專利名稱：一種藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療慢性盆腔炎和細(xì)菌性陰道炎的中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
婦科多種炎癥是臨床上的常見病，易反復(fù)發(fā)作，纏綿難愈?；幹委煕]有較為理想的方法，且長(zhǎng)期用藥又可能導(dǎo)致菌群失調(diào)與其它并發(fā)癥?，F(xiàn)有中藥也沒有一種能夠有效解決這一婦科問題，市場(chǎng)存在巨大開發(fā)的空間。發(fā)明人需要開發(fā)出一種軟膠囊或濃縮丸的劑型，細(xì)化工藝參數(shù)，保證工藝的穩(wěn)定，降低藥物的生產(chǎn)成本，并體現(xiàn)傳統(tǒng)中藥的特色，建立完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有效控制藥品質(zhì)量，便有利于藥品面向更廣大的需求人群。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的旨在克服現(xiàn)有藥物的不足，提供一種有效治療婦科炎癥的中藥組合物及其工藝制備方法；本發(fā)明目的還在于提供一種中藥組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的處方組成赤芍10～15重量份、土茯苓18～22重量份、三棱10～15重量份、川楝子10～15重量份、莪術(shù)10～15重量份、延胡索10～15重量份、芡實(shí)18～22重量份、當(dāng)歸18～22重量份、苦參10～15重量份、香附6～10重量份、黃柏10～15重量份、丹參18～22重量份、山藥22～27重量份。
優(yōu)選后的比例為赤芍12重量份、土茯苓20重量份、三棱12重量份、川楝子12重量份、莪術(shù)12重量份、延胡索12重量份、芡實(shí)20重量份、當(dāng)歸20重量份、苦參12重量份、香附8重量份、黃柏12重量份、丹參20重量份、山藥24重量份。
需要注意的是，本方中所用三棱、莪術(shù)、延胡索、香附也可以經(jīng)過中國(guó)藥典中的醋炙處理，并且使用醋炙炮制方法后會(huì)有更佳的效果，因而三棱、莪術(shù)、延胡索、香附和醋炙后的三棱、莪術(shù)、延胡索、香附都在本發(fā)明保護(hù)范圍之內(nèi)。
為了方便臨床使用，發(fā)明人針對(duì)該原料藥做了進(jìn)一步研究，制定其提取制備工藝，將其制成臨床或藥學(xué)所需的各種劑型，如顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑等。
首先為水提取工藝將處方的13味藥除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量為40～60％，靜置分層后，取上清液備用；另取莪術(shù)，用45～55％的乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，回收乙醇后，繼續(xù)濃縮成清膏，干燥，制成干浸膏粉。
確切的工藝路線為除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，每次1～2小時(shí)，其中第一次加8倍量水，第二、三次各加6倍量水，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置24小時(shí)，取上清液，備用；另取莪術(shù)，分別用5倍量50％的乙醇回流提取三次，每次1～2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對(duì)密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。
應(yīng)用以上提取精制工藝得到的細(xì)粉，配以相應(yīng)的輔料，就可以制成臨床所需的劑型，發(fā)明人重點(diǎn)研究了軟膠囊劑(1)基質(zhì)的組成 軟膠囊的基質(zhì)可以是植物油或聚乙二醇400兩類，根據(jù)本品的藥物性質(zhì)，并經(jīng)過預(yù)試驗(yàn)，確定本品以植物油作為最佳選擇基質(zhì)，并對(duì)基質(zhì)的組成作進(jìn)一步優(yōu)選。在植物油中加入適量蜂蠟可以增加成品的穩(wěn)定性， 發(fā)明人通過在基質(zhì)中加入不同量的蜂蠟，配置成藥液，對(duì)基質(zhì)的組成進(jìn)行試驗(yàn)比較。方法為取浸膏粉，各取四份，其中一份只加入適量的大豆油；另三份分別加入大豆油量的2％、4％、6％蜂蠟，充分混合攪拌后，在試管中比較藥粉沉降速度，觀察混合液的沉降情況，結(jié)果見表1。
表1不同基質(zhì)沉降情況試驗(yàn)結(jié)果

由上述試驗(yàn)結(jié)果可知，蜂蠟加入量為大豆油的2％時(shí)還不足以改觀藥液穩(wěn)定性，加入4％和6％均能保持良好的穩(wěn)定不分層，但加入大豆油6％的蜂蠟后藥液呈軟膏樣臘狀，流動(dòng)性不能滿足壓制軟膠囊的要求，故選擇在基質(zhì)的大豆油中加入4％的蜂蠟做穩(wěn)定劑。
(2)基質(zhì)比例的選擇 基質(zhì)的比例對(duì)軟膠囊的影響較大比例過大，藥物的含量降低，裝量增加；比例過低，藥液的流動(dòng)性不好，裝量差異大。試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選了不同比例的基質(zhì)，從而確定最佳比例，方法為取三份浸膏粉，分別加入不同量的基質(zhì)，充分混合后，觀察其狀態(tài)，結(jié)果見表2。
表2基質(zhì)比例的選擇試驗(yàn)結(jié)果

由上述試驗(yàn)結(jié)果可知，當(dāng)基質(zhì)和浸膏粉的比例為1.5∶1時(shí)，藥液的流動(dòng)性可以滿足軟膠囊壓制法的要求，又可使成品的含藥量適宜，大小適宜，服用方便。故確定基質(zhì)和藥粉的比例為1.5∶1。
(3)囊皮成分及比例的選擇軟膠囊的囊皮主要由甘油、明膠、水以一定比例混合制成。本品經(jīng)過試驗(yàn)，以0.4∶1∶0.9比例的甘油∶明膠∶水制備的囊皮效果較好，可塑性高，彈性好；試裝后發(fā)現(xiàn)囊皮容易氧化變硬變脆，延長(zhǎng)崩解時(shí)間，穩(wěn)定性不好，后經(jīng)過試驗(yàn)在囊液中加入1％量的焦亞硫酸鈉，則不會(huì)出現(xiàn)失水變硬現(xiàn)象，另加入著色劑氧化鐵棕0.3％，故本品確定囊皮處方為0.4∶1∶0.9比例的甘油∶明膠∶水，并加入1％的焦亞硫酸鈉、0.3％的氧化鐵棕。
最終，發(fā)明人得到軟本發(fā)明藥物組合物軟膠囊制劑的制備方法將提取精制得到的干浸膏粉，加入1.5～2倍的大豆油基質(zhì)中，邊加邊攪拌，混勻后再以膠體磨研磨至混懸均勻，壓制成軟膠囊劑。其中的大豆油基質(zhì)的制備過程為取大豆油加熱至60～70℃保溫，取4％大豆油量的蜂蠟切成小片，加入植物油中，攪拌使溶解，制得軟膠囊基質(zhì)。
當(dāng)然，本發(fā)明藥物組合物也能制成其他固體劑型，如將干浸膏粉加入適量的羧甲基淀粉鈉，混勻后壓制成片劑；拌入少量微晶纖維素鈉，混勻后填成膠囊劑；或與等量糊精混均后，壓成顆粒劑。
為了有效控制本發(fā)明產(chǎn)品的質(zhì)量，發(fā)明人還制定了其質(zhì)量控制方法，包括含量測(cè)定部分和定性鑒別部分。
含量測(cè)定方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；14∶86比例的乙腈-0.1％磷酸為流動(dòng)相；流速1.0ml/min，柱溫28℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于2500。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解制成每1ml含40μg的溶液，混勻，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研勻，稱取1g，精密稱定，加硅藻土1g，混勻，置索氏提取器中，加石油醚適量，加熱回流1小時(shí)，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，連同濾紙剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，以微孔濾膜濾過，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
定性鑒別方法可以包含以下中的一種或者幾種(1)取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置燒瓶中，加水，連接揮發(fā)油器，加水至溢入燒瓶中，加入醋酸乙酯，提取揮發(fā)油1小時(shí)，分取醋酸乙酯層，自然濃縮至約2ml，作為供試品溶液。另取莪術(shù)醇對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以93∶7比例的甲苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(2)取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘?jiān)蛹状汲曁幚?0分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，以氨水調(diào)pH9～10，以乙醚提取三次，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，在濃氨水飽和下展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(3)取苦參堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取鑒別(2)中的供試品溶液及苦參堿對(duì)照品溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以2∶3∶4∶0.5比例的甲苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘?jiān)蛹状迹曁幚?0分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)铀谷芙?，以氯仿提取兩次，棄去氯仿液；水液以乙醚提取三次，合并乙醚液，水液備用，乙醚液水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶1∶1比例的氯仿-丙酮-甲酸的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取鑒別(4)中的剩余水液，以水飽和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，以正丁醇飽和的水洗滌一次，水液棄去，正丁醇液水液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4∶1∶0.1比例的氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(6)本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)?％氫氧化鈉溶液40ml使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以石油醚提取兩次，棄去石油醚液，堿水液以鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取阿魏酸對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶2∶0.2比例的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
經(jīng)發(fā)明人證明，以上質(zhì)量控制方法可以應(yīng)用于本發(fā)明技術(shù)方案能夠制成的各種劑型。
本發(fā)明藥物組合物用于治療多種婦科炎癥，具有明顯的療效。下面以藥效學(xué)進(jìn)一步說明本發(fā)明的有益效果1材料和方法1.1材料1.1.1受試藥品“婦炎康片”為是按本發(fā)明最優(yōu)配比和工藝制備而得的，1g相當(dāng)于原生藥7.14g。
1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為ICR小鼠，SD大鼠均由云南省天然藥物藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供(云衛(wèi)動(dòng)管第A12號(hào))。
1.1.3實(shí)驗(yàn)菌株金黃色葡萄球菌，乙型溶血性鏈球菌，綠膿假單胞菌，痢疾桿菌，傷寒桿菌均由北京生物制品檢定所提供。
1.1.4培養(yǎng)基球脂培養(yǎng)基和肉湯培養(yǎng)基由衛(wèi)生部上海生物制品所提供。
1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)小鼠50只，隨機(jī)分成5組，組別、劑量如下N.S、嗎啡(HCL)10mg/kg A.C；阿司匹林100mg/kg i.g；婦炎康900，1800mg/kg i.g.。給藥60min后i.P.0.6％醋酸0.1mL/10g體重，5min后記錄各組動(dòng)物10min內(nèi)扭體次數(shù)。
1.2.2甲醛致小鼠傷害反應(yīng)實(shí)驗(yàn)各藥(阿司匹林、婦炎康、N.S.)劑量同前，均按0.3mL/10g/d×3 i.g.，末次給藥后60min按文獻(xiàn)方法于小鼠右后足趾注射25μL0.5％甲醛，立即單只放于透明容器內(nèi)觀察，以秒表記錄前10min舔咬右后足時(shí)間和后20in舔咬右后足或抓咬陰部等的時(shí)間。
1.2.3醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)收?qǐng)?bào)告 各藥(阿司匹林、婦炎康、N.S.)劑量及給藥同前，末次給藥后60min，每只小鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)生理鹽水，隨即i.P.0.6％醋酸0.2mL，輕揉翻轉(zhuǎn)幾次后抽取腹腔液，離心，上清液于590nm測(cè)定光密度(O，D)值。
1.2.4角叉萊膠所致大鼠足腫脹實(shí)臉SD大鼠(體重180-220g)，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，生理鹽水組給予等體積0.2mL/kg體重，阿司匹林組100mg/kg，婦炎康900，1800mg/kgB.i.g，連續(xù)3d，末次給藥后60min于每只大鼠右側(cè)足趾S.C.1％角叉菜膠0.1mL，左側(cè)注射N.S.0.1mL，采用毛細(xì)血管放大法(容器內(nèi)盛水銀)測(cè)量足體積變化，于致炎后1，2，3，4，5，6h測(cè)量?jī)勺隳[脹的差值。
1.2.5體外抑菌學(xué)試驗(yàn)采用紙片法做定性實(shí)驗(yàn)，即將上述細(xì)菌密集劃線接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上(其中乙型溶血性鏈球菌用血平板)，然后用紙片(直徑6mm，高壓滅菌)浸透藥物貼于平板上。同時(shí)用青霉素紙片，慶大霉素紙片對(duì)照。置37℃，18h后觀察結(jié)果。
2結(jié)果和討論2.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表3～表6列出表3對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)

表4對(duì)甲醛所致小鼠傷害反應(yīng)實(shí)驗(yàn)

*P＜0.05，**P＜0.01表5對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)

表6對(duì)角叉菜膠所致大鼠足腫脹實(shí)驗(yàn)

*P＜0.05，**P＜0.01(2)體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)菌株生長(zhǎng)情況標(biāo)準(zhǔn)，青霉素紙片抑制球菌圈達(dá)24mm以上，慶大霉素紙片抑制桿菌圈均在18mm以上，婦炎康濃度須在25％以上對(duì)兩種球菌和大腸桿菌、痢疾桿菌有輕度抑制(抑菌圈＜10mm)。
本實(shí)驗(yàn)證明，婦炎康在臨床劑量的12倍和24倍(900，1000mg/kg.i.g.)對(duì)醋酸所致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)，甲醛所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加，分別顯示止痛、減敏和降低炎性毛細(xì)血管通透性；顯著拮抗角叉菜膠所致大鼠關(guān)節(jié)腫脹，均呈量效關(guān)系方式；體外抑菌實(shí)驗(yàn)顯示本品高濃度對(duì)常見球菌和桿菌有弱的抑制作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1處方赤芍10kg土茯苓18kg 三棱10kg 川楝子1kg莪術(shù)10kg 延胡索10kg 芡實(shí)18kg 當(dāng)歸18kg、苦參10kg 香附6kg 黃柏10kg 丹參18kg山藥22kg制法除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加8倍量水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達(dá)40％，靜置24小時(shí)，取上清液，備用；另取莪術(shù)，分別用5倍量50％的乙醇回流提取三次，每次1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對(duì)密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。將浸膏粉加入一倍的糊精和適量白糖，混勻后以90％乙醇制粒，壓制成顆粒劑。
實(shí)施例2處方赤芍15kg 土茯苓22kg 三棱15kg川楝子15kg莪術(shù)15kg 延胡索15kg 芡實(shí)22kg當(dāng)歸22kg
苦參15kg 香附10kg黃柏15kg 丹參22kg 山藥27kg制法除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加6水煎煮三次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達(dá)60％，靜置24小時(shí)，取上清液，備用；另取莪術(shù)，分別用5倍量55％的乙醇回流提取三次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對(duì)密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。加入5％的淀粉和0.5％的羧甲基淀粉鈉，混勻制粒，壓制成片。
實(shí)施例3處方赤芍 100g 土茯苓 200g三棱(醋炙) 100g川楝子(炒) 100g 莪術(shù)(醋炙) 100g延胡索(醋炙)100g芡實(shí)(炒)200g 當(dāng)歸 200g苦參100g香附(醋炙) 100g 黃柏 100g丹參200g山藥240g制法以上十三味，除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置24小時(shí)，取上清液，備用；另取莪術(shù)，分別用50％的乙醇回流提取三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇(70±5℃，-0.08MPa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對(duì)密度1.13～1.15(70℃)的浸膏，噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)溫度170～180℃，出風(fēng)溫度90～100℃)，得干浸膏粉。加1％淀粉制粒，干燥，再加入0.4％微晶纖維素，混勻后填充膠囊劑。
實(shí)施例4處方赤芍12kg土茯苓 20kg三棱(醋炙) 12kg川楝子(炒)12kg莪術(shù)(醋炙) 12kg延胡索(醋炙) 12kg芡實(shí)(炒) 20kg當(dāng)歸 20kg苦參 12kg香附(醋炙)8kg 黃柏 12kg丹參 20kg山藥 24kg制法以上十三味，除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加水7倍量煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置24小時(shí)，取上清液，備用；另取莪術(shù)，分別用50％的乙醇回流提取三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇(70±5℃，-0.08MPa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對(duì)密度1.13～1.15(70℃)的浸膏，噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)溫度170～180℃，出風(fēng)溫度90～100℃)，得干浸膏粉。取大豆油加熱至60～70℃保溫，取4％的蜂蠟切成小片，加入植物油中，攪拌使溶解，制得軟膠囊基質(zhì)。取干浸膏粉加入基質(zhì)中，邊加邊攪拌，并補(bǔ)加基質(zhì)至總量60kg，混勻，以膠體磨研磨5分鐘，壓制成軟膠囊100000粒，洗油，干燥，即得。
鑒別(1)取本品內(nèi)容物5g，加硅藻土2g，混勻，置燒瓶中，加水30ml，連接揮發(fā)油器，加水至溢入燒瓶中，加入醋酸乙酯5ml，提取揮發(fā)油1小時(shí)，分取醋酸乙酯層，自然濃縮至約2ml，作為供試品溶液。另取莪術(shù)醇對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯(93∶7)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(2)取本品內(nèi)容物5g，加硅藻土2g，混勻，置錐形瓶中，加石油醚30ml，水浴回流30分鐘，濾過，殘?jiān)蛹状?0ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，以氨水調(diào)pH9～10，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(12∶6∶3∶3∶1)為展開劑，在濃氨水飽和下展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
(3)取苦參堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取鑒別(2)中的供試品溶液及苦參堿對(duì)照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液(2∶3∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(4)取本品內(nèi)容物8g，加硅藻土4g，混勻，置錐形瓶中，加石油醚30ml，水浴回流30分鐘，濾過，殘?jiān)蛹状?0ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，以氯仿提取兩次，每次20ml，棄去氯仿液；水液以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液(水液備用)，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(8∶1∶1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(5)取鑒別(4)中的剩余水液，以水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，以正丁醇飽和的水40ml洗滌一次，水液棄去，正丁醇液水液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(4∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(6)取本品內(nèi)容物8g，加硅藻土4g，混勻，置錐形瓶中，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)?％氫氧化鈉溶液40ml使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以石油醚提取兩次，每次20ml，棄去石油醚液，堿水液以鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取阿魏酸對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1％磷酸(14∶86)為流動(dòng)相；流速1.0ml/min，柱溫28℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于2500。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解制成每1ml含40μg的溶液，混勻，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研勻，稱取1g，精密稱定，加硅藻土1g，混勻，置索氏提取器中，加石油醚適量，加熱回流1小時(shí)，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，連同濾紙剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(250W，50kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，以微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于它是由如下重量份原料藥制成的赤芍10～15份、土茯苓18～22份、三棱10～15份、川楝子10～15份、莪術(shù)10～15份、延胡索10～15份、芡實(shí)18～22份、當(dāng)歸18～22份、苦參10～15份、香附6～10份、黃柏10～15份、丹參18～22份、山藥22～27份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于各原料的最佳重量配比為赤芍12份、土茯苓20份、三棱12份、川楝子12份、莪術(shù)12份、延胡索12份、芡實(shí)20份、當(dāng)歸20份、苦參12份、香附8份、黃柏12份、丹參20份、山藥24份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于原料中的三棱、莪術(shù)、延胡索、香附藥材為醋炙炮制處理。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的藥物組合物，其特征在于該組合物可制成臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，包含顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包含如下提取精制過程將處方的13味藥除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量為40～60％，靜置分層后，取上清液備用；另取莪術(shù)，用45～55％的乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，回收乙醇后，繼續(xù)濃縮成清膏，干燥，制成干浸膏粉。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包含如下提取精制過程除莪術(shù)外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，每次1～2小時(shí)，其中第一次加8倍量水，第二、三次各加6倍量水，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達(dá)50％，靜置24小時(shí)，取上清液，備用；另取莪術(shù)，分別用5倍量50％的乙醇回流提取三次，每次1～2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對(duì)密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法還包括如下制劑過程將提取精制得到的干浸膏粉，加入大豆油基質(zhì)中，邊加邊攪拌，混勻后再以膠體磨研磨至混懸均勻，壓制成軟膠囊劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述藥物組合物的制備方法，其特征在于大豆油基質(zhì)的制備方法為取大豆油加熱至60～70℃保溫，取4％大豆油量的蜂蠟切成小片，加入植物油中，攪拌使溶解，制得軟膠囊基質(zhì)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述藥物組合的制備方法，其特征在于其中的大豆油也可以用其他植物油或聚乙二醇400代替。
10.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下含量測(cè)定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；14∶86的乙腈-0.1％磷酸為流動(dòng)相；流速1.0ml/min，柱溫28℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于2500；對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解制成每1ml含40μg的溶液，混勻，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研勻，稱取1g，精密稱定，加硅藻土1g，混勻，置索氏提取器中，加石油醚適量，加熱回流1小時(shí)，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，連同濾紙剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，以微孔濾膜濾過，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于還含有如下鑒別方法中的一種或幾種A、取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置燒瓶中，加水，連接揮發(fā)油器，加水至溢入燒瓶中，加入醋酸乙酯，提取揮發(fā)油1小時(shí)，分取醋酸乙酯層，自然濃縮至約2ml，作為供試品溶液；另取莪術(shù)醇對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以93∶7比例的甲苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘?jiān)蛹状汲曁幚?0分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，以氨水調(diào)pH9～10，以乙醚提取三次，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，在濃氨水飽和下展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；C、取苦參堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取B項(xiàng)中的供試品溶液及苦參堿對(duì)照品溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以2∶3∶4∶0.5比例的甲苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D、本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘?jiān)蛹状?，超聲處?0分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)铀谷芙?，以氯仿提取兩次，棄去氯仿液；水液以乙醚提取三次，合并乙醚液，水液備用，乙醚液水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶1∶1比例的氯仿-丙酮-甲酸的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；E、取D項(xiàng)中的剩余水液，以水飽和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，以正丁醇飽和的水洗滌一次，水液棄去，正丁醇液水液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4∶1∶0.1比例的氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；F、本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘?jiān)?％氫氧化鈉溶液40ml使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以石油醚提取兩次，棄去石油醚液，堿水液以鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對(duì)照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶2∶0.2比例的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
12.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述藥物組合物在制備用于治療慢性盆腔炎和細(xì)菌性陰道炎藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物，確切地說是一種中藥組合物，屬中藥領(lǐng)域。該藥物組合物是由一定重量比的赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、莪術(shù)、延胡索、芡實(shí)、當(dāng)歸、苦參、香附、黃柏、丹參、山藥等原料藥按特定工藝制備而得，對(duì)于多種婦科炎癥有著較好的治療作用。同時(shí)本發(fā)明還公開了該藥物組合物的制備方法和質(zhì)量控制方法。
文檔編號(hào)G01N33/15GK1868534SQ20051020029
公開日2006年11月29日 申請(qǐng)日期2005年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月24日
發(fā)明者吳逸芳 申請(qǐng)人:吳逸芳