專利名稱：一種基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測試紙盤的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測
試紙盤
發(fā)明領(lǐng)域本實用新型涉及一種基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測試紙 盤，其可經(jīng)一次加樣即完成樣品中十種食源性致病菌的定性定量檢測。
背景技術(shù)：
食品安全已成為全球重要的公共衛(wèi)生問題，食源性疾病是食品安全的主要問題， 世界衛(wèi)生組織將食源性疾病定義為“凡是通過攝食進(jìn)入人體的，使人體患感染性或中毒性 的疾病。”這里包括了由食品微生物污染和化學(xué)性物質(zhì)引起的食源性疾病。而微生物引起 的食源性疾病是食品安全的主要問題。世界衛(wèi)生組織2002年3月公布，全球每年因食源性 微生物污染引起的腹瀉病例達(dá)到數(shù)十億，死亡的0-15歲兒童約170萬。在發(fā)達(dá)國家至少有 1/3的人患食源性疾病，在食源性疾病上花費達(dá)數(shù)十億美元。近年來，在國外食源性疾病事 件頻頻發(fā)生，如英國的瘋牛病，日本的出血性大腸埃希氏菌0157:H7和雪印牛奶的葡萄球 菌腸毒素中毒暴發(fā)，法國的李斯特氏菌中毒等。在我國盡管沙門氏菌、副溶血性弧菌、金黃 色葡萄球菌引起的食物中毒仍占主要位置，但近年來其它新的病原菌如出血性大腸埃希氏 菌0157:H7、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌等引起的食物中毒報道呈上升趨勢。1999年蘇皖等 地引起的0157:H7大規(guī)模暴發(fā)流行，急性腎功能衰竭患者195人，死亡人數(shù)177人，病死率 為 90. 8%。快速高效的對水源、食品以及食品加工、販?zhǔn)郗h(huán)境中的食源性致病菌進(jìn)行檢測與 監(jiān)測是降低食源性疾病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。食源性致病菌檢測與常規(guī)病原體檢測的突出區(qū)別在于 食源性致病菌種類繁多，因而監(jiān)測時無法針對性檢測只能大范圍篩查。如對人致病的沙門 氏菌就包括甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏 菌、鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌等十?dāng)?shù)種，此外還有霍亂弧菌、大腸桿 菌、副溶血弧菌等等不一而足，而監(jiān)測樣品與環(huán)境中可能含有其中的任何一種或任何幾種。 傳統(tǒng)的單靶標(biāo)檢測技術(shù)，無論是核酸檢測還是免疫檢測，均需對一份樣品重復(fù)多次操作，方 可完成多靶標(biāo)的一一檢測，這樣不僅增加監(jiān)測的繁冗費時費力，且極易出現(xiàn)人工錯誤、延長 檢測時間、現(xiàn)場可操作性差。若一次加樣即可實現(xiàn)多靶標(biāo)的同步檢測，則可在最大程度上預(yù) 防以及控制食源性疾病的發(fā)生。十通道免疫層析試紙盤是基于免疫層析技術(shù)的高通量檢測方法，其利用試紙盤的 獨特內(nèi)部設(shè)計使得樣品在各通道內(nèi)試紙之間的均勻分配以及后續(xù)的同步層析得以實現(xiàn)，由 此將免疫層析的快速便捷與高通量得以融合(見附圖1)。然而，傳統(tǒng)免疫層析中所使用的 膠體金、染料等顏色示蹤物則由于敏感性低、穩(wěn)定性差、無法定量等缺陷限制了這一技術(shù)的 發(fā)展。上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料(Up-Converting Phosphor，UCP)的出現(xiàn)彌補(bǔ)了這一不足。UCP顆 粒是一種稀土金屬的雜合晶體顆粒，其由于獨特的化學(xué)組成以及物理結(jié)構(gòu)，因而具有了自 然界中獨一無二的上轉(zhuǎn)換發(fā)光現(xiàn)象，即其可由低能的紅外光激發(fā)發(fā)射高能的可見光。這一 上轉(zhuǎn)換發(fā)光的特性使UCP顆粒作為免疫層析的示蹤物可抵抗樣品的熒光背景干擾，因而保證了檢測的敏感性、穩(wěn)定性與特異性。此外，以光學(xué)信號取代顏色變化作為結(jié)果的指征，使 得基于UCP顆粒的免疫層析可實現(xiàn)精確定量。若能將UCP顆粒與十通道免疫層析試紙盤相 結(jié)合則可實現(xiàn)高通量的現(xiàn)場快速定量檢測。

實用新型內(nèi)容為了克服上述缺陷，本實用新型公開了一種基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食 源性致病菌檢測試紙盤，其可克服在先技術(shù)無法實現(xiàn)食源性致病菌的高通量現(xiàn)場檢測以及 傳統(tǒng)免疫層析技術(shù)敏感性低、穩(wěn)定性差、不可定量的問題，將UCP顆粒作為示蹤物與十通道 免疫層析試紙盤相結(jié)合，最終實現(xiàn)了高通量的現(xiàn)場快速定量檢測。本實用新型的技術(shù)方案為—種基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測試紙盤，其結(jié)構(gòu)組成包 括上蓋[1]與底殼[2](如附圖2所示)，底殼[2]中均勻放置有針對甲型副傷寒沙 門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增 李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病 菌的十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]，每種單靶標(biāo)檢測試紙[3]針對一種食源性致病菌的特異性 檢測；試紙盤內(nèi)十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]上放置有引流片W]，引流片[4]將上蓋[1]的加 樣孔[5]與十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]的樣品墊[6]相互連通；裝配完整的試紙盤中，加樣孔 [5]對應(yīng)于引流片W]，結(jié)果掃描窗[7]對應(yīng)于分析膜[8]，終點指示窗[9]對應(yīng)于吸水墊 [10]。其中，單靶標(biāo)檢測試紙的結(jié)構(gòu)組成為樣品墊W]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]、吸水 墊[10]和粘性底襯[12]；其中，結(jié)合墊[11]中固定有UCP結(jié)合物[13] ；UCP結(jié)合物[13]由 作為示蹤物的UCP顆粒[14]以及作為液相探針的某靶標(biāo)特異性抗體A[15]結(jié)合而成；分析 膜[8]上設(shè)置有檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]；檢測帶T[16]為某靶標(biāo)特異性抗體B[18]， 質(zhì)控帶C[17]為某靶標(biāo)特異性抗體A的二抗[19]；樣品墊[6]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]和 吸水墊[10]依次粘貼于粘性底襯[12]上，其中，分析膜[8]貼于粘性底襯[12]的中間， 吸水墊[10]貼于分析膜[8]的一側(cè)，兩者重合部分為吸水墊[10]長度的1/4-1/2 ；結(jié)合墊 [11]貼于分析膜[8]的另一側(cè)，兩者重合部分為結(jié)合墊[11]長度的1/12-1/5 ；樣品墊[6] 貼于結(jié)合墊[11]的另一側(cè)，兩者重合部分為樣品墊[6]長度的1/4-1/2。本實用新型食源性致病菌檢測試紙盤的制備方法為A.結(jié)合墊[11]制備將針對甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型 副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌 0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌的十種UCP結(jié)合物[13]分別制 備各自的結(jié)合墊，制備方法相同，均為將某種靶標(biāo)的UCP結(jié)合物[13]用結(jié)合物稀釋液稀釋 至終濃度為ang/ml，結(jié)合物稀釋液為pH= 7. 2 0. 03M PB含5% BSA、5%海藻糖、5%蔗糖 和0. 5% Tween20，將某種靶標(biāo)的UCP結(jié)合物[13]加于可作為結(jié)合墊[11]的玻璃纖維、聚 酯膜或無紡布上，于40°C下池，烘干備用；B.分析膜[8]制備針對甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒 沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌分別制備各自的分析膜，制備方法相同， 均為將1.5mg/ml某靶標(biāo)特異性抗體B [18]、1. 5mg/ml某靶標(biāo)特異性抗體A的二抗[19]噴 點于可作為分析膜的硝酸纖維素膜或尼龍膜上分別作為檢測帶T[16]和質(zhì)控帶C[17]，于 37°C下60min，烘干備用；C.單靶標(biāo)檢測試紙[3]剪切成型針對甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏 菌、丙型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大 腸桿菌0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌分別制備各自的單靶標(biāo) 檢測試紙[3]，制備方法相同，均為將樣品墊[6]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]和吸水墊[10] 依次粘貼于粘性底襯[12]上，確保相互之間的重疊關(guān)系(如附圖3所示)；將單靶標(biāo)檢測 試紙[3]剪切為4mm寬的成品；D.試紙盤裝配將與甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙 門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌0157、霍亂 弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌對應(yīng)的十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]置于試紙 盤底殼[2]上，確保每種試紙位置序號固定可查，將引流片[4]置于十種單靶標(biāo)檢測試紙 [3]上并與樣品墊[6]重疊，蓋上上蓋[1]即得本實用新型可對一份樣品進(jìn)行十種靶標(biāo)檢測 的成品試紙盤。使用食源性致病菌檢測試紙盤檢測食源性致病菌的方法為A.樣品預(yù)處理水樣、食品、糞便樣品直接檢測或用增菌液增菌4. 5h后再進(jìn)行檢 測；B.樣品處理將1倍體積經(jīng)過預(yù)處理的樣品與1倍體積樣品處理液混合，樣品處 理液為 0. IM pH = 7. 2PB 含 0. 2M NaCl,0. 1% SDS,0. 3% NP40，0. 2% Tween20 的混合液；C.添加樣品將處理后的液體樣品滴加至本實用新型食源性致病菌檢測試紙盤 的加樣孔[5]中；D.層析反應(yīng)靜置15min待層析反應(yīng)完成；E.結(jié)果判讀(如附圖4所示)用上轉(zhuǎn)換發(fā)光生物傳感器通過試紙盤上的結(jié)果掃 描窗[7]依次對每個通道中試紙的分析膜[8]上的檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]進(jìn)行掃描 分析，每掃描完一個通道即旋轉(zhuǎn)36度進(jìn)行下一個通道的掃描；定性檢測對某種靶標(biāo)而言只有質(zhì)控帶C[17]有信號產(chǎn)生，則樣品為某種靶標(biāo) [20]陰性(如附圖5A所示)；若檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]均有信號產(chǎn)生，則樣品為某 種靶標(biāo)陽性[20](如附圖5B所示)；若檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]均無信號產(chǎn)生，則層 析系統(tǒng)異常檢測失敗，需進(jìn)行再次檢測；某幾種靶標(biāo)檢測均為陽性，則說明該樣品中同時存 在某幾種靶標(biāo)；定量檢測在某種靶標(biāo)檢測中將檢測帶T[16]、質(zhì)控帶C[17]的信號強(qiáng)度(即峰面 積)依次賦值于T、C，τ/c值即為檢測值，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)濃度菌液標(biāo)定并繪制定量曲線后，通過任 意樣品的檢測值即可獲得該樣品中十種食源性致病菌的有無及具體濃度，從而實現(xiàn)定量檢 測。本實用新型基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測試紙盤通過UCP 顆粒與十通道免疫層析試紙盤的結(jié)合使得一次加樣即可實現(xiàn)十種靶標(biāo)的檢測，實現(xiàn)了高通 量的現(xiàn)場快速定量檢測。而具有極強(qiáng)兼容性的樣品處理液則保證了檢測結(jié)果的特異性與敏感性。最終為食源性病原體的現(xiàn)場檢測、監(jiān)測提供了有效的技術(shù)手段，有助于食源性疾病的 預(yù)防與控制。

圖1 十通道免疫層析試紙盤圖2 食源性致病菌檢測試紙盤結(jié)構(gòu)圖；圖3 單靶標(biāo)檢測試紙粘貼示意圖；圖4 食源性致病菌檢測試紙盤定性定量檢測示意圖；圖5 食源性致病菌檢測試紙盤定性檢測示意圖。1、上蓋、2、底殼、3、單靶標(biāo)檢測試紙、4、引流片、5、加樣孔、6、樣品墊、7、結(jié)果掃描 窗、8、分析膜、9、終點指示窗、10、吸水墊、11、結(jié)合墊、12、粘性底襯、13、UCP結(jié)合物、14、UCP 顆粒、15、某靶標(biāo)特異性抗體A、16、檢測帶T、17、質(zhì)控帶C、18、某靶標(biāo)特異性抗體B、19、某 靶標(biāo)特異性抗體A的二抗、20、靶標(biāo)。a 液體流動方向，b 靶標(biāo)1，c 靶標(biāo)2，d 靶標(biāo)3，e 傳感器掃描方向，f 試紙盤旋 轉(zhuǎn)方向，g 質(zhì)控帶1，h 檢測帶1，i 質(zhì)控帶2，j 檢測帶2，k 質(zhì)控帶3，1 檢測帶3，m 靶 標(biāo)1定量曲線，η 靶標(biāo)2定量曲線，ο 靶標(biāo)3定量曲線，ρ 傳感器掃描方向，q 某靶標(biāo)陰性 樣品層析與掃描狀態(tài)，r 某靶標(biāo)陽性樣品層析與掃描狀態(tài)，Xl 試紙檢測信號，yl 試紙位 置，x2 被檢物濃度，y2 傳感器檢測信號。
以下結(jié)合附圖進(jìn)一步說明本實用新型。
具體實施方式
實施例1 本實用新型食源性致病菌檢測試紙盤的制備一種食源性致病菌檢測試紙盤，其結(jié)構(gòu)組成包括上蓋[1]與底殼[2](如附圖2所示)，底殼[2]中均勻放置有針對甲型副傷寒沙 門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增 李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病 菌的十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]，每種單靶標(biāo)檢測試紙[3]針對一種食源性致病菌的特異性 檢測；試紙盤內(nèi)十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]上放置有引流片W]，引流片[4]將上蓋[1]的加 樣孔[5]與十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]的樣品墊[6]相互連通；裝配完整的試紙盤中，加樣孔 [5]對應(yīng)于引流片W]，結(jié)果掃描窗[7]對應(yīng)于分析膜[8]，終點指示窗[9]對應(yīng)于吸水墊 [10]。其中，單靶標(biāo)檢測試紙的結(jié)構(gòu)組成為樣品墊W]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]、吸水 墊[10]和粘性底襯[12]。結(jié)合墊[11]中固定有UCP結(jié)合物[13] ；UCP結(jié)合物[13]由作 為示蹤物的UCP顆粒[14]以及作為液相探針的某靶標(biāo)特異性抗體A[15]結(jié)合而成；分析膜 [8]上設(shè)置有檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]；檢測帶T[16]為某靶標(biāo)特異性抗體Β[18]，質(zhì)控 帶C[17]為某靶標(biāo)特異性抗體A的二抗[19]；樣品墊[6]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]和吸水 墊[10]依次粘貼于粘性底襯[12]上，其中，分析膜[8]貼于粘性底襯[12]的中間，吸水墊 [10]貼于分析膜[8]的一側(cè)，兩者重合部分為吸水墊[10]長度的1/3 ；結(jié)合墊[11]貼于分 析膜[8]的另一側(cè)，兩者重合部分為結(jié)合墊[11]長度的1/8 ；樣品墊[6]貼于結(jié)合墊[11]的另一側(cè)，兩者重合部分為樣品墊[6]長度的1/3。本實用新型食源性致病菌檢測試紙盤的制備方法為A.結(jié)合墊[11]制備將針對甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型 副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌 0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌的十種UCP結(jié)合物[13]分別制 備各自的結(jié)合墊，制備方法相同，均為將某種靶標(biāo)的UCP結(jié)合物[13]用結(jié)合物稀釋液稀釋 至終濃度為ang/ml，結(jié)合物稀釋液為pH= 7. 2 0. 03M PB含5% BSA、5%海藻糖、5%蔗糖 和0. 5% Tween20，將某種靶標(biāo)的UCP結(jié)合物[13]加于可作為結(jié)合墊[11]的玻璃纖維上， 于40°C下濁，烘干備用；B.分析膜[8]制備針對甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒 沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌0157、霍 亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌分別制備各自的分析膜，制備方法相同， 均為將1. 5mg/ml某靶標(biāo)特異性抗體B[18]、1. 5mg/ml某靶標(biāo)特異性抗體A的二抗[19] 噴點于可作為分析膜的硝酸纖維素膜上分別作為檢測帶T[16]和質(zhì)控帶C[17]，于37°C下 60min，烘干備用；C.單靶標(biāo)檢測試紙[3]剪切成型針對甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏 菌、丙型副傷寒沙門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大 腸桿菌0157、霍亂弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌分別制備各自的單靶標(biāo) 檢測試紙[3]，制備方法相同，均為將樣品墊[6]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]和吸水墊[10] 依次粘貼于粘性底襯[12]上，確保相互之間的重疊關(guān)系(如附圖3所示)；將單靶標(biāo)檢測 試紙[3]剪切為4mm寬的成品；D.試紙盤裝配將與甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙 門氏菌、傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、單增李斯特菌、副溶血弧菌、大腸桿菌0157、霍亂 弧菌01群和霍亂弧菌0139群十種食源性致病菌對應(yīng)的十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]置于試紙 盤底殼[2]上，確保每種試紙位置序號固定可查，將引流片[4]置于十種單靶標(biāo)檢測試紙 [3]上并與樣品墊[6]重疊，蓋上上蓋[1]即得本實用新型可對一份樣品進(jìn)行十種靶標(biāo)檢測 的成品試紙盤。使用食源性致病菌檢測試紙盤檢測食源性致病菌的方法為A.樣品預(yù)處理水樣、食品、糞便樣品直接檢測或用增菌液增菌4. 5h后再進(jìn)行檢 測；B.樣品處理將1倍體積經(jīng)過預(yù)處理的樣品與1倍體積樣品處理液混合，樣品處 理液為 0. IM pH = 7. 2PB 含 0. 2M NaCl,0. 1% SDS,0. 3% NP40，0. 2% Tween20 的混合液；C.添加樣品將處理后的液體樣品滴加至本實用新型食源性致病菌檢測試紙盤 的加樣孔[5]中；D.層析反應(yīng)靜置15min待層析反應(yīng)完成；E.結(jié)果判讀(如附圖4所示)用上轉(zhuǎn)換發(fā)光生物傳感器通過試紙盤上的結(jié)果掃 描窗[7]依次對每個通道中試紙的分析膜[8]上的檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]進(jìn)行掃 描分析，每掃描完一個通道即旋轉(zhuǎn)36度進(jìn)行下一個通道的掃描；定性檢測對某種靶標(biāo)而言只有質(zhì)控帶C[17]有信號產(chǎn)生，則樣品為某種靶標(biāo)[20]陰性(如附圖5A所示)；若檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]均有信號產(chǎn)生，則樣品為某 種靶標(biāo)[20]陽性(如附圖5B所示)；若檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]均無信號產(chǎn)生，則層 析系統(tǒng)異常檢測失敗，需進(jìn)行再次檢測；某幾種靶標(biāo)檢測均為陽性，則說明該樣品中同時存 在某幾種靶標(biāo)； 定量檢測在某種靶標(biāo)檢測中將檢測帶T[16]、質(zhì)控帶C[17]的信號強(qiáng)度(即峰面 積)依次賦值于T、C，τ/c值即為檢測值，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)濃度菌液標(biāo)定并繪制定量曲線后，通過任 意樣品的檢測值即可獲得該樣品中十種食源性致病菌的有無及具體濃度，從而實現(xiàn)定量檢 測。
權(quán)利要求1.一種基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測試紙盤其特征在于該 試紙盤的結(jié)構(gòu)組成為上蓋[1]與底殼[2]，底殼[2]中均勻放置有十種單靶標(biāo)檢測試紙[3]；試紙盤內(nèi)十種 單靶標(biāo)檢測試紙[3]上放置有引流片[4]，引流片[4]將上蓋[1]的加樣孔[5]與十種單 靶標(biāo)檢測試紙[3]的樣品墊[6]相互連通；裝配完整的試紙盤中，加樣孔[5]對應(yīng)于引流片 [4]，結(jié)果掃描窗[7]對應(yīng)于分析膜[8]，終點指示窗[9]對應(yīng)于吸水墊[10]。
2.如權(quán)利要求1所述的食源性致病菌檢測試紙盤，其特征在于其中單靶標(biāo)檢測試紙 [3]的結(jié)構(gòu)組成為樣品墊[6]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]、吸水墊[10]和粘性底襯[12]。
3.如權(quán)利要求2所述的食源性致病菌檢測試紙盤，其特征在于其中結(jié)合墊[11]中固定 有UCP結(jié)合物[13] ；UCP結(jié)合物[13]由作為示蹤物的UCP顆粒[14]以及作為液相探針的 某靶標(biāo)特異性抗體A[15]結(jié)合而成；分析膜[8]上設(shè)置有檢測帶T[16]與質(zhì)控帶C[17]；檢 測帶T[16]為某靶標(biāo)特異性抗體Β[18]，質(zhì)控帶C[17]為某靶標(biāo)特異性抗體A的二抗[19]； 樣品墊[6]、結(jié)合墊[11]、分析膜[8]和吸水墊[10]依次粘貼于粘性底襯[12]上，其中，分 析膜[8]貼于粘性底襯[12]的中間，吸水墊[10]貼于分析膜[8]的一側(cè)，兩者重合部分為 吸水墊[10]長度的1/4-1/2 ；結(jié)合墊[11]貼于分析膜[8]的另一側(cè)，兩者重合部分為結(jié)合 墊[11]長度的1/12-1/5 ；樣品墊[6]貼于結(jié)合墊[11]的另一側(cè)，兩者重合部分為樣品墊 [6]長度的 1/4-1/2。
專利摘要本實用新型基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光十通道免疫層析的食源性致病菌檢測試紙盤通過UCP顆粒與十通道免疫層析試紙盤的結(jié)合使得一次加樣即可實現(xiàn)十種靶標(biāo)的檢測，實現(xiàn)了高通量的現(xiàn)場快速定量檢測。而具有極強(qiáng)兼容性的樣品處理液則保證了檢測結(jié)果的特異性與敏感性。最終為食源性病原體的現(xiàn)場檢測、監(jiān)測提供了有效的技術(shù)手段，有助于食源性疾病的預(yù)防與控制。
文檔編號G01N21/63GK201892678SQ201020297929
公開日2011年7月6日 申請日期2010年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月19日
發(fā)明者周蕾, 楊瑞馥, 王浩然, 郭兆彪 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所