專(zhuān)利名稱(chēng)：一種牛黃上清組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，特別涉及一種牛黃上清組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》臨床用藥須知中藥成方制劑卷收載的清熱瀉火藥共有5個(gè)品系，牛黃上清膠囊(片、丸)屬其中ー個(gè)品系。牛黃上清膠囊(片、丸)具有清熱瀉火、散風(fēng)止痛的功效，用于熱毒內(nèi)盛、風(fēng)火上攻所致的頭痛眩暈、目赤耳鳴、咽喉腫痛、ロ舌生瘡、牙齦腫痛、大便燥結(jié)。其中牛黃上清丸采用全生藥粉入藥，含有大量的藥材纖維，有效成分含量低，不符合現(xiàn)代中藥發(fā)展的趨勢(shì)；牛黃上清膠囊和牛黃上清片均對(duì)處方中的大部分藥材進(jìn)行了提取處理，大大提高了有效成分含量，但兩者制法相差較大。其中，牛黃上清片制法如下將牛黃、冰片研細(xì)；黃連、大黃粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩；連翹荊芥穗、薄荷提取 揮發(fā)油后，藥渣加水煎一次，濾過(guò)；黃芪、梔子、桔梗、赤芍、當(dāng)歸地黃、石膏、甘草加水煎煮ニ次，毎次ニ小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液；黃柏、川芎、白芷照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下有滲漉法(附錄17頁(yè))以70%こ醇為溶劑進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收こ醇。菊花熱浸二次，毎次人2小時(shí)，濾過(guò)。合并以上各藥液，減壓濃縮成稠膏狀加入黃連、大黃細(xì)粉及輔料適量，混勻，制成顆粒，60°C以下干燥，再兌入牛黃、冰片細(xì)粉。噴以連翹等揮發(fā)油，混勻，壓制成1000片，包糖衣，即得。牛黃上清膠囊制法如下大黃、冰片、人工牛黃分別粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，備用；薄荷、荊芥穗、白芷、川芎、當(dāng)歸、菊花、連翹蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集備用；藥渣與梔子等九味加水煎煮二次，毎次I. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至相對(duì)密度為1.321.36 (55°C)的稠膏，加入大黃粉，在80°C以下干燥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，用配研法加入人工牛黃、冰片，揮發(fā)油用こ醇溶解噴入，混勻，過(guò)篩，裝入膠囊，制成1000粒，即得。發(fā)明人針對(duì)上述情況，對(duì)部分藥材對(duì)藥效的影響進(jìn)行了研究，通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，黃連、黃柏、連翅、黃岑等四味味藥材對(duì)藥效影響較大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種牛黃上清組合物及其制備方法，本發(fā)明提供的牛黃上清組合物有效成分含量高、療效好，制備方法科學(xué)合理。本發(fā)明提供的牛黃上清組合物，包括如下重量配比的原料藥人工牛黃2. 9份、薄荷44. I份、菊花58. 8份、荊芥穗23. 5份、白芷23. 5份、川芎23. 5份、梔子73. 5份、黃連23. 5份、黃柏14. 7份、黃芩73. 5份、大黃117. 7份、連翹73. 5份、赤芍23. 5份、當(dāng)歸73. 5份、地黃94. I份、桔梗23. 5份、甘草14. 7份、石膏117. 7份、冰片14. 7份，其中人工牛黃、大黃、冰片經(jīng)粉碎后入藥，其余藥材經(jīng)提取后入藥，其特征在干該組合物質(zhì)量滿(mǎn)足如下質(zhì)量要求
Cl)組合物中小檗堿含量以鹽酸小檗堿計(jì)不低于O. 406% ；
(2)組合物中連翹苷含量不低于O.043% ；
(3)組合物中黃芩苷含量不低于I.54%。
本發(fā)明提供的牛黃上清組合物中的小檗堿含量采用高效液相色譜法測(cè)定，測(cè)定方法如下
色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為20:72:0. I的こ腈ー 33mmol/L磷酸ニ氫鉀溶液一三こ胺的混合溶液用磷酸調(diào)pH值為4. 50為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為345nm ;理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于2000 ；
對(duì)照品溶液制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取I. Og組合物細(xì)粉，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，用5g堿性氧化鋁吸附，裝柱，并用50ml甲醇洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，再用甲醇溶解轉(zhuǎn)移至IOml容量瓶，定容，用微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明提供的牛黃上清組合物中的連翹苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定，測(cè)定方法如下
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為25:75的こ臆-水混合溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm ;理論板數(shù)按連翹苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000 ；
對(duì)照品溶液的制備取連翹苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得；
供試品溶液的制備取組合物細(xì)粉2. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml，蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用三氯甲烷振搖提取5次，毎次20ml，合并三氯甲烷液，回收至干，殘?jiān)?0%甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本發(fā)明提供的牛黃上清組合物中的黃芩苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定，測(cè)定方法如下
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為45:55:0. 2的甲醇-水-磷酸混合溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm ;理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于5000 ；
對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加70%こ醇制成每Iml含50μ g的溶液，即得；
供試品溶液的制備取組合物細(xì)粉O. 2g，精密稱(chēng)定，置IOOml具塞錐形瓶中，精密加入70%こ醇50ml，稱(chēng)定重量，溫浸I小時(shí)后加熱回流30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用70%こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本發(fā)明提供的牛黃上清組合物，其制備方法包括如下步驟
(O大黃、冰片、人工牛黃分別粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，備用；
(2)薄荷、荊芥穗、白芷、川芎、當(dāng)歸、菊花蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集備
用；
(3)將步驟(2)藥渣與梔子、赤芍、地黃、桔梗、甘草、石膏一起加水提取二次，合并提取液，濾過(guò)，濾液備用；
(4)黃連、黃柏加水提取二次，合并提取液，濾過(guò)，濾液與步驟(3)濾液合并，濃 縮得稠膏I，備用；
(5)連翹、黃芩加309Γ85%こ醇提取二次，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮得稠膏II，備用；
(6)將稠膏I和稠膏II合并，加入大黃粉，在80°C以下干燥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，用配研法加入人工牛黃、冰片，揮發(fā)油用こ醇溶解噴入，混勻，即得。本發(fā)明提供的牛黃上清組合物，可以壓制成片劑或灌裝成膠囊。本發(fā)明創(chuàng)新之處在于通過(guò)缺味藥材的牛黃上清組合物與全處方量組合物進(jìn)行抗炎、鎮(zhèn)痛作用的比較，發(fā)現(xiàn)黃連、黃柏、黃芩、連翹等四味藥材對(duì)組合物的藥效有重要貢獻(xiàn)。本發(fā)明還通過(guò)對(duì)組合物中含上述四味藥材主要藥效成分小檗堿、黃芩苷、連翹苷量的多少與組合物藥效強(qiáng)弱關(guān)系的研究，將上述成分作為鑒別組合物質(zhì)量的依據(jù)。下面將通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步說(shuō)明。實(shí)驗(yàn)I :缺味牛黃上清組合物藥效影響試驗(yàn)
牛黃上清組合物處方中共有19味藥材，2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》一部收載的牛黃上清片只對(duì)黃芩苷和梔子苷的含量進(jìn)行了控制，牛黃上清膠囊也只對(duì)大黃素和龍腦的含量進(jìn)行了控制。由于牛黃上清片和牛黃上清膠囊中的人工牛黃、大黃和冰片都采用粉碎入藥，未經(jīng)提取處理，因此本實(shí)驗(yàn)未對(duì)其進(jìn)行研究。黃芩提取方法研究的文獻(xiàn)報(bào)道較多，采用的提取溶媒主要為水和不同濃度的こ醇溶液，考慮到牛黃上清片標(biāo)準(zhǔn)中黃芩苷含量限度偏低，因此本實(shí)驗(yàn)對(duì)黃芩及清熱瀉火藥中常用藥材黃連、黃柏、連翹等四味藥材進(jìn)行缺味藥材試驗(yàn)研究,具體試驗(yàn)內(nèi)容如下
(1)試驗(yàn)藥物牛黃上清組合物全組方樣品(對(duì)照組)和缺味樣品(樣品組)
牛黃上清組合物全組方樣品制備方法
人工牛黃2.9g 薄荷44. Ig 菊花58.8g 荊芥穗23. 5g 白芷23. 5g 川芎23. 5g梔子 73. 5g 黃連 23. 5g 黃柏 14. 7g 黃芩 73. 5g 大黃 117. 7g
連翹73. 5g赤芍23. 5g 當(dāng)歸 73. 5g 地黃94. Ig桔梗23. 5g 甘草
14. 7g 石膏 117. 7g冰片 14. 7g
以上十九味，以上十九味，除人工牛黃、冰片外，其余薄荷等十七味粉碎成細(xì)粉；將冰片研細(xì)，與人工牛黃及上述粉末配研，過(guò)篩，混勻，即得.
牛黃上清組合物缺味樣品制備方法除采用等重量份淀粉代替缺味藥材外，其余內(nèi)容同全組方樣品制備方法.
樣品組I (缺黃連、黃柏)
樣品組2 (缺黃芩)
樣品組3 (缺連翹)
(2)對(duì)巴豆油所致鼠耳腫脹作用影響取BABL/C雄性小白鼠，體重18 22g，隨機(jī)分為5組，每組10只。設(shè)空白對(duì)照組、對(duì)照組(14. O g · kg—1)、樣品組(14. O g · kg—1);空白對(duì)照組給予等容量生理鹽水,體積為40ml /kg。致炎前I小時(shí)給藥，致炎后2小時(shí)再給一次藥。用2%巴豆油致炎.致炎后4小時(shí)處死動(dòng)物，沿耳廓基線剪下兩耳，用9mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，用分析天平稱(chēng)重，計(jì)算各組鼠耳腫脹度和各藥物組鼠耳的腫脹抑制率，比較組間差異，結(jié)果見(jiàn)表I.
表I各藥物組對(duì)巴豆油致小鼠耳腫脹的影響(X土S) _
權(quán)利要求
1.一種牛黃上清組合物，包括如下重量配比的原料藥人工牛黃2. 9份、薄荷44. I份、菊花58. 8份、荊芥穗23. 5份、白芷23. 5份、川芎23. 5份、梔子73. 5份、黃連23. 5份、黃柏14. 7份、黃芩73. 5份、大黃117. 7份、連翹73. 5份、赤芍23. 5份、當(dāng)歸73. 5份、地黃94. I份、桔梗23. 5份、甘草14. 7份、石膏117. 7份、冰片14. 7份，其中人工牛黃、大黃、冰片經(jīng)粉碎后入藥，其余藥材經(jīng)提取后入藥，其特征在于該組合物質(zhì)量滿(mǎn)足如下質(zhì)量要求 Cl)組合物中小檗堿含量以鹽酸小檗堿計(jì)不低于O. 406% ； (2)組合物中連翹苷含量不低于O.043% ； (3)組合物中黃芩苷含量不低于I.54%。
2.如權(quán)利要求I所述的牛黃上清組合物，其特征在干 (O組合物中小檗堿含量采用高效液相色譜法測(cè)定，測(cè)定方法如下 色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為.20:72:0. I的こ腈ー 33mmol/L磷酸ニ氫鉀溶液一三こ胺的混合溶液用磷酸調(diào)pH值為4. 50為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為345nm ;理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于2000 ； 對(duì)照品溶液制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取I. Og組合物細(xì)粉，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，用5g堿性氧化鋁吸附，裝柱，并用50ml甲醇洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，再用甲醇溶解轉(zhuǎn)移至IOml容量瓶，定容，用微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得； (2)組合物中連翹苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定，測(cè)定方法如下 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為25:75的こ臆-水混合溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm ;理論板數(shù)按連翹苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于.3000 ； 對(duì)照品溶液的制備取連翹苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取組合物細(xì)粉2. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml，蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用三氯甲烷振搖提取5次，毎次20ml，合并三氯甲烷液，回收至干，殘?jiān)?0%甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得; (3)組合物中黃芩苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定，測(cè)定方法如下 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為45:55:0. 2的甲醇-水-磷酸混合溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm ;理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于5000 ； 對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加70%こ醇制成每Iml含50μ g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取組合物細(xì)粉O. 2g，精密稱(chēng)定，置IOOml具塞錐形瓶中，精密加入70%こ醇50ml，稱(chēng)定重量，溫浸I小時(shí)后加熱回流30分鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，用70%こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
3.制備如權(quán)利要求I所述的牛黃上清組合物的方法如下 (O大黃、冰片、人工牛黃分別粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，備用； (2)薄荷、荊芥穗、白芷、川芎、當(dāng)歸、菊花蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集備用； (3)將步驟(2)藥渣與梔子、赤芍、地黃、桔梗、甘草、石膏一起加水提取二次，合并提取液，濾過(guò)，濾液備用； (4)黃連、黃柏加水提取二次，合并提取液，濾過(guò)，濾液與步驟(3)濾液合并，濃縮得稠膏I，備用； (5)連翹、黃芩加309Γ85%こ醇提取二次，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮得稠膏II，備用； (6)將稠膏I和稠膏II合井，加入大黃粉，在80°C以下干燥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，用配研法加入人工牛黃、冰片，揮發(fā)油用こ醇溶解噴入，混勻，即得。
4.如權(quán)利要求I所述的牛黃上清組合物，可以制成片劑或膠囊。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種牛黃上清組合物及其制備方法。所述牛黃上清組合物，包括人工牛黃、薄荷、菊花、荊芥穗、白芷、川芎、梔子、黃連、黃柏、黃芩、大黃、連翹、赤芍、當(dāng)歸、地黃、桔梗、甘草、石膏、冰片，其中人工牛黃、大黃、冰片經(jīng)粉碎后入藥，其余藥材經(jīng)提取后入藥，其特征在于該組合物質(zhì)量滿(mǎn)足如下質(zhì)量要求(1)以鹽酸小檗堿計(jì)，小檗堿含量不低于0.406%；(2)連翹苷含量不低于0.043%；(3)黃芩苷含量不低于1.54%。本發(fā)明提供的牛黃上清組合物藥效明顯好于不滿(mǎn)足要求的組合物。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102688336SQ201210069218
公開(kāi)日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月16日
發(fā)明者嚴(yán)建良, 劉永祥, 吳孔松, 吳安明 申請(qǐng)人:江西天施康中藥股份有限公司