專利名稱：一種通用酶聯(lián)免疫測(cè)試板的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種通用酶聯(lián)免疫測(cè)試板，其屬于酶聯(lián)免疫檢測(cè)領(lǐng)域，可用于生物醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)、食品安全檢測(cè)。
背景技術(shù)：
酶聯(lián)免疫吸附分析(enzymelinked immunosorbent assay),簡(jiǎn)稱 ELISA,與所有的免疫測(cè)定(immunoassay, IA)—樣,其核心原理是抗原抗體的特異免疫反應(yīng)。在免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展史上，它要晚于免疫熒光(IFA，50年代)與放射免疫(RIA，60年代)。與熒光和Y射線不同，ELISA的顯色或吸光度變化本身不是高靈敏的，但一 個(gè)酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十幾百個(gè)底物分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生了放大作用。顯然，臨床檢測(cè)中通過底物變化來測(cè)試酶活力的方法啟發(fā)了免疫學(xué)家將這一技術(shù)與免疫反應(yīng)聯(lián)系起來。的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。酶聯(lián)免疫吸附分析中的兩個(gè)重要組分是測(cè)試板與酶標(biāo)記物。前者是捕獲手段，后者是顯色指示手段。針對(duì)每一種檢測(cè)指標(biāo)如鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、三聚氰胺一般都需要設(shè)計(jì)不同的測(cè)試板與酶標(biāo)記物，以達(dá)到識(shí)別不同的待測(cè)物、并檢測(cè)其濃度的作用。這些不同的測(cè)試板都是96孔微孔板，聚苯乙烯材質(zhì)，其上固化不同的抗原或抗體，用于識(shí)別不同的待測(cè)物。這種固化主要是疏水反應(yīng)，因?yàn)槊糠N抗原與抗體的特性如等電點(diǎn)不一樣。因此，針對(duì)每種抗原或抗體都需要研究其最佳的固化條件。這就帶來了研究成本。另外，批量化生產(chǎn)的測(cè)試板需要一定的批量與儲(chǔ)存空間，因而大量不同種類的測(cè)試板還會(huì)帶來庫存壓力。因此，需要改進(jìn)的測(cè)試板克服上述問題。

實(shí)用新型內(nèi)容為了克服現(xiàn)有技術(shù)的研究成本高、庫存壓力大的缺陷，本實(shí)用新型提供一種通用的酶聯(lián)免疫測(cè)試板，它是由聚苯乙烯制成的多孔微孔板，包括框架和微孔，微孔內(nèi)表面固化的第二抗體為羊抗鼠，用于代替固化單克隆抗體測(cè)試板。所述通用的酶聯(lián)免疫測(cè)試板可以用于不同的檢測(cè)項(xiàng)目，如鹽酸克倫特羅，萊克多巴胺，三聚氰胺。所述通用的酶聯(lián)免疫測(cè)試板為96孔微孔板，該測(cè)試板通過鋁箔袋封裝、抽真空、加入干燥劑以保持其活性。[0009]本實(shí)用新型可以針對(duì)檢測(cè)指標(biāo)，如鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、三聚氰胺，設(shè)計(jì)通用測(cè)試板，因此節(jié)約了研究成本。而且節(jié)省了批量化生產(chǎn)測(cè)試板的儲(chǔ)存空間。

圖I是本實(shí)用新型的通用酶聯(lián)免疫測(cè)試板的結(jié)構(gòu)圖。
具體實(shí)施方式
如圖I所示，通用酶聯(lián)免疫測(cè)試板包括框 架I和微孔2。實(shí)施例一如下制備通用的酶聯(lián)免疫測(cè)試板在由聚苯乙烯制成的多孔微孔板的微孔內(nèi)表面，固化第二抗體為羊抗鼠，用于代替固化單克隆抗體測(cè)試板。用pH為6. O 8. O的O. 02M PB O. 05M磷酸鹽緩沖液將羊抗鼠稀釋至一定的濃度，按100 μ I/孔加入96孔微孔板中，置于37°C保持24小時(shí)，棄去其中的溶液，用真空干燥機(jī)抽干。在用本實(shí)用新型的測(cè)試板進(jìn)行測(cè)試時(shí)，要加入50 ul單克隆抗體，50 ul待測(cè)樣品(其中可能含有鹽酸克倫特羅，萊克多巴胺或三聚氰胺)，50 ul酶標(biāo)記物。反應(yīng)過程中除了原有的免疫反應(yīng)外，還發(fā)生固化第二抗體捕獲單克隆抗體形成的反應(yīng)，兩種反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。在進(jìn)行萊克多巴胺測(cè)試時(shí)，向本實(shí)用新型的測(cè)試板的每孔中加入50 Ul抗萊克多巴胺單克隆抗體，50 ul待測(cè)樣品(其中可能含有萊克多巴胺)，50 ul酶標(biāo)記物，在37°C下反應(yīng)30分鐘后，洗除孔中液體，再加入顯色底物，保持10分鐘顯色反應(yīng)。待測(cè)樣品孔的顯示可以與標(biāo)準(zhǔn)孔對(duì)比，計(jì)算出樣品中萊克多巴胺的濃度。
權(quán)利要求1.一種通用的酶聯(lián)免疫測(cè)試板，是由聚苯乙烯制成的多孔微孔板，包括框架和微孔，其特征在于微孔內(nèi)表面固化的第二抗體為羊抗鼠。
2.權(quán)利要求I的酶聯(lián)免疫測(cè)試板，其特征在于所述酶聯(lián)免疫測(cè)試板為96孔微孔板。
專利摘要一種通用酶聯(lián)免疫測(cè)試板，它是由聚苯乙烯制成的多孔微孔板，包括框架和微孔,在微孔中固化第二抗體如羊抗鼠。所述通用的酶聯(lián)免疫測(cè)試板可以用于不同的檢測(cè)項(xiàng)目，如鹽酸克倫特羅，萊克多巴胺，三聚氰胺。本實(shí)用新型可以針對(duì)檢測(cè)指標(biāo)，如鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、三聚氰胺，設(shè)計(jì)通用測(cè)試板，因此節(jié)約了研究成本。而且節(jié)省了批量化生產(chǎn)測(cè)試板的儲(chǔ)存空間。
文檔編號(hào)G01N33/545GK202443016SQ20112056264
公開日2012年9月19日 申請(qǐng)日期2011年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月29日
發(fā)明者張恂 申請(qǐng)人:北京沙屏研科技有限公司