專利名稱：熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
公知有如下的熒光檢測(cè)裝置向測(cè)量對(duì)象物照射激光，并接收測(cè)量對(duì)象物發(fā)出的熒光，由此獲得測(cè)量對(duì)象物的信息。在利用熒光檢測(cè)裝置的流式細(xì)胞儀中，在鞘液中使由熒光試劑標(biāo)簽化的細(xì)胞、DNA、RNA、酶、蛋白等的測(cè)量對(duì)象物流動(dòng)。通過向該測(cè)量對(duì)象物照射激光，附著在測(cè)量對(duì)象物的熒光色素發(fā)出熒光。流式細(xì)胞儀通過測(cè)量該熒光，由此能夠獲得測(cè)量對(duì)象物的信息。
另外，公知有通過接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射后發(fā)出的熒光來獲得熒光弛豫時(shí)間常數(shù)的熒光檢測(cè)裝置(專利文獻(xiàn)I)。專利文獻(xiàn)I :特開2007-101397號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容
接收測(cè)量對(duì)象物發(fā)出的熒光的熒光檢測(cè)裝置對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量時(shí)，在所測(cè)量的熒光數(shù)據(jù)中有一定程度的分散。為了精度更高地測(cè)量熒光弛豫時(shí)間等，要求一種能夠降低所測(cè)量的熒光數(shù)據(jù)的分散的熒光檢測(cè)裝置。本發(fā)明的目的在于提供ー種熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法，與現(xiàn)有技術(shù)相比，能夠提高測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光的測(cè)量精度。本發(fā)明的熒光檢測(cè)裝置對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量，其特征在于，包括激光光源，向所述測(cè)量對(duì)象物照射激光；第一受光部，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的散射光；第二受光部，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的熒光；信號(hào)處理部，對(duì)應(yīng)第一受光部所接收的所述散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光部所接收的所述熒光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。另外，優(yōu)選的是，所述信號(hào)處理部根據(jù)對(duì)所述激光強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)制的調(diào)制信號(hào)和第ニ受光部接收的所述熒光信號(hào)之間的相位差求出熒光壽命。另外，優(yōu)選的是，所述信號(hào)處理部將第一受光部所接收的所述散射光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，并將被標(biāo)準(zhǔn)化的所述散射光的強(qiáng)度與第二受光部接收的所述熒光信號(hào)相乗。本發(fā)明的熒光檢測(cè)方法對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量，其特征在于，包括如下エ序向所述測(cè)量對(duì)象物照射激光的エ序；第一受光エ序，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的散射光；第二受光エ序，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的熒光；信號(hào)處理工序，相應(yīng)第一受光エ序中所接收的所述散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光エ序中所接收的所述熒光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。另外，優(yōu)選的是，所述信號(hào)處理工序根據(jù)對(duì)所述激光強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)制的調(diào)制信號(hào)和在第二受光エ序中所接收的所述熒光信號(hào)之間的相位差求出熒光壽命。
另外，優(yōu)選的是，所述信號(hào)處理工序包括將第一受光エ序中所接收的所述散射光強(qiáng)隊(duì)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的標(biāo)準(zhǔn)化工序，并將在所述標(biāo)準(zhǔn)化工序中被標(biāo)準(zhǔn)化的所述散射光強(qiáng)度與第ニ受光エ序中所接收的所述熒光信號(hào)相乗。本發(fā)明的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法與現(xiàn)有技術(shù)相比能夠提高測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光的測(cè)量精度。


圖I為表示本實(shí)施方式的流式細(xì)胞儀的一例的概略構(gòu)成圖；圖2為表示圖I所示的控制部的一例的圖； 圖3為表不圖I所不的信號(hào)處理部的一例的圖；圖4 Ca)為表不參照信號(hào)的時(shí)間變化的一例的圖，圖4 (b)為表不突光信號(hào)的時(shí)間變化的一例的圖；圖5 (a) (c)為表示測(cè)量對(duì)象物通過激光照射區(qū)域的樣子的圖；圖6為表示前向散射光強(qiáng)度的時(shí)間變化的一例的圖；圖7 (a)為表不突光信號(hào)的cos成分的一例的圖，圖7 (b)為表不突光信號(hào)的sin成分的一例的圖；圖8 (a)為表示乘以被標(biāo)準(zhǔn)化的前向散射光強(qiáng)度的熒光信號(hào)的cos成分的一例的圖，圖8(b)為乘以被標(biāo)準(zhǔn)化的前向散射光強(qiáng)度的熒光信號(hào)的sin成分一例的圖；圖9為表不相對(duì)于的參照信號(hào)的突光信號(hào)的相位差的圖；圖10為表示比較例的信號(hào)處理部的一例的圖；圖11為表示在比較例中相對(duì)于參照信號(hào)的熒光信號(hào)的相位差的圖。附圖標(biāo)記說明10 :流動(dòng)池12 :細(xì)胞14 :熒光色素16 :容器20 :激光光源30 :第一受光部32 :第二受光部40 :控制部42 :振蕩器44 :功率分配器46、48 :放大器50 :信號(hào)處理部52: IQ 混頻器54 :放大器56 :低通濾波器58 A/D 轉(zhuǎn)換器60 :運(yùn)算部
70 :輸出部
具體實(shí)施例方式以下，根據(jù)實(shí)施方式說明適用了本發(fā)明的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法的流式細(xì)胞儀。<實(shí)施方式>(流式細(xì)胞儀的構(gòu)成)首先，參照?qǐng)DI說明本實(shí)施方式的流式細(xì)胞儀的構(gòu)成。圖I為表示本實(shí)施方式的流式細(xì)胞儀的一例的概略構(gòu)成圖。流式細(xì)胞儀通過接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射后發(fā)出的熒光來能夠獲得測(cè)量對(duì)象物的信息。如圖I所示，本實(shí)施方式的流式細(xì)胞儀包括流動(dòng)池10、激光光源20、第一受光部30、第二受光部32、控制部40、信號(hào)處理部50、輸出部70。下面，詳細(xì)說明各構(gòu)成。
細(xì)胞12等的測(cè)量對(duì)象物被鞘液包圍而在流動(dòng)池10的內(nèi)部流動(dòng)。如后述，激光光源20向測(cè)量對(duì)象物照射激光，此時(shí)為了從所發(fā)出的熒光獲得測(cè)量對(duì)象物信息，在細(xì)胞12上事先附著有熒光色素14。熒光色素14例如使用CFP (藍(lán)綠色熒光蛋白，Cyan FluorescentProtein)、YFP (黃色突光蛋白，Yellow Fluorescent Protein)等。在流動(dòng)池 10 內(nèi)部,被鞘液包圍的測(cè)量對(duì)象物受流體動(dòng)力學(xué)性聚焦，由此成為細(xì)細(xì)的液流而在流動(dòng)池10內(nèi)流動(dòng)。激光光源20向測(cè)量對(duì)象物照射以規(guī)定頻率進(jìn)行強(qiáng)度調(diào)制的激光。激光光源20例如可以使用半導(dǎo)體激光器。激光的輸出例如為5 100mW。激光的波長(zhǎng)例如為350nnT800nm。激光光源20照射的激光強(qiáng)度通過從后述的控制部40輸出的調(diào)制信號(hào)進(jìn)行調(diào)制。第一受光部30以流動(dòng)池10中激光照射的位置作為基準(zhǔn)配置在激光光源20的相反側(cè)上。第一受光部30接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)產(chǎn)生的前向散射光。第一受光部30包括例如光電ニ極管等光電轉(zhuǎn)換器。第一受光部30將所接收的前向散射光轉(zhuǎn)換成電信號(hào)。通過第一受光部30轉(zhuǎn)換的電信號(hào)輸出給信號(hào)處理部50，用作通知測(cè)量對(duì)象物正通過流動(dòng)池10中激光照射的位置的時(shí)間的觸發(fā)信號(hào)。第二受光部32以流動(dòng)池10中激光照射的位置作為基準(zhǔn)配置在與從激光光源20照射激光的方向和在流動(dòng)池10中測(cè)量對(duì)象物流動(dòng)的方向相互垂直的方向上。第二受光部32接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光。第二受光部32包括例如光電倍增管等光電轉(zhuǎn)換器。第二受光部32將所接收的熒光轉(zhuǎn)換成電信號(hào)(熒光信號(hào))。通過第二受光部32轉(zhuǎn)換的電信號(hào)輸出給信號(hào)處理部50，用作通過流動(dòng)池10中激光照射的位置的測(cè)量對(duì)象物的信息。接著，關(guān)于控制部40進(jìn)行說明?？刂撇?0控制激光光源20照射的激光的調(diào)制頻率。在此，參照?qǐng)D2說明控制部40的構(gòu)成。圖2為表示控制部40的一例的圖。如圖2所示，控制部40包括振蕩器42、功率分配器44、放大器46、48。振蕩器42輸出規(guī)定頻率的正弦波信號(hào)。從振蕩器42輸出的正弦波信號(hào)用作對(duì)從激光光源20輸出的激光進(jìn)行強(qiáng)度調(diào)制的調(diào)制信號(hào)。正弦波信號(hào)的頻率例如為f 50MHz。從振蕩器42輸出的規(guī)定頻率的正弦波信號(hào)(調(diào)制信號(hào))通過功率分配器44分配給兩個(gè)放大器46、48。在放大器46放大的調(diào)制信號(hào)輸出給激光光源20。另外,在放大器48放大的調(diào)制信號(hào)輸出給信號(hào)處理部50。如后述,在放大器48放大的調(diào)制信號(hào)輸出給信號(hào)處理部50是用作對(duì)從第二受光部32輸出的信號(hào)進(jìn)行檢波的參照信號(hào)。接著，關(guān)于信號(hào)處理部50進(jìn)行說明。信號(hào)處理部50對(duì)應(yīng)第一受光部30接收的前向散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光部32接收的突光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。另外，信號(hào)處理部50根據(jù)對(duì)激光進(jìn)行強(qiáng)度調(diào)制的調(diào)制信號(hào)和第二受光部32接收的熒光信號(hào)之間的相位差求出熒光壽命。在此，參照?qǐng)D3說明信號(hào)處理部50的構(gòu)成。圖3為表示信號(hào)處理部50的一例的圖。如圖3所示，信號(hào)處理部50包括IQ混頻器52、放大器54、低通濾波器56、A/D轉(zhuǎn)換器58、運(yùn)算部60。IQ混頻器52接收通過放大器54進(jìn)行放大的、從第二受光部32輸出的突光信號(hào)的輸入。另外，IQ混頻器52接收從控制部40的放大器48輸出的參照信號(hào)的輸入。IQ混頻器52通過將突光信號(hào)和參照信號(hào)相乘,生成包括突光信號(hào)的cos成分和高頻成分的信號(hào)。另外，IQ混頻器52通過對(duì)熒光信號(hào)和將參照信號(hào)的相位90度位移的信號(hào)相乗，生成包括熒光信號(hào)的sin成分和高頻成分的信號(hào)。根據(jù)該信號(hào)能夠求出調(diào)制信號(hào)(參 照信號(hào))和熒光信號(hào)之間的相位差。通過IQ混頻器52生成的信號(hào)的高頻成分通過低通濾波器56被去除。通過低通濾波器56被去除高頻成分的信號(hào)通過A/D轉(zhuǎn)換器58轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)(后述的cos Θ >sin Θ )。另外，從第一受光部30輸出的前向散射光信號(hào)通過A/D轉(zhuǎn)換器58轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)。通過A/D轉(zhuǎn)換器58轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)的信號(hào)輸出給運(yùn)算部60。運(yùn)算部60對(duì)應(yīng)第一受光部30接收的前線散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光部32接收的熒光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。另外，運(yùn)算部60將第一受光部30接收的前向散射光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，并將標(biāo)準(zhǔn)化的前向散射光強(qiáng)度與熒光信號(hào)相乗。另外，運(yùn)算部60利用通過A/D轉(zhuǎn)換器58轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)的信號(hào)求出熒光壽命。關(guān)于運(yùn)算部60所進(jìn)行的詳細(xì)的處理在后面所述。運(yùn)算部60所運(yùn)算的結(jié)果輸出給輸出部70。返回到圖1，輸出部70輸出通過信號(hào)處理部50求出的信息。輸出部70例如為顯示裝置或打印機(jī)。輸出部70輸出例如通過信號(hào)處理部50求出的熒光壽命。以上為本實(shí)施方式的流式細(xì)胞儀的概略構(gòu)成。接著，說明信號(hào)處理部50進(jìn)行信號(hào)處理的流程。首先，用于調(diào)制激光強(qiáng)度的調(diào)制信號(hào)作為參照信號(hào)從控制部40輸出給信號(hào)處理部50。圖4 (a)表不輸入到信號(hào)處理部50的參照信號(hào)的時(shí)間變化的一例。圖4 (a)所不的例的參照信號(hào)為規(guī)定頻率的正弦波信號(hào)。另外，第二受光部32接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光。圖4 (b)表示從第二受光部32輸出的熒光信號(hào)的時(shí)間變化的一例。相對(duì)于參照信號(hào)，熒光信號(hào)產(chǎn)生相位差Θ。在此，如果將調(diào)制信號(hào)的角頻率用ω表示、測(cè)量對(duì)象物的熒光壽命用τ表示，則通過以下的式(1)，能夠從相位差Θ求出熒光壽命τ。[數(shù)I]tan θ = ω τ(I)另外，如圖4 (b)所示，熒光信號(hào)的振幅并不是規(guī)定的振幅。參照?qǐng)D5說明熒光信號(hào)的振幅變化。圖5為表示細(xì)胞12等測(cè)量對(duì)象物通過流動(dòng)池10中激光照射區(qū)域的樣子的圖。圖5 (a)為表示測(cè)量對(duì)象物剛進(jìn)入激光照射區(qū)域的瞬間的圖。圖5 (b)為表示測(cè)量對(duì)象物被激光完全照射的瞬間的圖。圖5 (C)為表示測(cè)量對(duì)象物剛從激光照射區(qū)域出去的瞬間的圖。圖5 (a) (c)的任意瞬間中，測(cè)量對(duì)象物受激光照射后發(fā)出熒光，但其熒光強(qiáng)度并不是規(guī)定強(qiáng)度的熒光。具體地說，在圖5 (b)的瞬間發(fā)出的熒光強(qiáng)度比在圖5 (a)、(c)的瞬間發(fā)出的熒光強(qiáng)度強(qiáng)。因此，如圖4 (b)所示，熒光信號(hào)的振幅隨時(shí)間變化。另外，第一受光部30接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的前向散射光。圖6表示第一受光部30所接收的前向散射光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的一例。如果ー個(gè)測(cè)量對(duì)象物通過流動(dòng)池10中激光照射區(qū)域，則能夠測(cè)量一個(gè)前向散射光的峰值。前向散射光強(qiáng)度成為最大的瞬間相當(dāng)于前面所述的圖5 (b)的瞬間。前向散射光信號(hào)通過A/D轉(zhuǎn)換器58轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)后輸入到運(yùn)算部60。另外，如上所述，正弦波信號(hào)的頻率例如為f 50MHz。另外，測(cè)量對(duì)象物通過流動(dòng)池10中激光照射區(qū)域所需的時(shí)間為20 μ秒程度。因此，一個(gè)測(cè)量對(duì)象物通過期間圖4所 示的信號(hào)實(shí)際上包括2(Γ1000周期程度的信號(hào)。在圖4中，為了便于說明，利用比實(shí)際低的頻率的信號(hào)進(jìn)行說明。IQ混頻器52通過將圖4 (b)所不的突光信號(hào)和圖4 (a)所不的參照信號(hào)相乘,生成包括熒光信號(hào)的cos成分和高頻成分的信號(hào)。圖7 (a)表示之后通過低通濾波器56去除高頻成分的熒光信號(hào)的cos成分的一例。另外，IQ混頻器52將圖4 (b)所不的突光信號(hào)和圖4 (a)所不的參照信號(hào)的相位90度位移的信號(hào)相乘，生成包括熒光信號(hào)的sin成分和高頻成分的信號(hào)。圖7 (b)表示之后通過低通濾波器56去除高頻成分的熒光信號(hào)的sin成分一例。本實(shí)施方式的運(yùn)算部60對(duì)應(yīng)圖6所示的前向散射光強(qiáng)度對(duì)圖7 (a)、(b)所示的熒光信號(hào)的COS成分、Sin成分的各信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。具體地說，運(yùn)算部60將前線散射光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，以使圖6所示的前向散射光強(qiáng)度的最大值成為1，并將被標(biāo)準(zhǔn)化的前向散射光強(qiáng)度與圖7 (a)、(b)所示的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分的各信號(hào)相乗。圖8 (a)、(b)表示將被標(biāo)準(zhǔn)化的前向散射光強(qiáng)度與圖7 (a)、(b)所示的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分相乘的結(jié)果。如圖8 (a)、(b)所示，前向散射光強(qiáng)度小的部分的熒光信號(hào)的值比圖7
(a)、(b)所示的值小。其原因是，與如圖5 (a)、(c)所示熒光強(qiáng)度弱的瞬間發(fā)出的熒光相比，在如圖5
(b)所示熒光強(qiáng)度強(qiáng)的瞬間發(fā)出的熒光中含有高精度的信息。因此，通過將被標(biāo)準(zhǔn)化的前向散射光強(qiáng)度與COS成分、Sin成分相乘，并利用精度高的信息能夠求出相位差Θ。然后，運(yùn)算部60計(jì)算出圖8 (a)、(b)所示的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分的各時(shí)間平均。被時(shí)間平均的熒光信號(hào)的COS成分、Sin成分在圖9所示的圖中繪圖。對(duì)于ー個(gè)測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行上述的信號(hào)處理，由此完成ー個(gè)圖9所示的圖的繪圖。運(yùn)算部60對(duì)于多個(gè)測(cè)量對(duì)象物繪圖被時(shí)間平均的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分。另外，運(yùn)算部60從被時(shí)間平均的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分的多個(gè)繪圖求出相對(duì)于參照信號(hào)的熒光信號(hào)的相位差。例如，運(yùn)算部60從將圖9所示的多個(gè)繪圖以通過原點(diǎn)的直線近似化后的直線的斜率，能夠求出相對(duì)于參照信號(hào)的熒光信號(hào)的相位差Θ。如以上的說明，本實(shí)施方式的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法中按照對(duì)應(yīng)前向散射光強(qiáng)度對(duì)包含精度高的信息的突光信號(hào)進(jìn)行更大的加權(quán)處理的方式對(duì)突光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。因此，能夠提高測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光的測(cè)量精度。
尤其是，本實(shí)施方式的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法中對(duì)應(yīng)前向散射光強(qiáng)度對(duì)測(cè)量對(duì)象物的各個(gè)熒光信 號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。因此，即使測(cè)量對(duì)象物的大小是不規(guī)定的大小，但也能夠提高測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光的測(cè)量精度。(比較例)下面，為了表示上述的實(shí)施方式的效果，對(duì)比較例進(jìn)行說明。本比較例的流式細(xì)胞儀的構(gòu)成與上述的實(shí)施方式的流式細(xì)胞儀大致相同。本比較例的流式細(xì)胞儀的信號(hào)處理部50的構(gòu)成與實(shí)施方式不同。下面，關(guān)于本比較例的信號(hào)處理部50進(jìn)行說明。圖10為表示本比較例的信號(hào)處理部50的一例的圖。如圖10所示，本比較例的信號(hào)處理部50包括IQ混頻器52、放大器54、低通濾波器56、A/D轉(zhuǎn)換器58、運(yùn)算部60。IQ混頻器52、放大器54、低通濾波器56、A/D轉(zhuǎn)換器58的構(gòu)成與上述的實(shí)施方式相同，因此在此省略說明。在本比較例中，從第一受光部30輸出的前向散射光的信號(hào)沒有輸入到信號(hào)處理部50,這點(diǎn)與實(shí)施方式不同。下面，說明本比較例的信號(hào)處理部50的信號(hào)處理的流程。如參照?qǐng)D4 (a)進(jìn)行的說明，用于對(duì)激光強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)節(jié)的調(diào)制信號(hào)從控制部40作為參照信號(hào)輸出到信號(hào)處理部50。另外，如參照?qǐng)D4 (b)進(jìn)行說明那樣，第二受光部32接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光。IQ混頻器52通過將圖4 (b)所示的熒光信號(hào)和圖4 (a)所示的參照信號(hào)相乘，生成包括熒光信號(hào)的COS成分和高頻成分的信號(hào)。然后，如參照?qǐng)D7 (a)進(jìn)行說明那樣，獲得通過低通濾波器56去除高頻成分的熒光信號(hào)的cos成分。另外，IQ混頻器52通過將圖4 (b)所示的熒光信號(hào)和圖4 (a)所示的參照信號(hào)的相位90度位移的信號(hào)相乘，生成包括熒光信號(hào)的sin成分和高頻成分的信號(hào)。然后，如參照?qǐng)D7 (b)進(jìn)行說明那樣，獲得通過低通濾波器56去除高頻成分的熒光信號(hào)的sin成分。本比較例的運(yùn)算部60計(jì)算出圖7 (a)、(b)所示的突光信號(hào)的cos成分、sin成分的各個(gè)時(shí)間平均。被時(shí)間平均的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分在如圖11所示的圖中繪圖。另外，運(yùn)算部60從被時(shí)間平均的熒光信號(hào)的cos成分、sin成分的多個(gè)繪圖求出相對(duì)于參照信號(hào)的熒光信號(hào)的相位差。將從上述的實(shí)施方式得到的圖9和從比較例得到的圖11相比較，結(jié)果可知實(shí)施方式的繪圖比比較例的繪圖分散小。例如，從圖9所示的繪圖的相位差Θ的分散求出的標(biāo)準(zhǔn)偏差為O. 71[rad]，相對(duì)于該相位差從圖11所示的繪圖的相位差Θ的分散求出的標(biāo)準(zhǔn)偏差為O. 79[rad]。這是由于實(shí)施方式的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法中按照對(duì)應(yīng)前向散射光強(qiáng)度對(duì)包含精度高的信息的突光信號(hào)進(jìn)行更大的加權(quán)處理的方式對(duì)突光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。因此，根據(jù)實(shí)施方式的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法，能夠以更高的精度測(cè)量熒光壽命O以上，關(guān)于本發(fā)明的熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法進(jìn)行了詳細(xì)的說明，但本發(fā)明并不局限于所述實(shí)施方式。另外，不脫離本發(fā)明主要內(nèi)容的范圍內(nèi)，可以進(jìn)行多種改進(jìn)或變更。
權(quán)利要求
1.一種熒光檢測(cè)裝置，對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量，其特征在于，包括 激光光源，向所述測(cè)量對(duì)象物照射激光； 第一受光部，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的散射光； 第二受光部，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的熒光； 信號(hào)處理部，對(duì)應(yīng)第一受光部所接收的所述散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光部所接收的所述突光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的熒光檢測(cè)裝置，其特征在于，所述信號(hào)處理部根據(jù)對(duì)所述激光強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)制的調(diào)制信號(hào)和第二受光部接收的所述熒光信號(hào)之間的相位差求出熒光壽命。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的熒光檢測(cè)裝置，其特征在于，所述信號(hào)處理部將第一受光部所接收的所述散射光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，并將被標(biāo)準(zhǔn)化的所述散射光的強(qiáng)度與第二受光部接收的所述熒光信號(hào)相乘。
4.一種熒光檢測(cè)方法，對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量，其特征在于，包括如下工序 向所述測(cè)量對(duì)象物照射激光的工序； 第一受光工序，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的散射光； 第二受光工序，接收所述測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的熒光； 信號(hào)處理工序，對(duì)應(yīng)第一受光工序中所接收的所述散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光工序中所接收的所述熒光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的熒光檢測(cè)方法，其特征在于，所述信號(hào)處理工序根據(jù)對(duì)所述激光強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)制的調(diào)制信號(hào)和在第二受光工序中所接收的所述熒光信號(hào)之間的相位差求出熒光壽命。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的熒光檢測(cè)方法，其特征在于，所述信號(hào)處理工序包括將第一受光工序中所接收的所述散射光強(qiáng)隊(duì)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的標(biāo)準(zhǔn)化工序，并將在所述標(biāo)準(zhǔn)化工序中被標(biāo)準(zhǔn)化的所述散射光強(qiáng)度與第二受光工序中所接收的所述熒光信號(hào)相乘。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種熒光檢測(cè)裝置和熒光檢測(cè)方法。熒光檢測(cè)裝置能夠提高測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光的測(cè)量精度。該熒光檢測(cè)裝置對(duì)測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)發(fā)出的熒光進(jìn)行測(cè)量，包括激光光源，向測(cè)量對(duì)象物照射激光；第一受光部，接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的散射光；第二受光部，接收測(cè)量對(duì)象物受激光照射時(shí)的熒光；信號(hào)處理部，對(duì)應(yīng)第一受光部所接收的所述散射光強(qiáng)度，對(duì)第二受光部所接收的所述熒光信號(hào)進(jìn)行加權(quán)平均。
文檔編號(hào)G01N21/64GK102713575SQ201180005789
公開日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2011年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月15日
發(fā)明者中田成幸, 星島一輝 申請(qǐng)人:三井造船株式會(huì)社