(méi)食子酸的含量，造成前列寧制劑產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)不精準(zhǔn)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有待提高。本發(fā)明對(duì)現(xiàn)有的中藥前列寧制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了相應(yīng)提高，在原標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了訶子、紅花、菥蓂子、藏茜草的鑒別；本發(fā)明采用同一條件，多個(gè)成分的分離測(cè)定，如采用高效液相色譜法，通過(guò)變化紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)，從而達(dá)到在同一色譜條件下同時(shí)對(duì)沒(méi)食子酸和羥基紅花黃色素A的含量測(cè)定。結(jié)果表明方法簡(jiǎn)便可行，具有較好的準(zhǔn)確性和精密度，可有效地保證本品質(zhì)量。下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)ー步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例I :鑒別實(shí)驗(yàn)中藥前列寧膠囊由青海金訶藏藥藥業(yè)股份有限公司提供。A、訶子的鑒別
取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g,加無(wú)水こ醇25ml,超聲處理30min,加娃藻土 2g,混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml,作為供試品溶液；另取訶子對(duì)照藥材lg，加無(wú)水こ醇25ml,超聲處理30min，加硅藻土 2g，混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液；另取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液作為對(duì)照溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)劑體積份數(shù)比為3-9:2-6:0. 5-1.5的范圍內(nèi)分別取(6:4:1)、(5:5:0. 8)、(7:5:0. 6)的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以質(zhì)量體積份數(shù)比為1%三氯化鐵こ醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的斑點(diǎn)。結(jié)果分析在體積份數(shù)比為3-9:2-6:0. 5-1. 5的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸展開(kāi)劑條件下，有較好的展開(kāi)效果。其中，體積份數(shù)比6:4:1的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸的展開(kāi)劑展開(kāi)效果最好。B、紅花的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材lg，加體積比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)劑體積份數(shù)比為5-9:ト3:2-4:0. 2-0. 6 的范圍內(nèi)分別取(7:2:3:0. 4)、(6:2:4:0. 5)、(9:1:4:0. 2)的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的斑點(diǎn)。結(jié)果分析在體積份數(shù)比為3-9:2-6:0. 5-1. 5的醋酸こ酷-甲酸-7K _甲醇展開(kāi)劑條件下，有較好的展開(kāi)效果。其中，體積份數(shù)比7:2:3:0. 4的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇的展開(kāi)劑展開(kāi)效果最好。C、菥蓂子的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取菥蓂子對(duì)照藥材lg，加體積份數(shù)比為80%水丙酮溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)劑體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5:3-7 的范圍內(nèi)分別取(4:1:5)、(5:1. 2:3)、(2:0. 6:6)的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以質(zhì)量體積份數(shù)比為10%硫酸こ醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)。結(jié)果分析在體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5:3-7的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液展開(kāi)劑條件下，有較好的展開(kāi)效果。其中，體積份數(shù)比4:1:5的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液的展開(kāi)劑展開(kāi)效果最好。D、藏茜草的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g,加甲醇30ml,超聲處理30min,濾過(guò)，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；另取藏茜草對(duì)照藥材lg，加甲醇30ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各10 μ 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚-丙酮為展開(kāi)劑，石油醚沸程為60 90°C，展開(kāi)劑體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5的范圍內(nèi)分別取(4:1)、(5:0. 5)、(2:1. 5)的石油醚-丙酮為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏的熒光斑點(diǎn)。結(jié)果分析在體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5的石油醚-丙酮展開(kāi)劑條件下，有較好的展開(kāi)效果。其中，體積份數(shù)比4:1的石油醚-丙酮的展開(kāi)劑展開(kāi)效果最好。實(shí)驗(yàn)例2 :含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)I、儀器、試藥和供試樣品儀器日立L-2100泵，日立L-2400紫外檢測(cè)器，島津AUW-220D型電子天平。對(duì)照品沒(méi)食子酸對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)批號(hào)110831-200803，羥基紅花黃色素A對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)批號(hào)111637-200905。樣品前列寧膠囊(青海金訶藏藥藥業(yè)股份有限公司提供)，批號(hào)20110216，20110217,20110218。2、檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇分別取沒(méi)食子酸、羥基紅花黃色素A對(duì)照品溶液，于200 500nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。根據(jù)紫外吸收?qǐng)D譜，選定275nm為沒(méi)食子酸的檢測(cè)波長(zhǎng)，選定403nm為羥基紅花黃色素A的檢測(cè)波長(zhǎng)。檢測(cè)波長(zhǎng)變化見(jiàn)表I。表I檢測(cè)波長(zhǎng)變化表
權(quán)利要求
1.ー種原料藥組成為菥蓂子58. 7重量份、石韋41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、訶子29. 3重量份、刀丑22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量份、大托葉云實(shí)17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、紅花11. 4重量份、豆蓮5.9重量份的中藥前列寧制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的ー種或幾種 鑒別 A、訶子的鑒別 取中藥前列寧制劑3-10g,加無(wú)水こ醇25-50ml,超聲處理20_30min,加娃藻土 l_3g,混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml,作為供試品溶液；另取訶子對(duì)照藥材l_2g,加無(wú)水こ醇25-50ml,超聲處理20-30min,加娃藻土 l_3g,混勻，濾過(guò),濾液濃縮至2ml,作為對(duì)照藥材溶液；另取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5-10 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為3-9:2-6:0. 5-1. 5的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸為展開(kāi)齊U，展開(kāi)，取出，晾干，噴以質(zhì)量體積份數(shù)比為1%三氯化鐵こ醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的斑點(diǎn)； B、紅花的鑒別 取中藥前列寧制劑3-10g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振搖10-20min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材lg，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振搖10-20min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5-10 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為5-9:1-3:2-4:0. 2-0. 6的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的斑點(diǎn)； C、菥蓂子的鑒別 取中藥前列寧制劑3-10g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振搖10-20min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取菥蓂子對(duì)照藥材lg，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振搖10-20min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5-10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5:3-7的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以體積份數(shù)比為10%硫酸こ醇溶液，100-105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)； D、藏茜草的鑒別 取中藥前列寧制劑3-10g,加甲醇25-50ml,超聲處理20-30min,濾過(guò),濾液濃縮至Iml,作為供試品溶液；另取藏茜草對(duì)照藥材l_2g，加甲醇25-50ml，超聲處理20_30min，濾過(guò)，濾液濃縮至lml，作為供試品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各5-10 u 1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為2-6:0. 5-1. 5的石油醚-丙酮為展開(kāi)劑，石油醚沸程為60 90°C，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)； 含量測(cè)定 照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D) 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以こ腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式0min — 20min — 25min—50min — 55min — 60min,按照上述時(shí)間段，こ腈、體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液同時(shí)進(jìn)行洗脫，其中，こ腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液.99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 時(shí)間內(nèi)使用 275nm 的檢測(cè)波長(zhǎng)，20min改變檢測(cè)波長(zhǎng)為403nm，21min使檢測(cè)器平衡，21min — 60min時(shí)間內(nèi)使用403nm的檢測(cè)波長(zhǎng)；理論板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ； 對(duì)照品溶液的制備取沒(méi)食子酸對(duì)照品、羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，加體積份數(shù)比40-60%こ醇水溶液分別制成每Iml含沒(méi)食子酸20 y g、羥基紅花黃色素A.0.2mg的溶液，即得； 供試品溶液的制備取中藥前列寧制劑粉末3g，過(guò)三號(hào)篩，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數(shù)比40-60%こ醇水溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用體積份數(shù)比40-60 %こ醇水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5-10 iil，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
2.如權(quán)利要求I所述的ー種中藥前列寧制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述的前列寧制劑是指按前列寧膠囊原料藥配方菥蓂子58. 7重量份、石韋41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、訶子29. 3重量份、刀豆22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃.17. 5重量份、大托葉云實(shí)17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、紅花11. 4重量份、豆蓮5. 9重量份，經(jīng)過(guò)洗浄，去除雜質(zhì)，溫度低于60°C干燥，混合均勻，超微粉碎機(jī)粉碎成0. 1-50 u m超微粉，按常規(guī)エ藝，加入常規(guī)輔料制備成臨床可接受的任何ー種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、軟膠囊、顆?；颔矸?。
3.如權(quán)利要求I所述的ー種中藥前列寧制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的ー種或幾種 鑒別 A、訶子的鑒別 取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g,加無(wú)水こ醇25ml,超聲處理30min,加娃藻土 2g,混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml,作為供試品溶液；另取訶子對(duì)照藥材lg，加無(wú)水こ醇25ml,超聲處理30min，加硅藻土 2g，混勻，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為對(duì)照藥材溶液；另取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為6:4:1的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以質(zhì)量體積份數(shù)比為1%三氯化鐵こ醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對(duì)照品及對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的斑點(diǎn)； B、紅花的鑒別取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g，加體積份數(shù)比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取紅花對(duì)照藥材lg，加體積比為80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為7:2:3:0. 4的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的斑點(diǎn)； C、菥蓂子的鑒別 取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g，加體積份數(shù)比為80%丙酮溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為供試品溶液；另取菥蓂子對(duì)照藥材lg，加體積比為80%丙酮溶液30ml，密塞，振搖15min，靜置，取上清液，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各5 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為4:1:5的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以體積份數(shù)比為10%硫酸こ醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)； D、藏茜草的鑒別 取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物5g,加甲醇30ml,超聲處理30min,濾過(guò)，濾液濃縮至Iml,作為供試品溶液；另取藏茜草對(duì)照藥材lg，加甲醇30ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，分別吸取上述溶液各10 yl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積份數(shù)比為4:1的石油醚-丙酮為展開(kāi)劑，石油醚沸程為60 90°C，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)； 含量測(cè)定 照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI D) 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以こ腈為流動(dòng)相A，以體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式0min — 20min — 25min—50min — 55min — 60min,按照上述時(shí)間段，こ腈、體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液同時(shí)進(jìn)行洗脫，其中，こ腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;體積份數(shù)比I %冰醋酸水溶液99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 時(shí)間內(nèi)使用 275nm 的檢測(cè)波長(zhǎng)，20min改變檢測(cè)波長(zhǎng)為403nm，21min使檢測(cè)器平衡，21min — 60min時(shí)間內(nèi)使用403nm的檢測(cè)波長(zhǎng)；理論板數(shù)按沒(méi)食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ； 對(duì)照品溶液的制備取沒(méi)食子酸對(duì)照品、羥基紅花黃色素A對(duì)照品適量，精密稱定，カロ體積份數(shù)比50%こ醇水溶液分別制成每Iml含沒(méi)食子酸20 u g、羥基紅花黃色素AO. 2mg的溶液，即得； 供試品溶液的制備取中藥前列寧膠囊內(nèi)容物粉末3g，過(guò)三號(hào)篩，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積份數(shù)比50%こ醇水溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用 體積份數(shù)比50 %こ醇水溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得; 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 yl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得;本發(fā)明中藥前列寧膠囊中訶子的含量以沒(méi)食子酸(C7H6O5)計(jì)，不得少于2. Omg/g ;紅花 含量以羥基紅花黃色素A (C27H30O15)計(jì)，不得少于0. 26mg/g。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種中藥前列寧制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。本發(fā)明對(duì)現(xiàn)有的中藥前列寧制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了改進(jìn)，增加了訶子、紅花、菥蓂子、藏茜草的薄層鑒別；采用高效液相色譜法，通過(guò)變化紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)，從而達(dá)到在同一色譜條件下同時(shí)對(duì)沒(méi)食子酸和羥基紅花黃色素A的含量測(cè)定。薄層鑒別方法，特征斑點(diǎn)明顯，專屬性強(qiáng)。高效液相色譜法，簡(jiǎn)便可行，具有較好的準(zhǔn)確性和精密度，可有效地保證本品質(zhì)量。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102662026SQ201210173578
公開(kāi)日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月30日
發(fā)明者任松鵬, 劉玉芹, 周忠山, 孫緒丁, 江玉娟 申請(qǐng)人:山東阿如拉藥物研究開(kāi)發(fā)有限公司