專利名稱：半定量精子濃度快速自檢試劑盒及其制備和使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及種體外診斷類醫(yī)療器械，具體是一種適用于男性精子濃度的半定量快速自 檢試劑盒。
背景技術(shù)：
生育專家報道，世界上大約15%的夫婦在一年內(nèi)(無避孕措施)不能懷孕，這些病例中 的40%是由于男性因素引起。還有男性科專家報道，男性不育的發(fā)病率大約為6—12%。上 述報道，說明男件不育的人群是相當大的個人群。
目前診斷男性不育的主要方法是精液的顯微鏡下診斷，即精子形態(tài)學檢測，這也是男性 不育診斷的金標準。但是這個方法存在許多缺點，比如由于中國人的傳統(tǒng)觀念，不好意思 去醫(yī)院診治男性不育方面的疾病，因而延誤了治療。即使去了醫(yī)院，由于取精子的條件有限， 受到環(huán)境、方法、時間的限制，不易取得樣品。去醫(yī)院看病比較繁瑣，必須經(jīng)過掛號、開處 方等一系列的程序。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點，提供一種可以在家里即可操作、快速、使用 方便、價格便宜的半定量精子濃度快速自檢試劑盒。
木發(fā)明的第二個目的是提供一種半定量精子濃度快速自檢試劑盒的制備和使用方法。 為達到上述目的，本發(fā)明包括精液收集盒、細胞染色液、生理鹽水和試驗板，所述的精 液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，所述的試驗板包括外殼、基板，外殼和基板是長 方形的PVC塑料制成，外殼中央有一個試驗孔，所述基板上有吸水紙、過濾膜和標準色標，
吸水紙和過濾膜位丁基板上方，外殼的試驗孔下方；吸水紙位于過濾膜下方；標準色標位于 外殼上試驗孔周圍，標準色標的顏色為500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、6000 萬、8000萬、10000萬個/毫升濃度精子樣品加入細胞染色液試驗結(jié)果的顏色。所述的過濾膜 為親水玻璃纖維膜，孔徑范圍l-30微米，大小尺寸為IO毫米XIO毫米；所述的吸水紙為木 質(zhì)纖維素紙，其大小尺寸和過濾膜一致。所述的精液液化劑可以是酶制劑如菠蘿蛋白酶，鏈 霉蛋白酶或糜蛋白酶，非酶制劑如二硫蘇糖醇，使用濃度均為1-5 mg/ml。所述的細胞染色液 可以是酸性，堿性和中性染料細胞染色液，例如亞甲蘭，孔雀綠，伊紅等，使用濃度均為 0.01-1.0%。所述的生理鹽水也可以是純凈水和含有低濃度醋酸等酸性物質(zhì)的脫色液。 一種半定量精子濃度快速自檢試劑盒的制備方法，包括如下步驟
制備細胞染色劑溶液把細胞染色劑加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫保存； 制備標準色標用經(jīng)過顯微計數(shù)確認的500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、 6000萬、8000萬、10000萬個/毫升濃度的精子樣本為標準樣本，加入已制備好的染色劑溶液， 根據(jù)實驗結(jié)果的顏色，應(yīng)用現(xiàn)代印刷技術(shù)制備出標準色標，置于外殼上試驗孔周圍；將過濾膜和吸水紙依次置于基板上方，試驗孔下方。，
本發(fā)明的優(yōu)點能夠快速準確地檢測出精子的濃度，從而診斷出男性是否能夠生育后代， 比以往傳統(tǒng)的診斷方法節(jié)省很多時間，使用簡單，在藥店購買、家庭使用即可，不用去醫(yī)院 就診，使使用者沒有羞澀感，使夫妻可以提前知道自己的潛在的生育問題，使用本試劑盒還 可以對男子絕育手術(shù)后效果進行檢測，也可用于精子庫對精子質(zhì)量進行篩選。


下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做進一步詳細的說明。
圖1是本發(fā)明試驗板的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是本發(fā)明試驗板的部分結(jié)構(gòu)示意圖。
圖中l(wèi).基板2.外殼3.試驗孔4.過濾膜5.吸水紙 6.標準色標
具體實施例方式
由圖可知，本發(fā)明的試驗板包括基板1和外殼2，外殼2中央有一個試驗孔3，基板l上 有過濾膜4、吸水紙5和標準色標6，過濾膜4和吸水紙5位于基板1上方，試驗孔3下方； 吸水紙5位于過濾膜4下方；標準色標6位于外殼2上試驗孔3周圍。
標準色標的顏色為2000萬個/毫升濃度精子樣品加入細胞染色液試驗結(jié)果的顏色。 一種制備精子濃度快速檢測試劑盒的方法，以亞甲蘭細胞染色劑為例 制備濃度為0.1%亞甲蘭溶液精密稱取105'C干燥至恒重的生物染色劑亞甲蘭100 mg， 置1000ml量瓶中，加入磷酸鹽緩沖液至刻度，搖勻，過濾，過濾后置室溫保存；
制備標準色標用經(jīng)過顯微計數(shù)確認的500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、 6000萬、8000萬、10000萬個/毫升濃度的精子樣本為標準樣本，加入已制備好的亞甲蘭溶液， 根據(jù)實驗結(jié)果的顏色，制備出標準色標，應(yīng)用現(xiàn)代印刷技術(shù)制備出標準色標，置于外殼上試 驗孔周圍；
將過濾膜和吸水紙依次置于基板上方，試驗孔下方。 精子濃度快速檢測試劑盒的使用方法如下
1、 收集精液樣本于精液收集盒內(nèi)；
2、 精液液化，讓精液在精液收集盒中液化， 一般時間為15到30分鐘，測定在精液收集 后12小時內(nèi)完成；
3、 加樣，用小塑料吸管收集l滴精液加入試驗孔中，要讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分 鐘并讓吸水紙吸千膜上的水份；
4、 加2滴生理鹽水到試驗孔，讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的 水份；
5、 加2滴亞甲蘭溶液到試驗孔，讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上 的水份；
6、 加2滴生理鹽水到試驗孔，讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕i分鐘，等吸水紙吸干膜上的 水份后開始讀取結(jié)果。要在4分鐘內(nèi)讀取結(jié)果，超過4分鐘后讀取結(jié)果可能不準確；7、 觀察試驗孔的顏色變化，并與標準色標上的顏色對比，確定最接近的顏色，判讀結(jié)果。
8、 第二次試驗
每兩次試驗必須間隔一周以上。
權(quán)利要求
1、一種半定量精子濃度快速自檢試劑盒，其特征在于包括精液收集盒、細胞染色液、生理鹽水和試驗板，所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，所述的試驗板包括外殼、基板，外殼和基板是長方形的PVC塑料制成，外殼中央有一個試驗孔，所述基板上有吸水紙、過濾膜和標準色標，吸水紙和過濾膜位于基板上方，外殼的試驗孔下方；吸水紙位于過濾膜下方；標準色標位于外殼上試驗孔周圍，標準色標的顏色為500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、6000萬、8000萬、10000萬個/毫升濃度精子樣品加入細胞染色液試驗結(jié)果的顏色。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種半定量精了-濃度快速自檢試劑盒，其特征在干所述的過濾膜 為親水玻璃纖維膜，孔徑范圍l-30微米，大小尺寸為IO毫米XIO毫米；所述的吸水紙為木質(zhì)纖維素紙，其大小尺寸和過濾膜一致。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種半定量精子濃度快速自檢試劑盒，其特征在于所述的精液液 化劑可以是酶制劑如菠蘿蛋白酶，鏈霉蛋白酶或糜蛋白酶，非酶制劑如二硫蘇糖醇，使用濃度均為1-5 mg/ml。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種半定量精子濃度快速自檢試劑盒，其特征在于所述的細胞染 色液可以是酸性，堿性和中性染料細胞染色液，例如亞甲蘭，孔雀綠，伊紅等，使用濃度 均為0.01-1.0%。
5、 種制備權(quán)利要求1-4任一項所述的半定量精子濃度快速自檢試劑盒的方法，其中包括如 下步驟制備細胞染色劑溶液把細胞染色劑加入磷酸緩沖液充分溶解，過濾后置室溫保存； 制備標準色標用經(jīng)過顯微計數(shù)確認的500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、 6000萬、8000萬、10000萬個/毫升濃度的精子樣本為標準樣本，加入己制備好的染色劑溶液， 根據(jù)實驗結(jié)果的顏色，應(yīng)用現(xiàn)代印刷技術(shù)制備出標準色標，置于外殼上試驗孔周圍； 將過濾膜和吸水紙依次置于基板上方，試驗孔下方。
6、 一種使用權(quán)利要求N4任一項所述的半定量精子濃度快速自檢試劑盒的方法其中包括如 下歩驟收集精液樣本于精液收集盒內(nèi)；精液液化，讓精液在精液收集盒中液化， 一般時間為15到30分鐘，測定在精液收集后 12小時內(nèi)完成；加樣，用小塑料吸管收集l滴精液加入試驗孔中，要讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分鐘 并讓吸水紙吸干膜上的水份；加2滴生理鹽水到試驗孔，讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸水紙吸干膜上的水份；加細胞染色劑，加2滴細胞染色劑到試驗孔，讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分鐘并讓吸 水紙吸干膜上的水份；加2滴生理鹽水到試驗孔，讓試驗孔內(nèi)過濾膜充分浸濕1分鐘，等吸水紙吸千膜上的水 份后開始讀取結(jié)果，要在4分鐘內(nèi)讀取結(jié)果，超過4分鐘后讀取結(jié)果可能不準確；觀察試驗孔的顏色變化，并與標準色標上的顏色對比，確定最接近的顏色，判讀結(jié)果。 第二次試驗每兩次試驗必須間隔一周以上。 7、根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的半定量精子濃度快速自檢試劑盒及其使用方法，其特征在于 所述的生理鹽水也可以是純凈水和含有低濃度醋酸等酸性物質(zhì)的脫色液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種半定量精子濃度快速自檢試劑盒及其制備和使用方法，包括精液收集盒、細胞染色液、生理鹽水和試驗板，精液收集盒由塑料收集盒和精液液化劑組成，試驗板包括外殼、基板，外殼中央有試驗孔和對照孔兩個小孔，基板上有吸水紙、過濾膜和標準色標，標準色標的顏色為500萬、1000萬、2000萬、3000萬、4000萬、6000萬、8000萬、10000萬個/毫升濃度精子樣品加入細胞染色液試驗結(jié)果的顏色。本發(fā)明的優(yōu)點能夠快速準確地檢測出精子的濃度，從而診斷出男性是否能夠生育后代，比以往傳統(tǒng)的診斷方法節(jié)省很多時間，使用簡單，在藥店購買、家庭使用即可，使使用者沒有羞澀感。
文檔編號G01N33/52GK101644706SQ20091008142
公開日2010年2月10日 申請日期2009年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月3日
發(fā)明者劉淑紅, 周明非, 望 朱, 婭 李, 毅 王, 趙永岐, 趙秀麗, 邢玉斌, 華 魏 申請人:北京望升偉業(yè)科技發(fā)展有限公司